OCORRÊNCIA DE Eimeria sp. EM FRANGOS DE CORTE NO ESTADO DE SÃO PAULO

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1 ARS VETERINARIA, Jaboticabal, SP, Vol. 19, nº 3, , ISSN OCORRÊNCIA DE Eimeria sp. EM FRANGOS DE CORTE NO ESTADO DE SÃO PAULO (THE OCCURRENCE OF Eimeria sp. IN BROILER CHICKENS IN THE STATE OF SÃO PAULO) R. F. S. SANTOS¹, G. M. KAVAVATA 2, S. M. ALMEIDA 2, M. HISANO¹, L. F. L. CALIXTO 3, M. V. MEIRELES 4 RESUMO O objetivo do presente trabalho foi o de determinar as espécies do gênero Eimeria presentes em frangos de corte no Estado de São Paulo, onde foram colhidas 9 amostras de fezes. Os oocistos presentes nas amostras foram purificados em solução salina saturada e, posteriormente, para cada amostra, 10 aves de 14 dias de idade foram inoculadas por via oral com oocistos purificados. A identificação das espécies foi realizada pela análise do período pré-patente, morfometria e morfologia de oocistos, lesões macroscópicas e local parasitado. Nas amostras analisadas foi observado a presença de E. acervulina,, E. mitis, e, geralmente em infecções mistas envolvendo várias espécies. PALAVRAS-CHAVE: Eimeria sp.. Frangos de corte. SUMMARY The aim of this research was to determine the species of the genus Eimeria that are present in broiler chickens in the State of São Paulo. Nine feces samples were collected from São Paulo State. Oocysts present in the samples were purified in saturated saline solution and, later, for each sample, 10 birds of 14 days of age were orally inoculated with purified oocysts. The identification of the species of Eimeria was accomplished through the analysis of the pre-patent period, oocysts morphometry and morphology, macroscopic lesions and tissue tropism. It was observed the presence of,, E. mitis, and, usually in mixed infections involving several species. KEY-WORDS: Eimeria sp.. Broiler chickens. INTRODUÇÃO A coccidiose em galinhas é causada por protozoários do gênero Eimeria e se constitui em uma das principais causas de perdas econômicas para a indústria avícola de frangos de corte, apesar dos constantes avanços concernentes à sua profilaxia. Estudo realizado para avaliar o impacto econômico da coccidiose no Brasil revelou que, se 10% do plantel brasileiro fosse afetado por essa parasitose, haveria uma perda anual de aproximadamente 13 milhões de dólares (CASTRO, 1994). O mesmo autor, em levantamento realizado junto a várias empresas avícolas brasileiras concluiu que a percentagem de lotes afetados por coccidiose clínica ou subclínica variou, entre diferentes empresas, de 1% a 15%. No Brasil existem somente dois estudos referentes à ocorrência ¹ Bolsista de Iniciação Científica - CNPq /Araçatuba, Acadêmico do Curso de Medicina Veterinária, Universidade Estadual Paulista- UNESP. 2 Bolsista de Iniciação Científica FAPESP/Araçatuba, Acadêmico do Curso de Medicina Veterinária, Universidade Estadual Paulista- UNESP. 3 Universidade de Franca. 4 Prof. Assistente Doutor do Departamento de Clínica, Cirurgia e Reprodução Animal - Curso de Medicina Veterinária - Unesp - Araçatuba; Rua Clóvis Pestana, 793, Jd. Dona Amélia C.P End. Eletrôn.: marcelo@fmva.unesp.br 230

