EXTRAÇÃO DE ÓLEO DE POLPA DE BURITI: PERFIL DE ÁCIDOS GRAXOS E CAPACIDADE ANTIOXIDANTE

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1 EXTRAÇÃO DE ÓLEO DE POLPA DE BURITI: PERFIL DE ÁCIDOS GRAXOS E CAPACIDADE ANTIOXIDANTE M. B. Cruz 1, W. Oliveira 2, M. T. Barcia 3, P. B. P. Konda 1 1 Universidade Federal de Mato Grosso, Instituto de Ciências Extas e da Terra CEP: Barra do Garças MT Brasil, telefone: (66) (paulapertuzatti@yahoo.com.br). 2 Departamento de Ciência de Alimentos - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de alimentos - CEP: Campinas-SP-Brasil, telefone: (19) (wellingtonoliveira1408@gmail.com.br) 3 Departamento de Tecnologia e Ciência dos Alimentos - Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Ciências Rurais - CEP: Santa Maria-RS-Brasil, telefone: (55) /8353/8364 sub-ramal (milene.barcia@ufsm.br) RESUMO - O buriti é um fruto nativo do cerrado brasileiro. Os frutos são ingeridos in natura ou na forma de farinhas, doces e são ricos em óleo. O caráter oleaginoso do fruto de buriti despertou a busca por técnicas de extração do óleo e sua composição. Com a finalidade de incentivar a busca por pesquisas na área de frutos nativos do Cerrado, aproveitando as suas características químicas objetivou-se extrair óleo da polpa de buriti e verificar a capacidade antioxidante pelo método de ORAC hidrofílico e lipofílico e o perfil de ácidos graxos. O óleo da polpa de buriti apresentou o maior valor de capacidade antioxidante pelo método de ORAC hidrofílico (70,92±6,65 µmol eq Trolox/g), seguido pelo método de ORAC lipofílico (0,22±0,02 µmol eq Trolox/g). Quanto ao perfil de ácidos graxos, o óleo de buriti revelou um elevado grau de ácido oleico (72,23%), seguido de uma considerável porcentagem de ácido palmítico (22,18%). ABSTRACT- Buriti is a fruit native from Brazilian cerrado. The fruits are eaten in natura or as flour, jellies and are rich in oil. The oily character of the Buriti fruit sparked the search for oil extraction techniques and composition. In order to encourage the pursuit of research in the native fruits of Brazilian Cerrado, taking advantage of its chemical characteristics, this study aim to extract oil from the buriti pulp and verify the antioxidant capacity by ORAC method hydrophilic and lipophilic and the fatty acid profile. The oil of buriti pulp showed the highest antioxidant capacity by hydrophilic ORAC method (70,92±6,65 µmol eq Trolox/g), followed by the lipophilic ORAC method (0,22±0,02 µmol eq Trolox/g). Regarding the profile of fatty acids, buriti oil revealed a high degree of oleic acid (72,23%), followed by a considerable percentage of palmitic acid (22,18%). PALAVRAS-CHAVE: óleo de polpa de buriti, atividade antioxidante, perfil de ácidos graxos, Mauritia flexuosa L.. KEWORDS: buriti pulp oil, antioxidant activity, fatty acid profile, Mauritia flexuosa L.. 1. INTRODUÇÃO A procura por óleos vegetais ricos em compostos bioativos atualmente vem crescendo devido a características interessantes como a capacidade antioxidante que alguns óleos apresentam. Em função disto, alguns estudos têm verificado que o consumo de óleos vegetais pode apresentar

2 benefícios à saúde como a prevenção do aparecimento de doenças crônico-degenerativas (Luzia, 2012). Uma fonte interessante para a extração de óleo são as frutas nativas do Cerrado, pois estas, apesar de pouco exploradas, vêm sendo avaliadas recentemente e oferecem elevado valor nutritivo, elevado conteúdo lipídico, além de atrativos sensoriais como cor, sabor e aromas peculiares e intensos (Agostini e Vieira, 2004; Rufino, 2008). O caráter oleaginoso do fruto de buriti (Mauritia flexuosa L.) gerou a possibilidade de pesquisadores estudarem mais sobre técnicas de extração desse óleo e sua composição, verificando assim, que o óleo é rico em ácidos graxos monoinsaturados, principalmente ácido oleico (Luzia, 2012; Aquino et al., 2014). Diante do exposto, este trabalho tem como objetivo extrair e caracterizar quimicamente o óleo da polpa de buriti, pois acredita-se que este tipo de estudo pode contribuir para incentivar o consumo de frutos do cerrado, o que atende uma necessidade atual de busca por produtos com alto valor nutricional. 