INFLUÊNCIA DO PROBIÓTICO DURANTE ALEVINAGEM DO ASTYANAX BIMACULATUS

Transcrição

1 INFLUÊNCIA DO PROBIÓTICO DURANTE ALEVINAGEM DO ASTYANAX BIMACULATUS Marian Felisberto BITENCOURT1, Andressa Vieira DE MORAES2, Leandro Marcolino VIEIRA3, Marina de Oliveira PEREIRA4, Adolfo JATOBÁ5. 1 Bolsista 054/2015 IFC Campus Araquari, 2,3,4 Discentes Medicina Veterinária, 5 Orientador IFC-Campus Araquari. Introdução O lambari do rabo-amarelo (Astyanax bimaculatus), também conhecido como lambari tambiú, é um peixe de 10 a 12 cm de comprimento, serve como espécie forrageira, possui rápido ciclo de vida, rusticidade e alta produtividade. Aceita facilmente comida natural, bem como a alimentação artificial, suporta altas densidades de estocagem acima de 6 peixes.l-1, sugerindo uma boa adaptação aos sistemas de produção intensiva. (Jatobá & Silva, 2015). A intensificação do cultivo, condições de estresse e circunstâncias ambientais, podem levar a problemas relacionados a doenças que atingem principalmente as formas mais jovens como larvas e alevinos. Agentes antimicrobianos atuam no controle contra doenças. No entanto, a utilização desenfreada de antibióticos leva ao aumento da pressão de seleção de comunidades microbianas, resultando em resistência por parte de bactérias patogênicas (Gastalho & Ramos, 2014). Uma alternativa para a antibióticoterapia é o uso de probiótico. Jatobá & Mouriño (2015) constataram melhora nos parâmetros de desempenho, tais como o aumento no ganho de peso, biomassa, eficiência alimentar aparente e produtividade. Neste cenário, o uso de probióticos surge com uma alternativa para a redução das perdas na produção de alevinos. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o desempenho zootécnico dos alevinos do lambari do rabo amarelo (Astyanax bimaculatus) alimentados com dietas suplementadas com probiótico (Lactobacillus sp.) e seu efeito na microbiota do trato digestório do hospedeiro. Material e Métodos

2 O estudo foi realizado no Laboratório de Aquicultura (LAQ), Instituto Federal Catarinense (IFC), campus Araquari, sob o protocolo de número 0118/2015 do comitê de ética no uso de animais da mesma instituição. Cento e sessenta alevinos de lambaris do rabo amarelo (peso médio 0,37 g) foram distribuídos em oito tanques de 22 litros de polietileno (n = 20.tanque -1 ) ligado a um sistema de recirculação com um filtro de cartucho e a temperatura constante (26-27 C). As unidades experimentais foram divididas em dois tratamentos: peixes alimentados com ração enriquecida com bactérias ácido láctica (Lactobacillus sp.) e peixes alimentados com dieta controle (sem suplementação). Os peixes foram alimentados quatro vezes ao dia, com 10% da biomassa por duas semanas, 7,5% da biomassa na terceira semana e 5% da biomassa nas duas últimas, totalizando 39 dias. Durante a experiência, o oxigênio dissolvido e temperatura foram aferidos duas vezes por dia. O ph, amônia e nitratos dissolvidos totais foram medidas uma vez por semana e as biometrias semanalmente. O alimento comercial, inicialmente consistiu de ração em pó (níveis de garantia do fabricante: proteína bruta 55%, Grupo Guabi, Brasil). A ração foi pulverizada com a bactéria ácido láctica previamente cultivada em soro de leite (30 mg/kg), água destilada e açúcar (20 mg/kg). O líquido probiótico foi incubado durante 24 h a 35 C, a uma concentração de 1 x 1011 UFC ml -1 e taxa de 100 ml kg -1 ração. A alimentação pulverizada foi incubada durante 24 h a 35 C em um recipiente hermeticamente selado. Em seguida, a alimentação foi seca durante 24 h a 35 C. A ração controle foi pulverizada com o líquido controle esterilizado. Na terceira semana a ração em pó foi substituída pela ração extrusada de um milímetro (níveis de garantia do fabricante: proteína bruta 45%, Grupo Guabi, Brasil). A ração agora era pipetada com a bactéria ácido láctica selecionadas, bem como a dieta controle logo antes de ofertar a alimentação aos peixes. Após 24 horas de jejum, os peixes foram anestesiados com óleo de cravo (1%) e sacrificados por concussão craniana. Um pool do trato digestivo de cinco peixes de cada unidade experimental foi coletado em condições estéreis, macerado em solução salina estéril 0,65% NaCl, homogeneizado, e diluído em série 1:10. As amostras de cada diluição foram cultivadas em Plate Count Agar (PCA), Tiossulfato Citrato Bile Sais Sacarose (TCBS), Cetrimide Agar, Baird Parker Agar (BPA) e MRS Agar. Placas de

