MATHEUS RODRIGO IOSSI*¹; DIEGO CUNHA ZIED²; FERNANDA APARECIDA DOURADO³; JOÃO AILTON GÍLIO JÚNIOR 4 ; LUCAS DA SILVA SOUZA 5

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1 Produtividade de Pleurotus spp. cultivados em substrato submetido à um método de desinfecção alcalina Productivity of Pleurotus spp. grown on substrate subjected to an alkaline disinfecting method MATHEUS RODRIGO IOSSI*¹; DIEGO CUNHA ZIED²; FERNANDA APARECIDA DOURADO³; JOÃO AILTON GÍLIO JÚNIOR 4 ; LUCAS DA SILVA SOUZA 5 ¹Graduando do curso de Engenharia Agronômica da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas - UNESP, Campus de Dracena; ² Professor Doutor da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas - UNESP, Campus de Dracena; ³ Graduanda do curso de Engenharia Agronômica da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas - UNESP, Campus de Dracena; 4 Graduando do curso de Engenharia Agronômica da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas - UNESP, Campus de Dracena; 5 Graduando do curso de Engenharia Agronômica da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas - UNESP, Campus de Dracena; *matheus.iossi1@gmail.com RESUMO O presente trabalho teve como objetivo avaliar o comportamento de duas espécies de cogumelo comestível cultivados em substrato submetido a um método de desinfecção alternativo. O substrato para o cultivo do cogumelo foi submetido a desinfecção com solução de hidróxido de cálcio Ca(OH) 2 em quatro diferentes concentrações: I 0% de Ca(OH) 2 ; II 0,5% de Ca(OH) 2 ; III 1,0% de Ca(OH) 2 e IV 2,0% de Ca(OH) 2. O substrato foi submerso na solução por um período de 20 minutos e drenado durante 60 minutos. Duas espécies de cogumelos foram utilizadas no experimento: Pleurotus sapidus e Pleurotus ostreatus var. Florida. A espécie Pleurotus ostreatus var. Florida não respondeu satisfatoriamente a metodologia empregada, em contrapartida, a espécie Pleurotus sapidus se sobressaiu nas concentrações de 1 e 2% de hidróxido de cálcio, com uma produtividade de 559

2 19,07% de conversão em basidiomas. O método utilizado pode ser utilizado por pequenos produtores devido seu baixo custo, além de ser extremamente útil até em zonas rurais que não apresentam a disponibilidade de energia elétrica, amplamente necessária para o tratamento térmico (pasteurização) de substratos. INTRODUÇÃO Os cogumelos são conhecidos devido aos seus atributos terapêuticos e nutricionais por povos asiáticos há mais de 3000 anos Podem fortalecer o sistema imunológico contra uma enorme gama de distúrbios biológicos do organismo assim como oferecer excelentes fontes proteicas, sem contar no sabor agradável (URBEN, 2001). Originalmente os cogumelos eram cultivados em toras de madeira, porém, devido à dificuldade de cultivo e o custo de aquisição da matéria prima, outras formas de cultivo mais acessíveis foram adaptadas, sendo essas a utilização de serragem, resíduos lignocelulósicos e palhas de diversas gramíneas em sacos plásticos, chegando até a casca de café após o despolpamento, palha de milho triturada, palha do sabugo e palha de feijoeiro triturada por meio de uma técnica conhecida como Jun-Cao (URBEN, 2004; DIAS et al., 1997). Nas duas últimas décadas tem-se aumentado as pesquisas abrangendo espécies de Pleurotus, devido ao seu auto potencial biotecnológico, a busca por matérias primas tem gerado novas tecnologias de cultivo, como a desinfecção alcalina utilizando hidróxido de cálcio Ca(OH) 2, que possibilita a utilização do substrato sem que seja necessário a realização da pasteurização do substrato, diminuindo os custos de produção e a mão de obra necessária nos cultivos (PATEL et. al. 2012; JUNQUEIRA, 2015). O objetivo do experimento foi avaliar a eficiência de esterilização do substrato com solução de hidróxido de cálcio Ca(OH) 2 em diferentes concentrações utilizando duas espécies de Pleurotus. MATERIAL E MÉTODOS O experimento foi realizado no Centro de Estudos de Cogumelos (CECOG) da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas (FCAT/UNESP), Câmpus de Dracena. As linhagens utilizadas no experimento foram Pleurotus sapidus e Pleurotus ostreatus var. 560

