FUNDAÇÃO ABC PESQUISA E DESENVOLVIMENTO AGROPECUÁRIO SETOR DE FERTILIDADE DE SOLOS

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1 FUNDAÇÃO ABC PESQUISA E DESENVOLVIMENTO AGROPECUÁRIO SETOR DE FERTILIDADE DE SOLOS APLICAÇÃO DO PROTETOR BACTERIANO PREMAX EM INOCULAÇÃO DE SEMENTES DE SOJA CASTRO 2010

2 FUNDAÇÃO ABC PESQUISA E DESENVOLVIMENTO AGROPECUÁRIO SETOR DE FERTILIDADE DE SOLOS RELATÓRIO DE PESQUISA APLICAÇÃO DO PROTETOR BACTERIANO PREMAX EM INOCULAÇÃO DE SEMENTES DE SOJA Fundação ABC x Rizobacter do Brasil RESPONSÁVEL: ENGº AGRº DR. GABRIEL BARTH CASTRO 2010

3 1 IDENTIFICAÇÃO DO PROJETO 1.1 Código do projeto: SS09PREMAX 1.2 Palavras chave: soja, inoculação, protetor bacteriano, Premax 1.3 Responsável técnico: Engº Agrº Dr. Gabriel Barth. 1.4 Execução: Bióloga MSc. Adriana Michelli 2 - INTRODUÇÃO Produtos comerciais frequentemente são ofertados na região de atuação da Fundação ABC, com o propósito de fornecimento de nutrientes, proteção a inoculantes, estímulo ao crescimento radicular e aéreo com conseqüente maior absorção de água e nutrientes, diminuição dos efeitos de baixas temperaturas, etc. Para validação desses benefícios, são necessários experimentos regionais em diversas culturas comerciais e em comparação com as atuais tecnologias em uso. 3 - OBJETIVO 3.1 Avaliar a eficiência do uso de protetor bacteriano na manutenção de longevidade e qualidade de inoculação de sementes de soja por bactérias do gênero Bradyrhizobium. 4 MATERIAIS E MÉTODOS 4.1. TRATAMENTOS N Descrição Dose 1 Testemunha (sem inoculação) - 2 Inoculação tradicional (Rizoliq ) 2,0 ml por kg de semente 3 Inoculação tradicional + Premax 2,0 + 1,0 ml por kg de semente

4 4.2. DELINEAMENTO: Inteiramente casualizado LOCAL: Laboratório Ento/Fito - Fundação ABC 4.4. CULTIVAR: COODETEC AVALIAÇÕES Determinação do número de bactérias de Bradyrhizobium viáveis por semente de soja; Quantificação da porcentagem de inoculação de plântulas de soja; 4.6. PROCEDIMENTO LABORATORIAL (PROTOCOLO RESUMIDO): Tratamento de sementes Foram tratados 2,0 kg de sementes (cv. Coodetec 206), em triplicata, com fungicida (Maxim XL, dose de 100 ml por 100 kg de semente), manualmente em saco plástico. Após uma hora, foi realizada a inoculação das sementes conforme os tratamentos, cuidando para todos os tratamentos receberem a mesma quantidade de calda (foi feita uma diluição, sendo que a testemunha recebeu apenas água destilada e esterilizada) Quantificação do número mais provável (NMP) de bactérias em sementes Tomou-se amostras de 100 sementes e colocou-se em erlenmeyer estéril com capacidade de ml, contendo 100 ml de solução fisiológica com Tween 80 (Polioxietilenorbitano Monolaurato) (8,5 g de cloreto de sódio em 1,0 litro de água destilada, adicionado de 0,4 ml de solução estoque de Tween 80). Colocou-se o erlenmeyer em agitador orbital pelo período de 15 minutos.