3 MRS foram incubadas durante 48 h a 30 C, e as demais foram incubadas durante 24 h a mesma temperatura para contagens bacterianas viáveis. Foram avaliados peso médio final, ganho de peso, o ganho de peso semanal, a taxa de sobrevivência, o eficiência alimentar aparente, e produtividade. Para análise estatística, os valores das análises microbiológicas foram convertidos para log(x + 1), e submetidos a um teste de "t". Todos os testes foram submetidos a 5% de significância. Resultados e discussão As análises microbiológicas de lambaris alimentados com a dieta suplementada com probiótico demonstraram que a contagem de bactérias heterotróficas totais, Staphylococcus sp., E Vibrio sp. foi menor do que no grupo controle. A contagem das bactérias heterotróficas totais do lambaris alimentados com a dieta de probiótico resultou em 5,37 unidades formadoras de colônia (UFC) por g de aparelho digestivo contra 6,77 no grupo controle. A contagem de Staphylococcus sp. resultou em 2,89 contra 5,75 UFC por g de aparelho digestivo. Já as contagens de Vibrio sp. foram de 2,31 contra 5,06 CFU por g de aparelho digestivo. A bactéria Pseudomonas sp. também demonstrou contagens mais baixas, 2,50 contra 3,04 unidades formadoras de colônia (UFC), porém sem diferença estatística (Tabela 1). Relatou-se a ausência de bactérias ácido láticas na análise microbiológica, isto pode estar relacionado provavelmente ao tamanho do trato digestivo do animal. Além disso, o período de jejum pode ter reduzido a população destas bactérias para níveis não quantificáveis pela metodologia escolhida. Tabela 1. Análises microbiológicas do trato intestinal (UFC por g de trato) do lambari do rabo amarelo (A. bimaculatus) alimentado com dieta suplementada com probióticos ou não. * Indica diferenças significativas. ND = não detectável. Análise Microbiológica Controle Tratamento Probiótico Significância Bactéria Heterotrófica totais 6,77 ± 1,06* 5,37 ± 0,64 0,039 Staphylococcus sp. 5,75 ± 0,82* 2,89 ± 1,09 0,040 Vibrio sp. 5,06 ± 1,35* 2,31 ± 0,89 0,014 Pseudomonas sp. 3,04 ± 1,41 2,50 ± 1,61 0,304 BAL (Bactéria Ácido Lática) ND ND - As mudanças na microbiota pelo Lactobacillus spp. levaram a uma redução significativa no número de bactérias. Esta redução pode ser considerada devido a uma provável manipulação da histo-arquitetura do intestino que conduz a uma melhor

