CONSIDERAÇÕES SOBRE LEUCÓCITOS E LEUCOGRAMA
Leucograma Anormal: permite identificar os processos patológicos Não permite definição de um diagnóstico específico Interpretação das anormalidades leucocitárias e dos achados clínicos pode levar a um diagnóstico
Leucócitos: morfologia e função Neutrófilos Função: quimiotaxia e fagocitose
Leucócitos: morfologia e função Linfócitos Função: imunidade humoral e celular Linfócitos granulares (mais comuns em ruminantes)
Leucócitos: morfologia e função Linfócitos Função:
Leucócitos: morfologia e função Monócitos Função: Fagocitose Função imunorreguladora Destruição de hemácias
Monócitos Normal Semelhante em cães e gatos Esfregaço de sangue fresco: arredondado, sem vacúolos citoplasmáticos Sangue com EDTA margem celular irregular, pseudópodos, vacuolizaçào citoplasmática
Leucócitos: morfologia e função Eosinófilos Função: Mecanismo de defesa contra os estágios larvares de parasitas Modulação de reações alérgicas inflamatórias e de imunocomplexos
Leucócitos: morfologia e função Basófilos Função: Desconhecida Conteúdo: histamina e heparina Membrana citoplasmática: IgE
Valores de Referência Interpretação : valores absolutos N. Bastonetes = 2% 60.000 1000 10.000 200 200 1200 2 % 2 % 2 % Número relativo vs. Número absoluto
Estágios de maturação dos neutrófilos Produção e Cinética dos Neutrófilos
Produção de neutrófilos na MO Prómielócito Mieloblasto Mielócito Metamielócito N. bastonete N. segmentado Mieloblasto pode originar 16 a 32 células, antes de perder sua capacidade produtiva
Fatores que influem na granulopoiese FEC- GM FEC-G Linfocinas Eosinofilopoetina Basofilopoetina Lítio Corticosteroides (+) (-) Granulopoese FIC Lactoferrina, transferrina Linfocinas PGE1 e PGE2 Produtos dos macrófagos
Granulopoiese Sistema de células - tronco Compartimento De proliferação Compartimento de Maturação e estocagem Mieloblasto Promielocito mielócito Metamielócito N. Bastonete N. segmentado Compartimento circulante Compartimento marginal TECIDOS
Distribuição de neutrófilos Exame M.O. Leucograma Citologia Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal M. int. Pulmão urina Produção Maturação/Reserva Medula óssea Sangue Tecido
Cinética de neutrófilos Medula óssea Sangue Tecido Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal M. int. Pulmão urina Migração transendotelial Compartimento medular Tempo de trânsito 7 a 10 dias ( inflamação- 2 a 3 dias) Compartimento sanguíneo Meia-vida na circulação (6-10 h)
Migração de neutrófilos Compartimento marginal Compartimento circulante (Grandes vasos) (microcirculação) Cão: c. marginal = C. circulante Gato: C. marginal = 2x C. circulante
Interpretação da resposta leucocitária nas doenças
Conceitos Citopenias neutropenia, linfopenia e eosinopenia -filia ou citose neutrofilia ou leucocitose neutrofílica; eosinofilia; basofilia; monocitose; linfocitose; eritroblastose ou metarrubricitose Desvio à Esquerda aumento do número de neutrófilos imaturos na circulação sanguínea Leucemia presença de células neoplásicas na circulação sanguínea
Conceitos Distúrbios linfoproliferativos Neoplasias de linfócitos B ou T ou de outras células Linfoma tecido sólido Leucemia linfocítica sangue e/ou medula óssea Neoplasias de linfócito B plasmócito Mieloma Distúrbios mieloproliferativos
Alterações na morfologia celular Nucleares: hipersegmentação ou hiposegmentação Tamanho ou forma: neutrófilos gigantes
Alterações tóxicas Corpúsculos de Döhle Basofilia citoplasmática Granulações tóxicas Vacuolização Alterações nucleares Células gigantes
