Avaliação fitoquímica do extrato de Lippia Alba para utilização como antioxidante natural em alimentos

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1 Avaliação fitoquímica do extrato de Lippia Alba para utilização como antioxidante natural em alimentos Assessment phytochemical extract of Lippia Alba for use as natural antioxidant in food Daniel Mantovani 1, Ornella Maria Porcu 1 Universidade Estadual de Maringá, Av. Colombo, 5790, Bloco J45, CEP , Maringá-PR. danieluns@yahoo.com.br RESUMO Este trabalho objetivou caracterizar a presença de substâncias antioxidantes em plantas medicinais as quais possuem amplo uso como condimentos na alimentação. A presença de substâncias antioxidantes tem como ação evitar e prevenir a oxidação em alimentos e dessa forma agem como conservantes naturais. A planta selecionada para o estudo fitoquímico sistemático foi a Lippia alba (sálvia). Comprovou-se a presença de glicosídeos saponínicos, taninos e taninos hidrolisáveis. Portanto, desde que seja seguido os parâmetros técnicos de qualidade, a planta Lippia alba pode ser usada como um ingrediente alimentício podendo atuar como antioxidante natural em alimentos preparados. Palavras chave: Antioxidantes. Plantas medicinais. Compostos químicos. ABSTRACT This study aimed to characterize the presence of antioxidants in medicinal plants which are widely used as condiments in food. The presence of antioxidants is to prevent action and prevent oxidation in foods and thus act as natural preservatives. The plant selected for the study was a systematic phytochemical Lippia alba (sage). Proved, the presence of glycosides saponins, tannins and hydrolysable tannins. So long as it followed the technical parameters of quality, the plant Lippia alba can be used as a food ingredient can act as a natural antioxidant in foods. Key words: Antioxidant. Medicinal plants. Chemistry composts. 1 INTRODUÇÃO As plantas produzem uma grande variedade de compostos químicos, os quais são divididos em dois grupos, metabólitos primários e secundários. O metabolismo primário é considerado como uma série de processos envolvidos na manutenção fundamental da sobrevivência e do desenvolvimento, enquanto o metabolismo secundário consiste num sistema de importante função para a sobrevivência e competição no ambiente (DIXON 2001). Os três grupos de metabólitos secundários mais importantes em plantas são os terpenos um grupo dos lipídios, compostos fenólicos (derivados dos carboidratos) e os alcalóides derivados dos aminoácidos, principais constituintes das proteínas (VERPOORTE, 2000). A confirmação científica dos efeitos benéficos das plantas condimentares que são usadas na alimentação como uma fonte de agregação de valor à composição nutricional, aroma e sabor dos alimentos, se deve, à presença de substâncias antioxidantes (BARA, et al., 2006). Os principais alimentos utilizados na culinária são: Origanum vulgare (orégano), Myristica fragans (nozmoscada), Mentha piperita (menta), Foeniculum vulgare (funcho), Zingiber officinale (gengibre), Pimpinella anisum (erva-doce), Eugenia caryophyllata (cravo-da-índia), Ocimum basillicum (manjericão) e Lippia alba (sálvia) principalmente pela liberação de compostos que melhoram o sabor dos alimentos e seus efeitos de prevenção (FILHO, 2000; ADITIVO e INGREDIENTES, 2003). O potencial ativo das plantas se deve à presença de constituintes tais como flavonóides,

