Capítulo 26. Criação do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis em cercados com substratos artificiais

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1 Capítulo 26 Criação do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis em cercados com substratos artificiais Eduardo Luis Cupertino Ballester 1* ; Paulo César Abreu 1 ; Tito Luís Pissetti 1 ; Ronaldo Olivera Cavalli 2 ; Natália Rudorff 3 ; Wilson Wasielesky Jr. 1 1Fundação Universidade Federal do Rio Grande (FURG), Instituto de Oceanografia CP 474; Rio Grande - RS 2 Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE), Departamento de Pesca e Aqüicultura Recife - PE 3 Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC) * autor correspondente: elcballester@yahoo.com.br Resumo Juvenis de Farfantepenaeus paulensis foram produzidos na densidade de estocagem de 20 camarões m -2, em cercados (área de fundo = 50 m 2 ) no estuário da Lagoa dos Patos em dois tratamentos com três repetições: CS onde foram adicionados substratos artificiais com o objetivo de aumentar a área para desenvolvimento de biofilme em aproximadamente 100% e SS onde não foram adicionados substratos. Durante o ciclo de produção, a biomassa e composição do biofilme foram monitoradas. Após 86 dias, não foram encontradas diferenças significativas (p>0,05) no desempenho dos camarões cultivados nos dois tratamentos. Entretanto, o monitoramento da clorofila a, peso seco e composição de microorganismos indicou que os camarões consumiram o biofilme aderido aos substratos. Reduções significativas no número de nematódeos > 500 µm, tintinídeos e rotíferos presentes no biofilme sugerem uma possível seletividade dos camarões por estes organismos. Além disso, a redução na concentração de clorofila a indicou também um consumo das microalgas pelos camarões. Apesar do aumento da área para desenvolvimento de biofilme não ter resultado em melhoria do desempenho dos camarões, verificou-se que durante o período de maior consumo de microorganismos do biofilme, os camarões apresentaram as maiores taxas de crescimento durante todo o experimento. Framing of the Pink Shrimp Farfantepenaeus paulensis in Pens with Artificial Substrates Abstract Farfantepenaeus paulensis juveniles were reared at a stocking density of 20 shrimp m -2 in pen structures (bottom area = 50 m 2 ), installed at the Patos Lagoon estuary in two treatments with three repetitions: CS where artificial substrates (polyethylene nets 1 mm mesh size) were added to increase approximately 100% the area for biofilm development and SS where no substrates were added. During the experimental period biofilm biomass and composition were assessed. After 86 days of culture no significant differences (P>0.05) on shrimp performance were found between treatments. However, examination of biofilm chlorophyll a, dry weight and composition indicated that shrimp were actively consuming biofilm attached to artificial substrates. Significant decrease on the abundance of nematodes > 500 µm, tintinids and rotifers indicated that shrimp were selectively predating on these organisms. Moreover, decrease of biofilm chlorophyll a concentration suggests the consumption of micro algae by shrimp. Though the increase in the area for biofilm development did not improve shrimp performance, it was observed that during the period when shrimp most consumed biofilm microorganisms they presented the highest growth rates of all experiment.

2 Criação do camarão-rosa em cercados Introdução O camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis é uma espécie nativa da América do Sul, distribuída desde a costa nordeste do Brasil (Ilhéus, 14º S) até o litoral nordeste da Argentina (Mar del Plata, 38º S) (D Incao, 1995). Este camarão representa um importante recurso pesqueiro nas regiões sul e sudeste do Brasil e é uma das espécies de maior valor capturado na pesca artesanal realizada no estuário da Lagoa dos Patos (Valentini et al., 1991; D Incao et al., 2002). Entretanto, grandes flutuações nos volumes capturados no estuário têm sido registradas nas últimas décadas (D Incao et al., 2002), o que afeta diretamente a comunidade de pescadores artesanais que vivem as margens da Lagoa dos Patos (Wasielesky et al., 2004). Como alternativa para a geração de renda das comunidades de pescadores artesanais, pesquisas vêm sendo realizadas para determinar a possibilidade da produção do camarão-rosa em sistemas de baixo custo, como cercados montados no estuário da Lagoa dos Patos (Wasielesky, 2000). Os resultados encontrados foram promissores, indicando que o sistema de produção proposto tem grande potencial (Wasielesky et al., 2001; Wasielesky et al., 2004). Além disso, foi demonstrado que a produção em cercados pode ser desenvolvida na região em questão sem causar maiores impactos ambientais (Soares et al., 2004; Poersch et al., 2007). Como o sistema de produção proposto é dirigido a atender comunidades de baixa renda, a redução dos custos de produção é extremamente importante para atingir a viabilidade econômica (Wasielesky et al., 2004). Sabe-se que, na produção de camarões, cerca de 50% dos custos de produção são atribuídos a gastos com a alimentação (Akiyama et al., 1992; Epp, 2002). Em contrapartida, já foi demonstrado que o alimento natural presente no ambiente de criação pode suprir uma significativa parte dos requerimentos nutricionais dos camarões (Anderson et al., 1987; Cuzon et al., 2004; Abreu et al., 2007). A utilização do biofilme, que pode ser definido como uma comunidade de microorganismos que se forma sobre superfícies submersas (Thompson et al., 2002), demonstrou ser uma interessante forma de disponibilizar maior quantidade de alimento natural para os camarões cultivados (Bratvold e Browdy, 2001; Moss e Moss, 2004). O efeito positivo da utilização de biofilme já foi demonstrado inclusive para o camarão-rosa durante a fase de berçário (Thompson et al., 2002; Ballester et al., 2003; Jensen et al., 2006; Ballester et al., 2007). Entretanto não existem estudos que demonstrem o aproveitamento do biofilme por camarões desta espécie durante a fase de engorda, quando os camarões atingem maior porte. Portanto, o objetivo deste estudo foi determinar a influência do uso de substratos artificiais que aumentam a área para desenvolvimento de biofilme no desempenho de juvenis do camarão-rosa cultivados em cercados instalados no estuário da Lagoa dos Patos. Para isto, durante o período experimental, foi monitorada a biomassa e composição de microorganismos do biofilme, presentes sobre os substratos artificiais.

