MPE Análise Crítica da Aplicação de Métodos Moleculares à Pesquisa Clínica em Pediatria

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1 MPE Análise Crítica da Aplicação de Métodos Moleculares à Pesquisa Clínica em Pediatria Carga horária: Total: 45 h Teórica: 1 h Prática: 5 h Estudos: 3 h Créditos: 3 Duração: 5 semanas Responsáveis: Thelma Suely Okay Conteúdo: PÚBLICO ALVO. Alunos de Pós-Graduação (nível mestrado ou doutorado), atuando na área de conhecimento das Ciências da Saúde: medicina, enfermagem, nutrição, fisioterapia, fonoaudiologia, terapia ocupacional, psicologia, ciências sociais. A inscrição de alunos pertencentes a outros ramos de atividade deverão ser previamente submetidas à apreciação do coordenador da Disciplina. NÚMERO DE ALUNOS. O número mínimo de alunos para que o curso seja realizado será de 4, e o número máximo de 20 alunos (que serão divididos em 5 grupos para as aulas práticas) ESTRUTURA DO CURSO: O curso será ministrado em 4 semanas: módulo teórico na primeira semana; os módulos de aulas práticas propriamente ditas na segunda semana, além de 2 períodos de estudo com 1 hora de duração; outros 5 períodos de estudo de 2 horas de duração cada na terceira semana e finalmente, os seminários na quarta e última semana. 2a feira 3a feira 4a feira 5a feira 6a feira 1a semana T T T T T 2a semana P P P E1 E2 3a semana E3 E4 E5 E6 E7 4a semana S S S S S

2 T = 8:00 h - 12:00 h (5 aulas de 4 horas = 20 horas) P = 8:00 h - 12:00 h (3 aulas de 4 horas = 12 horas) OBS: os períodos de aula prática (P) serão mesclados com os 2 primeiros períodos de estudo (E1 e E2), de acordo com a distribuição dos alunos e 5 grupos (vide item sobre aulas práticas) E = 14:00-15:00 h (2 períodos de 1 hora) + 14:00-16:00 h (5 períodos de 2 horas) - total de 12 horas S = 9:00 h - 12:00 h (5 períodos de 3 horas = 15 horas) MÓDULO TEÓRICO. Deverá fornecer embasamento das novas metodologias laboratoriais na primeira metade de todas as aulas. Na segunda parte, serão abordados exemplos de metodologias em alguns modelos de doenças na tentativa de tornar clara a importância destes exames laboratoriais na prática clínica, tanto para o diagnóstico, quanto para o acompanhamento de pacientes pediátricos portadores de doenças de maior complexidade. Os conceitos inicialmente introduzidos serão aprofundados até o nível de compreensão adequado a um aluno de Pós-Graduação. MÓDULO PRÁTICO. Será dividido em parte prática propriamente dita e seminários. As aulas práticas propriamente ditas servirão para que o aluno entenda todas as etapas de realização de algumas técnicas de ponta que encontram-se disponíveis no Laboratório de Pesquisa do Departamento de Pediatria (enfoque em Biologia Molecular, em especial na Reação em Cadeia da Polimerase ou PCR). Nos seminários, os alunos serão estimulados a discutir os artigos científicos previamente selecionados e tirar dúvidas. MÓDULO DE ESTUDO. Os alunos deverão usar estes períodos para ler e comentar os artigos científicos que serão selecionados pelo grupo dentre uma série proposta. Esta coletânea compreenderá artigos conceituais, e outros de aplicações clínicas. Os alunos deverão fazer um resumo do que entenderam dos artigos e ainda uma lista de dúvidas, críticas e sugestões que poderiam aprimorar os trabalhos que foram analisados. Os períodos de estudo serão dirigidos, isto é, o coordenador da Disciplina estará disponível para esclarecer dúvidas. CONTEÚDO DO PROGRAMA TEÓRICO. 1) Considerações gerais sobre exames laboratoriais: erros pré-analíticos, erros analíticos (precisão e exatidão), limitações metodológicas (sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo, eficiência, linearidade, controle de qualidade. Os erros mais freqüentes no dia-a-dia de um laboratório.

