EFFECT OF GRAPE JUICE (Vitis labrusca L.) INTAKE ON LEFT VENTRICULAR HYPERTROPHY AND PLASMA LIPID CONCENTRATION IN HYPERLIPIDEMIC MICE.
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- Ayrton Sampaio Coradelli
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1 EFEITO DA INGESTÃO DO SUCO DE UVA (Vitis labrusca L.) NA HIPERTROFIA VENTRICULAR ESQUERDA E NA CONCENTRAÇÃO DOS LIPÍDIOS PLASMÁTICOS EM CAMUNDONGOS HIPERLIPIDÊMICOS EFFECT OF GRAPE JUICE (Vitis labrusca L.) INTAKE ON LEFT VENTRICULAR HYPERTROPHY AND PLASMA LIPID CONCENTRATION IN HYPERLIPIDEMIC MICE. ANGELA MARIA MARTINS 1, JANAÍNA SILVA 2, JAQUELINE SILVA 2, PAULO SÉRGIO DE SOUZA 3, JULIANA BORGES REIS 1 ORIENTADOR: PROF. DR. JOSÉ ANTONIO DIAS GARCIA 4 1 Mestrandos - Programa de Mestrado Profissional em Ciência e Tecnologia de Alimentos IF Sul de Minas Gerais Campus Machado. 2 Acadêmicas do curso de Ciências Biológicas IF Sul de Minas Campus Muzambinho. 3 Professor IF Sul de Minas Campus Muzambinho. 4 Professor Orientador - Programa de Mestrado Profissional em Ciência e Tecnologia de Alimentos IF Sul de Minas Gerais Campus Machado e Programa de Pós-Graduação em Reprodução, Sanidade e Bem-Estar Animal UNIFENAS Campus Alfenas. RESUMO: INTRODUÇÃO: As uvas apresentam grandes benefícios à saúde devido à sua variedade de compostos bioativos. OBJETIVO: Analisar o efeito do suco de uva (Vitis labrusca L.), sobre a concentração de lipídios plasmáticos e HVE, em camundongos hiperlipidêmicos. MÉTODOS: Em 60 dias de experimento os camundongos hiperlipidêmicos, foram divididos em 3 grupos (n=10), onde HL receberam ração hiperlipídica; HLU receberam ração hiperlipídica e 2g/kg/dia de suco de uva; HLS receberam ração hiperlipídica e 20mg/kg/dia de sinvastatina. RESULTADOS: O tratamento com suco de uva reduziu os níveis de CT, LDL e TG, aumentou os níveis de HDL e preveniu a resistência insulínica, o aumento de PCR e a HVE. CONCLUSÃO: O suco de uva (Vitis labrusca L.) representou uma alternativa de baixo custo para prevenção e tratamento da dislipidemia e HVE. Palavras-chave: Uva, Doenças cardiovasculares, Antocianinas. Keywords: Grape, Cardiovascular diseases, Anthocyanins. INTRODUÇÃO As doenças cardiovasculares (DCV) representam 30% de todas as causas de morte no mundo (GIEHL et al., 2007). Segundo Castelli et al. (1977), seu desenvolvimento está relacionado diretamente com os níveis plasmáticos de LDL colesterol (LDLc) e inversamente com a concentração de HDL colesterol (HDLc). Sendo assim, o acompanhamento dos níveis plasmáticos de HDL em indivíduos dislipidêmicos deve ser rigoroso, uma vez que sua redução pode consequentemente facilitar o desenvolvimento de processos inflamatórios e oxidantes cardiovasculares (GARCIA, et.al., 2011). A regulação do metabolismo lipídico através da alimentação é uma ferramenta importante para diminuição do risco de DCV (SCHAEFER, 2000). O consumo de produtos derivados da uva, como vinho tinto e suco de uva tinto, tem demonstrado efeito antioxidante
2 reduzindo o desenvolvimento da aterosclerose (GIEHL et al., 2007). As uvas (Vitis labrusca L.), segundo Ramsay (2017), contêm cerca de 46% de antocianinas. Estas têm apresentado grandes benefícios à saúde devido as suas atividades biológicas, que incluem propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias, inibição da oxidação do LDL, diminuição dos riscos de doenças cardiovasculares e de câncer (CARDOSO; LEITE; PELUZIO, 2011). O objetivo deste trabalho foi analisar o efeito do suco de uva (Vitis labrusca L.), sobre a concentração de lipídios plasmáticos e hipertrofia ventricular esquerda, em camundongos hiperlipidêmicos. MATERIAL E MÉTODOS A uva utilizada foi da espécie Vitis labrusca L. provinda da colheita do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Sul de Minas Gerais - Campus Muzambinho. O suco foi preparado