3 2. Material e Métodos Criação do camarão-rosa em cercados 261 Condições do sistema de produção e delineamento experimental O experimento foi realizado de janeiro a abril de 2004, na enseada Saco do Justino (32º S, 052º W), estuário da Lagoa dos Patos, Rio Grande, RS, Brasil, totalizando um ciclo de produção de 86 dias. Seis cercados circulares com área de fundo de 50 m 2, confeccionados com malha de poliéster revestida de PVC, com abertura de malha de 5,0 mm e altura de 2,1 m, foram instalados na enseada (profundidade média de 0,80 m) com estrutura de sustentação feita de bambus. Em três cercados, aleatoriamente escolhidos, foram adicionados 25 m 2 (50% da área de fundo) de substrato artificial (tela de polietileno, abertura de malha de 1,0 mm), para aumentar a superfície disponível para fixação do biofilme em aproximadamente 100% (tratamento com substratos - CS). Estes substratos foram colocados verticalmente na área central dos cercados, enquanto que nos outros três cercados não foram adicionados substratos artificiais (tratamento sem substratos SS). Os substratos foram colocados na água 25 dias antes da estocagem dos camarões, com o objetivo de permitir o desenvolvimento do biofilme (Santos, 2003). Obtenção dos animais para o experimento, alimentação e monitoramento do crescimento e sobrevivência dos camarões Os camarões utilizados no experimento foram obtidos a partir de larvicultura realizada no Laboratório de Maricultura da Estação Marinha de Aquacultura da FURG. A metodologia para produção das pós-larvas está descrita nos trabalhos de Marchiori (1996) e Ballester et al. (2007a). Quando atingiram 29 dias após a metamorfose para pós-larva (PL 29 ) os camarões foram aclimatados às condições de temperatura e salinidade encontradas na enseada Saco do Justino e transferidos para gaiolas-berçário feitas de poliéster revestido com PVC, com 25 m 2 de área de fundo e abertura de malha de 1,5 mm, onde foram estocados na densidade de 320 PLs m -2. Os camarões permaneceram nestas estruturas até atingirem peso mínimo superior a 0,36 g, quando seu tamanho permite que sejam estocados nas estruturas de engorda sem risco de fuga pela malha de 5 mm (Jensen et al., 2004). Durante os 43 dias de berçário, os camarões foram alimentados quatro vezes ao dia com ração comercial específica para a fase de berçário (Purina, 40% de proteína bruta). No momento do povoamento dos cercados utilizados para o experimento, os camarões apresentavam peso médio (± DP) de 0,80 ± 0,28 g. Nos cercados os camarões foram estocados em uma densidade de 20 juvenis m -2. Durante o período experimental, os camarões foram alimentados duas vezes ao dia. Como a atividade alimentar do camarão-rosa é maior à noite (Santos, 2003), 1/3 da quantidade diária de alimento era fornecida às 8:00, e às 21:00, era fornecido o restante de alimento. A taxa de arraçoamento inicialmente empregada foi 10% da biomassa total de camarões (Wasielesky, 2000), sendo ajustada ao longo do experimento de acordo com o consumo alimentar. Durante a primeira semana de experimento, os camarões foram alimentados com a mesma ração utilizada na fase de berçário, sendo esta oferecida a lanço. Na semana seguinte, a alimentação foi realizada utilizando-se uma mistura da ração de berçário e a ração de engorda (35% de proteína bruta) na razão de 1:1. Para controlar o consumo alimentar dos camarões, a ração foi oferecida em alimentadores do tipo bandeja (uma bandeja de 40 cm de diâmetro por

