Página 1 de 5 1 Escopo Este método tem como objetivo determinar a presença de gás sulfídrico, proveniente da degradação de proteínas do pescado. 2 Fundamentos O método fundamenta-se na decomposição de aminoácidos sulfurados com liberação de enxofre. Este, em meio ácido, se transforma em gás sulfúrico, que combinado com acetato de chumbo produz sulfeto de chumbo que enegrece o papel de filtro. 3 Reagentes, padrões e materiais Todos os reagentes são de grau analítico (p.a.), exceto quando especificado. Toda a água utilizada nos procedimentos é destilada/deionizada, exceto quando especificada. 3.1 Reagentes Acetato de chumbo trihidratado ((CH 3 COO) 2 Pb.3H 2 O); Ácido acético (CH 3 COOH). 3.2 Padrões Sulfeto de sódio monohidratado (Na 2 S.9H 2 O), material de referência; 3.3 Materiais Barbante; Béquer; Erlenmeyer; Espátula; Papel de filtro qualitativo; Papel filtro; Pipeta volumétrica; Proveta.
Página 2 de 5 4 Equipamentos Balança; Banho-maria. 5 Precauções analíticas Este método emprega substâncias químicas nocivas e possui procedimentos que podem representar risco ao operador. Equipamentos de proteção individual e uniforme apropriado devem ser utilizados durante todo o processo. Amostras de alimentos em geral devem ser consideradas como de risco biológico, evitando-se o contato direto com pele e mucosas. Ao colocar o papel filtro no erlenmeyer, precaver que o mesmo não encoste na água do banhomaria, isso traria problemas para a avaliação do resultado. Colocar de uma a duas folhas de papel filtro em cada erlenmeyer, acrescentando uma gota de solução de acetato de chumbo 5% no centro, solução em excesso dificultará a amarração do mesmo. 6 Procedimentos Todos os procedimentos devem ser registrados no formulário Dados brutos, Anexo A do POP POA/SLAV/15 Procedimentos de rotina na análise físico-química de produtos de origem animal. 6.1 Preparo de soluções 6.1.1 Solução de acetato de chumbo trihidratado ((CH 3 COO) 2 Pb.3H 2 O) a 5%: Pesar em uma balança analítica, diretamente em um béquer de 250mL, 5g de acetato de chumbo. Adicionar água deionizada, transferindo quantitativamente para um balão de 100mL. Antes de chegar ao menisco do balão, adicionar 1mL de ácido acético glacial. 6.1.2 Solução padrão de sulfeto de sódio monohidratado (Na 2 S.9H 2 O) (0,1 g/l): Pesar 0,1g de sulfeto de sódio em um béquer de 50mL. Transferir com água deionizada quantitativamente para um balão volumétrico de 1000mL. Misturar e completar o volume.
Página 3 de 5 6.2 Descrição da metodologia Realizar o ensaio em duplicata; Pesar exatamente 20g da amostra homogeneizada, diretamente no erlenmeyer de 125mL, limpando a boca da vidraria caso necessário; Adicionar 25mL de água deionizada ao erlenmeyer com ajuda de uma proveta de 50mL; Fechar o erlenmeyer com papel de filtro embebido na solução de acetato de chumbo ou de plumbito de sódio, preso com liga de borracha ou amarrado com barbante; Levar ao banho-maria em temperatura máxima de 70ºC e aguardar 15 minutos; Em outro erlenmeyer, colocar 10mL de solução padrão que corresponde a 0,014mg de gás sulfídrico nas condições do método adotado. Acidificar com 1mL de ácido acético e proceder conforme citado para amostra; Registrar as leituras no formulário Dados brutos, Anexo A do POP POA/SLAV/15. 7 Resultados Comparar as manchas obtidas. A mancha da amostra não deve ser igual ou mais escura que a do padrão (0,0014mg/mL). 7.1 Expressão dos resultados O resultado deve ser expresso como positivo (mancha da amostra igual ou mais escura que o padrão) ou negativo à presença de gás sulfídrico (mancha da amostra menos escura que o padrão). 7.2 Aceitabilidade dos resultados Todos os resultados devem ser aceitos se os requisitos para execução do ensaio forem atendidos. Em caso de funcionamento inadequado do equipamento, ou outro motivo, o ensaio deve ser interrompido e repetido, se possível. Caso contrário os resultados não devem ser emitidos. 8 Arquivamento dos registros Não aplicável.
Página 4 de 5 9 Referências BRASIL. Ministério da Agricultura. Secretaria Nacional de Defesa Animal. Laboratório Nacional de Defesa Animal. Portaria nº. 01, de 07 de outubro de 1981. Aprova os métodos analíticos para controle de produtos de origem animal e seus ingredientes. Diário Oficial da União de 13/10/1981, Brasília, DF. 10 Anexos Não aplicável. 11 Alterações Item 3: incluído Todos os reagentes são de grau analítico (p.a.), exceto quando especificado. Toda a água utilizada nos procedimentos é destilada/deionizada, exceto quando especificada. ; Itens 3.1, 3.2, 3.3: incluídos; Item 4: excluídos Barbante, Erlenmeyer de 125mL, Espátula, Papel de filtro qualitativo, Papel filtro, Pipeta volumétrica de 10mL, Proveta de 50mL ; Item 5: incluídas precauções analíticas referentes ao uso de equipamentos de proteção individuais; Item 6: incluído Todos os procedimentos devem ser registrados no formulário Dados brutos, Anexo A do POP POA/SLAV/15 Procedimentos de rotina na análise físico-química de produtos de origem animal ; Item 6.1: incluído Preparo de soluções. Descrição da metodologia, incluído no item seguinte (Item 6.2); Item 6.2: incluído; Item 8: excluído Os registros no Anexo A devem ser arquivados na pasta Dados brutos - do POA/SLAV.. Incluído Não aplicável ; Anexo A: Formulário Dados brutos -, excluído. As alterações no MET não implicam na realização de complemento de confirmação de desempenho.
Página 5 de 5 12 Responsabilidades O Responsável pelo POA/SLAV deve garantir a elaboração, aprovação, emissão, distribuição de cópias, implementação, capacitação do pessoal para execução, gerenciamento de não conformidades, análise crítica e revisão deste MET. A UGQ é responsável pela verificação deste MET. Elaboração/Revisão: Aprovação: Verificação: Ana Paula Pereira de Melo POA/SLAV Cristhiane Cattani POA/SLAV Rosane Carlessi UGQ Data: 15/07/2014 Data: 17/07/2014 Data: 18/07/2014