Curso AGREGAÇÃO PLAQUETÁRIA. Nydia Strachman Bacal. Médica Hematologista Patologista Clínica

Transcrição

1 Curso AGREGAÇÃO PLAQUETÁRIA Nydia Strachman Bacal Médica Hematologista Patologista Clínica

2 Morfologia plaquetária Hemostasia primária ria Métodos laboratoriais: diagnóstico classificação de disfunções plaquetárias

3 PLAQUETA Célula discóide ide anuclear (3-5 5 microns) Membrana bilaminar que contem várias v invaginações com um sistema canalicular aberto: Ligado intracelularmente a um sistema tubular denso, formando uma rede de interconexão através s da célula c (complexo membránico) Facilita a secreção dos grânulos

4 Célula não nucleada com meia-vida de 7 a 10 dias. Pode reduzir a meia-vida para 3 a 4 dias indicando aumento de consumo, aumento do turnover plaquetário. (geneticamente? patológicamente?) Um espiral de microtubulos mantém a forma discóide da plaqueta. A membrana plaquetária estica como um guarda chuva em espiral e circula na corrente sanguínea. A estabilidade é conseguida por dois sistemas de canais inter-conectados no interior da plaqueta: a fina rede de ligação do canal sistema tubular denso (amarelo) e os tubos tipo saco (azul) o qual também prove a conexão com o exterior. A plaqueta é altamente especializada e diferenciada. Além dos dois sistemas de canais apresenta outras organelas (mitocondrias, lisossomos, grânulos de estocagem de glicogênio, etc ).

5 Fragmentos do citoplasma de megacariócitos. citos.

6 Organelas da Plaqueta Mitocondria, Aparelho de Golgi, ribossomos, peroxisomos, lisossomos omos Dois tipos de Grânulos de armazenamento: Grânulos Alpha: : Fator 4 Plaquetário, PDGF, fibrinogênio, fibronectina, inibidor I do ativador de plasminogênio o (PAI I), Fatores V, VIII,e FvW Corpos Densos: : Histamina, epinefrina, serotonina, ADP, cálcioc

7 membrana microtubulos Sistema tubular denso Sistema canalicular conectado a superfície Mitocondria Grânulos de glicogênio Grânulos Densos Grânulos α

8 Citoesqueleto plaquetário Composto de filamentos cruzados de actina, ligados a superfície interna da dupla membrana lipídica. Regula a forma da plaqueta em repouso Interage com os receptores transmembranicos Ativação plaquetária através s da cascata de fosforilação proteica intracelular leva a sua contração e liberação do conteúdo das organelas plaquetárias

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10 PLAQUETAS Sistema canicular aberto Grânulo α Sistema Tubular Denso Grânulo Denso Estoque de glicogênio Microtubulos Miosina Filamentos Actínicos Mitocondria Degranulação liberação do conteúdo dos grânulos α e densos Mudança de forma (discóide para esférica) e extensão de pseudópodes

11 Subendotélio

12 Superfície plaquetária Possui numerosos receptores G-proteicos G ou receptores de adesão (integrinas): heterodímeros transmembranicos compostos de subunidades alpha e beta, responsáveis pela adesão e sinais de transdução São glicoproteinas designadas de I até IX (de forma decrescente conforme tamanho molecular); e de a e b conforme tipo de bandas obtidas por eletroforese

13 Glicoproteinas receptoras GP Ib-V-IX: IX: complexo de quatro produtos gênicos, serve como um receptor para FvW; adesão plaquetária Síndrome de Bernard-Soulier GP IIb-IIIa: IIIa: mais abundante, reconhece os quatro receptores de adesão: fibrinogênio, fibronectina, vitronectina, e FvW; agregação plaquetária ria- Tombastenia de Glanzmann Outros: GP Ia, IIa; GP VI: receptores do colágeno

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15 Hemostasia Primária ria Extremamente dinâmica, interação contínua nua entre vaso, plaqueta, e componentes do plasma Adesão, Ativação (Secreção), Agregação

16 Adesão Rompimento vascular expõe os componentes pró-coagulantes do sub-endot endotélio (matrix extracelular, colágeno, proteoglicanos, e fibronectina); O FvW atua como uma ponte de adesão entre o complexo GP Ib-V-IX IX da plaqueta e o colágeno exposto; As plaquetas aderem-se a fibronectina das microfibrilas subendoteliais; A associação FvW-GPIb é a ligação mais forte que supera a força a do fluxo sanguíneo neo

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18 Secreção Ativação Mudança a da forma de discóide ide para esférica com extensão de pseudópodes podes promovida pela contração do citoesqueleto Conteúdo dos Granulos plaquetários são liberados através s do sistema canalicular A contração do citoesqueleto ocorre pelo aumento do Ca iônico intraplaquetário, rio, modulado pela redução do AMPc e aumento de ADP proveniente da via das prostaglandinas (TXA2) Também m são expostos fosfolipídios na superfície da membrana plaquetária, que são receptores dos fatores da coagulação vitamina K dependentes (Fator II, IX, X)

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20 Contraste de Fase

21 Via das Prostaglandinas Prostaglandinas Prostaciclina Sintetase Ciclooxigenase (AAS) Prostaglandinas Tromboxane Sintetase (Clopidogrel) Ca ++ Drogas Antiagregantes interferem nesses mecanismos Prostaciclina (PGI 2 ): poderoso antiagregante plaquetário e vasodilatador Tromboxane A2: poderoso agregante plaquetário e vasoconstrictor

22 Agregação A contração da plaqueta provocada pela reação de liberação propicia: Mudança a conformacional dos receptores IIbIIIa, permitindo a ligação do fibrinogênio Agregação plaquetária via fibrinogênio Reação auto-catal catalítica tica ativando outras plaquetas Formação do plug primário rio hemostático tico

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29 EXAMES LABORATORIAIS NA AVALIAÇÃO PLAQUETÁRIA Contagem Manual de Plaquetas Importante contadores automáticos não contam plaquetas com > 20 fl analisadores automáticos hematológicos com Atc monoclonais Avaliar Morfologia Plaquetária Confirmar trombocitopenia Tamanho (macroplaquetas, microplaquetas) Grânulos plaquetários Tempo de Sangramento Ivy Agregação Plaquetária - Técnica de Born PFA 100 x TS Adesividade Plaquetária Técnica de Salzman Impact (Diamed) Citometria de Fluxo Proteínas de superfície plaquetária CD41 (GPIIb) e CD61 (GPIIIa), CD42b (GPIb), CD42a (GPIX), CD42d (GPV)

30 Obrigada!