CENTRO UNIVERSITÁRIO CESMAC
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1 CENTRO UNIVERSITÁRIO CESMAC NÚCLEO DE PÓS-GRADUAÇÃO NPG CURSO DE PÓS-GRADUAÇÃO LATU SENSU CLÍNICA MÉDICA E CIRÚRGICA DE PEQUENOS ANIMAIS Dermatofitoses: Causas e Tratamento Jones Bahri CURITIBA 2013
2 DERMATOFITOSES: CAUSAS E TRATAMENTO Monografia apresentada como requisito para conclusão do Curso de Pós-Graduação em Clínica Médica e Cirúrgica de Pequenos Animais, do Centro Universitário CESMAC, sob a orientação do Prof. Gustavo Mafra. CURITIBA
3 Jones Bahri DERMATOFITOSES: CAUSAS E TRATAMENTO Monografia apresentada como requisito para conclusão do Curso de Pós-Graduação em Clínica Médica e Cirúrgica de Pequenos Animais, do Centro Universitário CESMAC, sob a orientação do Prof. Gustavo Mafra. Curitiba/PR, de de 2013 PROFESSOR GUSTAVO MAFRA ORIENTADOR
4 RESUMO A dermatofitose é uma das principais enfermidades tegumentares de pequenos animais, em especial cães e gatos, uma vez que seus agentes etiológicos são responsáveis por importante zoonose por vezes de difícil tratamento. A presença de fungos patogênicos na pele, associado às lesões alopécicas, de bordas delimitadas, e com prurido de discretas intensidades caracteriza a dermatofitose. As manifestações clínicas são denominadas tineas ou tinhas, epidermofitíases, onicomicoses dermatofíticas e dermatofitoses subcutâneas e profundas, apresentando gravidade que pode variar de moderada a grave,dependendo mais da resposta do hospedeiro que da virulência da espécie ou linhagem do dermatófito em si. O diagnóstico clínico das dermatofitoses, assim como de outras infecções fúngicas, passa por três fases distintas: a pré-analítica, na qual é imprescindível que a coleta, conservação e transporte sejam realizados deforma adequada para que não haja influência no resultado do final do exame; a analítica, na qual o exame é realizado pela microscopia direta, análise da cultura, micro cultivo em lâmina e, se necessário, prova da uréase, teste de perfuração do pêlo in vitro, provas nutricionais, identificação por métodos moleculares e por fim, a etapa pós-analítica, na qual se estoca o patógeno em que estão para estudos futuros. Palavras-chave: dermatologia canina; cães; micose superficial.
5 SUMÁRIO INTRODUÇÃO DERMATOFITOSES PATOGENIA GÊNEROS E PRINCIPAIS ESPÉCIES ENVOLVIDAS Gênero Trichophyton Trichophyton Rubrum Trichophyton Mentagrophytes Trichophyton Tonsurans Trichophyton Verrocosun Trichophyton Violaceun Trichophyton Concentricun Trichophyton Shoenleinii Gênero Microsporum Microsporum Canis Microsporum Gypseum Gênero Epidermophyton Epidermophyton Floccsum ASPECTOS CLÍNICOS DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Exame Microscópico Direto Cultivo e Identificação dos Dermatófitos Microcultivo em Lâminas Prova de Urease Teste de Perfuração do Pêlo in vitro Provas Nutricionais TRATAMENTO Tratamento Tópico Tratamento Sistêmico CONCLUSÃO REFERÊNCIAS... 35
6 DEDICATÓRIA Dedico à minha família que sempre me apoiou com carinho e paciência.
7 AGRADECIMENTO Agradeço a Deus, sobre todas as coisas, por todas as vitórias na minha vida; A o s m e u s p a i s, q u e s e m p r e e s t i v e r a m a o m e u l a d o d i a n t e d e t o d a s a s d i f i c u l d a d e s encontradas ao longo do caminho; Agradeço a minha família por torcerem por mim. Aos meus amigos, por tudo que já vivi com eles, pelo ombro amigo, por rir e chorar juntos; Ao meu orientador, pelo estímulo e colaboração nessa trajetória.
8 EPÍGRAFE "As emoções são a próxima fronteira a ser compreendida e conquistada. Gerenciar nossas emoções não é sedá-las ou suprimi-las, mas compreendê-las de modo que possamos inteligentemente direcionar nossas energias e intenções emocionais. É hora dos seres humanos crescerem emocionalmente, amadurecer em cidadãos emocionalmente gerenciados e responsáveis. Nenhuma pílula mágica fará isso. " ( Doc Childre ) CURITIBA 2013
9 INTRODUÇÃO O processo patológico desencadeado por dermatófitos (fungos queratino fílicos) é genericamente denominado de dermatofitose. O termo dermatófito não corresponde a uma unidade taxonômica, mas sim a um grupo de fungos com características morfológicas, antigênicas e fisiológicas relacionadas entre si. A infecção está normalmente restrita às estruturas cornificadas superficiais, como o estrato córneo da epiderme, os pêlos e as unhas em função da existência de altos teores de queratina. Essa condição determina o aparecimento de quadros clínicos diferentes em função do sítio anatômico: dermatofitose do couro cabeludo (Tinea capitis), dermatofitose do corpo (Tinea corporis), dermatofitose ungueal (Tinea unguium) entre outras. Ocasionalmente, a derme e o tecido subcutâneo podem ser envolvidos, porém, não é comum. O tipo de dermatófito e a proporção com que são isolados dependem ou variam com as zonas geográficas, coincidindo em algumas ocasiões a presença de mais de um dermatófito sobre o mesmo animal e sendo M. canis o causador da maior parte das dermatofitoses caninas e felinas. Também existem variações de incidência da dermatofitose segundo se trate de climas quentes e úmidos (maior incidência) ou climas frios e secos. Por outra parte, a estacionalidade também é um fator de variação, assim nos cães de nossa área geográfica M. canis é mais freqüente no período de outubro a fevereiro e menos freqüente de março a setembro. M. gypseum é mais abundante de julho a novembro e aparece menos freqüentemente de dezembro a junho. Por sua vez, T. mentagrophytes apresenta a mesma incidência durante todo o ano com um pico entre novembro e dezembro. (SUTTON, 1998). Estudos recentes, sobretudo no campo da imunologia, têm permitido maior conhecimento da relação agente/hospedeiro nessa infecção cutânea. O contágio pode ser feito de maneira direta (seres humanos, animais e solo contaminado) ou indireta (exposição aos fômites contaminados). A transmissão da enfermidade é mediada por esporos ou propágulos cuja formação depende da fonte de infecção. Segundo Weitzman e Summerbell (1995), há uma tendência de proliferação das drogas para tratamento das dermatofitoses devido à variabilidade de dermatófitos e ao custo das diferentes terapias, provocando assim, um aumento da variabilidade terapêutica. Há de se levar em conta também, o surgimento de resistência, microbiológica ou clínica.