Degeneração de neutrófilos Vacuolização citoplasmica Tumefação nuclear-perda do padrão de cromatina Esfregaço preparado após 12 horas artefato de técnica
Mucopolissacaridose Doença de armazenamento lisosomal (MPS) Deficiência de enzimas lisossômicas para a degradação de GAGs Grânulos não são evidenciados na coloração pela técnica Diff-Quick
Resposta leucocitária Resposta à excitação Migração de leucócitos do compartimento marginal circulante: neutrofilia madura Gatos: linfocitose até 20.000 células/ L Resposta ao estresse Linfopenia Aumento de neutrófilos hiperssegmentação Eosinopenia Monocitose (cães)
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Estágio inicial neutrofilia (N. maduros) Depleção do pool de maturação e reserva D.E. Dias após Mieloide hiperplasia expansão da produção de N D.E. Estabilização da inflamação neutrófilos maduros
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal TECIDO Produção Maturação/Reserva 4 a 6 dias INFLAMAÇÃO Medula óssea
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia Desvio a esquerda Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal TECIDO Produção Medula óssea Esgotamento da reserva INFLAMAÇÃO
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal TECIDO Produção Maturação / reserva INFLAMAÇÃO Medula óssea
Resposta neutrofílica na inflamação aguda Neutrofilia discreta ou inexistente Mieloblasto Progranulocito Mielócito Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Pool circ. Pool marginal TECIDO Produção Maturação / reserva INFLAMAÇÃO Medula óssea
Resposta neutrofílica na inflamação Mieloblasto Progranulocito Mielócito Produção Metamielo N. Bastonete N.Segmentado Maturação/Reserva Leucograma normal Pool circ. Pool marginal Tecido (Mucosa) Inflamação discreta,crônica Medula óssea
Neutrófilos x prognóstico
Prognóstico do processo inflamatório Bom Leucocitose < 40.000 D.E. discreta a moderada Mau D.E. degenerativo Leucopenia / neutropenia Reação leucemoide Neutrófilos tóxicos Linfopenia
Neutrofilia D.E. significante >1.000 N. bast. / ul Não Leucocitose marcante Não Linfopenia Não Linfocitose Sim Sim Sim Sim Inflamação Inflamação Estresse Esteróide Epinefrina
Outras causas de neutrofilia Hemorragia ou anemia hemolítica Neutrofilia com desvio a esquerda (discreto) ocorre em animais com anemia hemolítica imune mediada Leucocitose marcante ( > 50.000) Neutrofilia madura ocorre 3 hs. após hemorragia aguda
Neutropenia Consumo de neutrófilos Taxa de migração para os tecidos excede a capacidade do pool de reserva medular de neutrófilos / endotoxemia Enterite por parvovirus Salmonelose Destruição imunemediada
Neutropenia Demanda aguda ou consumo nos tecidos Processo inflamatório severo Desvio a esquerda severo Alterações tóxicas evidentes nos neutrófilos na circulação sanguínea Prognóstico pobre ou reservado
Neutropenia Diminuição da produção medular por dano tóxico severo estrógeno, fenilbutazona, cloranfenicol, griseofulvina Agentes infecciosos: Ehrlichia canis, parvovirus, VLF Irradiação Imune - mediada
Neutropenia Granulopoiese ineficaz (disgranulopoiese) Adequado número de progenitores / alteração na produção ou no desenvolvimento Mielodisplasia, leucemia mieloide,vlf, VIF Marginalização Evento precoce e transitório Anafilaxia, endotoxemia
Eosinófilos Produção MO. Cinética = Neutrofilos Função Reações de hipersensibilidade Papel principal na morte de parasitas (nematoides e trematoides) Número no SP Reflexo da produção, demanda e consumo
Eosinofilia Alergia (HS tipo I) Parasitas Inflamação granulomatosa Neoplasias Síndrome hipereosinofílica Leucemia eosinofílica
