Dosagem de Colesterol em Massas. 1.Introdução

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1 Dosagem de Colesterol em Massas 1.Introdução Colesterol é um lipídeo encontrado nas células de todos os tecidos. Existe uma crença, inclusive entre os químicos, que plantas não contém colesterol. Este erro ocorre em parte porque plantas geralmente contém pequenas quantidades de colesterol e também porque os métodos analíticos para detecção do colesterol nesta faixa não estavam bem desenvolvidos, o que só ocorreu mais recentemente. Outra razão advém da legislação que permite que se rotulem os alimentos como zero de colesterol quando a quantidade deste esteróide for muito pequena. A presença de esteróides em plantas é extensamente relatada e mais de 250 destes são conhecidos. Dentre estes esteróides o β-sitosterol (sitosterol) é o mais comum. O sitosterol difere do colesterol pela presença de um grupo etila na posição 24. O colesterol também está presente em plantas tanto na forma livre como esterificada. Colesterol ocorre como componente de membranas das plantas e também como parte dos lipídeos da superfície das folhas onde algumas vezes é o lipídeo mais abundante. A quantidade de colesterol é baixa quando esta é expressa como porcentagem total de lipídeos. Enquanto em plantas o colesterol responde em média por 50mg/kg da totalidade de lipídeos. Nos animais esta quantidade é cerca de 5g/kg ou mais. Colesterol Colesterol é necessário para manter e construir as membranas celulares, regular a fluidez das membranas em diferentes temperaturas. O grupo hidroxila do colesterol interage com grupos fosfato das membranas enquanto a porção esteróide está inserida na mesma. Colesterol também contribui na produção da bile e é importante para o metabolismo de vitaminas lipossolúveis, A, D, e K. É o precursor principal para a síntese da vitamina D e de vários hormônios esteroidais (cortisol, aldosterona e hormônios sexuais). Colesterol é provavelmente o lipídeo mais conhecido por causa da relação entre níveis de colesterol do sangue e doenças cardiovasculares. Colesterol é sintetizado no fígado e é encontrado em quase todos os tecidos

2 do corpo. Colesterol também é encontrado em alimentos principalmente os de origem animal. Não precisamos ingerir colesterol porque nosso corpo pode sintetizar tudo que precisamos. Uma dieta rica em colesterol pode levar a altos níveis de colesterol na corrente sanguínea. O excesso pode se acumular nas paredes de artérias restringindo a circulação. Esta condição do sistema circulatório é conhecida como aterosclerose e é a causa principal das doenças do coração. Colesterol é transportado na corrente sanguínea associado a partículas que também contém ésteres de colesterol, fosfolipídeos e proteínas. As partículas são classificadas de acordo com suas densidades. As lipoproteínas de baixa densidade (LDL) transportam o colesterol do fígado para outros tecidos. Receptores nas superfícies das células se ligam as LDLs e permitem que o colesterol seja usado por estas. As proteínas de alta densidade (HDL) removem o colesterol das superfícies das membranas trazendo-o de volta para o fígado onde é convertido em ácidos biliares. LDL é também conhecida como mau colesterol enquanto a HDL é conhecida como bom colesterol. Quanto mais colesterol nós consumimos menos o corpo produz. Isto não significa no entanto que a presença de colesterol em nossa dieta não tem influência no nível total de colesterol em nossa corrente sanguínea, pois o colesterol ingerido inibe a síntese de receptores das LDLs. O corpo não consegue portanto dirigir o colesterol para as células alvo. Isto faz com que o nível de colesterol na corrente sanguínea aumente. Conhecer portanto a quantidade de colesterol em alimentos é importante para uma dieta saudável. O método de dosagem de colesterol (total incluindo os ésteres) aqui empregado está baseado no método de Liebermann-Buchard. A base deste método é a reação do colesterol e ésteres com anidrido acético e ácido sulfúrico concentrado resultando na formação de um complexo azul esverdeado. 2.Material e métodos: Equipamentos e vidrarias Balança analítica Banho-maria Espectrofotômetro Estufa Papel de filtro Proveta graduada 25 Tubos de ensaio Balões volumétricos

3 Reagentes: Ácido acético glacial Ácido sulfúrico Anidrido acético Colesterol Clorofórmio Padrão de colesterol(25 mg/): Dissolver 25 mg de colesterol em 250 de clorofórmio 3. Procedimento analítico: Pesar 3,0 g da amostra finamente pulverizada. Secar a amostra em estufa a 105ºC, durante 2h. Esfriar em dessecador. Adicionar 5 de clorofórmio, homogeneizar e deixar em repouso por 20 min. Adicionar mais 5 de clorofórmio e filtrar em papel de filtro, lavando-o cuidadosamente até que desapareça a cor amarelada na borda do filtro. Receber o filtrado em proveta graduada de 25 até o volume máximo de 15. Adicionar à proveta graduada 1 de ácido acético glacial, 2 de anidrido acético e 0,2 de ácido sulfúrico. Arrolhar a proveta e agitar após a adição de cada reagente. Deixar no escuro por 25 min. Medir a coloração desenvolvida em espectrofotômetro a 550 nm usando cubetas de 1 cm. Curva Padrão Completar a Tabela abaixo: Tubo Solução colesterol CHCl 3 AcOH Ac 2 O H 2 SO 4 T(%) (550 nm) A (550 nm) mg de colesterol em cada tubo 1 15,0 0, ,2 2 10,0 5, ,2 3 7,5 7, ,2 4 5,0 10, ,2 5 2,5 12, ,2 6 0,0 15, ,2 7 (macarrão) 15,0 (resultado da extração) 0, ,2 4. Resultados - Completar a Tabela -Gráfico com os valores de absorbância (y) versus mg de colesterol em cada tubo (x)

4 - Determinar a porcentagem de colesterol na amostra 5. Bibliografia -Carvalho, H. H. e Jong, E. V., et al, Alimentos: Métodos Físicos e Químicos de Análise, Editora da Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Huang, T.C. et al, Anal. Chem. 1961,33, Behrman, E. J. e Gopalan, V., J. Chem. Educ. 2005, 82, Burke, R. W. et al, Clin. Chem. 1974, 20, Bruice, P. Y. Organic Chemistry, Química Orgãnica, Pearson Prentice Hall, São Paulo, 2006, 4a Edição.

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