2 das diferentes espécies de Eimeria em plantéis de frangos de corte (KAWAZOE & FIGUEIREDO, 1990; MacDOUGALD et al, 1987). Pesquisas referentes à etiologia da eimeriose no território nacional são extremamente importantes, principalmente pelo fato de que vacinas com oocistos vivos estão sendo utilizadas em matrizes e frangos de corte em substituição à utilização de agentes anticoccidianos. O presente trabalho tem como objetivos determinar quais espécies do gênero Eimeria estão presentes em plantéis de frangos de corte no Estado de São Paulo. 231 MATERIAL E MÉTODOS Instalações e Equipamentos O experimento foi realizado em instalações pertencentes ao curso de Medicina Veterinária da UNESP - Campus de Araçatuba. As aves foram alojadas em gaiolas, permanecendo 10 aves por unidade. Aves experimentais e manejo Foram utilizados pintos de corte, machos, de linhagem comercial, vacinados no primeiro dia de vida contra a doença de Marek e alimentados com ração sem agentes anticoccidianos. Amostras de fezes Foram colhidas amostras de fezes em 9 complexos avícolas de corte do Estado de São Paulo. Cada amostra foi colhida em 3 a 5 galpões de frangos de corte de uma mesma empresa, de aves com 30 a 40 dias de idade. As amostras foram acondicionadas em frascos de plástico, que continham contendo solução de bicromato de potássio 2%, e enviadas ao laboratório, sendo posteriormente submetidas a um processo de purificação e concentração de oocistos em solução salina saturada. Após esta etapa, procedeu-se à diluição dos oocistos em bicromato de potássio 2% e aeração forçada em temperatura de 30º C, para que ocorresse a esporulação dos oocistos. Identificação das espécies de Eimeria A identificação presuntiva de, E. maxima, E. necatrix, e E. brunetti foi feita através da análise do local e aparência das lesões macroscópicas e pela análise morfológica e morfométrica dos oocistos e estágios endógenos. A identificação de E. mitis e foi realizada pela análise morfológica e morfométrica e determinação do período pré-patente. Para cada amostra foi realizada infecção experimental em 10 aves, utilizando-se oocistos purificados sem determinação prévia das espécies presentes. Foram colhidas amostras de fezes 90, 92 e 95 horas após a inoculação, com posterior concentração e purificação de oocistos através de flutuação em solução salina saturada, seguida de observação da presença, morfologia e morfometria dos oocistos (McDOUGALD et al., 1997). No 7º dia após a inoculação, as aves foram necropsiadas para determinação do local parasitado e das características das lesões macroscópicas. RESULTADOS E DISCUSSÃO Pela análise do local parasitado, aspectos das lesões macroscópicas e análise morfológica e morfométrica dos oocistos, pôde ser feita a identificação das 3 espécies de Eimeria mais comuns nos frangos de corte, E. acervulina, e. Duas espécies consideradas de baixa patogenicidade e de baixa ocorrência em nossas granjas foram encontradas: E. mitis em amostras de 4 empresas e em amostras de 7 empresas (Tabela 1). Nos 9 experimentos foram encontradas lesões no duodeno e jejuno caracterizadas por pontos brancos, isolados ou coalescentes, espessamento da parede intestinal, hiperemia da mucosa e exsudato mucoso, indicando infecção por. No jejuno e íleo havia a presença de petéquias na serosa, hiperemia da mucosa e exsudato mucoso de coloração alaranjada, lesões indicativas da presença de. No ceco, foi observada presença de sangue e exsudato caseoso preenchendo sua luz, além de petéquias na mucosa e serosa desse órgão, evidenciando infecção por. Pelo fato de a infecção experimental ter sido realizada sem o isolamento de diferentes espécies, foram encontrados oocistos com morfologia que variava de elipsóide a subesférica até oocistos de formato ovóide, caracterizando infecção mista com presença de várias espécies (Figura 1). Em relação à morfometria dos oocistos, também foi observada variação nos diâmetros polar e equatorial, sugerindo uma diversidade de espécies presentes nas amostras (Tabela 1). Não foi possível distinguir as diferentes espécies de Eimeria somente pela análise morfológica e morfométrica dos oocistos. Desse modo, para permitir a identificação das espécies, foram colhidas amostras de fezes, respeitando-se o período pré-patente, e realizados raspados da mucosa intestinal das respectivas áreas de infecção de cada espécie. Com isso foi possível a identificação de oocistos de e E. mitis. A E. necatrix não foi verificada nas granjas pesquisadas. Esta espécie geralmente está presente em

3 Tabela 1 Período pré-patente, morfologia e morfometria de oocistos encontrados em infecções mistas, em amostras de fezes e raspados de mucosas. Oocistos Empresa 1 2 e 6 7 3, 5 e 8 4 e 9 Morfologia Morfometria * Período pré-patente de 83 h é indicativo da presença de. Elíptico a subesférico e Elíptico a subesférico e Diâmetro polar μm μm 13,25-34,7μm 13,13-35 μm μm Diâmetro equatorial μm μm 12,40-20 μm 10,87-20 μm μm Período prépatente* - 83 h 93 h 83 h 83 h Local parasitado Espécie E. mitis E. mitis Figura 1 - Oocistos de Eimeria presentes em amostras de fezes: a). b) E. mitis c). d). e). f) Infecção mista. Barra = 12,5 µm. 232

