LEVANTAMENTO DE BRUCELOSE BOVINA COM A PROVA DO ANEL EM LEITE (PAL), NA PLATAFORMA DE ENTREGA DE LEITE NO MUNICÍPIO DE URUGUAIANA, RS, BRASIL 1

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1 LEVANTAMENTO DE BRUCELOSE BOVINA COM A PROVA DO ANEL EM LEITE (PAL), NA PLATAFORMA DE ENTREGA DE LEITE NO MUNICÍPIO DE URUGUAIANA, RS, BRASIL 1 SURVEY OF BRUCELOSIS BOVINE WITH RING TEST AT THE LOCAL INDUSTRY IN URUGUAIANA COUNTY, RS, BRAZIL Airoldi Lacroix Bonetti 2 ; Gilson Luiz Borges Corrêa 2 ; Airoldi Lacroix Bonetti Junior 3 ; Vanderlei Rosa' RESUMO Com objetivo de verificar a ocorrência de brucelose, na bacia leiteira do município de Uruguaiana-RS, foram coletadas 115 amostras de leitura, na plataforma de recebimento da Cooperativa Central Gaúcha de Leite (CCGL). As amostras coletadas foram examinadas com a Prova do Anel em Leite (PAL) e Quatro delas (3,48%) resultaram positivas. Amostras de soro, de 321 animais das propriedades que deram resultados positivos à PAL, foram examinadas com o "card test", sendo todas as reações negativas a essa prova sorológica. Com base nos resultados obtidos, concluiu-se que as reações resultantes do uso da PAL foram falsas positivas, causadas provavelmente por reações inespecíficas. As propriedades do município de Uruguaiana, as quais entregam leite na CCGL, não apresentaram focos de brucelose. Palavras-chave: Prova do Anel em Leite, brucelose bovina. ABSTRACT In order to occurrence of brucellosis at the milk basin in Uruguaiana County-RS, is has been collected 115 samples of milk from the admission platform of Cooperativa Central Gaúcha de Leite (CCGL). The samples collected were examined with the Ring Test for Milk and four of them (3,48%) got a positive result. Were examined, with card test, samples of serum of 321 animals from the farms where the result with Ring Test had been positive, being al reactions negative to this sorologic proof. Based on these results, it has been concluded that the final results were false positive. They were probably caused by unspecific reactions since 1 - Projeto realizado com apoio da FAPERGS, processo nº 2627/ Fac. Zoot. Vet. Agro. PUCRS - Uruguaiana 3 - Médico Veterinário Uruguaiana - RS

2 47 Levantamento de brucelose... the Uruguaiana's farms, which deliver milk to CCGLm did not present any focus of brucellosis. Key words: Ring Test, bovine brucellosis Para GUERREIRO et al (1984) os INTRODUÇÃO mais importantes materiais para a O leite é um alimento de confirmação da doença são: o leite, o reconhecida importância nutritiva para o exsudato vaginal, sangue, membranas consumo humano, além de servir como fetais, fetos abortados e os gânglios matéria prima para a fabricação de linfáticos. O leite deverá conter uma subprodutos componentes do cesto básico alimentar da população. Por esse motivo, é mistura dos quatros tetos, pois a infecção pode se localizar em um ou mais tetos. A indispensável que seja produzido e PAL é um teste que detecta aglutininas de distribuído dentro de normas higiênicas, proporcionando menor risco de transmissão de doenças para o homem. Brucellas no leite, e foi idealizado para ser aplicado em mistura de leite de diversos animais. Através do leite podem ser O presente trabalho teve como transmitidas algumas zoonoses, entre estas, a brucelose, cujo agente etiológico nos bovinos é denominado Brucella abortus, objetivo verificar a ocorrência de focos de brucelose, na bacia leiteira no município de Uruguaiana, RS, através da PAL, utilizando podendo penetrar no organismo inclusive amostras coletadas na plataforma de por via digestiva. Segundo VOIGT e recebimento da Cooperativa Central KLEINE (1975) para o homem, o maior Gaúcha de Leite. perigo de contrair a brucelose é a ingestão de leite crua, sendo a pasteurização a única forma segura de evitar a doença. O médico veterinário desempenha um importante papel no controle de MATERIAL E MÉTODOS Esta pesquisa foi desenvolvida junto à Cooperativa Central Gaúcha de Leite (CCGL), no município de Uruguaiana, a zoonoses. A realização de exames qual conta com cerca de 99 associados que laboratoriais, como a Prova do Anel em entregam leite junto à Cooperativa. Leite (PAL), permite verificar a taxa de Foram coletados dos tarros e prevalência da brucelose, e que se realize a caminhões tanques, junto à plataforma de vigilância epidemiológica para a entrega, amostras de leite "in natura", localização de rebanhos infectados. oriundas de diversas propriedades rurais.