2. MATERIAL E MÉTODOS 2.1 Análise do Extrato Lipofílico do Óleo de Buriti A determinação da capacidade antioxidante relativa aos compostos lipofílicos, como carotenoides e tocoferóis, presentes no óleo de buriti, foi realizada através do método descrito por Pertuzatti et al. (2014), no qual 10 ml do extrato lipofílico (obtido de acordo com a descrição da análise de carotenoides totais) foi seco com nitrogênio, ressuspendido em 250 µl de acetona e diluído com 750 µl de beta metil ciclodextrina 7% em acetona - água (1:1 v/v). A mesma solução foi utilizada para dissolver o trolox e para preparar o branco. Em seguida, retirou-se uma alíquota de 20 µl deste extrato e adicionou-se 120 µl de fluoresceína 70 nmol L -1 a uma microplaca aquecida a 37ºC, e pré incubou-se a mistura por 15 min, adicionando-se logo após este período 60 µl da solução de AAPH (2,2'-azobis-(2- metilpropionamidina) 12 mmol L -1. Imediatamente após esta etapa a microplaca foi colocada na microleitora, realizando a leitura da fluorescência (excitação 485 nm e emissão 520 nm) a cada minuto por 80 minutos. 2.2 Análise do Extrato Hidrofílico do Óleo de Buriti Para a determinação da capacidade antioxidante dos compostos hidrofílicos, como compostos fenólicos, presentes no óleo de buriti, realizou a extração de acordo com o método de Pertuzatti et al. (2014), onde 250 mg de óleo foram pesadas e 50 ml de uma solução extratora ácido fórmico:acetona:água (0,35:20:79,65 v/v/v) foram adicionados e a mistura foi submetida a agitação durante 20 minutos. Logo após, a mesma foi filtrada e o sobrenadante re-extraído uma vez mais, e os extratos foram combinados e adicionados em um balão volumétrico de 100 ml. Após, preparado o extrato, uma alíquota de 20 µl foi adicionada na microplaca e seguiu-se o método de Prior et al. (2003).

3 2.3 Ácidos Graxos Para a análise dos ácidos graxos foram pesados em tubos de ensaio aproximadamente 100 mg de amostra, posteriormente foram adicionados 4 ml de NaOH 0,5 mol -1 L -1 em metanol. Os tubos foram aquecidos em banho-maria a 100 C por aproximadamente 8 min., até a obtenção de uma solução transparente. Nesta etapa ocorreu a hidrólise dos triacilglicerois, liberando os ácidos graxos livres. Após o resfriamento, foram adicionados 3 ml de solução de trifluoreto de boro (BF 3 ) 12% em metanol, e os tubos foram novamente aquecidos em banho-maria a 100 C, durante 3 minutos. Nesta etapa produziu-se a metilação dos ácidos graxos livres, catalisada pelo BF 3, resultando na formação dos ésteres metílicos dos ácidos graxos (FAMEs). Após o resfriamento, foram adicionados 4 ml de solução saturada de NaCl, com posterior agitação. Em seguida, foram adicionados 4 ml de hexano, com posterior agitação vigorosa. Posteriormente, os tubos foram deixados em repouso para separação das fases, sendo que 1 µl da fase orgânica superior de cada replicata foi injetado no cromatógrafo gasoso. 3. RESULTADOS E DISCUSSÕES 3.1 Capacidade Antioxidante Medida pelo Método de ORAC As médias dos resultados obtidos para a capacidade antioxidante hidrofílica e lipofílica do óleo da polpa de buriti com desvio padrão e coeficiente de variação (CV) estão dispostas na Tabela 1. Tabela 1 - Resultado da análise antioxidante hidrofílica e lipofílica da capacidade de absorção do radical oxigênio (ORAC) do óleo extraído da polpa de buriti. Amostra ORAC (µmol eq de Trolox/g de óleo) CV (%)* Extrato Hidrofílico 70,92±6,65 a 9,37 Extrato Lipofílico 0,22±0,02 b 7,1 *CV = Coeficiente de Variação. Valores expressos em média ± desvio padrão. Médias seguidas de letras diferentes diferem estatisticamente entre si em nível de 5% (p<0,05) pelo teste de Tukey. O valor encontrado para ORAC hidrofílico foi de 70,92 µmol eq de Trolox/g de óleo, sendo superior ao encontrado por Bataglion et al. (2015) (8,3µmol eq de Trolox/g) em estudos com o óleo de buriti, esta diferença pode estar relacionada com o ano do cultivo, processo de extração do óleo, condições de análise do local de produção, uma vez que o buriti analisado por estes autores era proveniente do estado do Pará e o óleo foi adquirido no comércio local da cidade de Belém, provavelmente não tenha sido extraído pelo método de Goldfish, haja vista que este não costuma ser utilizado em extrações comerciais. Já Lima (2008) em estudos com a polpa de pequi obteve um valor superior (325,9 µmol eq de Trolox/g) ao encontrado no presente estudo. O valor encontrado para ORAC lipofílico foi de 0,22±0,02 µmol eq de Trolox/g, sendo este valor inferior ao encontrado por Bataglion et al. (2015) (1,8±0,01 µmol eq de Trolox/g) em estudos