2 70 Mantovani, Porcu alcalóides, triterpenos, sesquiterpenos, taninos, carotenóides e compostos fenólicos (BARA, et al., 2006). Estes têm sido exaustivamente estudados e demonstraram ações farmacológicas a qual podem ser empregados, como agentes medicinais. Por outro lado, os compostos apresentam ação antioxidante, destacando as especiarias e ingredientes utilizados no preparo dos alimentos (FILHO e YUNES, 1998). O fenômeno da oxidação lipídica é uma das principais causas da deterioração dos alimentos, podendo ser prevenida pela adição de antioxidantes naturais (tocoferol), substituindo os compostos sintéticos (BHA, BHT, EDTA entre outros) utilizados na prevenção da oxidação dos alimentos, pela substituição por antioxidantes provindos de fontes naturais como as plantas (DIXON 2001). Os antioxidantes podem ser classificados em produtos que atuam sobre a formação do 1O2 (oxigênio singlet), ou que reagem com o 1O2 (oxigênio singlet), atuando na forma competitiva com radicais livres dos lipídios, impedindo a continuação da reação em cadeia (BOBBIO e BOBBIO, 2003), inibindo os processos de formação da rancidez em alimentos causada pela deterioração da cadeia lipídica que ocorrem principalmente em alimentos os quais contém quantidades significativas de óleos ou gorduras em sua composição. Portanto, o principal objetivo deste estudo, foi caracterizar o perfil fitoquímico sistemático da presença de substâncias antioxidantes presentes na Lippia alba. 2 MATERIAS E MÉTODOS Para realização das análises via espectrofotométrica, foi necessário a obtenção dos extratos dos componentes químicos da planta Lippia alba. Para realização deste procedimento, as plantas foram coletadas no Refúgio Biológico da Itaipu Binacional, na forma in natura. Transportada até o laboratório e realizado o procedimento de seleção das partes da planta que serão extraídas e analisadas. Nesta seleção foram realizados os seguintes passos: retirada da terra com uso de água corrente, caules, galhos e folhas secas. As melhores folhas (verdes) foram secas em estufa a 45 OC por um período de duas horas para retirada da água. 2.1 OBTENÇÃO DOS EXTRATOS As folhas secas foram maceradas e trituradas até obtenção do pó e armazenadas em sacos de polietileno em local fresco e arejado. Para realização do procedimento de extração, a matériaprima na forma de pó, foi pesada em balança de precisão + 0,0001g e transferida para um frasco erlenmeyer de 50 ml acrescentando água destilada à temperatura ambiente. As análises dos compostos fitoquímicos da planta Lippia alba foi realizada após obtenção do extrato por difusão usando solventes alcoólicos, cetônicos e aquosos, para realização da caracterização e identificação dos metabólitos secundários presentes na Lippia Alba. Foi utilizada a técnica da cromatografia em camada delgada, demonstrada na Tabela 1 para pesquisa de metabólitos secundários no extrato aquoso a 10 % m/v de Lippia alba e avaliação das características sensoriais, conforme procedimento descrito pelo Instituto Adolfo Lutz (2004). Os valores de absorção foram obtidos via espectrofotometria utilizando (Espectrofotômetro UV/Vis, modelo 700 Plus-Latstore). A Figura 1, 2 e 3, demonstra os valores obtidos pelo espectro de absorção na região do UV-Vis para cada extrato utilizado Farmacopéia Brasileira IV edição (2004). O recipiente foi deixado em repouso por 20 minutos e em seguida realizada a filtragem para

3 Avaliação fitoquímica do extrato de Lippia Alba para utilização como antioxidante natural em alimentos 71 retirada da parte foliar e obtenção dos extratos a serem submetidos para análise. Os extratos prontos foram utilizados em 36 horas, após esse período, em seguida foram desprezados e substituídos por novos extratos. Os extratos com concentração de 0,4%, ou seja, aqueles que eram preparados com 0,1g do pó foram utilizados para a análises em espectrofotometria. E par os extratos com concentração de 10% foram preparados alterando a quantidade do material para 10g de pó em 100 ml de solvente, e usadas para a análise dos metabólitos secundários, por apresentar maior concentração. 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Segundo Matos, (1995) os testes fitoquímicos visam evidenciar as principais classes de substâncias químicas presentes nas espécies, por reações qualitativas, a partir de extratos das plantas com solventes específicos para cada classe As classes de substâncias testadas para este estudo foram: fenóis, taninos hidrolisáveis, condensados, flavonóides e alcalóides. Os testes fitoquímicos mostraram de acordo com a (Tabela 1) que as folhas de Lippia alba em extrato aquoso 10% m/v apresentaram coloração castanha, odor característico e caráter ácido ph 6,0. Para os metabólitos secundários notou-se a presença de glicosídeos e saponínicos, taninos através da reação com sais de ferro III, taninos hidrolisáveis pela reação com formol clorídrico, e ainda, a presença de ácidos voláteis com ph 5,0. A presença destas substâncias indicou a diversidade de constituintes funcionais da planta Lippia alba. Tabela 1. Características sensoriais e pesquisa de metabólitos secundários no extrato aquoso 10 % m/v de Lippia alba. Extrato aquoso Resultado Características organolépticas Cor Castanho Odor Característico da planta ph da mistura 6,0 Metabólitos secundários Glicosídeos antociânicos - Glicosídeos saponínicos ++ Taninos ++ Reação com sais de Ferro III + Reação com Ácido Nitroso - Taninos hidrolisáveis +++ Taninos condensados - Ácidos voláteis 5,0 Glicosídios Flavônicos n.p Reação de Shinoda - Glicosídios antraquinônicos - Obs.: (-) ausência de reação; (+) intensidade da reação: (+++) máxima; (++) média e (+) mínima; n.p = não pesquisado. O resultado negativo para o teste de reação fotoquímica aplicados para os compostos glicosídeos antociânicos, antraquinônicos, flavônicos e para alcalóides, evidenciou a ausência ou baixa concentração para as classes dos constituintes estudados. Possivelmente devido à interferência ambiental como temperatura, umidade, tipo de solo, estágio de desenvolvimento da planta, tendo como conseqüência um prejuízo da atividade terapêutica. Efing, (2008) ao estudar compostos secundários cita que a baixa quantidade destes compostos pode ocorrer devido à interferência ambiental. Espectro de absorção na região do UV-Vis para o extrato de Lippia alba, não foi possível caracterizar as substâncias isoladamente, mas podemos evidenciar a presença de picos de absorção