3 Bonetti, A.L. et al. 48 As coletas das amostras de leite foram executadas em três fases: 1. dias 26, 27 e 30 de setembro de 1991; 2. dias 3, 8 e 16 de outubro de 1991; 3. dias 19, 21, 22 e 28 de junho de Após prévia homogeneização do conteúdo, foram retiradas amostras de 30 ml de leite e colocadas em frascos esterilizados. Os frascos contendo as amostras foram identificados com o número do tarro ou do tanque, sendo que os mesmos indicavam o número de inscrição dos cooperados, também se marcou um número de série, nos tarros e tanques, conforme chegavam na plataforma de recebimento. As amostras permaneciam em temperatura de refrigeração por vinte e quatro horas após a coleta. Uma hora antes do processamento com a PAL, colocavamse o antígeno e as amostras de leite, em temperatura ambiente. Depois que cada amostra foi homogeneizada, invertendo-se os frascos, retirou-se com o auxílio de uma pipeta, a quantidade em mililitros de leite para a realização da PAL, transferindo-se para tubos de ensaio de 13x100mm, seguindo o seguinte critério: 1ml : mistura de leite até 50 vacas; 2ml: mistura de leite de 51 a 100 vacas; 3ml: mistura de leite de 101 a 150 vacas e amostras de caminhões tanques. Após serem transferidas para os tubos, colocou-se sobre o leite uma gota de antígeno (0,03 ml), invertendo-se os mesmos para homogeneização. A seguir, os tubos permaneciam em estufa, na temperatura de 37ºC, por um período de 60 minutos. Passado esse intervalo em incubação, realizou-se a leitura. As reações resultantes da utilização da PAL nas amostras examinadas foram classificadas como negativas e positivas; já os estabelecimentos foram classificados como negativos ou suspeitos. Nas propriedades suspeitas, coletaram-se amostras de sangue, por punção jugular em bovinos fêmea como mais de dois anos e meio de idade, tanto nos animais em lactação como naqueles fora de lactação. Após a retração do coágulo, o soro foi submetido a soroaglutinação através da prova "card test", cujos exames foram executados na Inspetoria Veterinária e Zootécnica de Uruguaiana, RS. RESULTADOS Os resultados obtidos encontram-se na tabela 1 e tabela 2: Na tabela 1 estão expressos os resultados de todos os exames de coletas, tanto de tarros como de tanques, realizados com a PAL, na CCGL, Uruguaiana, RS.