3 Florida, ambas se encontram preservadas na Micoteca da Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas, Câmpus de Dracena. PREPARO DO INÓCULO O substrato utilizado para o crescimento do inóculo foi a base de grãos de sorgo, que foram cozidos por aproximadamente 30 minutos em água fervente, logo após foram drenados e resfriados. Adicionou-se 2% de sulfato de cálcio e 1% de calcário agrícola para cada quilograma de grãos úmidos. Em sacos de polietileno foram colocados aproximadamente 500 gramas de grãos. Cada saco foi inoculado com aproximadamente ½ placa de petri contendo meio de cultura e micélio das linhagens de interesse (Figura 1). Os sacos inoculados foram incubados em BOD por 15 dias a temperatura média de 25º Celsius. Figura 1: Placa colonizada utilizada como inóculo e sacos já inoculados COLETA DE SUBSTRATO Para realização do experimento utilizou-se palha de capim Urochloa, o qual é abundante na FCAT. O capim foi cortado e seco por uma semana em ambiente natural. Após esse período, foi triturado em partículas de aproximadamente 4 a 6 cm de comprimento, para facilitar o manejo. 561

4 PREPARO DO SUBSTRATO A desinfecção do substrato foi realizada utilizando solução de hidróxido de cálcio Ca(OH) 2 conforme proposto por Contreras (2004). O hidróxido de cálcio é encontrado na forma comercial como cal hidratada, devendo ser escolhidas marcas que possuem em torno de 82% de pureza. Em uma caixa plástica com capacidade para 100 litros de água, preparou-se as soluções contendo 0; 0,5; 1,0 e 2,0% de cal hidratada, onde a concentração de 0% foi considerada como testemunha. Para a confecção de cada tratamento, utilizou-se 3,5 quilogramas de palha seca, o qual após umedecida adquiri o dobro do peso inicial. Seguindo a metodologia e os resultados obtidos por Junqueira (2015), o tempo necessário de submersão foi de 20 minutos, suficiente para elevar o ph do substrato e reduzir a quantidade de microrganismos contaminantes. Após o período de submersão, o substrato foi realocado em caixas plásticas vazadas do tipo hortifruti, onde permaneceu por 60 minutos para permitir completa drenagem do excesso de água. O excesso de água no substrato resulta em anaerobiose, ou seja, ausência de oxigênio, o que dificulta o crescimento do fungo de interesse cultivado. INOCULAÇÃO A quantidade de inóculo obedeceu uma porcentagem com relação a quantidade total de substrato, ou seja, em 1 kg substrato, adicionou-se 2% de inoculante (20 gramas de inóculo em cada saco) o qual representava uma repetição. A Tabela 1 apresenta a descrição dos tratamentos em função da linhagem utilizada. Os sacos plásticos mediam 40 cm de altura por 30 cm de largura, o que proporciona um volume ideal para 1 quilograma de substrato. Os sacos foram furados antes do ensacamento do substrato para permitir a futura frutificação dos cogumelos. 562

5 Tabela 1. Tratamentos utilizados em função da concentração da solução alcalina e da linhagem utilizada. Tratamentos Concentração Espécie 1 0% P. florida 2 0% P. sapidus 3 0,5% P. florida 4 0,5% P. sapidus 5 1% P. florida 6 1% P. sapidus 7 2% P. florida 8 2% P. sapidus INCUBAÇÃO Os sacos com substrato foram colocados em câmara climatizada, sobre prateleiras de ferro galvanizado, com temperatura média programada para 25ºC e umidade relativa em torno de 70%. O monitoramento foi realizado utilizando se termo-higrômetro digital. COLHEITA O período de incubação foi de 24 dias e o período de colheita foi de 36 dias, totalizando 60 dias de cultivo. Os basidiomas foram colhidos diariamente (no começo da manhã e no final da tarde) para análise de produtividade, massa de cachos, número de cachos e número de cogumelos no cacho. DESENHO EXPERIMENTAL O desenho experimental constou de um fatorial duplo, sendo quatro diferentes concentrações de hidróxido de cálcio e duas espécies de Pleurotus sp., com sete repetições em cada tratamento. Os resultados obtidos de produtividade, número de cachos, massa dos cachos e número de cogumelos no cacho foram submetidos ao Teste Tukey ao nível de 5% de probabilidade, conforme proposto por PARDO-GIMÉNEZ, (2010). 563

6 RESULTADOS E DISCUSSÃO Tabela 2. Produtividade (%) e massa dos cachos (g) de P. sapidus e P. ostreatus var. Florida cultivados em substrato submetido a desinfecção alcalina. Concentração Produtividade Massa dos cachos 0 % 0,5% 1% 2% P. sapidus 0,83 ba 5,57 ba 19,07 aa 15,78 aa P. Florida 0 aa 0,49 aa 5,98 ab 3,01 ab P. sapidus 4,15 ba 27,86 ba 95,39 aa 78,94 aa P. Florida 0 aa 2,45 aa 29,92 ab 15,07 ab DMS 5,89** 7,80* 29,47** 39,03* Média 6,34 31,72 CV 86,46 86,46 Letras minúsculas comparam os resultados na coluna e letras maiúsculas comparam os resultados na linha; *DMS dos valores obtidos entre concentração de hidróxido de cálcio; **DMS dos valores obtidos entre linhagens. Os resultados obtidos de produtividade, massa dos cachos, número de cachos e número de cogumelos no cacho indicam que o método de desinfecção alcalina é interessante a ser utilizado, no entanto em se tratando das espécies utilizadas o Pleurotus sapidus destacou-se nos parâmetros avaliados nas concentrações de 1 e 2%. O Pleurotus ostreatus var. Florida não demonstrou resultados satisfatórios utilizando esta metodologia, de modo que se faz necessário o estudo de outros métodos de esterilização para espécie, como pasteurização ou a autoclavagem do substrato. O tratamento utilizando 0,5% de cal hidratada não deve ser utilizado. Junqueira (2015) encontrou uma produtividade de 14,20% utilizando a mesma metodologia de desinfecção, porém o autor utilizou palha de feijão triturada como substrato, submersão de 6 horas e concentração de hidróxido de cálcio Ca(OH) 2 de 2,0%. Utilizando grama Digitaria decumbens como substrato e solução alcalina para desinfecção, Contreras (2004), encontrou 11,19% de produtividade submergindo a grama por 5 minutos e 28,11% submergindo a grama por 12 horas. 564

