Meios de cultura bacteriano

Transcrição

1 Meios de cultura bacteriano

2 O material preparado no laboratório para o crescimento de microrganismos. Inóculo e Cultura; Se desejarmos o crescimento de uma cultura de um certo microrganismo, por exemplo de uma amostra clínica, quais critérios deverão ser considerados para o meio de cultura? Conter os nutrientes corretos; Quantidade de água, ph ajustado e oxigênio; Meio deve ser estéril; Temperatura adequada.

3 Caldo Simples - formulação: Extrato de carne... 0,3 g Peptona... 1,0 g ClorEto de sódio... 0,5 g Água destilada ,0 ml

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5 Agar

6 Meio Quimicamente Definido É aquele em que a composição química exata é conhecida Meio quimicamente definido para o crescimento de uma bactéria quimioautotrófica típica como E. coli Glicose... 0,3 g Fosfato de amônia monobásico (NH 4 H 2 PO 4 )... 1,0 g Cloreto de sódio... 0,5 g Água destilada ,0 ml

7 Meio Complexo Utilizados normalmente para trabalhos experimentais no laboratório ou para o crescimento de bactérias autotróficas. Composição do Meio Agar Nutriente, um Meio Complexo para o crescimento de Bactérias Peptona (proteína parcialmente digerida)... 5,0 g Extrato de carne... 3,0 g Cloreto de sódio... 8,0 g Agar...15,0g Água...1 litro

8 Meio para crescimento de anaeróbios Utiliza-se meios de cultivo especiais: meios redutores (tioglicolato de sódio)

9 Técnicas Especiais de Cultivo Capnofílicos

10 Meios de Cultivo Seletivo Favorece o crescimento de uma determinada bactéria de interesse, impedindo o crescimento de outras bactérias. Ex: ágar Sabouraud dextrose, ph 5,6, é utilizado no crescimento de fungos que são favorecidos, em relação as bactérias, pelo baixo ph.

11 Meios de Cultivo Diferencial Utilizado para a fácil identificação da colônia da bactéria de interesse quando existem outras bactérias crescendo na mesma placa de meio de cultura. Ex: meio ágar-sangue, utilizado para a identificação de bactérias capazes de destruir células sangüíneas (anel claro em torno da colônia).

12 Meios de Cultivo Seletivo e Diferencial Não inoculado Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus Ágar Sal Manitol

13 Meios de Enriquecimento Utilizado para o isolamento de bactérias presentes em pequeno número junto com outras que estão em grande quantidade (fezes e solo);

14 Meio de manutenção: Estocagem ou manutenção - utilizados para conservação de microrganismos no laboratório, ou seja, garantem a viabilidade de microrganismos Ex: ágar Conservação, Meios com leite, Ágar suco de tomate, Ágar Simples, meio semi-sólido, etc.

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16 Preservando culturas bacterianas Congelamento em baixas temperaturas liquido + glicerol e congelamento rápido de -50 a -95 C) (meio Liofilização (rapidamente congelado, em meio líquido, sob temperaturas de -54 a -72 C e imediatamente submetido à remoção de água por vácuo)

17 Substratos para meios complexos: Extrato de Carne: extrato aquoso de tecido muscular, concentrado sob a forma de pasta, contém carboidratos, N orgânico, vitaminas hidrossolúveis e sais. Peptona: produto da digestão da carne (enzimática ou ácida), fonte de N orgânico e vitaminas. Triptona: hidrolisado pancreático de carne, rica em nitrogênio-amínico; destinado ao isolamento de organismos de difícil crescimento. - Extrato de Levedura: extrato aquoso de células de leveduras lisadas, fonte excelente de substâncias estimulantes do crescimento como vitamina complexo B; contém compostos orgânicos de N e C. Extrato de malte: extrato aquoso de cevada malteada. Rica em carboidratos, contém material nitrogenado, vitaminas e sais minerais. Tripticase: peptona derivada da caseína por digestão pancreática,fonte rica em nitrogênio de aminoácidos.

18 Grupo nutricional Quimioautotróficos Quimioheterotróficos Fotoautotróficos Fonte de Carbono Dióxido de carbono Compostos orgânicos Dióxido de carbono Fonte de Energia Compostos inorgânicos Compostos orgânicos Luz Fotoheretróficos Compostos orgânicos Luz