4 49 Levantamento de brucelose... TABELA 1. Levantamento de brucelose bovina. Resultados de todos os exames das coletas, tanto de tarros como de tanques, da prova do Anel em leite (PAL) em amostras de leite coletadas na plataforma de recebimento da CCGL, Uruguaiana, RS. Número Positivas Negativas amostras Nº % Nº % , ,52 Na tabela 2 estão expressos os resultados dos exames efetuados com a prova "card test", utilizando soro de 321 bovinos das propriedades onde ocorreram amostras positivas a PAL. TABELA 2. Levantamento de brucelose bovina. Resultados dos exames com a prova "card test", realizados com soro de bovinos, das propriedades com reações positivas à Prova do Anel em Leite (PAL). Propriedades Nº de Animais Tipo de Reações A 234 negativas B 21 negativas C 22 negativas D 44 negativas TOTAL: DISCUSSÃO Os resultados expressos na tabela 1, permitiram verificar que, do total de 115 amostras de leite coletadas de tarros e de caminhões tanques na plataforma de recebimento do leite da CCGL, Uruguaiana-RS e examinadas com a Prova do Anel em Leite (PAL), em 4 delas (3,48%) as reações indicaram resultados positivos. O percentua1 de 3,48% é bem próximo ao encontrado por MOTA et al. (1963), o qual foi de 4,9% de amostras examinadas positivas, durante estudo realizado em tambos utilizando a PAL, no município de Santa Maria-RS. Já ARANALDE et al. (1974) na bacia leiteira de Pelotas-RS, encontraram 10,1 % de amostras positivas, percentual superior aos 3,48% pesquisa. observados nesta Particularmente em Uruguaiana-RS, POESTER et al. (1977) examinando 394 amostras de leite "in natura", recolhidas diretamente dos veículos transportadores, no momento em que o produto era distribuído à população, encontraram 37 amostras (9,4%) entre positivas e suspeitas, não tendo sido realizados exames sorológicos complementares.

5 Bonetti, A.L. et al. 50 Porém no presente trabalho, analisando a Tabela 2, verificou-se ao serem procedidos exames sorológicos utilizando-se o "card test", com o soro de 321 animais, das propriedades onde ocorreram reações positivas com a PAL, que os resultados de todas as amostras de soro examinadas foram negativas. Resultado semelhante a este foi observado por CHIELLE et al. (1989), durante estudo realizado com objetivo de determinar a especificidade da Prova do Anel em Leite para o diagnóstico de brucelose na bacia leiteira do município de Santa Maria-RS, explicando ainda que a PAL, por si só, não pode ser considerada uma prova confiável para o diagnóstico da brucelose bovina, em função de sua baixa especificidade. Os resultados falsos positivos detectados na presente pesquisa, com a PAL podem ser atribuídos provavelmente, pela existência de animais com mastite, alterando a prova e produzindo reações inespecíficas. Além disso, ratificou-se a importância do uso de provas sorológicas complementares, visando, a confirmação de resultados obtidos com a PAL, durante levantamento para vigilância epidemiológica de brucelose bovina. CONCLUSÕES Baseando-se nos resultados obtidos é possível concluir que: 1. As propriedades do município de Uruguaiana, as quais entregam leite na CCGL, não apresentaram focos de brucelose. 2. Concomitantemente com a PAL, devem ser realizados exames sorológicos, como o "card test", evitando-se assim interpretações errôneas com a PAL, devido a reações inespecíficas que podem ocorrer. REFERÊNCIAS ARANALDE, A A.; MARTINS, L. F.; ZIEGLER. J.C. Ocorrência de estafilococus coagulase positiva no leite crú da bacia leiteira de Pelotas-RS. Revista do Centro de Ciências Rurais, v. 4, nº, 2, p , CHIELLE, L.L.; WEIBLEN, R; MOREIRA, W. S.; FLÔRES, M. L. Especificidade da Prova do Anel em Leite (PAL) para diagnóstico da brucelose bovina na bacia leiteira do município de Santa Maria-RS, Brasil. Revista do Centro de Ciências Rurais, v. 19, nº 4, p , GUERREIRO, M. G.; OLIVEIRA, S. J.; SARAIVA, D. et al. Bacteriologia Especial com interesse em Saúde Animal e Saúde Pública. Porto Alegre: Sulina, 1984, 492p.

6 51 Levantamento de brucelose... MOTA. T. M. B.; VALLANDRO, A; PASIN, I. P.; GAIDA. F. P. Brucelose no gado leiteiro em Santa Maria (RS). Revista da Faculdade de Farmácia, v. 9, nº 2, p , POESTER, F. P.; BONETTI, A. L.; DORA, J. F. P. Aplicação do ring test em alguns rebanhos leiteiros no município de Uruguaiana-RS. In: V CONGRESSO ESTADUAL DE MEDICINA VETERINÁRIA. 1977, Porto Alegre. Resumos... Porto Alegre: SOVERGS, VOIGT, A; KLEINE, F. D. Zoonosis (Descripción sinóptica orientativa). Zaragoza: Acribia, 1975, 343p.