4 utilização de nutrientes e consequentemente, um aumento da imunidade. Os alevinos de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus) alimentados com dietas suplementadas com Lactobacillus plantarum, também demonstraram alterações em sua microbiota, e inferior contagem de bactérias para Vibrio harveyi, V. anguillarum, Enterococcus sp., V. alginolyticus, Micrococcus luteos e Escherichia coli (Jatobá & Mouriño, 2015). A avaliação dos índices zootécnicos no final do ensaio revelou uma melhoria da taxa de sobrevivência dos alevinos de lambaris alimentados com dieta suplementado com Lactobacillus spp. (Tabela 2). A diferença da sobrevivência entre lambaris alimentados com ração suplementada com probiótico e o grupo controle foi de 88,25 contra 68,75%, respectivamente. Esta diferença pode ser devido a atuação do probiótico como promotor da saúde da microbiota intestinal do peixe e suas alterações benéficas, que aumentam a resposta imune elevando a sua resistência (Nayak, 2010). Outros parâmetros, tais como a média do peso final, o ganho de peso; ganho de peso semanal; eficiência alimentar aparente e o rendimento não apresentaram diferenças estatísticas entre os tratamentos (Tabela 2). No entanto, uma maior taxa de sobrevivência na cultura do A. bimaculatus tratado sobre o grupo de controle mostra que o probiótico é um suplemento notável quando se trata de produção de alevinos. Nesta fase da vida a sobrevivência torna-se um dos parâmetros mais importantes devido a sua comercialização. Alevinos são vendidos em grupos de mil, ao invés de peso em quilogramas. Portanto, ao aumentar as taxas de sobrevivência, garante-se que os produtores tenham uma maior oferta para esta espécie. Tabela 2. Índices zootécnicos do lambari do rabo amarelo (A. bimaculatus) alimentado com dieta suplementada com probióticos ou não. * Indica diferenças significativas. GPS: ganho de peso semanal. Índice Zootécnico Controle Tratamento Probiótico Significância Peso médio final (g) 3,21 ± 0,35 2,73 ± 0,42 0,066 Ganho de peso (g) 2,51 ± 0,35 2,51 ± 0,19 0,075 GPS (g.semana -1 ) 0,57 ± 0,04 0,50 ± 0,04 0,075 Sobrevivência (%) 68,75 ± 16,52 88,25 ± 4,72* 0,031 Eficiência alimentar aparente 0,74 ± 0,17 0,73 ± 0,12 0,200 Produtividade (kg.m -3 ) 1,92 ± 0,10 2,21 ± 0,25 0,070 Os resultados dos parâmetros de qualidade de água não divergiram entre os tratamentos e estão são adequados para a espécie. Não foi detectada a presença de Lactobacillus spp. na água das unidades experimentais dos peixes alimentados com dieta suplementada com probiótico ou não. Este fato demonstra que, apesar de os peixes

5 terem compartilhado um único sistema de filtro, as bactérias não interferiram no tratamento controle. Conclusão Os resultados demonstram o potencial de dietas suplementadas com Lactobacillus spp. em induzir alterações na flora intestinal e aumentar as taxas de sobrevivência no lambari do rabo amarelo. Referências GASTALHO, S.; SILVA, G.; RAMOS, F. Uso de antibióticos em aquacultura e resistência bacteriana: impacto em saúde pública. Acta Farmacêutica Portuguesa , JATOBÁ, A.; MOURIÑO, J. L. P. Lactobacillus plantarum effect on intestinal tract of Oreochromis niloticus fingerlings. Ciência Animal Brasileira, v. 16, n. 1, p , JATOBÁ, A.; SILVA, B. C. Stocking density in the juvenile production of two characins species in a recirculating system. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 67, n. 5, p , NAYAK, S. Probiotics and immunity: a fish perspective. Fish Shellfish Immunol 29:2 e 14, ROTLLANT, J.; TORT, L. Cortisol and glucose responses after acute stress by net handling in the sparid red porgy previously subjected to crowding stress. J Fish Biol, 51: 21 28, STRANGE, R. J. Acclimation temperature influences cortisol and glucose concentrations in stressed channel catfish. Transactions of the American Fisheries Society 109.3, , 1980.