pelo setor de Vegetais da Agroindústria da mesma instituição sem adição de qualquer soluto, conservante ou água. Protocolo animal Foram utilizados 30 camundongos homozigotos para a ausência do gene do receptor de LDL (LDLr-/-) gerados no background C57BL6, machos com 3 meses de idade, pesando 22 ± 2 g. Os animais foram adquiridos no Laboratório Jackson Estados Unidos da América e criados no biotério da pós-graduação da Universidade José do Rosário Vellano, Alfenas - MG (UNIFENAS), com controle de temperatura e ciclo claro/escuro (12h). Divididos em três grupos (n=10), onde Grupo HL receberam ração hiperlipídica com 20% de gordura total, 1,25% de colesterol, 0,5% de ácido cólico; Grupo HLU receberam ração hiperlipídica com 20% de gordura total, 1,25% de colesterol, 0,5% de ácido cólico e 2g/kg/dia de suco de uva via gavagem; Grupo HLS receberam ração hiperlipídica com 20% de gordura total, 1,25% de colesterol, 0,5% de ácido cólico e 20mg/kg/dia de sinvastatina (obtida comercialmente) via gavagem. Água e ração foram fornecidos ad libitum. Após 60 dias de experimento os animais foram anestesiados por via intraperitoneal (IP), o sangue foi coletado para análise dos níveis séricos de glicose, triglicérides (TG), colesterol total (CT), suas frações (LDL, HDL e VLDL) e proteína C reativa (PCR). Análises séricas Foram mensurados por métodos enzimáticos colorimétricos: triglicérides (TG), colesterol total (CT), lipoproteínas de alta densidade (HDLc) e glicose utilizando protocolos descritos nos kits comerciais. As lipoproteínas de muita baixa densidade (VLDLc) foram calculadas pela divisão dos níveis séricos de TG por 5. As lipoproteínas de baixa densidade (LDLc) foram determinadas pela fórmula: LDLc = CT - (HDLc + VLDLc) (FRIEDEWALD et al., 1972). A resistência insulínica foi calculada pelo índice de Homa ir. Análises morfométricas e histológicas Após toracotomia, o coração foi removido e o ventrículo esquerdo (VE) foi separado, pesado a fresco e a proporção peso ventricular (mg) pelo peso corporal (g) foi calculada (GARCIA et al., 2008). O VE foi processado histologicamente, segundo Junqueira et al., (1979), e lâminas foram coradas com HE e Picrosírius red para determinar o diâmetro dos cardiomiócitos. O uso dos animais e o protocolo experimental foram aprovados pelo Comitê
3 de Ética de Experimentação Animal da Universidade José do Rosário Vellano (UNIFENAS), protocolo n 060/2013. RESULTADOS E DISCUSSÃO Análises séricas Observou-se uma redução significativa de CT, LDLc e TG no Grupo HLU quando comparado ao Grupo HL. Além disso houve aumento significativo de HDLc no grupo que recebeu o tratamento com o suco de uva quando comparado ao grupo que recebeu apenas ração hiperlipídica. O suco de uva também preveniu a resistência insulínica, impedindo o aumento dos níveis de insulina e do índice de Homa ir, preveniu também o aumento dos níveis de PCR quando comparados aos do grupo HL (Tabela 1). Tabela 1 Comparação dos níveis plasmáticos de lipídios, glicose, insulina, índice de Homa (Homa ir) e PCR dos camundongos LDLr-/- dos Grupos HL, HLU e HLS. HL HLU HLS CT (mg/dl) 681 ± 38,2 a 398 ± 15,0 b 330 ± 8,0 c HDL (mg/dl) 27 ± 2,7 a 37 ± 5,2 b 36 ± 1,9 b LDL (mg/dl) 608 ± 32,0 a 329 ± 13,3 b 264 ± 23,1 c TG (mg/dl) 230 ± 5,7 a 159 ± 8,0 b 158 ± 6,3 b Glicose (mmol/l) 5,6 ± 0,2 a 5,3 ± 0,1 a 5,3 ± 0,2 a Insulina (µg/dl) 6,3 ± 0,6 a 3,6 ± 0,2 b 3,2 ± 0,4 b Homair 1,6 ± 0,2 a 0,8 ± 0,05 b 0,7 ± 0,06 b PCR (mg/dl) 15,2 ± 1 a 6,3 ± 1,5 b 5,2 ± 1,2 b Valores expressos como média ± EPM. Letras distintas indicam diferenças significativas entre grupos (p<0,05). Hipertrofia Ventricular Esquerda Verificou-se uma diminuição da área imunorreativa do CD40L no VE do Grupo HLU quando comparado ao Grupo HL, demonstrando efeito positivo do suco de uva, não diferindo significativamente da sinvastatina. O