7 Tabela 3. Número de cachos (unidade) e número de cogumelos no cacho (unidade) de P. sapidus e P. ostreatus var. Florida cultivados em substrato submetido a desinfecção alcalina Concentração Número de Cachos Nº de cogumelos no cacho 0 % 0,5% 1% 2% P. sapidus 0,28 ca 2,57 bca 7,28 aa 4,57 aba P. Florida 0 0 aa 0,85 aa 2,71 ab 1,14 ab P. sapidus 2,85 c A 22,85 bca 56,57 aa 47,00 aba P. Florida 0 aa 11,00 aa 16,28 ab 6,00 ab DMS: 2,50** 3,32* 18,44** 24,41* Média: 2,42 20,32 CV: 96,10 84,44 Letras minúsculas comparam os resultados na coluna e letras maiúsculas comparam os resultados na linha; *DMS dos valores obtidos entre concentração de hidróxido de cálcio; **DMS dos valores obtidos entre linhagens. Seguindo a mesma linha da produtividade para a espécie P. sapidus, os maiores valores de número de cachos formado por saco (7,28) resultaram em elevado número de cogumelos no cacho (56,57), o que consequentemente proporcionou massa do cacho elevada (95,39). Os melhores valores de número de cachos colhidos e também de número de cogumelos, seguiram a ordem 1, 2, 0,5% de cal hidratada. A metodologia de produção utilizando hidróxido de cálcio Ca(OH) 2 para desinfecção é interessante do ponto de vista produtivo, visto que é um material de fácil aquisição e preço relativamente baixo, tornando viável sua utilização por exemplo por pequenos produtores ou olericultores que desejam diversificar sua produção e não possuem instalações necessárias adequadas para os procedimentos de autoclavagem e pasteurização. Outra vantagem desta metodologia é a isenção da utilização de energia elétrica, uma fonte de recurso que atualmente representa 30% do custo fixo do produtor. CONCLUSÃO A utilização de solução alcalina na concentração de 1 e 2% é recomendada para pequenos produtores de cogumelo. A espécie P. sapidus respondeu de maneira mais favorável que a espécie P. ostreatus var. Florida, quando submetida a esta metodologia. 565

8 AGRADECIMENTO Pró-Reitoria de Pesquisa (PROPE) pelo fornecimento de bolsa de apoio acadêmico. REFERÊNCIAS CONTRERAS, E. P. et al. Soaking of substrate in alkaline water as a pretreatment for the cultivation of Pleurotus ostreatus. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, v. 79, n. 2, p , DIAS E. S., KOSHIKUMO, E.M. S., SCHWAN, R. F., & SILVA, R. D. Cultivo do cogumelo Pleurotus sajor-caju em diferentes resíduos agrícolas. Ciência e Agrotecnologia, v. 27(6), p , JUNQUEIRA, P. P. G.; Aplicação de hidróxido de cálcio em substituição ao tratamento térmico no cultivo de Pleurotus ostreatus. 40 Páginas. Universidade Federal de Lavras, Minas Gerais PARDO-GIMÉNEZ, ARTURO; ZIED, DIEGO CUNHA; PARDO-GONZALÉZ, JOSÉ EMILIO. Utilización de compost agotado de champiñón como capa de coberturas en nuevos ciclos de producción. Pesquisa Agropecuária Brasileira. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Informação Tecnológica Pesquisa Agropecuária Brasileira, v. 45, n. 10, p , Disponível em: < PATEL, Y., NARAIAN, R., & SINGH, V. K. Medicinal properties of Pleurotus species (Oyster mushroom): A review. World Journal of Fungal and Plant Biology, 3, (2012) URBEN, Arailde F. et al. Produção de cogumelos por meio de tecnologia chinesa modificada. [S. l.]: Embrapa, (Recursos genéticos e biotecnologia). 566

9 URBEN, A. F. Produção de cogumelos por meio de tecnologia chinesa modificada. Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, p. 186,