4 com o óleo do buriti e ao encontrado por Candido et al., (2015) (78,0 µmol eq de Trolox/g) em estudos com a polpa de buriti. No entanto, este valor é próximo ao encontrado por Pertuzatti et al. (2014), para o extrato lipofílico de algumas cultivares de mirtilo (0,22 µmol eq de Trolox/g de mirtilo cultivar Elliot). Quando se compara a capacidade antioxidante do extrato lipofílico com o extrato hidrofílico obtido neste trabalho, observa-se que o extrato lipofílico obteve um valor mais de trezentas vezes inferior ao extrato hidrofílico, demonstrando uma diferença altamente significativa a p< 0,05. Segundo Kuskoski et al. (2005), a capacidade antioxidante de um determinado fruto é resultante da interação de seus componentes, os quais propiciam um microambiente específico, podendo ser produzidos efeitos sinérgicos ou inibitórios. Deste modo, é possível verificar que os compostos presentes nos dois extratos diferenciam-se com relação a sua capacidade de atuação frente ao radical peroxila. De acordo com Rodriguez-Amaya et al. (2008), os carotenoides são muito eficientes no controle do oxigênio singlete, enquanto os compostos fenólicos atuam principalmente na interrupção da reação em cadeia. 3.2 Perfil de Ácidos Graxos A Tabela 2 apresenta o perfil dos ácidos graxos presente no óleo extraído da polpa de buriti. O óleo contém como principais constituintes, os ácidos oleico (C 18:1 cis) e palmítico (C 16:0). Tabela 2 Perfil de ácidos graxos do óleo da polpa de buriti. Nº de Carbonos Ácidos Graxos Ácidos Graxos (%)* Saturados 25,26 C 6:0 Ácido hexanóico 0,01 C 8:0 Ácido caprílico 0,05 C 10:0 Ácido cáprico 0,01 C 12:0 Ácido láurico 0,03 C 14:0 Ácido mirístico 0,12 C 15:0 Ácido pentadecanóico 0,07 C 16:0 Ácido palmítico 22,18 C 17:0 Ácido margárico 0,12 C 18:0 Ácido esteárico 2,51 C 20:0 Ácido araquídico 0,16 Monoinsaturados 73,05 C 16:1 Ácido palmitoléico 0,15 C 17:1 Ácido heptadecanóico 0,09 C 18:1 cis Ácido oleico 72,23 C 20:1 n-9 Ácido gadolínico 0,58 Poli-insaturados 1,71 C 18:2 cis Ácido linoleico 0,51 C 18:3 n-3 Ácido gama-linolênico 1,15 C 22:6 Ácido docosahexaenóico 0,04 *Médias das análises realizadas em triplicata O perfil de ácidos graxos encontrado para o óleo de buriti é composto principalmente por ácidos graxos monoinsaturados (73,05 %), destacando-se o ácido oleico (72,23%), no entanto apresenta uma quantidade significativa de ácidos graxos saturados (25,26%), sendo o ácido palmítico

5 o de maior quantidade (22,18%). Possui também uma menor concentração de ácidos graxos poliinsaturados (1,71%). Jorge, (2014) em estudos com óleo de abacate da variedade Margarida encontrou os valores de 23,28% e 57,33 % para o ácido palmítico e ácido oleico respectivamente, o valor encontrado para o ácido palmítico é próximo ao encontrado no presente estudo, porém o valor de ácido oleico é inferior ao encontrado no óleo de buriti. Silva et al., (2014) em estudos com o óleo de buriti encontrou os valores de 19,81% e 75,74 % para o ácido palmítico e ácido oleico respectivamente, sendo o valor de ácido palmítico inferior e o ácido oleico muito próximo ao encontrado no óleo de buriti do presente estudo. As indústrias de óleos comestíveis têm procurado processar óleos vegetais com alto teor de ácido oleico, pois é um ácido graxo monoinsaturado, e elevadas porcentagens de ácido oleico fazem com que estes sejam desejáveis em termos de nutrição e culinária, representando alta estabilidade para o aquecimento. O elevado grau de insaturação dos óleos permite que eles se oxidem facilmente quando utilizadas altas temperaturas, um exemplo seria o ácido linoleico, um ácido graxo poliinsaturado, que oxida muito mais rápido (aproximadamente 50 vezes) que o ácido oleico (LUZIA, 2012; BRINKMANN, 2000). Essa elevada concentração de ácidos graxos insaturados no óleo de buriti e baixa concentração de ácidos graxos saturados é muito interessante, pois segundo o Codex Alimentarium Commission (2009) os ácidos graxos saturados promovem menor benefício para a saúde, apesar de conferirem maior estabilidade diante do processo degradativo da rancidez autoxidativa. O cromatograma de identificação dos ácidos graxos presentes no óleo da polpa de buriti está apresentado na Figura 1. Figura 1 Cromatograma da separação de ácidos graxos em óleo da polpa de buriti Ácido Palmítico Ácido Oleico 4. CONCLUSÃO Com relação a capacidade antioxidante, o óleo da polpa de buriti apresentou o maior valor para o extrato hidrofílico pelo método de ORAC, seguido pelo extrato lipofílico.

