Proteinas Disciplina: Bioquímica Curso: Análises Clínicas 3º. Módulo Docente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini
Proteinas Moléculas orgânicas; Alto peso molecular; Fundamentais estrutural e funcionalmente; 50% peso seco Formadas por aminoácidos Ligações peptídicas.
Proteinas 20 aminoácidos ; Combinação ; tamanhos, formas, estruturas, propriedades e funções;
Proteína A seqüência de aminoácidos, que define as características das proteínas, é determinada pelas informações genéticas contidas no núcleo da célula.
Classificação das Proteinas Enzimas; Proteinas Transportadoras; Proteinas de Armazenamento; Proteinas Contráteis; Proteinas Estruturais; Proteinas de Defesa; Proteinas Reguladoras.
Funções das Proteinas Atividade enzimática; Transporte; Manutenção da pressão coloidosmótica; Tamponamento de ΔpH; Imunidade humoral; Coagulação; Resposta da fase aguda.
Proteínas totais A concentração das proteínas plasmáticas é determinada por três fatores: Velocidade de síntese: A maioria produzida no fígado. Cerca de 25g/dia num indivíduo de 70kg Volume de líquido: Cerca de 250g de proteínas são encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kg, dando uma concentração ao redor de 7,0g/dl Velocidade do catabolismo: As proteínas totais são degradadas, liberando aminoácidos para a síntese de proteínas celulares.
Proteínas totais Determinação de proteinas totais: Paciente: Jejum de 8 horas Amostra: soro sem hemólise e não lipêmico
Proteínas totais Determinação das proteínas totais: Método do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligação peptídica. O produto apresenta bandas de absorção. Interferentes: Substâncias que possam reagir com o íon cúprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerídeos acima de 500mg/dl VR soro: 6,0 8,0g/dl
Proteínas totais Hiperproteinemia Desidratação (vômito, diarréia ou acidose diabética) Mieloma múltiplo Cirrose hepática Hepatite ativa crônica Lupuseritematoso sistêmico Infecções bacteriana crônica Hipoproteinemia Hemodiluição Perda renal de proteínas Queimaduras severas Desnutrição Hipertireoidismo Hemorragia grave
Albumina Representa cerca de 60% das proteínas do plasma humano; Meia vida de 15-19 dias; Produção de cerca de 15g/ dia.
Albumina Funções Regulação osmótica Transporte e armazenamento : Ácidos graxos e esteróides; bilirrubina; fármacos Síntese : no fígado, na forma de pro-albumina. Degradação: mecanismo desconhecido.
Albumina Determinação da albumina Métodos de corantes: Metilorange, HABA, verde de bromo cresol(vbc) e púrpura de bromocresol VR: 3,5 a 5,5g/dl Eletroforese Fracionamento salino
Albumina Paciente : Não consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da prova Amostra: soro, observar postura dos pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina é cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados. Interferências: Elevação agentes citotóxicos. Redução Paracetamol, aspirina, ampicilina
Albumina Hiperalbuminemia Rara; Carcinomatose metastática, desidratação aguda, diarréia, estresse, febre reumática, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentração Hipoalbuminemia Redução da síntese Cirrose Ingestão inadequada de proteínas: A síntese é reduzida a um terço durante um jejum de 24hr Perda protéica extravascular Síndrome nefrótica (proteinúriamassiva) e enteropatiaperdedora de proteínas
Fracionamento eletroforético Eletroforese de proteínas (EFP) no soro: Técnica simples para separar as proteínas do soro. Teste de triagem mais utilizado para investigação de anormalidades das proteínas séricas. Em condições normais, são separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presença da préalbumina.