Eosinopenia Pode ser normal em alguns indivíduos Causas: Infecções agudas hipercortisolemia (endógena ou exógena) liberação de adrenalina por medo ou exercício extremo
Eosinopenia Limite normal inferior = zero Corticosteroide endógeno / exógeno Fase aguda do processo inflamatório ou doenças graves, estressantes Reaparecimento na circulação prognóstico bom
Eosinofilia Algoritmo para o diagnóstico das causas mais comuns de eosinofilia em felinos Eosinofilia persistente ( >1000 / ul) Exame da pele Exame do trato respiratório Exame do trato digestivo DAPP Placa eosinofílica Granuloma linear Dermatite alérgica Cuterebra sp. Asma Paragonimus sp. Aelurostrongylus sp Dirofilaria oculta Enterite parasitária ou não Lesão oral Síndrome hipereosinofílica
Eosinofilia Causas mais comuns de eosinofilia em cães: algoritmo Eosinofilia persistente ( >1000 / ul) Exame do trato respiratório Exame da pele Exame do trato digestivo Dirofilaria? Pneumonite eosinofílica Paragonimus sp. Filaroides DAPP Alergia (alimentar, Staphylococcus sp. Strongyloides Outros Enterite Parasitaria ou não Granuloma eosinofílico oral
Basófilos Basofilia - > 3 a 6 % Parasitismo (Dirofilariose) Reações de hipersensibilidade Associada a Lipemia Mastocitoma Leucemia granulocítica
Linfócitos Origem- Timo e Medula óssea Circulação sangue - tecidos Tempo de trânsito: 8 a 12 horas Tempo de sobrevida: meses a anos
Linfopenia Doenças virais Lesão direta do tecido linfóide Redistribuição linfática devido ao estresse ou exposição ao antígeno Cinomose, HIC, enterite por parvovirus, enterite por coronavirus
Linfopenia Corticoide exógeno ou endógeno Fase precoce de doença aguda e grave Normalização: prognóstico bom Perda de linfa Quilotorax (efusão quilosa) Enteropatia com perda proteica Linfangiectasia Alteração da circulação linfática Doença inflamatória, infecciosa ou neoplásica
Linfocitose Transitória leucocitose fisiológica (15-30 ) Linfocitose persistente forte estimulação imune Infecção crônica Viremia Doença imunemediada Imunização recente
Can, M, Husky Siberiano, 3 a Ädquirido com 4 a 5 meses de idade. Óbito da irmã por cinomose. Não imunizado. Presença de carrapatos. Tremores, Ataxia, vocalização excessiva, convulsão,mioclonias Hemácias x10 6 /ul 4,7 Hematócrito (%) 33 Hemoglobina(g/dL) 10,3 Leucócitos ( x10 3 /ul) 5.700 N.bastonetes 0 N.segmentados 4.902 Eosinófilos 57 Linfócitos 570 Monócitos 171 Plaquetas 137.000
Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução Hemácias x10 6 /ul 5,5 Hematócrito (%) 41 Hemoglobina(g/dL) 12,8 Leucócitos ( x10 3 /ul) 5,5 N. jovens 220 N.bastonetes 1650 N.segmentados 3300 Eosinófilos 0 Linfócitos 165 Monócitos 165 P.total (g/dl) 5,0 Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N
Linfocitose Leucemia linfática Anemia não regenerativa, trombocitopenia e neutropenia Linfoblastos
Linfocitose Linfoma / leucemia linfática Evento tardio Acompanhada de anemia não regenerativa Trombocitopenia e neutropenia, Linfoblastos, com nucléolos evidentes
Monócitos Fagocitose Função PI liberação de mediadores: fatores quimiotáticos, prostaglandinas Apresentação de antígeno Participação na regulação da reserva corpórea de ferro
Monocitose Presença de inflamação Demanda por fagocitose Necrose tecidual
Monócitos Morfologia na doença Núcleo oval a arredondado Citoplasma abundante Vacúolos proeminentes, com ou sem material fagocitado: Eritrócitos (AHIM) Leveduras: histoplasmose Protozoários: leishmaniose