grupo HLU também apresentou uma diminuição do diâmetro dos cardiomiócitos, quando comparado ao Grupo HL. Com relação ao peso ventricular esquerdo (mg) / peso animal (g) o grupo que recebeu o suco de uva apresentou resultados significativos se comparados ao Grupo HL, demonstrando o auxílio do suco de uva na prevenção da hipertrofia ventricular esquerda (Tabela 2). Tabela 2 Comparação da área imunorreativa para CD40L no VE em porcentagem (%), diâmetro dos cardiomiócitos e relação peso ventricular esquerdo (mg)/ peso do animal (g) entre os camundongos dos Grupos HL, HLU e HLS. HL HLU HLS Proporção peso VE (mg)/ peso animal (g) 4,2 ± 0,08 a 3,6 ± 0,01 b 3,1 ± 0,09 c Diâmetro dos cardiomiócitos 25 ± 0,8 a 22,5 ± 1 b 19 ± 1 c Área imunorreativa do CD40L no VE (%) 7,0 ± 0,5 a 3,0 ± 0,3 b 2,6 ± 1 b Valores expressos como média ± EPM. Letras distintas indicam diferenças significativas entre grupos (p<0,05). Estes resultados podem ser explicados pela variedade de compostos secundários com propriedades bioativas presentes na uva, como compostos fenólicos ou polifenóis, que apresentam atividade antioxidante, anticarcinogênica, cardioprotetora, antimicrobiana, neuroprotetora e anti-inflamatória (TOALDO, 2016).
4 CONCLUSÃO A utilização do suco de uva (Vitis labrusca L.) neste modelo animal, representou uma alternativa de baixo custo para prevenção e tratamento da dislipidemia e hipertrofia ventricular esquerda, por apresentar um efeito positivo sobre os níveis séricos de lipídios e resistência insulínica, efeito cardioprotetor e anti-inflamatório, devendo seu consumo ser incentivado junto a uma alimentação equilibrada e hábitos de vida saudáveis. REFERÊNCIAS CARDOSO, L. M.; LEITE, J. P. V.; PELUZIO, M. C. G. Efeitos biológicos das antocianinas no processo aterosclerótico. Rev. Colomb. Cienc. Quim. Farm, v.40, n.1, p , CASTELLI, W. P. et al. HDL cholesterol and other lipids in coronary heart disease: The cooperative lipoprotein phenotyping study. Circ. Aha Journals, v.55, n.5, FRIEDEWALD, W. T. et al. Estimation of the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma, without the use of preparatory ultracentrifugation. Clin. Chem., v.18, p , GARCIA, et al. S-Nitroso-N-Acetylcysteine (SNAC) Prevents Myocardial Alterations in Hypercholesterolemic LDL Receptor Knockout Mice by Antiinflammatory Action. J Cardiovasc Pharmacol, v.51, n.1, p.78-85, GARCIA, J. A. D. et al. Efeito anti-inflamatório da lipoproteína de alta densidade no sistema cardiovascular de camundongos hiperlipidêmicos. Rev Port Cardiol, v.30, n.10, p , GIEHL, M. R. et al. Eficácia dos flavonoides da uva, vinho tinto e suco de uva tinto na prevenção e no tratamento secundário da aterosclerose. Scientia Medica, Porto Alegre, v.17, n.3, jul/set JUNQUEIRA, L.C. et al. Picrosirius staining plus polarization microscopy, a specific method for collagen detection in tissue sections. Histochem Journal, v.11, p , RAMSAY, C. F. H. et al. Cognitive and mood improvements following acute supplementation with purple grape juice in healthy young adults. Eur. J. Nutr, v.56, p , SCHAEFER, E. J. Lipoproteins, nutrition, and heart disease. Am. J. Clin. Nutr, v.75, p , TOALDO, I. M. Potencial bioativo de sucos de uva Vitis labrusca L.: caracterização química e atividade antioxidante, influência de sementes de uva e de pectinases na composição fenólica, e bioatividade do trans-resveratrol em células humanas. Univesidade Federal de Santa Catarina. Florianópolis
5 AGRADECIMENTOS: Ao Professor Orientador Dr. José Antonio Dias Garcia, por sua dedicação e seus ensinamentos. A todos os autores e instituições que contribuíram para a realização deste trabalho. Autor a ser contatado: Angela Maria Martins Rua Paulo de Pádua do Lago, 317 Centro - Campestre/MG CEP: angelamartins1186@yahoo.com.br
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