5 Tomou-se alíquota de 1 ml da diluição 10 0, colocou-se em frasco estéril com 9 ml de solução fisiológica (NaCl 0,85%), obtendo a diluição Repetiu-se a operação anterior até obter a diluição Semeou-se, em triplicata, 0,1 ml das diluições, por meio da técnica do espalhamento, em placas de Petri contendo o meio Levedura Manitol Ágar (ELMA) com vermelho Congo. Incubou-se as placas em estufa a 28 C por sete dias e realizou-se a contagem das UFC das placas com 30 a 300 colônias. Esse procedimento foi realizado após 0 (18 horas), 7, 10 e 14 dias após a inoculação Porcentagem de plantas noduladas Método de Burton modificado O método objetiva avaliar a potencialidade da infectividade das sementes pré-inoculadas comerciais. Foram preparados 7 vasos (plásticos de 500 ml) dos tratamentos 2 e 3 (42 no total), com substrato areia e vermiculita (1:1) esterilizados receberam uma semente pré-inoculada cada, a 1,5 cm de profundidade; em cada uma das épocas mencionadas na metodologia anterior. Adicionou-se sobre o plantio solução nutritiva de Norris para uma boa acomodação da semente, conduzindo em câmara de crescimento. Repetiu-se a irrigação com solução nutritiva e água esterilizada de acordo com a necessidade da cultura estabelecida. A contagem final dos nódulos foi realizada após 30 dias de crescimento das plantas. Foram considerados os nódulos estabelecidos dentro de um cilindro imaginário na coroa da raiz principal, ou seja, num diâmetro de 2,5 cm por um comprimento de 2,5 cm a contar do colo radicular (nível do solo).

6 Figura 2. Plântulas de soja em meio esterilizado para contagem de nódulos. Figura 1. Detalhes da incubação em placas. 4.7 Análise estatística: Para análise do experimento foi utilizado o programa SISVAR, adotando-se o delineamento inteiramente ao acaso. Em caso de a análise de variância apresentar-se significativa, adotou-se o teste de Tukey para comparação de médias, e índice de significância de 5%.

7 5 RESULTADOS Os resultados são apresentados nas Tabelas 1 e 2. Na Tabela 1 é demonstrado o número de células recuperadas das sementes tratadas, após algumas horas, 7, 10 e 14 dias após a inoculação. Observa-se que houve uma alta perda de número de bactérias, mesmo na primeira contagem, com inoculante e que o uso de protetor bacteriano não impede a mortalidade das bactérias, mas reduz significativamente a perda de viabilidade das mesmas. Na Tabela 2 há uma confirmação desses dados, pois com o uso do protetor bacteriano, há uma infecção positiva das raízes de soja até os 14 dias após a inoculação das sementes. Tabela 1. Número de células por semente, conforme os tratamentos. Descrição 0 dia 7 dias 10 dias 14 dias Rizoliq b b b b Rizoliq+Premax a a a a CV 35,71 25,71 25,58 55,45 Prob>F 0,0000 0,0000 0,0000 0,0001 DMS Tabela 2. Número de nódulos na raiz principal*, 26 dias após o plantio. Descrição 0 dia 3 dias 7 dias 10 dias 14 dias Rizoliq 10,56 a 6,42 b 5,83 b 1,53 b 1,38 b Rizoliq+Premax 10,65 a 10,85 a 10,67 a 9,80 a 9,60 a CV 15,66 29,00 25,33 28,87 27,87 Prob>F 0,8771 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 DMS 1,176 1,700 1,470 1,281 1,184

8 6 - CONCLUSÃO Há uma perda significativa da viabilidade das bactérias nas sementes de soja em inoculação tradicional poucas horas após a inoculação. O uso do protetor bacteriano (Premax ), promove uma redução significativa nessa perda de viabilidade, ocasionando uma infecção positiva das raízes de soja até 14 dias após a inoculação. Eng Agr Dr. Gabriel Barth Coordenador Fertilidade de Solos CREA PR 69386/D Eng Agr MSc. Eltje Jan Loman Filho Diretor Técnico CREA PR 16222/D

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