10 O tratamento das dermatofitoses se faz de forma geral com o uso de antifúngicos tópicos e/ou sistêmicos, associados ou não a anti-bacterianos, substâncias queratolíticas, bem como a remoção de restos de escamas e pêlos infectados. O tratamento tópico é usualmente eficiente para a cura da maioria das infecções, porém as formas mais graves necessitam de tratamento sistêmico. Iodo e suas associações, griseofulvina, ciclopirox, compostos ali lamínicos, imidazólicos e triazólicos, incluindo, mais recentemente, no último grupo o voriconazol, são as principais drogas antifúngicas utilizadas para o tratamento das dermatofitoses (BARROS, 2003; SIDRIM et al, 2004; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995).
11 1. DERMATOFITOSES É um grupo de fungos relacionados entre si que apresentam a capacidade de invadir os tecidos queratinizados (pele, pêlo, unhas) do homem e dos animais, produzindo uma enfermidade denominada dermatofitose, ou mais comumente, tinha ou tinea. A infecção é geralmente cutânea, restrita à camada córnea, devido à incapacidade do fungo de penetrarem tecidos profundos ou órgãos de indivíduos imuno competentes (SAENZ, 2001; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995). A prevalência dos dermatófitos é variável nas diversas regiões do mundo e dentro de um mesmo país, devido a fatores como clima, condições socioeconômicas e higiênicas da população, urbanização, sistema imunológico do hospedeiro, características fúngicas e ações terapêuticas (LACAZ et al,1998). Possuem elevada revalência na América Latina e atingem tanto o homem quanto os animais domésticos. Existem relatos e dados epidemiológicos que indicam que estas micoses, estão entre as zoonoses mais comuns do mundo, Também há relatos de ocorrência da enfermidade entre cães e gatos no meio urbano (PINHEIRO et al, 1997). Não se conhece bem a fase sexual (perfeita ou teleomorfa) da maioria destes fungos, mas foi provado que eles são ascomicetos através de diferentes técnicas. Taxonomicamente se englobam na divisão Ascomycota e pertencem à classe Plectomycetes, ordem Onygenales e família Arthrodemataceae. Atualmente, um único gênero denominado Arthroderma inclui todas as espécies de teleomorfos (SAENZ, 2001). A taxonomia dos dermatófitos e sua identificação rotineira em laboratório baseiam-se fundamentalmente em critérios morfológicos, macroscópicos e microscópicos, relacionados com a sua fase de reprodução assexuada (anamorfa, imperfeita - SAENZ, 2001). Quando no estado anamórfico ou assexuado, os gêneros que agrupam as espécies produtoras de dermatofitoses são: Epidermophyton, Microsporume Tricophyton. Atualmente, aproximadamente 40 espécies encontram-se inclusas nesses gêneros e o número de espécies reduz a 30 quando se considera apenas as espécies produtoras de dermatofitoses (verdadeiros dermatófitos). Estas espécies não são encontradas com a mesma freqüência em todos os laboratórios, devido à variabilidade climática, geográfica e socioeconômica que originam a mudança dos padrões de distribuição dos agentes etiológicos das dermatofitoses (SAENZ, 2001).
12 Outras espécies se distribuem de forma mais ou menos regular por todo o mundo. Apenas 10 espécies são encontradas com elevada freqüência na maioria dos laboratórios de micologia clínica humana, representando 99% dos cultivos positivos. Destas, apenas seis espécies são responsáveis por mais de90% dos casos. São elas: Epidermophyton floccosum, Microsporum canis, Microsporum gypseum, Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes e Trichophyton tonsurans (SAENZ, 2001). Apesar da distância taxonômica, os gêneros Microsporum, Tricophyton e Epidermophyton têm em comum, além da queratinofilia e de algumas semelhanças nas características microscópicas, a propriedade de colonizar estruturas queratinizadas: camada córnea da epiderme, pêlos e unhas do tegumento dos hospedeiros. Como essas são estruturas inertes, as alterações provocadas usualmente pelos dermatófitos resultam primeiramente de uma reação desenvolvida nos tecidos vizinhos contra produtos do metabolismo fúngico, antes que da presença dos microrganismos invasores nas partes quer atinizadas (MORAES et al, 2001). A gravidade das manifestações clínicas pode variar de moderada a severa e depende mais do estado imunitário, da sensibilidade do hospedeiro a esses produtos, do que da virulência da espécie ou linhagem do dermatófito em si, além do sítio anatômico da infecção e de outros fatores ambientais locais (MORAES et al, 2001; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995). As dermatofitoses compreendem uma extensa variedade de condições clínicas distintas. As mais comuns foram inclusas nas micoses cutâneas sob o nome genérico de tinhas (do latim tinea), e classificadas de acordo com alocalização: Tinea capitis, Tinea corporis, Tinea barbae, Tinea unguium, Tineapedis, Tinea manuum e Tinea cruris (MORAES et al, 2001). Em raras ocasiões, os dermatófitos invadem as camadas mais profundas, não queratinizadas, da pele ou, mesmo, a hipoderme, onde desperta uma resposta aguda, com formação de abscessos, que pode dar uma resposta aguda, com formação de abscessos, que pode dar lugar a uma inflamação granulo matosa de tipo corpo estranho (MORAES, et al, 2001).
