Profa. Patricia Dalzoto Departamento Patologia Básica Universidade Federal do Paraná

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Andreia Raminhos Barreiro
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1 Microbiologia da água Profa. Patricia Dalzoto Departamento Patologia Básica Universidade Federal do Paraná

2 Água

3 Microbiologia da água Águas naturais Rios Estuários Oceanos Água potável

4 Análise microbiológica da água Visa investigar a presença de micro-organismos potencialmente patogênicos em concentrações que comprometam o uso da água para os fins a que se destina: Consumo humano e animal Recreação Navegação Irrigação Paisagismo

5 Micro-organismos patogênicos presentes na água Bactérias Salmonella spp. Vibrio cholerae Shigella spp. Yersinia enterocolitica: gastroenterite aguda Escherichia coli: linhagens patogênicas: enterites Clostridium perfringens: enterite, gangrena gasosa Vibrio parahaemolyticus: gastroenterites Pseudomonas aeruginosa: infecções nos olhos, ouvidos Staphylococcus aureus: infecções cutâneas, garganta e intoxicações alimentares Leptospira: hepatite, conjuntivite e insuficiência renal

6 Micro-organismos patogênicos presentes na água Fungos aquáticos: saprófitas, parasitas de peixes oriundos do solo: leveduras Candida albicans: infecções da pele, mucosas fungos dermatófitos Geotrichum

7 Micro-organismos patogênicos presentes na água Protozoários ciliados Giardia lamblia: esporos resistentes ao cloro amebas Entamoeba hystolytica (amebíase-doença intestinal)

8 Micro-organismos patogênicos presentes na água Vírus Hepatites A e B Gastroenterite infecciosa não bacteriana Poliomielite

9 Exame colimétrico da água Objetivo Avaliar as condições sanitárias da água, investigando a presença de bactérias do grupo coliforme, que atuam como indicadores de contaminação fecal.

10 Contaminação fecal Podem estar presentes nas fezes: Bactérias patogênicas Pseudomonas Enterococcus Salmonella Shigella Vibrio

11 Contaminação fecal Coliformes totais Escherichia coli Enterobacter Klebsiella Citrobacter Coliformes fecais E. coli Coliformes termotolerantes E. coli e Enterococcus Presentes nas fezes e em outros habitas Presentes nas fezes

12 Organismos indicadores Coliformes totais, fecais e termotolerantes são indicadores de contaminação fecal. Características dos micro-organismos indicadores: Ocorrência e desaparecimento concomitante com patógenos; Densidade populacional diretamente relacionada com o grau de contaminação; Maior sobrevida que os patógenos; Ausência em água potável; Fácil detecção e recuperação laboratorial; Não prejudicial às pessoas e animais; Manipulação segura.

13 Indicador ideal A bactéria indicadora deve: 1. ser propícia para a análise de todos os tipos de água: torneira, rios, subterrânea, barragens, estuários, oceanos, águas residuais. 2. estar presente sempre que microrganismos entéricos também estejam presentes. 3. sobreviver mais tempo que os patogênicos entéricos mais resistentes. 4. não deve reproduzir-se na água contaminada (para não inflacionar os resultados). 5. O método usado para detecção do indicador deve ser específico (i.e., a presença de outras bactérias não deve gerar resultados positivos) e deve ser suficientemente sensível para detectar níveis baixos do indicador. 6. O método usado deve ser fácil de realizar. 7. O indicador deve ser inofensivo para o ser humano. 8. O nível da população da bactéria indicadora na água contaminada deve ter uma relação direta com o grau de poluição fecal.

14 Coliformes totais Bacilos gram-negativos; Aeróbios ou anaeróbios facultativos; Não formadores de esporos; Oxidase negativos; Capazes de se desenvolver na presença de sais biliares ou agentes tensoativos; Fermentam a lactose com produção de ácido, gás e a;deído a 35,0 +_ 0,5 o C em horas; Podem apresentar atividade da B-galactosidase.

15 Coliformes fecais E.coli Fermenta lactose e manitol, com produção de ácido e gás a 44,5 +_ 0,2 o C em 24 horas; Produz indol a partir do triptofano; Oxidase negativa; Não hidrolisa a uréia; Atividade de B-galactosidase e B-glucoronidase; Mais específico indicador de contaminação fecal recente e de eventual presença de organismos patogênicos.

16 Coliformes termotolerantes Subgrupo dos coliformes. Fermentam lactose a 44,5 +_ 0,2 o C em 24 horas. E. coli é o principal representante Enterococcus grupo dos estreptococos fecais

17 Método dos tubos múltiplos

19 Exame colimétrico da água

20 1. Provapresuntiva para coliformes totais Meio de cultura: Caldo Lactosado. Temperatura e tempo de incubação: 35,0 +/- 0,5 o C 24 a 48 horas.

21 Prova presuntiva para CT

22 2. Provaconfirmatória para coliformes totais Meio de cultura: Caldo Lactosado Verde Bile Brilhante. Temperatura e tempo de incubação: 35,0 +/- 0,5 o C 24 a 48 horas.

23 Prova confirmatória para CT

24 3. Provaconfirmatória paracoliformes fecais 3.1. Quantitativa Meio de cultura: Caldo EC. Temperatura e tempo de incubação: 44,5 +/- 0,2 o C 24 horas.

25 Prova confirmatória para coliformes fecais 3.2. Qualitativa Ágar Teague (EMB eosina azul de metileno) Contém lactose e sucrose (mas não glicose). Azul de metileno inibe gram positivas. Eosina em ph ácido torna-se escuro, com brilho verde metálico.

26 E. coli em ágar Teague Colônias pequenas (2mm), negras, sem pigmento verde metálico difundido no meio; Colônias pequenas (2mm), negras com pigmento verde metálico difundido no meio; Colônias com centro negro e bordos róseos, com ou sem pigmento verde metálico difundido no meio.

30 Legislação Brasileira

32 Resolução CONAMA 20/86 Tabelas para classificação de águas Classes Especificações Balneabilidade Utilização Especial Totais e fecais ausentes Excelente Abastecimento doméstico sem tratamento. Equilíbrio das comunidades aquáticas. I Até 200 fecais Até 1000 totais Excelente Abastecimento com tratamento simplificado. Proteção das comunidades aquáticas. Recreação primária. Irrigação de hortaliças e frutas cruas. Aquicultura. II Entre fecais Entre totais Excelente Abastecimento com tratamento convencional. Proteção das comunidades aquáticas. Recreação primária. Irrigação de hortaliças e frutas cruas (fervida). Aquicultura. III Entre fecais Entre totais Imprópria Abastecimento com tratamento convencional. Irrigação de cereais e forrageiras. Dessebentação de animais. Navegação. Harmonia paisagística. IV Acima de 4000 fecais Acima de fecais Imprópria Navegação. Harmonia paisagística.

33 Resolução CONAMA 274/00 classificação das águas doces, salobras e salinas destinadas à balneabilidade (recreação de contato primário) Categoria Coliformes fecais Escherichia coli Enterococos (NMP/100 ml) (NMP/100 ml) (NMP/100 ml) Própria Excelente <250 em 80% das <200 em 80% das <25 em 80% das amostras amostras amostras Boa <500 em 80% das <400 em 80% das <50 em 80% das amostras amostras amostras Satisfatória >1000 em mais de >800 em mais de 20% >100 em mais de 20% 20% das amostras das amostras das amostras Imprópria >1000 em mais de >800 em mais de 20% >100 em mais de 20% 20% das amostras das amostras das amostras >2500 na última >2000 na última >400 na última amostra amostra amostra

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