Cão, M, Elvis, 3m Animal encontrado na rua Diarréia, dispnéia, secreção nasal, olho azul Em tratamento com corticoide (Ehrlichia?) Hemácias x10 6 /ul 4,2 Hematócrito (%) 26 Hemoglobina(g/dL) 8,0 Leucócitos ( x10 3 /ul) 52.000 N. jovens 0 N.bastonetes 0 N.segmentados 42.330 Eosinófilos 520 Linfócitos 520 Monócitos 3.640 Basófilos 4.160 Plaquetas - 496.000 /ul (85.000)*
Cão, M, Elvis, 3m PCR Adenovirus 1 e 2, vírus da cinomose
Cão, Luana, F, 11 m HC - diarréia, ataxia locomotora, paralisia progressiva, convulsão, imunização (três doses) Data 11/12/02 03/01/03 10/01/03 Leucócitos/uL 6.600 4.500 7.200 N. bastonetes 66 0 0 N. segmentados 4.620 3.690 6.336 Eosinófilos 66 45 0 Linfócitos 1650 495 216 Monócitos 198 45 648 Diagnóstico - Cinomose
Cão, Rex, M, 3 meses HC: gastrenterite, de 2 dias de evolução Hemácias x10 6 /ul 5,5 Hematócrito (%) 41 Hemoglobina(g/dL) 12,8 Leucócitos ( x10 3 /ul) 5,5 N. jovens 220 N.bastonetes 1650 N.segmentados 3300 Eosinófilos 0 Linfócitos 165 Monócitos 165 P.total (g/dl) 5,0 Obs. Neutrófilos tóxicos; degeneração do citoplasma de N
Can, Maltês, F,10 a Hemácias x10 6 /ul 1,9 Hematócrito (%) 12 Hemoglobina(g/dL) 3,9 Leucócitos ( x10 3 /ul) 22,4 N.bastonetes 0 N.segmentados 11424 Eosinofilos 224 Linfócitos 10528 Monócitos 224 Reticulócitos % 10,5 Eritroblastos % 50 Plaquetas x 10 3 / ul 34,0 Coomb s Pos. Anemia hemolítica imunemediada
Xamã, Fel, siamês, M, 8anos Hemácias x10 6 /ul 4,2 5,5 8,2 Hematócrito (%) 24 31 40 Hemoglobina(g/dL) 7,6 9,7 13,2 Leucócitos ( x10 3 /ul) 67.000 28.200 17.500 N.bastonetes 0 0 0 N.segmentados 57.630 21.714 11.200 Eosinofilos 678 282 2100 Linfócitos tipicos 102 5.640 3.150 L. atípicos 2034... 525 Monócitos 1356 564 525 Reticulócitos/ ul 150.000 Diagnóstico Anemia infecciosa felina
Fel., Birmanês, F, 3 anos Anorexia e dispnéia de vários dias de duração Hemácias x10 6 /ul 5,6 Hematócrito (%) 25 Hemoglobina(g/dL) 8,1 Leucócitos ( x10 3 /ul) 54,0 N.bastonetes 6000 N.segmentados 44.000 Eosinofilos 800 Linfócitos 1.200 Monócitos 2.000 Plaquetas x 10 3 / ul Reduzido Morfologia Marcante toxicidade de neutrófilos Linfócitos reativos esporadicos
1. Leucograma inflamatório ativo com stress, necrose tecidual e toximia sistêmica. Desvio a esquerda e monocitose são indicativos de inflamação A monocitose também indica necrose tissular. Alto nível de corticoide circulante é indicado pla linfopenia marginal Toxemia sistêmica é indicada pela presença de neutrófilos tóxicos. Neste caso, a toxemia é grave, Em cães e gatos, toxiemia sistêmica grave é associada a infecções bacterianas 2. Anemia da doença inflamatória anemia moderada,normocítica normocrômica 3. Trombocitopenia indicativa de possível CID, considerando-se a severidade da inflamação e toxemia sistêmica, a trombocitopenia pode ser indicador de CID. Diagnóstioc: Piotórax bacteriano. Painel para CID indicou ocorr~encia de CID sub-clínica
Can, cocker spaniel, F, 8 anos HC- linfadenopatia generalizada Hemácias x10 6 /ul 2,6 Hematócrito (%) 15 Hemoglobina(g/dL) 5,0 Leucócitos ( x10 3 /ul) 5,0 N.bastonetes 0 N.segmentados 3.000 Eosinofilos 300 Linfócitos 700 Monócitos 1.000 Plaquetas x 10 3 / ul 34,0 Pt. Plasmática 6,0 g/dl
1. Possível doença medular. Os dados do leucograma, eritrograma e trombograma indicam pancitopenia. 2. Citopenia inexplicável de uma ou mais linhagens celulares sugere possível problema de produção medular. 3. Possibilidades: hipoplasia/aplasia, síndrome mieloftísica, mielofibrose 4. Nesse caso MO foi altamente celular, porém anormal. Infiltrado de linfoblastos. 5. Diagnóstico- síndrome mieloftísica devido a linfossarcoma linfoblástica