13 2. PATOGENIA Quando um animal é exposto a um dermatófito, pode ocorrer uma infecção. A ruptura mecânica do estrato córneo é importante para facilitar a penetração e invasão dos folículos pilosos. As hifas fúngicas disseminam-se na superfície do pêlo e, posteriormente, migram para o bulbo do pêlo, produzindo enzimas queratolíticas que permitem a penetração em sua cutícula. Neste ponto, o fungo estabelece um equilíbrio entre o crescimento para baixo e a produção de queratina ou é expelido. Aderência aos queratinócitos da pele e a germinação artroconidial constituem etapas cruciais para o estabelecimento da infecção. Sendo assim, no desenvolvimento de uma infecção ativa na pele intacta, o conídio, geralmente, deve penetrar na camada de queratina, estabelecendo o sítio de parasitismo. Na maioria das vezes, a hifa emergente é capaz de uma penetração tanto mecânica quanto enzimática. Alguns dermatófitos possuem estruturas especializadas para favorecer a invasão. Várias enzimas extracelulares como protease, lípases, fosfatases, nucleases e glicosidases são também produzidas com esse fim. A queratina é uma escleroproteína altamente polimerizada, constituída de cadeias de polipeptídeos unidas por ligações dissulfeto (S-S), as quais mantêm a forma tridimensional da molécula. Sua alta resistência à maioria dos microorganismos é, provavelmente, devida a tais ligações. Os dermatófitos possuem um sistema enzimático capaz de quebrar as ligações S-S, resultando em compostos que possuem o grupamento isolado. Parte do nitrogênio é liberada sob a forma de amônia. Tecidos que têm a capacidade de produzir queratina, como camadas queratinizadas de pele, pêlos e unhas são altamente seletivos para o crescimento de dermatófitos, o que explica o fato desses fungos infectarem somente os tecidos superficiais ricos em queratina, não tendo poder invasor. A hidrólise da queratina por proteínas proteolíticas é um aspecto conspícuo na patogenia das dermatofitoses. Entretanto, algumas enzimas extracelulares verificadas de espécies de Trichophyton e Microsporum são ativas apenas em ph
14 neutro ou alcalino. Tendo a pele um ph fracamente ácido em sua superfície, há dúvidas se as queratinas trabalham como fatores de virulência. As variações individuais, imunossupressão e locais dos ambientes cutâneos podem modular a patogenicidade dos elementos fúngicos depositados sobre a epiderme. A produção de enzimas extracelulares é dependente dos substratos acessíveis in vivo para o crescimento do dermatófito. Conseqüentemente, a agressividade do fungo sobre as estruturas queratinizadas poderá ser maior ou menor, conforme o suprimento nutricional encontrado. A formação de enzimas e a habilidade de causar inflamação cutânea contribuem para a disseminação do fungo. Como o dermatófito, em geral, não é capaz de sobreviver a uma reação inflamatória, tende a se afastar da região inflamada e a fixar-se no tecido normal adjacente. Os dermatófitos não invadem as estruturas sub-epidérmicas, contudo, produzem respostas inflamatórias definidas e reações imunes mediadas por células em todos os indivíduos normais. A doença é desencadeada a partir da elaboração e secreção de substâncias tóxicas ou alergênicas que se difunde pela epiderme, atingindo a derme vascularizada que é potencialmente capaz de responder a agressão dos materiais irritantes, por meio de um processo inflamatório. A resolução espontânea ocorre quando os pêlos infectados entram na fase telo gênica ou se uma reação inflamatória for estimulada. A fase cata gênica é traduzida pela parada na produção de queratina e isto cessa o crescimento do dermatófito, visto que ele necessita de pêlos em franco crescimento para sua sobrevivência. Todavia, os artrósporos podem permanecer na haste do pêlo, mas a reinfecção deste folículo piloso, em particular, não ocorre até que o desenvolvimento desse pêlo não seja novamente ativado. As infecções dermatofíticas em cães e gatos sadios são, freqüentemente, autolimitantes. Em função de sua incapacidade de sobreviver em ambiente de inflamação, ao longo do processo evolutivo, alguns fungos suprimiram a capacidade de produzir substâncias irritantes para determinados hospedeiros, garantindo, assim, sua sobrevivência.
15 3. GÊNEROS E PRINCIPAIS ESPÉCIES ENVOLVIDAS 3.1 Gênero Trichophyton É o gênero mais freqüentemente isolado de material clínico e acomete tanto a pele glabra como os cabelos e unhas. As principais espécies antropofílicas isoladas são: Trichophyton rubrum, Trichophytonmentagrophytes, Trichophyton tonsurans, Trichophyton violaceum, Trichophyton concentricum e Trichophyton schoenleinii. Dependendo das condições geográficas, essas espécies apresentam maior ou menor prevalência em determinada região (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001) Trichophyton Rubrum É uma espécie antropofílica cosmopolita, responsável por cerca de 70%de todas as infecções por dermatófitos e é o maior agente responsável por dermato micoses superficiais, como onicomicoses e tinea.. A porcentagem alta está correlacionada ao fato dessa espécie ser refratária ao tratamento imposto, devido sua grande adaptação ao hospedeiro humano - daí sua maior facilidade de burlar as defesas inatas do hospedeiro e permanecer como uma infecção residual, com exacerbações clínicas eventuais (SIDRIM et al, 2004; MUKHERJEE et al,2003). De acordo com Sidrim et al (2004), T. rubrum é um fungo de crescimento intermediário em ágar Sabouraud, com maturação de 12 a 16 dias a partir da primeira semeadura. As colônias caracterizam-se por textura cotonosa,com pregas radiais, formando uma pequena saliência no centro, o que permite confundir freqüentemente com as colônias de T. tonsurans. Apresenta tonalidade branca, que pode tornar-se avermelhada e esse tom pode ser observado também na borda da colônia. Com o passar do tempo, o reverso também apresenta coloração avermelhada, podendo predominar várias tonalidades de castanho. Em algumas linhagens, esse pigmento é observado com dificuldade, sendo preciso repicar a colônia suspeita em ágar fubá com
