RESULTADOS E DISCUSSÃO

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1 Avaliação da germinação polínica de tomateiro híbrido Silvety sob solução salina e adubação nitrogenada Talitta S dos S Paiva 1 ; John S Porto 1 ; Yuri F Amorim 1 ; Erlani de Oliveira Alves 1 ; Tiyoko N H Rebouças 1 ; Cláudio Lúcio F Amaral 1 UESB Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia. Estrado do Bem Querer, Km 04, Caixa Postal 95, CEP Vitória da Conquista BA, talittasantos@gmail.com, jsporto87@ yahoo.com.br, yfamorim@hotmail.com, erlanea@gmail.com, tiyoko@uesb.edu.br, materdidatic@gmail.com RESUMO O objetivo deste trabalho foi avaliar a germinabilidade e viabilidade polínica do tomateiro híbrido Silvety sob solução salina e adubação nitrogenada. As investigações foram conduzidas no mês janeiro de 2012, na UESB, em área experimental de fertilização nitrogenada, de tomate híbrido Silvety em plena condução. O teste de germinação in vitro consistiu na coleta de 30 flores, no início da manhã, distribuindo os grãos de pólen em lâminas escavadas, com 1 ml da solução contendo 5,0 % de sacarose, 5,0 % de Agar, 2,5% de Boro, 2,5% de Cálcio, 4,3% de Boro e ph fixado em 6,5. Foram testados cinco meios de cultura com diferentes concentrações de NaCl, quais sejam: M1 = 0; M2 = 25; M3 = 50; M4= 75 e M5 = 100 mm. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado com 3 repetições. Os grãos de pólen foram levados a B.O.D. por um período de incubação 4h e temperatura fixada em 25ºC. Após o período de incubação foram observados, por meio de microscópio óptico, os polens germinados utilizando o corante Azul de Amã. Os resultados foram submetidos à análise de variância, e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% utilizando o programa SISVAR versão 5.3 (FERREIRA 2010). Conclui-se que o aumento das concentrações salinas reduz o potencial de germinação do híbrido e aumenta o número de polens inviáveis e as plantas submetidas à adubação nitrogenada obtiveram menor percentagem de germinação dos tubos polínicos. PALAVRAS-CHAVE: Solanum lycopersicum, nitrato, ureia, pólen, salinidade. ABSTRACT Evaluation of pollen germination of hybrid tomato Silvety under saline and nitrogen fertilization This research aimed to evaluate the germination and pollen viability of hybrid tomato Silvety under saline and nitrogen fertilization. The investigations were conducted in the month of January 2012 in UESB, in an area of nitrogen fertilization of tomato hybrid Silvety in full conduction. The germination in vitro consisted of the collection of 30 S1819

2 flowers in the early morning, distributing pollen grains in excavated blades with 1 ml of solution containing 5.0 % sucrose, 5.0% agar, 2.5 % boron, 2.5% calcium, 4.3% boron and set at ph 6.5. Five culture media with different concentrations of NaCl were tested: M1 = 0, M2 = 25, M3 = 50, M4 = 75 and M5 = 100 mm. The experimental design was completely randomized with 3 replications. The pollen grains were carried B.O.D. for 4h incubation period and temperature fixed at 25 C. After the incubation period were observed through an optical microscope, pollen grains germinated using the blue dye of Amman. The results were subjected to analysis of variance, and means were compared by Tukey test at 5 % using the SISVAR program version 5.3 (FERREIRA, 2010) it was concluded that the increase in salt concentration reduces the germination potential of hybrid and increases the number of viable pollen and plants subjected to nitrogen fertilization had a lower percentage of germination of pollen tubes. Keyword: Solanum lycopersicum, nitrate, urea, pollen, salinity. O tomate é uma hortaliça de grande importância no mundo destacando o Brasil como um dos maiores produtores mundiais (CARVALHO e PAGLIUCA, 2007). Na região Sudoeste da Bahia o cultivo do tomate, no verão, é beneficiado pelas condições climáticas favoráveis existentes na região tornando-se fonte de emprego e renda para as comunidades que cultivam esta hortaliça. O cultivo do tomate necessita de intensa mão de obra e alto índice tecnológico que envolve a utilização de mecanização para preparo do solo, adubação, irrigação. No que tange o aspecto da adubação, é de extrema importância ressaltar o valor do nitrogênio uma vez que este afeta o crescimento e desenvolvimento do tomateiro promovendo ganhos significativos na produção de seus frutos. Dentre os adubos nitrogenados é possível citar a ureia que é proveniente do amônio CH4N2O e o Nitrato de Cálcio - Ca(NO3)2.4H2O como uma fonte de nitrogênio bastante utilizada em culturas com alta demanda de cálcio ou cultivadas em solos salinos. A salinidade dos solos tornou-se um grande problema nas regiões áridas e semiáridas no mundo. No caso da Bahia, 44% do solo são classificados como salinos afetando quantitativamente e qualitativamente a produção de polens por meio da redução do número de polens bem como da porcentagem de germinação e taxa de crescimento do tubo polínico ocasionando redução do número de frutos (RIBEIRO et al., 2003; S1820

