Profa Dra Cristina L S Petrarolha Silva. FEA Fundação Educacional de Andradina FISMA-FCCA

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Tânia Aquino Beppler
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1 Disciplina: MICROBIOLOGIA I Aula: Crescimento Bacteriano Profa Dra Cristina L S Petrarolha Silva FEA Fundação Educacional de Andradina FISMA-FCCA

2 1-Considerações Gerais Crescimento em bactérias: Individual populacional Crescimento é um somatório dos processos metabólicos progressivos, que normalmente conduz à divisão com concomitante produção de duas células-filhas a partir de uma.

metabólicos progressivos, que normalmente conduz à divisão

5 Tamanho bacteriano adulto O que é? Quem o influencia? Idade bacteriana O que é?

6 Termos para crescimento microbiano Taxa de crescimento (velocidade específica de crescimento): é a variação no número ou massa de microrganismos por unidade de tempo. Tempo de geração: é o intervalo de tempo necessário para que uma célula se duplique. O tempo de geração é variável para os diferentes organismos, podendo ser de 10 a 20 minutos até dias, sendo que em muitos dos organismos conhecidos, este varia de 1 a 3 horas. O tempo de geração não corresponde a um parâmetro absoluto, uma vez que é dependente de fatores genéticos e nutricionais.

O tempo de geração é variável para os diferentes organismos, podendo ser de 10 a 20 minutos até dias, sendo que em muitos dos organismos

7 IMPORTANTE Toda bactéria tem seu ambiente ideal onde encontra condições ótimas de crescimento. Uma pop bacteriana é um SISTEMA DINÂMICO, com células se dividindo e células morrendo o tempo todo.

8 Tubo à direita, meio BHI sem semeadura; tubo à esquerda, meio BHI após crescimento bacteriano. Observar turvação indicativa de multiplicação microbiana

9 Meio com crescimento bacteriano apresentando sedimento (deposição de bactérias).

10 2- Métodos de medida Desenvolvimento da cultura bacteriana: Aumento da quantidade de protoplasma Aumento do número de microorganismos

11 2.1- Métodos para estimar massa ou aumento de protoplasma DIRETOS Centrifugação Peso Seco INDIRETOS Nitrogênio Colorimetria ou espectrofotometria Consumo de Metabólito ou Acúmulo de produto do metabolismo Turbidimetria

Nitrogênio Colorimetria ou espectrofotometria Consumo

12 Turbidímetro Leitura em 660nm Curva padrão Não destrutiva Não diferencia céls viáveis das céls mortas

14 Colorímetro

15 2.2- Métodos para estimar o número de microorganismos DIRETOS Contadores de partículas Câmaras de contagem Esfregaços corados INDIRETOS (células viáveis) Diluição Seriada ou do número mais provável (NMP) Plaqueamento em Meio Sólido (UFC)

Esfregaços corados INDIRETOS (células viáveis) Diluição

16 Contagem direta Câmara de Neubauer

18 Contagem indireta

20 Contagem Indireta Técnica da Diluição Seriada

21 Contagem em placas:

22 Contagem em placas: Técnica Pour Plate

23 khauser/labs/microbiology /Meat_Milk/Pour_Plate.htm

24 Técnica da membrana filtrante

26 Técnica número mais provável mentos.blogspot.com/

27 3- Curva de Crescimento Utilizar apenas CULTURA PURA Representação gráfica do aumento do número de indivíduos em um determinado período de tempo

28 3- Curva de Crescimento fases de desenvolvimento de uma cultura bacteriana adaptação, desenvolvimento (crescimento), extinção de nutrientes e morte Fases: lag, exponencial, estacionária e morte

29 Curva de Crescimento Sistema Fechado

30 Fase Lag ou Latente Período de adaptação, intensa atividade metabólica Ausência de divisão Longa: inóculo pequeno, cultura velho, meio e T desfavoráveis Pode inexistir

31 Fase logarítimica ou exponencial Divisão máxima Progressão geométrica de razão 2 Fatores determinantes do crescimento

32 Fase estacionária Escassez de nutrientes ou acúmulo de metabólitos Bactérias crescem muito lentamente ou número de mortes é igual ao de novas

33 Fase de declínio ou morte Morte das bactérias Lento ou exponencial

34 Curva de Crescimento Sistema Fechado

35 Curva Diáuxia duas fontes de carbono após término da primeira, inicia-se uma nova curva

36 Crescimento em culturas contínuas Estes são respectivamente controlados pela concentração do nutriente limitante (fonte de C ou N) e pela taxa de fluxo (taxa de diluição). Em baixas concentrações do nutriente limitante, a taxa de crescimento é proporcional à concentração do nutriente

37 Se houvesse: Suprimento ilimitado de nutrientes + Ambiente inalterável + Espaço ilimitado

38 Quimiostato htm

39 Equações para determinação dos parâmetros de crescimento O tempo de geração pode ser calculado quando uma cultura encontra-se em fase exponencial, pela fórmula abaixo: N=No.2n onde N= número final de células No= número inicial de células n= número de gerações

40 n= log(n) - log(no)/0,301 G = t/n onde G= tempo de geração t= tempo de crescimento n= determinado acima.

41 4- Efeito dos fatores ambientais no Crescimento Bacteriano no Crescimento Bacteriano 4.1-Temperatura

42 Tipos de Bactérias em Relação a Temperatura

43 4.2- ph

44 4.3- Tensão de Oxigênio 4.4- Água 4.5- Pressão Osmótica

46 Fontes de Consulta TRABULSI, L. R.; ALTERTHUM, F.; Microbiologia. 4. ed. rev. e atual. São Paulo: Atheneu, p. Imagens:

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