3 2) Fundamentos de Biologia Celular e Molecular : transcrição, tradução. Desenvolvimento de anticorpos e antígenos. Exemplos de aplicações práticas de todas as etapas. 3) Etapas de uma Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Principais métodos de extração e de amplificação. Detecção do material amplificado. 4) Outros métodos Moleculares : amplificação de sinal X amplificação de ácidos nucléicos e suas aplicações em diferentes modelos de doença. 5) Biologia Celular: métodos atuais de detecção de antígenos, de anticorpos, receptores de superfície (CD), e Interleucinas. Aplicação clínica nas diferentes especialidades pediátricas OBSERVAÇÃO: todas as aulas teóricas serão ministradas pelo coordenador da Disciplina. Horário das aulas teóricas: 9:00 h as 12:00 h Local: 7 andar do Instituto da Criança em sala a ser determinada à posteriori. PROGRAMA DAS AULAS PRÁTICAS E PERÍODOS DE ESTUDO : Os alunos serão divididos em 5 grupos de até 4 alunos (A, B, C, D, E). Haverá 3 aulas práticas propriamente ditas, e 7 períodos de estudo (E1,E2, E3, E4, E5, E6 e E7). As aulas práticas serão ministradas na segunda semana, junto com os períodos de estudo E1 e E2. Na terceira semana haverá 5 períodos de estudo para todos os alunos que deverão ser dedicados à leitura dos artigos selecionados e preparação dos seminários. A distribuição dos alunos será feita nos grupos de A a E para a realização das aulas práticas propriamente ditas e seguirá a ordem apresentada na tabela abaixo: Aulas práticas: reagentes = R extração = E amplificação = P

4 2a feira 3a feira 4a feira 5a feira 6a feira A = R A = E A = P A = E1 A = E2 B = E B = P B = E1 B = E2 B = R C = P C = E1 C = E2 C = R C = E D = E1 D = E2 D = R D = E D = P E = E2 E = R E = E E = P E = E1 HORÁRIO DAS AULAS PRÁTICAS PROPRIAMENTE DITAS: início 8:00 horas e final 12:00 horas. LOCAL: Laboratório de Biologia Molecular - 3 andar do Instituto da Criança, ao lado da Farmácia. COLABORADORES DAS AULAS PRÁTICAS: Gilda Maria Barbaro Del Negro (farmacêutica e gerente administrativo do Laboratório de Pesquisa do ICr), e Roberto Raiz Júnior (biomédico, biologista supervisor do Laboratório de Pesquisa do ICr). PERÍODOS DE ESTUDO: os alunos poderão freqüentar a Biblioteca do Instituto da Criança, ou qualquer outra sala disponível e poderão encontrar o coordenador da Disciplina para o esclarecimento de dúvidas no Setor de Biologia Molecular do LIM/36 (Laboratório de Pesquisa do Departamento de Pediatria), localizado no 30 andar do Instituto da Criança.

5 Bibliografia: I) Livros pertencentes ao acervo da Biblioteca do Instituto da Criança: a) Raw I. Bases Moleculares da Medicina: Anemias e outras doenças moleculares. b) Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M. Molecular Biology of. the Cell. 3rd Edition. c) Zaha A Biologia Molecular Básica. Porto Alegre d) Harrison TJ., Zukerman AJ. The Molecular Medicine of. Viral Hepatitis. e) Boothroyd JC, Komuniecki R. Molecular Approches to Parasitology. II) Artigos selecionados e que encontram-se disponíveis para cópia no "xerox" do ICr: a) Genoma: fatos que explicam. Revista Galileu (ex-globo Ciência). b) Golpe no Orgulho Vão. Revista da FAPESP (Março de 2001). c) Criesp -Diagnóstico por Biologia Molecular. d) Aplicação da Biologia Molecular no Diagnóstico Clínico. Mário Hiroyuki Hirata, Rosário D.C. Hirata. Laes&Haes, Agosto/ Setembro, e) Sondas de DNA para o Diagnóstico de Doenças Infecciosas. Carmem paz Oplustil. Atualização Científica. NewsLab, edição 18, f) Product Application Focus - Polymerase Chain Reaction. Christian Oste. Perkin Elmer Cetus Instruments. Biotehcniques, vol. 6, número 2, g) Minireview. Principles and Applications of Methods for DNA-Based Typing of Microbial Organisms. D. Michael Olive & pamela Bean. Journal of. Clinica Microbiology, June 1999, , h) Criesp- TesteGenético para Fibrose Cística. Informativo, janeiro de i) Carga Viral das Hepatites. Núcleo de Educação Médica do Laboratório Fleury. Vide site do Fleury : j) Quantificação Ultra-Sensível do RNA do HIV-1 (Carga Viral Ultra-Sensível). Dr. Mauro S. Figueiredo. Assessor Médico- Setor de Biologia molecular. Núcleo de Educação Médica do Laboratório Fleury. Vide site do Fleury :

6 k) Genotipagem do HIV-1 para Avaliação de Resistência contra Anti-Retrovirais. Dr. Mauro S. Figueiredo. Assessor Médico- Setor de Biologia molecular. Núcleo de Educação Médica do Laboratório Fleury. Vide site do Fleury : III) Livro texto recomendado para o aprendizado de técnicas moleculares: " DNA Segredos & Mistérios" - Solange Bento Farah - Editora Sarvier - ISBN X, 1997.