16 dextrose para uma melhor observação do pigmento. Na microscopia óptica observam-se muitos microconídiose osmacroconídios, quando presentes, apresentam-se como clavas alongadas, quase com um aspecto cilíndrico, com duas a nove septações; todavia, a presença desses macroconídios não é diagnóstico definitivo para a espécie. Muitas vezes a identificação é difícil de ser feita apenas com esses dados mesmo para micologistas experientes, logo, é preciso fazer o diagnóstico diferencial, como a capacidade que o T. rubrum tem de produzir pigmento emágar fubá com 1% de dextrose, teste de perfuração do pêlo negativo e teste de urease negativo (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001, SINSKI et al, 1981). A terapia mais comum é baseada no uso da terbinafina e griseofulvina, geralmente consideradas efetivas no tratamento, porém há relatos na literatura de linhagens de T. rubrum exibindo resistência primária à terbinafina(mukherjee et al,2003). Osborne et al (2005) comprovaram através de técnicas moleculares, que a resistência à terbinafina das linhagens selecionadas parecia estar relacionada à substituição de um único aminoácido no gene SE do T. rubrum Trichophyton Mentagrophytes É a espécie responsável no homem pela segunda ou terceira causa dermatofitose, causando quadros de epidermofitíases, onicomicoses, lesões no couro cabeludo e interdigitoplantares. Apresenta duas principais variedades, sendo a primeira conhecida como T. mentagrophytes var. mentagrophytes, e asegunda conhecida como T. mentagrophytes var. interdigitale. O que diferenciaas duas, é o fato de o T. mentagrophytes var. mentagrophytes ser uma espécieparticularmente zoofílica e o T. mentagrophytes var. interdigitale ser uma espécie por excelência antropofílica. Além disso, essas duas variedades podem apresentar diferenças nas características fenotípicas, assim, o T.mentagrophytes var. mentagrophytes em ágar Sabouraud, apresenta uma textura pulverulenta, sem relevo acentuando, formando às vezes círculos concêntricos, de coloração que varia do branco amarelado ao castanho avermelhado e o reverso da colônia apresenta um pigmento castanho, que pode tender para o vinho. O T. mentagrophytes var. Interdigitaleapresenta em ágar Sabouraud, colônias com textura aveludada ou cotonosa,de coloração branco
17 amarelada e com reverso pouco pigmentado, de tom castanho ou avermelhado (KAUFMAN et al, 2005; SIDRIM et al, 2004; SAENZ,2001; SINSKI et al, 1981). O T. mentagrophytes apresenta crescimento rápido, com maturação por cerca de 6 a 11 dias após ser semeado. Microscopicamente, as colônias são ricas em estruturas de frutificação: há grande quantidade de microconídios arredondados a agrupados, em aspecto de cacho. Os macroconídios nem sempre estão presentes, mas quando presentes assemelham-se a um charutocubano, com um a seis septos transversais ligados a hifas hialinas e septadas. Apresenta grande quantidade de estruturas de ornamentação, como hifas espiraladas, órgãos nodulares, hifas em raquete e clamidoconídios intercalares. No diagnóstico diferencial, é positivo para os testes da urease eteste de perfuração do pêlo e não se observa pigmento em ágar-fubá (SIDRIMet al, 2004; SAENZ, 2001) Trichophyton Tonsurans Espécie antropofílica por excelência, porém há relatos de casos raros em cavalos e cães. Responsável por lesões tonsurantes no couro cabeludo, mas raramente pode também causar lesões na pele glabra e onicomicoses.após a semeadura primária em ágar Sabouraud, apresenta crescimento intermediário, por volta de 12 a 16 dias. As colônias apresentam aspectos que podem variar de cotonosa a aveludada e quando mais velhas, podem apresentar-se pulverulentas. Além do aspecto variado, o relevo também pode o ser, logo, as colônias podem apresentar-se apiculadas, crateriformes ou até mesmo cerebriforme com algumas pregas radiais. O verso tem coloração variando de branco a diversos tons de bege e o reverso apresenta vários tons de castanho avermelhado e um pigmento que pode ser difundido em agar Sabouraud, o que não é observado no ágar batata e que pode confundir sua identificação macroscópica com o T. rubrum. Microscopicamente, observam-se muitos microconídios dispostos em acladium, de aspecto grosseiro, sem homogeneidade e dimensão entre eles Os macroconídios, quando presentes, são irregulares e contribuem pouco para a identificação. Em culturas velhas, podem ser observados clamidoconídios intercalares, hifas em raquete e artroconídios. Cresce pouco em ausência de tiamina e infecta o pêlo pelo tipo endotrix. Diagnóstico diferencial: paradoxalmente à capacidade de parasitar
18 pêlos humanos in vivo, o T. tonsurans não perfura o pêlo in vitro; apresenta teste de uréase positivo por até 30 dias e não mostra pigmento quando semeado no ágar- fubá (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001) Trichophyton Verrucosum É um fungo cosmopolita, parasita de bovinos, mas esporadicamente pode causar lesões bastante inflamatórias no couro cabeludo, pele glabra, barba e bigode de humanos. No couro cabeludo há um parasitismo megaspórico endotrix, não fluorescente à lâmpada de Wood. Cresce lentamente a contar da semeadura, levando cerca de 13 a 25 dias de maturação. Macroscopicamente a textura da colônia varia de glabrosa a aveludada, com relevo rugoso ou ainda cerebriforme. A pigmentação do verso varia de branco a amarelo ocre e o reverso apresenta-se em tons de amarelo com pigmento não difusível ao meio. Microscopicamente, a semeadura no agar Sabouraud produz um material pobre, que não evidencia a presença demacroconídios e nem microconídios, porém apresenta cadeias grandes formadas por clamidoconídios. Diagnóstico diferencial: é uréase negativa, não perfura pêlo in vitro e não produz pigmento em ágar fubá. Necessitam de tiamina e inositol (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001) Trichophyton Violaceum Macroscopicamente caracterizado por possui colônias de cor púrpura escuro, violeta. Microscopicamente não são detectados conídios. Sua infecção é pelo tipo endotrix e seu crescimento é escasso em ausência de tiamina (SAENZ, 2001) Trichophyton Concentricum Espécie antropofílica por excelência e muito comum no norte do Brasil,entre populações indígenas, causando uma lesão conhecida como tineaimbricata. Tem crescimento lento, com período de maturação de 20 a 30 dias. Macroscopicamente as