4 72 Mantovani, Porcu referentes às substâncias procuradas principalmente pela característica que cada solvente usado apresenta. O perfil qualitativo da absorção em diferentes solventes é apresentado nas (Figuras 1, 2 e 3). 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, Abs x comprimento de onda 600 Figura 1. Espectro de absorção na região do UV-Vis do extrato de Lippia alba em metanol. 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, Abs x comprimento de onda Figura 2. Espectro de absorção na região do UV-Vis do extrato de Lippia alba em acetona. 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, Abs x comprimento de onda Figura 3. Espectro de absorção na região do UV-Vis do extrato de Lippia alba em acetona.

5 Avaliação fitoquímica do extrato de Lippia Alba para utilização como antioxidante natural em alimentos 73 4 CONCLUSÃO Os resultados preliminares obtidos com os extratos aquosos a 10 % de Lippia alba, indicaram a presença de glicosídeos saponínicos, taninos e taninos hidrolisáveis. Portanto, desde que seguidos rigorosamente os parâmetros técnicos de qualidade, esta planta pode ser usada como um ingrediente alimentício que atuará como antioxidante natural. Estudos adicionais são necessários para determinação e quantificação dos compostos secundários, envolvidos neste processo. A extração utilizando solventes alcoólicos, cetônicos e aquosos, permitiu uma extração com maior rendimento dos compostos secundários, não levando a degradação destes compostos. Entretanto, testes de toxidade devem ser levados em conta quando utilizados solventes como metanol e cetona durante a extração. A quantificação de substâncias biologicamente ativas é uma etapa importante para a segurança e eficácia na utilização em produtos alimentícios e farmacêuticos. AGRADECIMENTOS À CAPES Pelo incentivo a bolsa de estudos. REFERÊNCIAS ARAÚJO, J.M.A. Química de Alimentos, 3 edição, Viçosa: Editora UFV, (2004). Artigo Técnico. Plantas e Extratos Vegetais na Indústria de Alimentos, Aditivos & Ingredientes, n.29 Nov/Dez, p.48-53, BARA, M.T.F.; RIBEIRO, P.A.M.; ARANTES, M.C.; AMORIM, L.L. S.S.; PAULA J.R. Determinação do Teor de Princípios Ativos em Matérias-primas Vegetais, Revista Brasileira de Farmacognosia, v.16 (2), p , abr/jun BOBBIO, F.O; BOBBIO, P.A. Introdução à Química de Alimentos, 3 edição São Paulo: Varela, BOBBIO, P.A.; BOBBIO, F.O. Química do Processamento de Alimentos, São Paulo: Varela, (2001). DIXON, R.A. Natural products and plant disease resistance. Nature, p.411, p EFING, L.M.A.C. Compostos bioativos do material resinoso, subproduto do processamento da erva-mate (Ilex paraguariensis A. St.- Hil.). Curitiba PR, Tese (Doutorado em Tecnologia de Alimentos) Universidade Federal do Paraná. EVANGELISTA, J. Tecnologia de Alimentos, São Paulo: Atheneu, Farmacopéia Brasileira. 4. ed. São Paulo: Editora Atheneu, parte II, quinto fascículo, FILHO, C.F. Principais Avanços e Perspectivas na Área de Produtos Naturais Ativos: Estudos Desenvolvidos no NIQFAR?UNIVALI. Química Nova, v.23 (5): p , FILHO, V.C.; YUNES, R.A. Estratégias para a Obtenção de Compostos Farmacologicamente Ativos a partir de Plantas Medicinais. Conceitos sobre Modificação Estrutural para Otimização da Atividade. Química Nova, v.21 (1): p , INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Métodos físico-químicos para análise de alimentos. IV Edição. São Paulo, 2004.

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