Fracionamento eletroforético
Fracionamento eletroforético
Globulinas Região α1 Alfa1-antitripsina(AAT) Inibição de várias proteases provenientes dos neutrófilos. Proteção contra destruição da parede alveolar. VR: 20-60μmol/L
Globulinas - Alfa1-glicoproteína ácida(aag) Tem como função primária inativar a progesterona, além de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatóide, Lúpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG não é conhecido -Alfa1-Fetoproteína(AFP) Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado através do líquido amniótico VR líquido amniótico: 5 a 25mg/dl -Alfa 1- Lipoproteína Transportadora de lipídeos
Globulinas Região α2 -Haptoglobina (HAP) Transportadora de Hb para o retículo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatórios e diminuída em síndromes hemolíticas. -Alfa2-macroglobulina inibidora de proteases. Aumentada durante a infância e na síndrome nefrótica e está diminuída em hepatopatias crônicas. -Ceruplasmina (CER) é fixadora de cobre. Está diminuída nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; proteína de fase aguda tardia.
Globulinas Região β1 -Transferritina(TRF) Transporta o ferro do intestino até a medula óssea. Está aumentada na depleção de ferro e diminuída nas perdas protéicas e hepatopatias crônicas. -Hemopexina (HX) Transporta o grupamento Heme até o fígado -Beta-lipoproteína Transportadora de lipídeos -Complemento C4 Resposta humoral, participa da via clássica do complemento. A deficiência resulta redução da resposta a infecções.
Globulinas Região β2 -Fibrinogênio Substrato da trombina, não encontrado em fracionamentos eletroforéticos pois a amostra usada é o soro -Complemento fração C3 Atua na resposta imunológica humoral -Beta2-microglobulina (BMG) Proteína usada para testar a função tubular renal. Elevada em IR
Globulinas Região γ -Proteína C reativa Marcador não-específico de lesão tecidual, infecção ou necrose celular associada com infarto ou malignidade VR: 80-800μg/dl
Globulinas Região γ -Imunoglobulinas Sintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partícula estranha. -Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e proteínas estranhas. -Constituídas por proteínas com estrutura em y. -4 cadeias: 2 leves(l) e 2 pesadas(h) - Antígeno se liga a região variável das cadeias. -IgG, IgM, IgA, IgDe IgE
Globulinas Imunoglobulinas IgG (1,2,3,4) 85% das Ig totais, atravessa a barreira placentária VR:800-1800mg/dl IgM 5-10% das Ig totais VR: 50-150mg/dl IgE importante papel na atopia e imunidade antiparasitária VR:0-0,2mg/dl
Globulinas Hipogamaglobulinemia -Imunodeficiências hereditárias -Imunodeficiência adquirida: neoplasias linfóides, IR, terapia imunossupressiva -Mieloma múltiplo, leucemia linfocítica crônica -Crianças prematuras -Fármacos: Fenitoína, carbamazepina, ác. Valpróico
Globulinas Gamopatias policlonais -Aumentos difusos das gamaglobulinemias -Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primária, cirrose portal, hepatite crônica ativa, doença de Crohn, lúpus eritematoso sistêmico Gamopatias monoclonais -Encontrada em: Mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de Franklin)
Globulinas Eletroforese de proteínas séricas em gel de agarose, (1) hipergamaglobulinemiaem processo inflamatório; (2) e (3): fracionamento normal; (4) gama monoclonal no mielomamúltiplo.
Globulinas Perfis eletroforéticos patológicos: -Mau fornecimento protéico: albumina, α1 e α2, β, γ -Perdas protéicas Síndrome Nefrótica: albumina, α1, α2, β, γ(varia) -Hepatite crônica: albumina, γ -Hepatite aguda: albumina ou normal, α1, α2 normal ou, βe γ -Cirrose: albumina, α1,α2 normal ou, β, fusão das frações βe γ
Globulinas
Proteínas totais e séricas Bibliografia -Motta, Valter Bioquímica clínica: princípios e interpretações. Aminoácidos e Proteínas- Capítulo 8 -LabTest. Disponível em: www.labtest.com.bracesso em 19/09/2011