19 colônias apresentam textura glabrosa e relevo cerebriforme amarelado, que ao envelhecer pode tornar-se castanho-escuro. O reverso acompanha a coloração do verso e não se observa pigmento difusível no meio. Microscopicamente, não há microconídios e são observadas hifas hialinas, ramificadas e septadas, associadas ou não a hifas em candelabro. O diagnóstico clínico é de suma importância paradiferenciar o T. schoenleinii do T. concentricum (SIDRIM et al, 2004) Trichophyton Shoenleinii Espécie atualmente rara e de países industrializados. Infecta o pêlo por infecção do tipo fávico. Possui crescimento lento, com 14 a 30 dias dematuração. Macroscopicamente, as colônias apresentam textura que varia deglabrosa seca a aveludada baixa, com relevo cerebriforme e pigmentação no verso, que varia de bege ao castanho escuro o que é semelhante ao T.concentricum. O reverso tem o mesmo tom do verso, não apresentando, portanto, pigmento difusível. As colônias tendem a apresentar uma grande massa de hifas submergindo no meio. Microscopicamente não são observados microconídios nem macroconídios, porém vêem-se numerosas hifas septadas e em bifurcação, associadas a hifas em candelabro e a hifas em cabeça de prego. Não necessita de tiamina para o seu crescimento. Deve ser sempre realizado o diagnóstico diferencial com o T.violaceum e o T verrucosum, por apresentarem à microscopia, estruturas bastante semelhantes (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001). 3.2 Gênero Microsporum As espécies antropofílicas mais isoladas são Microsporum canis e Microsporum gypseum (SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001) Microsporum canis É uma espécie zoofílica, transmitida ao homem por animais doméstico se tem os felinos jovens como reservatório principal. Responsável por lesões no couro cabeludo, caracterizadas por grandes placas de alopecia, especialmente em crianças,
20 porém, também pode causar epidermofitíases e mais raramente, onicomicoses. Possui crescimento moderadamente rápido quando semeado, cerca de 6 a 10 dias. Macroscopicamente a colônia apresenta textura cotonosa, discreto relevo umbilicado, radiado e brancacento. Já o reverso possui tonalidade amarelo-limão, que com o passar do tempo tende a tornar-se castanho por difusão do pigmento no meio. O pleomorfismo é evidenciado com rapidez, apresentando-se como colônias cotonosas altas. Microscopicamente, há grande quantidade de macroconídios em forma de fuso,de paredes grossas, rugosas, com um pico terminal característico e numerosas septações, que variam de cinco a sete, porém, em determinadas ocasiões,podem ser observadas mais. Quando presentes, os microconídios sãosésseis e sem valor diagnóstico. Podem ainda ser observados clamidoconídios, órgãos nodulares e hifas pectinadas (GURTLER et al, 2005; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001) Microsporum gypseum É uma espécie geofílica, infecta o homem através do solo e por contato com outros animais contaminados também pelo solo. Geralmente causam epidermofitíases e em raras situações podem parasitar os cabelos, causandouma lesão bastante inflamatória no couro cabeludo. Tem um crescimento rápido, com maturação de 3 a 5 dias. Macroscopicamente, a colônia caracteriza-se por ser plana, com bordas irregulares, extremamente pulverulentas, com pigmentação que varia a diversos tons de amareloacastanhado. Tem uma forte tendência ao pleomorfismo e nessas situações, observam-se colônias cotonosas e brancacentas, constituídas apenas por hifas estéreis. O reverso apresenta cores que variam do alaranjado ao marrom e não se observa pigmento difusível ao meio. Microscopicamente a colônia apresenta macroconídios abundantes, fusiformes e simétricos, com 3 a7 septos de paredes finas e extremidade menos pontiaguda. Algumas linhagens apresentam numerosos microconídios piriformes (WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001). 3.3 Gênero Epidermophyton
21 Esse gênero possui apenas uma espécie de interesse médico humano: Epidermophyton floccosum Epidermophyton floccosum É uma espécie antropofílica por excelência, patógeno exclusivamente da pela glabra. Ocupa no Brasil o quarto ou quinto lugar como responsável por epidermo fitíases, principalmente das grandes pregas. Mais raramente acomete as áreas interdigito plantares e as unhas. Possui crescimento rápido quando semeado, com maturação de 7 a 10 dias. Macroscopicamente, as colônias apresentam uma textura cotonosa baixa, com relevo umbilicado, evoluindo para pulverulenta na região intermediária. As bordas do verso da colônia possuem coloração amarelo-esverdeada ou castanho-amarelada, ou ainda rubra. O reverso tende a acompanhar a coloração do verso, porém com um tom mais acentuado e pigmento difusível ao meio. Microscopicamente, a colônia apresenta macroconídios de paredefina, com dois a cinco septos e agrupados em cacho. Nas colônias mais velhas observam-se numerosos clamidoconídios intercalares, distais e em cadeias,sendo alguns deles originados dos próprios macroconídios. Linhagens que produzem pigmento rubro podem ser confundidas com T. rubrum. Não parasita pêlos humanos in vivo, porém in vitro, tem a capacidade de parasitar pêlos de cavalos (WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; SIDRIM et al, 2004; SAENZ, 2001).
22 4. ASPECTOS CLÍNICOS Os dados da anamnese não são de grande ajuda quanto a estabelecer o diagnóstico da dermatofitose, a não ser que se tenha conhecimento de que haja existido uma exposição ou contato com outros animais afetados. Por outra parte o período de incubação é muito variável (4 dias a 4 semanas) e clinicamente pode apresentar-se sob diferentes aspectos. Dados interessantes que nos podem ajudar é saber se as pessoas que convivem com o animal afetado têm lesões, se existem gatos que convivem com os cães, ainda que estes sejam assintomáticos ou se o animal permaneceu nos últimos dias em algum pet shop, creche, clínica ou outro ambiente. Não se deve esquecer na análise da história clínica que existem muitos fatores que predispõem um animal à infecção, incluindo o que seja jovem, fêmea gestante/lactente, que padeçam doenças que o debilitam, situações com sistema imunitário comprometido, nutrição inadequada e estresse em geral. Devido a que a infecção é quase sempre folicular, o sintoma mais característico é a presença de uma ou várias zonas arredondadas alopécicas com um grau variável de descamação, pápulas e pústulas que se estendem perifericamente (conforme figuras 01,02,03,04 páginas 23, 24 e 25). Alguns cães desenvolvem a típica lesão em forma de anel com uma zona central curada e pápulas foliculares e crostas na periferia. Mas os sintomas são muito variáveis de alguns casos a outros, dependendo da interação hospedeira - fungo e do grau de reação inflamatória desenvolvida. O prurido costuma ser mínimo ou ausente. Por outra parte a dermatofitose pode estar complicada por uma infecção bacteriana secundária. Portanto, a dermatofitose deve ser incluída no diagnóstico diferencial de qualquer erupção anular, papular ou pustular. Outra forma de apresentação é a foliculite e furunculose simétrica facial ou nasal, que imita as doenças autoimunes e que são produzidas especialmente por T. mentagrophytes. Tricophyton também pode dar lugar a foliculite e furunculose afetando uma só extremidade.