3 ESTEVES e SUZUKI, 2008). Dessa forma, o estudo do comportamento germinativo dos grãos de pólen de uma espécie pode revelar diferenças genéticas entre genótipos (PFAHLER et al., 1997). No caso do tomateiro este é classificado com uma cultura moderadamente sensível à salinidade, com diferentes respostas entre as cultivares (ALIAN et al., 2000). Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a germinabilidade e viabilidade polínica do tomateiro híbrido Silvety sob solução salina e adubação nitrogenada. MATERIAL E MÉTODOS As investigações foram conduzidas no mês janeiro de 2012, no campus da Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia (UESB) e na Biofábrica da UESB, localizada em Vitoria da Conquista BA (Latitude: 14 51' 57", Longitude: 40 50' 20" e Altitude 923m). Foram marcadas 30 plantas, previamente selecionadas, com base em seu aspecto fitossanitário, em área experimental de fertilização nitrogenada, de tomate híbrido Silvety em plena condução. O teste de germinação in vitro consistiu na coleta, ao acaso, de 30 flores obtida das 15 plantas previamente selecionadas. Estas foram retiradas dos indivíduos tratados com diferentes adubos nitrogenados (Nitrato de Cálcio e Uréia) e o controle sem uso do nitrogênio. A coleta ocorreu no início da manhã, sendo posteriormente levadas para a Biofábrica onde foram realizados os experimentos. As anteras foram retiradas das flores e os grãos de pólen foram distribuídos em lâminas escavadas, sob placas de Petri contendo papel absorvente umedecido com água destilada, simulando uma câmara úmida, com 1 ml da solução contendo 5,0 % de sacarose (p/v), 5,0 % de Agar (p/v), 2,5% de Boro (p/v), isto é, 400ppm de H3BO3, 2,5% de Cálcio (p/v), ou seja, 400ppm de Ca(NO3)2.4H2O e 700ppm de MnSO4.H2O. O ph foi fixado em 6,5. Foram testados cinco meios de cultura com diferentes concentrações de NaCl, quais sejam: M1 = 0; M2 = 25; M3 = 50; M4= 75 e M5 = 100 mm. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado com 3 repetições. Os grãos de pólen foram levados a B.O.D. por um período de incubação 4h e temperatura fixada em 25ºC. Após o período de incubação foram observadas, com auxílio de um microscópio óptico, os polens germinados, cujo tubo polínico atingiu comprimento igual ou maior que seu próprio diâmetro, como sugerido por YOKAS et al. (2008). Para melhor visualização, foi utilizado o corante Azul de Amã, o qual é específico para esta finalidade, permitindo S1821

4 uma maior eficácia na identificação dos tubos polínicos. Os resultados foram submetidos à análise de variância, análise regressão polinomial e as médias comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05) utilizando o programa SISVAR versão 5.3 (FERREIRA 2010). RESULTADOS E DISCUSSÃO Foi verificado efeito significativo do Cloreto de Sódio e da adubação nitrogenada sobre a germinação dos polens do híbrido Silvety. À medida que a concentração salina era aumentada o número de pólen germinado era diminuído, e por consequência, o número de polens inviáveis crescia conforme aumento da concentração salina (Figura 1). Esse fator pode ser justificado tanto pelo meio em que os grãos de pólen foram cultivados como pela sensibilidade a salinidade do tomateiro, uma vez que, a emissão do tubo polínico é diretamente influenciada pelas concentrações de sacarose, boro, NaCl, ph e tempo de incubação (SALLES et al., 2006; ANTONIO, 2004). A tolerância à salinidade pode variar entre espécies, dentro da mesma espécie, e ainda, em diferentes estádios de desenvolvimento da planta sendo controlada por mais de um gene e influenciada pelos fatores ambientas (FLOWERS e FLOWERS, 2005; MUNNS, 2005). Dessa forma, altos teores de sais no solo resultarão em redução do número de polens e da taxa de germinação, assim como, do crescimento do tubo polínico em função da baixa fertilidade do gametófito masculino resultando em baixa produção de frutos em função da formação de plantas anormais devido à baixa viabilidade dos grãos de pólen (VEIGA et al., 2012; ALMEIDA et al., 2010; ESTEVES e SUZUKI, 2008). A viabilidade do pólen é de grande importância nos processos de melhoramento e por meio desta é possível avaliar os fatores que envolvem a formação de flores e de embriões. Além da viabilidade, a germinabilidade polínica é fator essencial no melhoramento de plantas, uma vez que o grão de pólen contém material genético, resultante da recombinação, no qual transmitirá para próximas gerações genótipos amplamente diversificados (SANTOS NETO et al., 2006). Avaliando o efeito da adubação nitrogenada foi possível verificar que a testemunha obteve maior média de polens germinados do que as plantas adubadas, conforme descrito na tabela 1. S1822

