Vacinas para Carrapato Boophilus microplus

Transcrição

1 Vacinas para Carrapato Boophilus microplus Itabajara da Silva Vaz Junior UFRGS

2 Ciclo biológico 5% 95%

3 Importância econômica Principais vetores de agentes de doenças humanas e veterinárias Perdas na produção de carne e leite Métodos de controle ineficientes

4 Características regionais Clima Temperatura / umidade / precipitação Estoque de informação Controle estratégico

5 Controle Químico Substâncias químicas: compostos arsenicais, organoclorados organofosforados, formamidinas e piretróides sintéticos Resistência Permanência de resíduos no animal e meio ambiente

6 Controle Biológico Condições climáticas: temperatura e umidade do ar Vegetação Aves, bactérias e fungos

7 Antígenos protetores Resistência adquirida após infestações Interação carrapato/hospedeiro carrapato secreta substâncias que o possibilitam alimentar-se de sangue resposta imunológica contra moléculas do carrapato resultam na resistência

8 Efeito da Vacinação com Bm86 % Redução Isolado N Capacitade Fertilidade Proteção carrapatos de postura dos ovos (%) Camcord Camcord Camcord Yeerongpilly Cenapa Tuxpan Tuxpan Mora Colômbia Brasil

9 Embriogênese Desenvolvimento carrapato B. microplus A- 1 dia, B- 3 dias (blastoderma sincicial), C- 5 dias (blastoderma celular), D- 7 dias (embrião segmentado), E- 12 dias. (Campos et. al., 2006)

10 Boophilus Yolk pro-cathepsin BYC associadas com degradação da VT Imunização com a BYC nativa infereferiu na reprodução do carrapato

11 O.D. Imunização com rbyc 1,600 1,400 1,200 1,000 0,800 0,600 0,400 0,200 0,000 bov 5 bov 6 bov 7 bov Days Leal et al., 2006

12 Imunização com rbyc Proteção final: 26% Leal et al., 2006

13 Triose Fosfato Isomerase (TIM) Enzima da via glicolítica e da gliconeogênese (energia) Moraes et al, redação

14 Estrutura TIM bovino carrapato

15 Oxidação NADH Efeito de anticorpos monoclonais sobre rtim 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0 mab(10ug): - BrBm37 BrBm37 BrBm37 BrBm38 BrBm38 BrBm38 OC3 OC3 0C3 rtim-bm: 10ug 10ug 100ug 500 ug 10ug 100ug 500ug 10ug 100ug 500ug Tratamento

16 número de céls x por ml de meio de cultura Efeito de anticorpos em célula BME26 60,0 50,0 40,0 30,0 20,0 controle BrBm 37 BrBm 38 OC3 10,0 0,0 1 dia 3 dia 5 dia 7 dia Tempo de tratamento

17 Glicogênio sintase quinase (GSK-3β) - Metabolismo do Glicogênio - Importante para produção de energia

18 Alimentação artificial - Os grupos são alimentados por 28 horas. Parâmetros: Peso dos ovos e larvas, redução da postura e eclosão. Figura 10: Foto ilustrativa da técnica de alimentação artificial por capilar.

19 Efeito dos inibidores em fêmeas Inibidores via alimentação artificial alimentadas / incubadas. Peso (mg) postura (mg) redução postura (%) peso larva (mg) redução eclosão (%) Controle 23/ (±30.34) (±17.33) 4.47 (±7.74) (±8.68) (±13.23) Alsterpaullone 4nM 22/ (±26.77) 16.8 (±14.3) (±15.52)** 2.87 (±2.71)** 69.5 (±27.64)

20 Efeito dos inibidores da GSK-3β em fêmeas Efeito do inibidor alsterpaullone no desenvolvimento do embrião após 21 dias de postura. A) Ovos de fêmeas tratadas 5A com 4nM de alsterpaullone. B) Ovos de fêmeas 5B tratadas com 1% de DMSO (controle).

21 Efeito dos inibidores da GSK-3β em fêmeas 6A 6B Efeito do inibidor alsterpaullone em partenóginas através da alimentação artificial por capilar. A) alimentados com sangue e DMSO 1%. B) alimentados com sangue e alsterpaullone (4nM).

22 Efeito de RNAi na embriogênese A) alimentados com sangue. B) tratados com RNAi e alimentados com sangue.

23 Transportadores ABC Envolvidos em diversos processos metabólicos: Transporte de nutrientes e Resistência a drogas: Quimiorresistência nos tratamentos de câncer (fenótipo MDR) Resistência a drogas antiparasitárias: Haemonchus contortus e Onchocerca volvulus Resistência em ectoparasitas: Helicoperva armigera e Lepeophtheirus salmonis

24 Efeito de Ivermectina and inibidores de transportador ABC no desenvolvimento de ovos de carrapato. Bar= 0.1mm.

25 GST de Haemaphysalis longicornis Glutatioana S-transferase envolvida em detoxificação Reatividade cruzada entre soro anti GST of R. microplus com GSTs de H. longicornis e R. appendiculatus

26 Infestação de carrapatos Parizi et al., 2010

27 Parâmetros biológicos B. microplus Group Cattle Fully engorged Index Number Weight (g) Egg laying Egg Capacity Fertilit Control Total Mean S.D GST Total Mean S.D Difference Proteção 57% Parizi et al., 2010

28 Grupos de Pesquisa UFRGS UFRJ UENF USP UNIFESP IPVDF

29 Financiamento INCT Entomologia Molecular CNPq PADCT PRONEX-FAPERJ PRONEX-FINEP-CNPq FAPERGS