23 Nas infecções generalizadas se podem observar quadros de seborreia com descamação gordurosa. O Querion por dermatófitos é uma apresentação exudativa, bem circunscrita e de tamanho variável, uma furunculose de tipo nodular que desenvolve múltiplos tratos de drenagem. Costuma estar associada a infecções por M. gypseum ou T. mentagrophytes. As onicomicoses são raras e costumam estar associadas a T. mentagrophytes e se apresentam como paroniquias e onicodistrofias assimétricas (um dedo ou vários dedos numa pata). Em geral, o aspecto clínico não serve para determinar o tipo de dermatófito implicado. As infecções por dermatófitos em cães costumam ser mais bem localizadas com lesões na face, pavilhão auricular, patas e cauda. A dermatofitose é geralmente uma doença de animais jovens (menos de um ano), mas a tinha selvática (que se contagia a partir de mamíferos selvagens) aparece mais comumente em adultos, sendo M. persicolor uma das causas crescentes deste tipo de dermatofitose em diversos países. Caracteriza-se pela presença de lesões faciais escamosas, crostrosas e pápulo-pustulares, às quais seguem perda de pigmentação da trufa e do plano nasal. Quando surgem dermatofitoses generalizadas em cães adulto-idosos é preciso indagar se se está administrando alguma droga (imunossupresora ou glicocorticoides) ao paciente ou se este padece de alguma doença concomitante como neoplasias ou soluceradrenocorticismo. (TAKAHASHI, 2003). Alguns exemplos do aspecto clínico das dermatofitoses em cães:
24 Figura 01. Dermatofitose nas costas do cão. Figura 02. Dermatofitose no corpo do cão. Figura 03. Dermatofitose nas patas do animal.
25 Figura 04. Dermatofitose nas patas do animal.
26 5. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL No diagnóstico laboratorial das dermatofitoses é imprescindível que a colheita do material clínico, assim como a sua conservação e transporte sejam realizados de forma adequada, já que influenciarão muito no resultado final do exame. É importante que o paciente não esteja fazendo uso de medicamentos antifúngicos no momento da coleta, mas caso isto ocorra, é necessário que haja a suspensão do uso do mesmo por pelo menos uma semana antes. A quantidade de material a ser colhido deve ser suficiente para a realização de pelo menos dois exames laboratoriais e na colheita do material biológico, deve se respeitar a questão do crescimento radial do fungo na lesão, evitando colher material em áreas lesionadas mais antigas como o centro das lesões na pele e a região distal das unhas infectadas, pois o fungo geralmente apresenta- se em menor quantidade ou com pouca viabilidade nestes locais (DOS SANTOS et al,2002; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995). Os cabelos devem ser coletados junto com a raiz, já que o fungo está presente próximo a estas áreas. Lesões de pele devem ser raspadas na região que fica entre a parte lesionada e a parte sã, partindo-se da região próxima ao centro em direção à periferia da lesão. Quando não for possível evidenciar esta diferenciação, deve raspar áreas representativas das lesões. Se houver em bolhas e vesículas, estas podem ser cortadas com tesoura e ao coletar, deves se evitar o líquido contido nas mesmas, por apresentar poucos elementos fúngicos. Já o material de lesões supuradas deve ser colhido com swab devido à dificuldade de se realizar raspagens neste tipo de lesão. As unhas devem ser preferencialmente raspadas até quase atingir o leito ungueal e deve se coletar também o material queratinizado que se acumula embaixo da unha (DOS SANTOS et al, 2002; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; ELEWSK,1998). Todo o material biológico colhido das lesões por dermatofitoses geralmente compõe-se de material sólido, portanto devem ser transportado em recipientes secos como placas de Petri pequenas ou mesmo em envelopes de papel resistentes. Caso não seja possível realizar o exame laboratorial logo após a coleta, o mesmo pode ser mantido em ambiente seco e ao abrigo da luz por pelo menos uma semana (DOS SANTOS et al, 2002; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; SIDRIM et al, 2004).
27 5.1 Exame Microscópico Direto No exame microscópico direto o material colhido deve ser tratado com clarificantes, como o hidróxido de potássio (potassa) em uma concentração de10-30%, para que as estruturas fúngicas presentes possam será adequadamente visualizadas ao microscópio. Pode-se também acrescentar Dimetil sulfóxide (DMSO) em proporção variável para que o processo de clarificação seja acelerado. Segundo dos Santos et al (2002), alguns autores estão acrescentando branco de calcio flúor na solução de postassa também com esse objetivo. O cálcio flúor se liga à parede fúngica, tornando os elementos fúngicos fluorescentes sob a luz ultravioleta. Porém essa técnica aumenta o custo do exame por precisar do microscópio de fluorescência e não vale à pena ser utilizada. Glicerina a 10% pode ser acrescentada para evitar a desse ação rápida das lâminas. O tempo de clarificação pode variar em função do tipo de material clínico, de alguns minutos como em raspados finos de pele, até muitas horas quando se trata de fragmentos maiores de unha (DOS SANTOS et al,2002). Os dermatófitos apresentam morfologia semelhante entre si ao exame microscópico direto. Em pele e unhas são mais observadas hifas septadas, ramificadas ou não e artroconídios nos quais as hifas separam-se fisicamente em nível dos septos e posteriormente os mesmos arredondam-se formando cadeias semelhantes a um colar de contas. Nos cabelos os dermatófitos apresentam-se como artroconídios arredondados e, mais raramente, hifaspodem localizadas tanto fora do cabelo (parasitismo por ectotrix), como dentro dos pêlos (parasitismo endotrix). Entre as espécies cuja invasão ao cabelo produz o tipo ectotrix de parasitismo, podemos citar o M. canis, M. gypseum et. mentagrophytes. Já aquelas associadas ao tipo endotrix estão T. Tonsuranse T. violaceum, entre outros. Os resultados devem ser expressos de maneira ase fazer uma descrição morfológica clara e concisa das estruturas fúngicas observadas à microscopia (DOS SANTOS et al, 2002; WEITZMAN e SUMMERBELL, 1995; SIDRIM et al, 2004). 5.2 Cultivo e Identificação dos Dermatófitos
28 O cultivo dos dermatófitos é realizado rotineiramente em meio de ágarsabouraud dextrosado contendo inibidores bacterianos e fúngicos comocloranfenicol e cicloheximide. Sempre que o crescimento fúngico limitar-se ahifas estéreis, deve-se recorrer ao uso de meios de cultura especiais que favoreçam o desenvolvimento das estruturas de frutificação e ornamentação década espécie de dermatófito. O procedimento de semeadura é o mesmo, porém ao invés de semear a amostra clínica diretamente, se pega um pequeno fragmento da colônia que foi obtida no isolamento primário. A temperatura ótima de crescimento situa-se na faixa de 25 a 30 C. Nestas condições os dermatófitos crescem num período de uma a três semanas (DOS SANTOS etal, 2002; SIDRIM et al, 2004). Para a correta identificação da espécie do dermatófito, devem será avaliadas as características macro e micromorfológicas das colônias e, em alguns casos, critérios fisiológicos e nutricionais. O estudo da morfologia inclui características macroscópicas como coloração da superfície e do reverso da colônia, topografia, textura e velocidade de crescimento. Além disso, fragmentos da colônia obtidos através do micro cultivo em lâmina, devem ser colocados sob lâmina limpa, corados com lactofenol azul de algodão, cobertos com lamínula e examinados ao microscópio para verificar a presença de elementos característicos como modificações de hifas, macro e microconídios. Ensaios adicionais incluem o teste de urease e teste de perfuração de pelo in vitro para diferenciação das espécies T. rubrum e T. mentagrophytes. Alémdisso, algumas espécies de dermatófitos que são menos freqüentes na rotina laboratorial, apresentam requerimentos nutricionais especiais de maneira que,para o seu isolamento, é necessário que os mesmos sejam acrescentados ao meio de isolamento. Assim, o Trichophyton equinum necessita de ácido nicotínico enquanto que o T. verrucosum necessita de inositol e tiamina para o seu crescimento (DOS SANTOS et al, 2002; WEITZMAN e SUMMERBELL,1995; SIDRIM et al, 2004; SUMMERBELL et al 1988) Micro cultivo em lâmina Método que consiste na obtenção do crescimento de fungos filamentosos em meio pobre em nutrientes, favorecendo a esporulação e o aparecimento das estruturas de frutificação.
