Vírus respiratórios aviários: Epidemiologia, Diagnóstico e Controle

Transcrição

1 Vírus respiratórios aviários: Epidemiologia, Diagnóstico e Controle Helena Lage Ferreira Seminário internacional da FAPESP 12 de Setembro, 2011.

2 Produção avícola comercial... e de fundo de quintal

3 Problemas na avicultura Vírus da laringotraqueíte infecciosa Metapneumovírus aviário Vírus da bronquite infecciosa >US$1bi Notificação à OIE >>US$ Influenza vírus Restrições comerciais Vírus da doença de Newcastle

4 Problemas na avicultura Prostação, diarréia, sinais respiratórios 100% de mortalidade Conjuntivite Queda de postura Sinais nervosos, torcicolo

5 Epidemiologia Influenza Influenza DN ampv Coronavirus? Influenza DN ampv Coronavírus Esporádico Influenza Esporádico Influenza DN Adaptado de Swayne (2008). In:. Avian Inflluenza

6 Diagnóstico o Viral o Sorológico

7 Controle Biosseguridade Abate Diagnóstico Vacinação Monitorada Vigilância Prevenção

8 Interferência por RNA o Fire, A. et al. (1998). Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans. Nature, 391, o Prêmio Nobel de Medicina 2006 Caenorhabditis elegans Craig C. Mello and Andrew Z. Fire

9 citoplasma Interferência por RNA sirna RISC (RNA silencing complex) RISC ativado Fita as Associação com RNAm alvo Clivagem do RNAm alvo Adaptado de Hilleman (2003). Vaccine, 21:

10 MPVA ampv orinotraqueíte (TRT) em perus osíndrome da cabeça inchada (SCI) em frangos e galinhas odoença aguda e altamente contagiosa oaves domésticas e aves silvestres

11 RNAi é capaz de inibir o ampv?

12 SH 25, 50, 75, 100 nm + ECP Titulação viral ampv Easton et al (2004). Clinical Microbiology Reviews, 17:

13 Ausência de efeito citopático em células tratadas com sirna/n Fig. 1. CPE in transfected cells after 3 days (200 ). CER cells were transfected with sirnas at 75 nm. The transfected cells were infected after 6 h with AMPV subtype A: (A) negative control (without virus and sirnas); (B) sirna/gfp (control group); (C) sirna/n; (D) sirna/f.

14 Queda nos títulos virais pelo sirna/n Fig. 2. Transfected cells monolayer were infected with AMPV after 6 h posttransfection.supernatants were collected 3 days after infection and assayed for virus titration. *p < 0.05 when compared to the control group.

15 Impacto na produção de RNAm N e F Fig. 3. Attenuation of AMPV mrna copy numbers by sirnas in N mrna (a) and F mrna (b). *p < 0.05 when compared to the control group.

16 Impacto na produção de RNAm G Effect of different sirnas on GmRNAproduction (448 bp) in the culture supernatants from infected cells, as indicated: (A), 1 positive and 2 negative control; (B) sirna/gfp; (C) sirna/n; (D) sirna/f; M, leader 1 kb plus; numbers 1 4, 25, 50, 75, 100 nm, respectively.

17 Conclusões sirna/n 99.9%

18 ; Conclusões Gênero Pneumovírus: Vírus Respiratório Sincicial 3 NS1 N P M S G NS2 H F M2 L 5 Gênero Metapneumovirus: Metapneumovírus aviário, metapneumovírus humano 3 N P M F M2 SH G L 5 Medicamento Virus Alvo Laboratório Fase SPC3649 HCV mir-122 Santaris Pharm Ativa, fase II phiv7-shl-tar- HIV HIV Tat proteína, HIV City of Hope Mediacal Ativa, fase 0 CCR5RZ TAR RNA, humano CCR5 Center/Benitec ALN-RSV01 RSV em voluntários RSV nucleocapsídeo Alnylam Pharm. Completa, fase II ALN-RSV01 RSV em pacientes transplantados (pulmão) RSV nucleocapsídeo Alnylam Pharm. Completa, fase I ALN-RSV01 RSV em pacientes transplantados (pulmão) RSV nucleocapsídeo Alnylam Pharm. Ativa, fase II Davidson & McCray Jr., (2011) Rev Genet,12(5):329-40

19 Infecção Excreção Tropismo viral Origem vírus vacinal versus vírus brasileiro Limites dos programas de vacinação Proteção Resposta sorológica MDA

20 FAPESP BELSPO EC FP6 OBRIGADA Projeto Europeu Novaduck Michel Bublot Véronique Jestin Olivier Guionie Jill Banks Nick Derek Laboratório de Virologia Animal Clarice Weis Arns Renata Servan de Almeida Regina Célia Freitas D Arce Marcia M dos Santos Paulo Anselmo Paula Porto e Geneci Avian Virology and Immunology Unit Thierry van den Berg Bénédicte Lambrecht Steven Van Borm Jean François Pirlot Fabienne Rauw