4 aves com longo período de alojamento, como matrizes, quando as outras espécies de Eimeria não mais estiverem presentes. Contudo, KAWAZOE & FIGUEIREDO (1990) relataram a presença desta espécie em granjas de frangos de corte da região de Campinas, São Paulo. Apesar de a E. brunetti não ter sido detectada nas amostras de fezes analisadas, trabalhos publicados no Brasil e na Argentina (McDOUGALD et al., 1987), e na República Tcheca (KUCERA, 1990) relatam sua presença em granjas de frangos de corte. A infecção por, e E. tenella é comumente encontrada em granjas de frangos de corte. Existem relatos da presença dessas espécies no Brasil (McDOUGALD et al., 1987; KAWAZOE & FIGUEIREDO, 1990), Argentina (McDOUGALD et al., 1987) e em vários outros países (NAKAMURA et al., 1986; KARIM & TREES, 1990; WILLIAMS et al., 1996). Os únicos estudos no território brasileiro referentes à presença de e E. mitis em plantéis de frangos de corte foram realizados somente em 1987 por McDOUGALD et al. e em 1990 por KAWAZOE & FIGUEIREDO. Apesar de geralmente serem consideradas de baixa patogenicidade, essas espécies são responsáveis por causarem queda no ganho de peso e pior conversão alimentar em frangos de corte (DALGLIESHI, 1997). GORE & LONG (1982) observaram, além de interferência em parâmetros produtivos de frangos de corte inoculados com, a ocorrência de diátese exsudativa, provavelmente relacionada à má-absorção, que também foi verificada em infecção experimental por E. mitis por RUFF & EDGAR (1982). FITZ-COY & EDGAR (1992), através de infecção experimental em frangos de corte com oocistos de E. mitis, evidenciaram queda de ganho de peso três dias após a inoculação, que foi mais evidente 5 a 6 dias pós-inoculação. Houve ainda interferência na conversão alimentar e pigmentação da canela e da pele das aves. Pelo fato de as vacinas utilizadas atualmente para a profilaxia da coccidiose em frangos de corte serem constituídas pelas espécies consideradas mais importantes, ou seja,, e (SHIRLEY, 1999), o controle dessas espécies por meio de vacinação poderia levar à diminuição da competição entre as diferentes espécies e a um aumento da ocorrência e, conseqüentemente, da importância econômica da E. praecox e E. mitis, justificando, assim, sua possível inclusão nas vacinas destinadas a frangos de corte (WILLIAMS, 1998). CONCLUSÕES As espécies E. brunetti e E.necatrix não foram observadas nas granjas analisadas. As espécies,, E. mitis, E. maxima e foram encontradas em infecções mistas, geralmente com várias espécies envolvidas. ARTIGO RECEBIDO: Fevereiro/2003 APROVADO: Novembro/2003 REFERÊNCIAS CASTRO, A.G.M. Situação atual da coccidiose no Brasil e importância econômica. SIMPÓSIO INTERNACIONAL SOBRE COCCICIOSE, Santos, Anais... p DALGLIESH, R. J. Isolation and pathogenicity of Australian strains of Eimeria praecox and Eimeria mitis. Australian Veterinary Journal, v.75, p , FITZ-COY, S.H., EDGAR, S.A. Pathogenicity and control of Eimeria mitis infections in broiler chickens. Avian Diseases, v.36, p.44-88, GORE, T.C.; LONG, P.L. The biology and pathogenicity of a recent field isolate of Eimeria praecox Johnson, Journal of Protozoology, v.29, p.82-85, KARIM, M.J.; TREES, A.J. Isolation of five species of Eimeria from chickens in Bangladesh. Tropical Animal Health and Production, v.22, p , KAWAZOE, U.; FIGUEIREDO, A.C. Levantamento de coccidiose aviária em três granjas de frangos de corte da região de Campinas - São Paulo - Brasil. Arquivos Brasileiros de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.42, p , KUCERA, J. Identification of Eimeria species in Czechoslovakia. Avian Pathology, v.1, p.59-66, McDOUGALD, L.R.; FULLER, L.; MATTIELLO, R. A survey of coccidia on 43 poultry farms in Argentina. Avian Diseases, v.41, p , McDOUGALD, L.R.; SILVA, J.M.L. da SILVA; SOLIS, J.; BRAGA, M. A survey of sensitivity to anticoccidial drugs in 60 isolates of coccidia from broiler chickens in Brazil and Argentina. Avian Diseases, v. 31, p ,

5 McDOUGALD, L.R.; FULLER, L.; MATTIELLO, R. A survey of coccidia on 43 poultry farms in Argentina. Avian Diseases, v. 41, p , NAKAMURA, T.; KONISHI, T.; KAWAGUCHI, H. Isozymes of chicken coccidian in Japan. Japanese Journal of Veterinary Science, v. 48, p , RUFF, M.D.; EDGAR, S.A. Reduced intestinal absorption in broilers during Eimeria mitis infection. American Journal of Veterinary Research, v.43, p , WILLIAMS, R.B. Epidemiological aspects of the use of live anticoccidial vaccines for chickens. International Journal for Parasitology, v.28, p , WILLIAMS, R.B.; BUSHELL, A.C.; RÉPÉRANT, J.M.; DOY, T.G.; MORGAN, J.H.; SHIRLEY, M.W.; YVORÉ, P.; CARR, M.M.; FRÉMONT, Y. A survey of Eimeria species in commercially-reared chickens in France during Avian Pathology, v.25, p , SHIRLEY, W.S. Uso de Vacinas Baseadas em Oocistos Vivos no Controle da Coccidiose Aviária - Visão Européia. SIMPÓSIO INTERNACIONAL SOBRE COCCIDIOSE AVIÁRIA,Foz do Iguaçu, PR, Anais... v.2, p

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