CENTRO REGIONAL DE HEMOTERAPIA DO HCFMRP - USP
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- Fernanda Lara Ferrão Bacelar
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1 P.: 01/07 1. Objetivo Realizar a fenotipagem ABO/RhD, PAI e fenotipagem Rh C c E e de doadores de sangue por processo semi-automatizado. 2. Amostra Sangue total com anticoagulante. Sangue total sem anticoagulante. 3. Aplicação Otimizar a rotina de doares através da automação. 4. Responsabilidade Biologistas, Técnicos de Laboratório e Aprimorandos. 5. Reagentes Solução Fisiológica. Água Destilada. Tween 20 Álcool 70 % *2 6. Equipamentos / Materiais Qasar III. Tubo de ensaio 12 X 75. Microplaca fundo em U. 7. Procedimento INÍCIO DA ROTINA: - Ligar o estabilizador, ligar o computador e aguardar que o Windows98 seja iniciado e seja executado o programa Cleanup, ligar a leitora, ligar o pipetador, ligar o Sample Transport Unit (STU); *1 - Clicar no ícone QT; - Selecionar utilities e instrument check, aguardar a realização da checagem do aparelho;
2 P.: 02/07 - Selecionar utilities e fluid check, o aparelho realizara a checagem dos fluidos e o operador devera verificar se tem uma gota em cada probe e se elas não caem durante todo o procedimento de checagem; - Selecionar function e motor power off e deslizar as probes para o lado oposto; - Selecionar function, down probe e digitar 400; - Limpar as probes com uma gaze úmida em álcool 70% e em seguida com uma gaze seca; *2 - Selecionar function e park arm e as probes voltarão para a posição original; - Completar os recipientes um com água destilada e outro com solução fisiológica. Para cada litro de água ou de solução fisiológica adicionar 200l de Tween 20; - Conectar as mangueiras; - Selecionar run, chained run e morning e o aparelho realizara o primer. ROTINA PARA A PIPETAGEM DA FENOTIPAGEM ABO/RHD: - Numerar as microplacas seguindo a seqüência de pipetagem do equipamento. *2 Exemplo: *2 A B D CRh RD RB A B D CRh RD RB
3 P.: 03/07 - Selecionar run, chained run, selecionar ABO comp. ;*2 - O suporte de miocroplacas deverá permanecer na posição horizontal; *2 - Informar o número de amostras que serão processadas e colocar as amostras nos suportes do STU (8 amostras por suporte) e um tubo vazio para cada amostra no suporte de diluição; *2 - Colocar um código de barras em cada microplaca que será pipetada, colocar as placas no suporte de microplacas e ler o código de barras de cada microplaca; - Colocar os reagentes anti-a, anti-b, Anti-D, Controle Rh, Hemácia A1 e Hemácia B nos recipientes próprios. Os soros devem estar diluídos conforme padronização descrita nas TEIH e TEIH Colocar os recipientes no equipamento da seguinte forma: *2 *2 Anti-A Anti-B Anti-D Crh HA1 HB - Iniciar a rotina; - Ao terminar a pipetagem aguardar o STU voltar para a posição HOME; - Se algum código de barras das amostras não tiver sido detectado, efetuar a leitura com o scanner; Procedimento ABO REAG. : para pipetagem apenas dos reagentes nas microplacas; *2 Selecionar run, chained run, selecionar ABO REAG ; O suporte de microplacas deverá permanecer na posição horizontal; Informar o número de amostras que terão apenas seus reagentes pipetados; Dar para cada microplaca um número ou nome para que os reagentes sejam pipetados; Colocar os reagentes anti-a, anti-b, Anti-D, Controle Rh, nos recipientes próprios. Os soros devem estar diluídos conforme padronização descrita nas TEIH e TEIH Colocar os recipientes no equipamento da seguinte forma: *2 Anti-A Anti-B Anti-D Crh
4 P.: 04/07 Iniciar a pipetagem. Procedimento ABO AMO. : para pipetagem apenas das amostras em microplacas previamente pipetadas com reagentes; *2 Selecionar run, çhained run, selecionar ABO AMO ; *2 O suporte de microplacas deverá permanecer na posição horizontal; *2 Informar o número de amostras que serão processadas e colocar as amostras nos suportes do STU (8 amostras por suporte) e um tubo vazio para cada amostra no suporte de diluição; *2 Colocar um código de barras em cada microplaca que será pipetada, colocar as placas no suporte de microplacas e ler o código de barras de cada microplaca; *2 Colocar os reagentes Hemácia A1 e Hemácia B nos recipientes próprios. Os soros devem estar diluídos conforme padronização descrita nas TEIH e TEIH Colocar os recipientes no equipamento da seguinte forma: *2 Vazio Vazio Vazio Vazio HA 1 HB OBS: Qualquer problema durante a pipetagem pressionar F2 para dar uma pausa ou F3 para abortar o teste. *3