29 Etapas do micro cultivo em lâmina: * Preparação do meio de cultura pobre em nutrientes (ágar-fubá, ágar-batata); * Montagem de uma lâmina com lamínula sobre um suporte de vidro, sendo este material previamente esterilizado em autoclave; * Corte do meio de cultura em blocos e a transferência de um destes para a lâmina; * Com o auxílio de uma alça em L, retira-se fragmentos da colônia a ser identificada, inoculando-os nos quatro lados do bloco.; * Coloca-se uma lamínula sobre o cubo de ágar inoculado; * Incuba-se em câmara úmida estéril por aproximadamente 15 a 20 dias, à temperatura ambiente * Quando houver crescimento adequado, remove-se a lamínula do bloco de ágar e esta é colocada em uma lâmina com uma gota de azul de lactofenol (SIDRIM et al, 2004; VILELA, 2002) Prova da Urease É uma prova muito utilizada na identificação dos dermatófitos, sendo particularmente útil na diferenciação de Trichophyton mentagrophytes dasdemais espécies de Trichophyton. O teste é baseado na capacidade das espécies produzirem a enzima urease, que hidrolisa a amônia e alcaliniza o meio, fazendo com que a coloração do mesmo vire de amarelo para rosa-escuro. As amostras são semeadas em ágar uréia de Christensen, que contém uréia e vermelho de fenol como indicador de ph. As amostras de Trichophytonmentagrophytes são urease positivas (SIDRIM et al, 2004; VILELA, 2002) Teste da perfuração do pêlo in vitro É um teste que permite diferenciar Trichophyton mentagrophytes (queapresenta órgãos perfuradores típicos), das demais espécies de Trichophyton,tais como T. tonsurans e T. rubrum (que não apresentam órgãos perfuradores).são colocados pequenos fragmentos de cabelos esterilizados em placas de Petri e em seguida adicionados 25 ml de água destilada estéril e duas a três gotas de extrato de levedura a 10%. Pequenos fragmentos do cultivo em prova, a partir de ágar
30 Sabouraud, são semeados e incubados a 25 C por 4 semanas.periodicamente, retirase fragmento dos pêlos, examinando ao microscópio eml âmina com lactofenol azul de algodão, cobrindo-se a preparação com lamínula(sidrim et al, 2004; VILELA, 2002, SALKIN et al, 1985) Provas Nutricionais Possuem valor para a identificação definitiva das diferentes espécies detrichophyton. T. verrucosum necessita de tiamina ou tiamina mais inositol para o seu desenvolvimento; T. schoenleinii cresce em meios vitaminados ou não eo T. tonsurans necessita de tiamina para se desenvolver (SIDRIM et al, 2004).
31 6. TRATAMENTO Dos estudos levados a cabo nos últimos anos se desprende que na maioria dos animais sadios, a dermatofitose é um processo auto limitante e a longo prazo se resolverá inclusive sem tratamento. No entanto, é conveniente tratar aos animais para: Encurtar o curso da infecção minimizando a gravidade e duração das lesões. Impedir ao máximo a disseminação do material infectante pelo meio ambiente que rodeia o animal, evitando que se formem reservatórios contaminantes para outros animais e para o homem. Portanto um bom protocolo para o tratamento deve incluir: Tratamento tópico, para destruir o material infectante e prevenir a disseminação sobre o meio; Tratamento sistêmico, para reduzir o tempo de infecção que sofre o animal; Tratamento do ambiente, para prevenir as recorrências da infecção ou a disseminação a outros animais ou pessoas. (ROCHETE, 2003) 6.1. Tratamento tópico Pode-se aplicar somente sobre as áreas que apresentam lesões ou sobre todo o corpo. A este respeito se deve indicar que, nas pessoas os esporos infectantes podem cultivar-se a partir de amostras obtidas de zonas afastadas mais de dez centímetros das zonas com lesões apreciáveis, e nos animais, nem todas as lesões são visíveis, sobretudo quando os animais têm pelo longo, portanto pode haver esporos infectantes em áreas não lesadas. Por conseguinte, o mais recomendável é a realização de tratamentos tópicos de todo o corpo. Se se deseja fazer um tratamento tópico o melhor será utilizar produtos que se apliquem por todo o manto em forma de banhos: Solução de sulfeto de cal: É uma das formas mais inócuas e efetivas, sendo muito seguro em cães, mas seu odor pode ser um complicante. Aplica-se a cada 3 dias.