5 O efeito do nitrato foi verificado em trabalho realizado por Pio et al., (2004) para citros sob meio de cultura utilizando diferentes dosagens de nitrato de cálcio, no qual maior número de polens estourados foram verificados a medida em que se aumentava a quantidade de Ca(NO3)2.4H2O. Dessa forma, foi possível verificar que o aumento da concentração salina reduziu o número de polens germinados e aumentou o número de polens inviáveis bem como o uso de adubos nitrogenados promoveu menor porcentagem de germinação do polen do que a testemunha. REFERÊNCIAS ALIAN, A.; ALTMAN, A.; HEUER, B. Genotypic difference in salinity and water stress tolerance of fresh market tomato cultivars. Plant Science, v.152, p.59-65, ALMEIDA, L.A.H.; SAMPAIO, L.S.; SANT ANA, M.R.; AMARAL, C.L.F. Seleção in vitro de mamona para resistência a estresse salino: foco nas plantas espontâneas. Irriga, Botucatu, v. 15, n. 4, p , out dez, ANTONIO, I.C. Germinação in vitro do pólen de Theobroma grandiflorum (Willdenow ex Sprengel) Schumann. Científica, Jaboticabal, v.32, n.2, p , CARVALHO, J. F. L. C.; PAGLIUCA, L.G. Tomate, um mercado que não para de crescer globalmente. Hortifruti Brasil, ed. 58, p. 6-14, jun, ESTEVES, B. S.; SUZUKI, M. S. Efe.ito da salinidade sobre as plantas. Oecologia Brasiliensis.,n. 12, v. 4, p , FERREIRA, D. F. (2010) Sistema de análise de variância - SISVAR. Versão 5.3. Lavras-MG: UFLA. FLOWERS, T. J.; FLOWERS, S. A. Why does salinity pose such a difficult problem for plant breeders?. Agricultural Water Management, v.78, n.1, p.15-24, MUNNS, R. Comparative physiology of salt and water stress. Plant, Cell & Environment, v. 25, n.2, p , fev, PFAHLER, P. L.; PEREIRA, M. J.; BARNETT, R. D. Genetic variation for in vitro sesame pollen germination and tube growth. Theoretical and Applied Genetics, New Brunswick, v. 95, p , S1823

6 PIO, L.A.S.; SANTOS, F.C.; RUFINI, J.C.M.; RAMOS, JD.; ARAÚJO, AG. Germinação in vitro de pólen de citros sob diferentes concentrações de cálcio e boro. Revista Brasileira de Agrociência, v.10, n. 3, p , jul-set, RIBEIRO, M. R.; FREIRE, F. J.; MONTENEGRO, A. A. Solos halomórficos no Brasil: ocorrência, gênese, classificação, uso e manejo sustentável. In: CURI, N.; MARQUES, J. J.; GUILHERMES, L. R. G. G.; LIMA, J. M.; LOPES A. S.; ALVAREZ, V. H. (ed) Tópicos em ciência do solo. Viçosa, MG: Sociedade Brasileira de Ciência do Solo, v. 3, p , SALLES, L.A.; RAMOS, J.D.; PASQUAL, M.; JUNQUEIRA, K.P.; SILVA, A.B. Sacarose e ph na germinação in vitro de grãos de pólen de citros. Ciência e Agrotecnologia, Lavras, v. 30, n. 1, p , jan-fev, SANTOS NETO, O.D.; KARSBURG, I.V.; YOSHITOME, M.Y. Viabilidade e germinabilidade polínica de populações de jurubeba (Solanum paniculatum L.). Revista de Ciências Agro-Ambientais, Alta Floresta, v.4, n.1, p.67-74, VEIGA, P.de O.A.; VON PINHO, R.G.; VON PINHO, E.V.R.; VEIGA, A.D.; OLIVEIRA, K.C.; DINIZ, R.P. Meios de cultura para germinação de grãos de pólen de milho. Revista Agrarian, Dourados, v.5, n.17, p , YOKAS, I.; TUNA. A. L.; BURUN. B.; ALTUNLU, H.; ALTAN, F.; KAYA, C. Responses of the Tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) Plant to Exposure to Different Salt Forms and Rates, Tukey, v. 32, p , S1824

7 Figura 1: Viabilidade e germinabilidade polínica de híbridos de tomate Silvety em função de diferentes concentrações salinas (Pollen viability and germination of tomato hybrids Silvety for different salt concentrations). Vitória da Conquista- BA, Tabela 1: Germinação in vitro de pólens de tomateiro híbrido Silvety submetido a diferentes soluções salinas e adubação nitrogenada (In vitro germination of pollen hybrid tomato Silvety subjected to different salt solutions and nitrogen fertilizer). Vitória da Conquista BA, Tratamentos Germinação in vitro (%) Testemunha Nitrato Uréia 28,4 a 15,8 b 13,5 b Médias seguidas de mesma letra na coluna não diferem entre si pelo teste de Tukey, a 5% de probabilidade. S1825