5 P.: 05/07 ROTINA PARA A PIPETAGEM DO PAI: I II l ll l ll l ll l ll l ll 1 O1 O1 O9 O9 O17 O17 O25 O25 O33 O33 O41 O41 5 O5 O5 O13 O13 O21 O21 O29 O29 O37 O37 O45 O45 2 O2 O2 O10 O10 O18 O18 O26 O26 O34 O32 O42 O42 6 O6 O6 O14 O14 O22 O22 O30 O30 O38 O38 O46 O46 3 O3 O3 O11 O11 O19 O19 O27 O27 O35 O35 O43 O43 7 O7 O7 O15 O15 O23 O23 O31 O31 O39 O39 O47 O47 4 O4 O4 O12 O12 O20 O20 O28 O28 O36 O36 O44 O44 8 O8 O8 O16 O16 O24 O24 O32 O32 O40 O40 O48 O48 - Numerar as microplacas seguindo a seqüência de pipetagem do equipamento; Exemplo: - Selecionar run, chained run, selecionar PAI ou PAI 75 ; *1 - O suporte de miocroplacas deverá permanecer na posição horizontal; *2 - Informar o número de amostras que serão processadas e colocar as amostras nos suportes do STU (8 amostras por suporte); - Colocar um código de barras em cada microplaca que será pipetada, colocar as placas no suporte de microplacas e ler o código de barras de cada microplaca; - Colocar os reagentes Hemácia I e Hemácia II nos recipientes próprios. As hemácias deverão estar preparadas conforme TEIH 1.6; - Iniciar a rotina; - Se algum código de barras das amostras não tiver sido detectado, efetuar a leitura com o scanner. OBS: Qualquer problema durante a pipetagem pressionar F2 para dar uma pausa ou F3 para abortar o teste. Todas as mostras deverão ser centrifugadas antes de serem colocadas no equipamento. FINALIZAÇÃO DA ROTINA DE PIPETAGEM: - Selecionar function e motor power off e deslizar as probes para o lado oposto; - Selecionar function, down probe e digitar 400; - Limpar as probes com uma gaze úmida em álcool 70% e em seguida com uma gaze seca; *2 - Selecionar function e park arm e as probes voltarão para a posição original; - Colocar as mangueiras em um recipiente com água sem tween 20; - Selecionar run, chained run e endofday e aguardar o equipamento realizar o shut down.
6 P.: 06/07 LEITURA DAS MICROPLACAS PIPETADAS APÓS PROCESSAMENTO: - Selecionar o ícone Sanguin Aurora; - Digitar nome e senha; - Clicar no ícone monitor que fica na barra de ferramenta na parte inferior da tela; - Abrirá uma nova tela. Clicar no 2 ícone na barra de ferramentas superior e aguardar a importação dos dados de pipetagem; - Minimizar a tela; - Selecionar o ícone read a plate. Read a plate - Automaticamente abrirá a gaveta da leitora. Colocar a microplaca na leitora e apertar o botão vermelho. Caso o código de barras não seja lido, abrirá uma tela para que este seja digitado; - A microplaca será interpretada. Retirar a microplaca da leitora e conferir com os dados na tela. Qualquer resultado poderá ser alterado clicando em cima do resultado; - Pressionar a tecla Print Scream. Clicar em start, selecionar programas, em seguida Acessórios, abrir o programa Word pad. Clicar em Paste para colar a foto da microplaca. Clicar em File, em seguida em save as. Selecionar desktop e placas. Digitar o número da microplaca correspondente à foto e clicar em save ; *1 - Fechar o Word pad ; *1 - Depois da conferência salvar os resultados clicando no ícone que é um disquete; - Clicar no ícone reporting. Abrirá uma nova tela. Selecionar o teste desejado e o número da microplaca. Clicar em search e em seguida em Print. Será criado um arquivo temporário para importação dos dados ao SBS; *2 - Em seguida, sair do programa Sanguin Aurora e clicar no ícone Integração Qasar para enviar os resultados para o SBS;
7 P.: 07/07 - Desligar o equipamento seguindo a ordem inversa daquela utilizada para ligar o equipamento. *1 - Em seguida proceder conforme POIH021 para finalização dos registros no SBS. BACKUP DAS FOTOS DAS MICROPLACAS *1 - As fotos das microplacas salvas na pasta placas do computador deverão ser gravadas em um CD semanalmente. *1 Aprovação Gerente do Laboratório de Imuno-Hematologia Data / / Diretor Responsável Data / / Implementação Gerente da Qualidade Data / /
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