6 O óleo de buriti é composto principalmente por ácidos graxos monoinsaturados, tendo com componente majoritário o ácido oleico, seguido do ácido palmítico que é um ácido graxo saturado. 5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Agostini-Costa. T. S.; Vieira. R. F. (2004). Frutas nativas do cerrado: qualidade nutricional e sabor peculiar. Brasília: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Disponível em: Aquino, J. S.; Pessoa, D. C. N. P.; Araujo, K. L. G. V.; Epaminondas, P. S.; Schuler, A. R. P.; Souza, A. G.; Stamford, T. L. (2014). Refining of Buriti Oil (Mauritia flexuosa) Originated from the Brazilian Cerrado: Physicochemical, Thermal-Oxidative and Nutritional Implications. In: Additions and Corrections. Journal Brazilian Chemistry Society, 25 (1),182. Bataglion, G. A.; Silva, F. M. A.; Santos, J. M.; Barcia, M. T.; Godoy, H. T.; Eberlin, M. N.; Koolen, H. H. F. (2015). Integrative Approach Using GC-MS and Easy Ambient Sonic-Spray Ionization Mass Spectrometry (EASI-MS) for Comprehensive Lipid Characterization of Buriti (Mauritia flexuosa) Oil. Journal Brazilian Chemistry Society, 26(1), Brinkmann, B. (2000). Quality criteria of industrial frying oils and fats. European Journal of Lipid Science and Technology, 102 (8), Candido, T. L. N.; Silva, M. R.; Agostini-Costa, T. S. (2015). Bioactive compounds and antioxidant capacity of buriti (Mauritia flexuosa L.f.) from the Cerrado and Amazon biomes. Food Chemistry, 177, Codex Alimentarius Commission. (2009). Codex-Stan 210: codex standard for comparative study of antioxidant properties and total phenolic content of 30 plant extracts of industrial interest using DPPH, ABTS, FRAP, SOD, and ORAC assays. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 57, Jorge, T. S. (2014). Avaliação reológica do óleo de abacate (Persea americana Mill) e estudo da estabilidade sob condições de aquecimento e armazenamento à temperatura ambiente (Dissetação Mestrado). Universidade Estadual Paulista, São José do Rio Preto. Kuskoski, E. M.; Asuero, A. G.; Troncoso, A. M.; Mancini-Filho, J.; Fett, R. (2005). Aplicación de diversos métodos químicos para determinar actividad antioxidante en pulpa de frutos. Ciência e Tecnologia de Alimentos, 25(4), Lima, A. (2008). Caracterização química, avaliação da atividade antioxidante in vitro e in vivo e identificação dos compostos fenólicos presentes no pequi (Caryocar brasiliense Camb.) (Tese de Doutorado). Faculdade de Ciências Farmacêuticas, São Paulo. Luzia, D. M. M. (2012). Propriedades funcionais de óleos extraídos de sementes de frutos do cerrado brasileiro (Tese de Doutorado). Universidade Estadual Paulista, São José do Rio Preto. Pertuzatti, P. B.; Barcia, M. T.; Rodrigues, D.; Cruz, P. N. Hermosín-Gutiérrez, I.; Smith, R.; Godoy, H. T. (2014). Antioxidant activity of hydrophilic and lipophilic extracts of Brazilian blueberries. Food Chemistry, 164, Rodriguez-Amaya, D. B.; Kimura, M.; Amaya-Farfan, J. (2008). Fontes brasileiras de carotenoides: tabela brasileira de composição de carotenoides em alimentos. (2. ed.). Brasília: MMA/SBF. Rufino, M. S. M. (2008). Propriedades funcionais de frutas tropicais brasileiras não tradicionais (Tese de Doutorado). Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró. Silva, J. P. P.; Oliveira, P. D.; Rodrigues, A. M. C.; Silva, L. H. M. (2014). Caracterização física e química de lipídios estruturados obtidos a partir da interesterificação química da mistura de Murumuru e óleo de buriti. Em XX Congresso Brasileiro de Engenharia Química (COBEQ), Florianópolis, Brasil.