Processos de interação vírus célula. Mutiplicação e replicação vírus DNA

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1 Processos de interação vírus célula Mutiplicação e replicação vírus DNA Capítulos 73 e 89 Trabulsi e Althertum, 2015 Capítulos 4, 5 e 9 do Flint et al,

2 Adsorção: ligação do receptor celular e antirreceptor viral. MAS QUAL A FUNÇÃO DOS RECEPTOR? Permitir a célula ser infectada pelo vírus? Os receptores têm funções definidas para as células e para o organismo. Os vírus evoluem de modo a utilizar receptores celulares, e a encontrar uma âncora na célula hospedeira. 2

3 Os receptores celulares dão a especificidade da infecção do vírus. Tropismo Permissividade 3

4 Adsorção: ligação do receptor celular e antirreceptor viral. Hepatite C: Adsorção e fusão de membranas HIV: interação GP120 (Antirreceptor)- CD4 (receptor) e co-receptor (quimiocinas) 4

5 5

6 Por que os anti-receptores são as proteínas mais imunogênicas dos vírus? Os anti-receptores localizam-se na superfície do vírus, sendo portanto bastante expostos. O vírus influenza: Hemaglutinina (H) Neuraminidase (N) 6

7 Exemplo de receptor para vírus influenza: presença de glicoproteínas na membrana. Mas como ocorre a entrada do vírus na célula? Penetração: Fusão: 7

8 Influenza: endocitose, onde o baixo ph do endossomo ativa a atividade de fusão da HA 8

9 Endocitose: Fusão ph-mediada 1 AdV-2 2 AdV-2 3 CAR αvβ5 AdV-2 Adenovírus: acidificação ativa liberação do endossomo e o vírus é direcionado para o núcleo. V: 2 µm/s 7 4 AdV-2 9 AdV-2 8 ADP + P ATP AdV-2 + H + H + H + AdV-2 H + H DINEÍNA ph:6,0 6 H + H + AdV-2 H + H + H + Poliovírus: fazendo poros na membrana para injeção de seu material genético. Não há fusão. 9

10 10

11 Intracitoplasmáticos CORPÚSCULOS DE INCLUSÃO Pox vírus Reovirus Paramyxovirus Vírus da raiva Intranucleares Herpesvirus Adenovirus Parvovirus 11

12 Replicação: Classificação de Baltimore. DNA dupla fita DNA dupla fita RNA fita+ DNA simples fita DNA dupla fita RNA fita + mrna RNA fita + RNA fita - DNA dupla fita RNA dupla fita RNA fita - RNA fita + RNA fita + 12

13 Classificação viral segundo Baltimore: classes 1 & 2 DNA dupla fita DNA simples fita DNA dupla fita mrna Replicação de vírus a DNA, classe I Papovavírus: estrutura do genoma de SV40. 13

14 O processo de replicação de SV40. Early Late Possíveis ciclos do vírus SV40. 14

15 O SV40 também pode integrar seu genoma no celular e transformar a célula. Cancer? (expressão do antígeno T e bloqueio da proteína p53!!!) Na verdade, estdos com SV40 permitiram descobrir a proteína p53. P53 é um supressor de tumor!- mutado em metade dos tumores humanos. Por que? Qual sua função? 15

16 Outro papovavírus: HPV- human papilloma virus. HPV: vírus responsável pela verruga e relacionado com cancer cervical em mulheres. Harald zur Hausen Prêmio Nobel HPV: encontrou genoma de HPV em 70% dos tumores cervicais. 16

17 Mecanismos de oncogênese: 17

18 Mecanismos de oncogênese: integração do genoma... expressão de E6 e E7. integração no genoma da célula hospedeira Mecanismos de oncogênese: HPV- E6 e E7. Trends in Microbiology , DOI: ( /j.tim ) 18

19 Mecanismos de oncogênese: HPV- E6 e E7. Milller et al, Biochem J, 2012 Epidemiologia: --- mulheres com evidência de HPV tem 16X mais risco de cancer --- cerca de novos casos/ano de cancer cervical mortes/ano. (87% países em desenvolvimento) % desses casos tem contaminação com HPV mais de 200 sorotipos, sendo os tipos 16, 18, 6 e 11 considerados de alto risco (>80% dos tumores) latência de vários anos para surgir o cancer após a contaminação. 19

20 HPV- vacinas: vacinas recombinantes- boas perspectivas (dificuldades de cultura do vírus). L1 e L2 formam capsídeos vazios (VLP virus like particle ). antigênicos. protetivos em modelos animais e em humanos!! não tem DNA viral e são altamente conservados. quadrivalente bivalente HPV- vacinas debate: 20

21 Estrutura e organização do adenovírus. Immediate Early Early Late 21

22 Vetores adenovírus para Terapia gênica: Genoma deletado em genes de replicação. B L1 L2 L3 L4 L5 ITR Ψ E1A E1B E3 ITR E2 E4 Vetores de primeira geração: L1 L2 L3 L4 L5 ITR Ψ Transgene transgene E3 ITR E2 E4 Vetores adenovírus para Terapia gênica: Produção em células 293, que produzem a proteína E1. 22

23 Vetores adenovírus para Terapia gênica: Infecção com vetor Adeno -GFP. Estrutura e organização do herpes vírus. 23

24 Ciclo de Replicação do vírus da Herpes Estrutura e organização do vírus vaccinia Pox vírus. 24

25 Vírus de DNA simples fita: classe II Estrutura e organização do parvovírusvírus. 25

26 Terapia Gênica por AAV recombinante. Vírus e seus genes Vetor e o transgene Virus VIVO ou NÃO VIVO! Debate no dia 27/08 (noturno) ou 23/08 (diurno) Precisamos de 3 voluntários para cada grupo!!! 26

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