32 Eniconazol: É um excelente produto e de ação muito rápida contra os pelos infectados e esporos de Microsporum canis. É talvez a melhor solução tópica para utilizar em pacientes caninos. Em gatos se tem descrito verdadeiro grau de toxicidade como conseqüência de ingestão do produto por lambida (problemas que se evitam se se impede que o gato lamba o manto enquanto esteja molhado com a solução). Deve-se aplicar a cada 3 dias em solução a 2%. (MORIELLO, 2004) Cetoconazol: De ação mais lenta que os anteriores. Pode ser algo irritante e se deve aplicar a cada 3 dias. Clorexidina: Em forma de shampoo ou solução. É um bom produto, mas não ataca os fungos dos pelos infectados com a mesma intensidade que o faz o sulfeto de cal ou enilconazol. Esta solução pode produzir irritação forte dos olhos e também toxicidade sistêmica quando as soluções são muito concentradas (recomenda-se utilizar de 0,02% a 2%). Não é necessário tosquiar ou cortar o pelo do cachorro, sobretudo se se trata de um indivíduo isolado; não obstante se facilita o tratamento tópico. Em todo caso, dever-se-á ter cuidado se se decide recortar o pelo do animal, pois as pequenas feridas podem ajudar a disseminar a infecção. Se se determina a utilização de preparados tópicos para lesões muito localizadas os produtos mais utilizados são a povidona iodada, a clorexidina em creme, o clotrimazol, o miconazol e o bifonazol Tratamento Sistêmico Demonstrou-se que o tratamento sistêmico encurta muito significativamente a duração e gravidade da dermatofitose e é mais benéfico para o indivíduo afetado do que para limitar a disseminação pela área habitada pelo cachorro afetado. O tratamento sistêmico deve combinar-se com o tratamento tópico e o tratamento do meio. Os antimicóticos sistêmicos mais importantes são: A griseofulvina é o melhor fármaco sistêmico para tratar a dermatose na primeira intenção. É mais fungistático que fungicida e sua eficácia depende parcialmente da eficácia dos mecanismos de defesa do hospedeiro para responder à
33 invasão do fungo. É um medicamento de preço exeqüível e ademais quase todos os enfermos com Microsporum canis e a maioria dos infectados por Tricophyton mentagrphytes se curarão com este fármaco. Mas não se deve utilizar em cães com menos de 6 semanas nem em fêmeas gestantes já que a griseofulvina é teratogênica. Nos humanos, recomenda-se que a paciente não engravide pelo menos até passado um mês após ter finalizado o tratamento. A absorção intestinal do produto é bem mais efetiva se se administra com comida gordurosa e se o estômago está cheio, ademais se minimiza o efeito de irritação gástrica que pode provocar em alguns enfermos. Deve administrar-se durante o tempo que seja necessário até que desapareçam as lesões observáveis e preferivelmente até que o cultivo seja negativo, isto é, durante aproximadamente 6-10 semanas. A dose de produto de griseofulvina micronizada para pacientes caninos é de 50 mg/kg/dia (melhor dividindo a dose em duas) e 10 mg/kg/dia, se se utiliza a forma ultramicronizada. (SILVA, 1994) O cetoconazol é uma alternativa à griseofulvina que se reserva sobretudo para os casos de resistêcias aos Trichophyton nos cachorros. É um imidazol que atua inibindo a síntese de ergosterol da parede celular do fungo. É um produto especialmente hepatotóxico em gatos, produzindo-se algumas vezes sérios problemas de intoxicações (anorexia, vómitos, diarreia, perda de peso) mas funciona muito bem em cachorros. Alguns estudos demonstraram que existem cepas de Microsporum canis que são resistentes ao cetoconazol e que este produto não tem vantagens sobre a griseofulvina em casos normais de dermatofitose felina. A dose recomendada para cães é de 10 mg/kg/dia oral (melhor divida em duas doses) e deve administrar-se com o estômago cheio para favorecer sua absorção, já que precisa de um meio ácido. Itraconazol. É o mais recente antimicótico sistêmico da família dos triazoles e dá muito bons resultados no tratamento das dermatofitoses animais. Tem atividade fungicida e pode inibir o estágio inicial da invasão dermatofítica (evita a aderência do fungo aos queratinocitos). Sua atividade é similar e inclusive superior à griseofulvina para tratar as dermatofitoses por M. canis nos gatos e é muito bem tolerado por estes sem efeitos secundários. É um composto muito caro e a dose que
34 se pode aplicar é 10 mg/kg uma vez ao dia. É um fármaco que está muito indicado para o tratamento das dermatoses felinas e, sobretudo para as produzidas por cepas de Microsporum canis que são resistentes à griseofulvina (SILVA, 2003). 7. CONCLUSÃO De origem fúngica, dermatofitoses são constantes enfermidades que afetam cães e gatos, como também grandes animais. Se pré-diagnosticadas pelo proprietário, que observa e fornece bem estar ao seu animal e diagnosticadas pelo profissional médico veterinário, o tratamento é prático, funcional e eficaz. São micoses superficiais muito contagiosas. Portanto, é indispensável que se faça um tratamento eficaz e o controle dos animais acometidos, além da desinfecção dos utensílios utilizados e do ambiente em que esses animais vivem.
35 8. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ANDRADE, Silvia Franco. Manual de Terapêutica Veterinária. 2ª ed. São Paulo: Roca, p ARANTE, F. C. et al. Micoses, dermatoses e dermatofitose. Acta. Scientise Veterinarie. São Paulo/SP, v. 22, n. 13, p , BEER, Joachim. Doenças Infecciosas em Animais domésticos. São Paulo: Roca, p CARTER, G. R. Fundamentos da Bacteriologia e Micologia Veterinária. São Paulo: Roca, p , CORRÊA, Walter Maurício; CORRÊA, Célia N. Maurício. Enfermidades Infecciosas dos Mamíferos Domésticos. Rio de Janeiro: Medsi, DUARTE, S. M. C. et al. Dermatofitose em animais. Microb. Line, v. 15, n. 5, Rio de Janeiro/RJ, DYCE, K.M. Tratado de Anatomia Veterinária. 2ª ed. Guanabara Koogan, p FENNER, William R. Consulta Rápida em Clinica Veterinária. 3ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, p , 375. FRASER, Clarence M. Manual Merk de Veterinária. 7ª ed. São Paulo: Roca, p GETTY, Robert. Anatomia dos Animais Domésticos. Volume I. 5 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, p HOSKINS, Johnny D. Pediatria Veterinária cães e gatos do nascimento aos 6 meses 2ª ed. Rio de Janeiro: Interlivros, p JUNIOR, P. S. et al. Dermatofitose (fungos dermatófitos). Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci. São Paulo, v. 38, n. 5, p , KOLB, Erich, GURTLER, H. Fisiologia Veterinária. 4ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, p MACHADO, Mauro Luiz da Silva. Micoses Cutâneas em Cães e Gatos. Disponível em: < [Acesso em: 08 ago. 2010].
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