4 Criação do camarão-rosa em cercados 262 unidade experimental). A partir da terceira semana do ciclo de produção a alimentação foi realizada exclusivamente com ração de engorda. Ao final do experimento a taxa de conversão alimentar aparente (TCA) foi calculada baseada na sobrevivência, no ganho de biomassa e no total de ração oferecida em cada unidade experimental. O crescimento dos camarões foi monitorado através de biometrias realizadas a cada 14 dias. Trinta camarões de cada unidade experimental eram amostrados aleatoriamente e seu peso úmido individual registrado em balança digital com precisão de 0,01 g. Após a pesagem, os camarões eram devolvidos aos seus respectivos cercados. A partir destes dados foi determinado o aumento de peso semanal (cumulativo) e calculada a taxa de crescimento registrada pelos camarões entre cada biometria (período de 14 dias). Ao final do experimento, todos os camarões foram retirados dos cercados, com o auxílio de uma rede de arrasto, com o objetivo de determinar a sobrevivência e a biomassa final de cada unidade experimental. Monitoramento da qualidade da água do sistema de produção Durante o período experimental foram verificados diariamente, em um ponto localizado a 5 m dos cercados, os valores de temperatura da água (8:00 e 17:00 - termômetro de mercúrio com precisão de 0,5 C), salinidade (refratômetro manual Atago, precisão 1 ) e transparência (Disco de Secchi, precisão de 5 cm). A concentração de oxigênio dissolvido (oxímetro Handylab OX1/Set SCHOTT ) e o ph (phmetro Handylab 2 BNC SCHOTT ) foram monitorados uma vez por semana às 8:00 e 17:00 em um ponto controle, afastado 200 m da área de criação, e em um ponto central aos cercados. Nestes mesmos locais eram colhidas, a cada quinze dias, amostras de água para posterior determinação da concentração de amônia total (UNESCO, 1983). Clorofila a, peso seco e microorganismos do biofilme Para determinar a composição de microorganismos, concentração de clorofila a e peso seco do biofilme formado nos substratos artificiais do tratamento CS, foram retiradas a cada 14 dias, amostras dos substratos. Para avaliar a concentração de clorofila a no biofilme eram retirados três fragmentos de 2 x 2 cm, por tratamento, dos substratos artificiais colocados nos cercados. Esses fragmentos foram coletados a 35 cm do fundo, conforme metodologia proposta por Santos (2003). A extração do pigmento fotossintético foi feita em frascos contendo 20 ml de acetona 90% (Merck PA) mantidos no escuro a -12 ºC por 24 horas. A concentração de clorofila a foi determinada por espectrofotometria (Strickland e Parsons, 1972), utilizando-se cubeta com 1 cm de trajeto ótico em um espectrofotômetro digital (B 342 II- Micronal ). Para o cálculo das concentrações foram utilizadas as equações propostas por Jeffrey e Humphrey (1975). Para determinar o peso seco do biofilme foi realizada coleta semelhante à descrita anteriormente. Três fragmentos dos substratos artificiais de 2 x 2 cm eram secos em estufa a 60 C até atingir peso constante (aproximadamente 24 horas). A pesagem foi realizada em balança analítica digital com precisão de 0,0001 grama (Sartorius, modelo MC1 Analytic 210S). Após a pesagem os fragmentos eram limpos e novamente levados à estufa e pesados, obtendo-se assim o peso seco do biofilme por diferença.

5 Criação do camarão-rosa em cercados 263 Para a caracterização e contagem dos microorganismos presentes no biofilme, amostras de 2 x 2 cm dos substratos artificiais foram cortados e fixados em solução de formol 4%. Para remover o biofilme dos substratos foi utilizado um aparelho de ultrasom (Ultrasonic Homogeneizer 4710 Series, ColeParmer Instrument Co.) na amplitude de 20 Khz de 6 a 8 vezes em intervalos de 15 a 20 segundos seguidos por 15 a 20 segundos de descanso para evitar aquecimento da amostra (Thompson et al., 2002). Para contagem de bactérias e flagelados, subamostras de 0,1 ml foram filtradas em membrana de policarbonato (Nuclepore 0,2 μm de poro, diâmetro 25 mm) previamente escurecidos com Irgalan black e corados com o fluorocromo DAPI na concentração final de 10 g ml -1 (Porter e Feig, 1980). As contagens foram realizadas em um microscópio de epifluorescência Zeiss Axioplan, equipado com conjunto de filtros de luz (BP365/11; FT 395; LP 397), com magnificação final de 1000 x. Foram realizadas contagens em 30 campos por lâmina escolhidos aleatoriamente. Para contagem de nematódeos, copépodos, copepoditos, ciliados (tintinídeos e vorticelídeos), cistos de ciliados e rotíferos presentes no biofilme, subamostras de 0,1 ml a 2,1 ml foram colocados em câmara de sedimentação. A contagem foi realizada em um microscópio invertido Zeiss Axiovert equipado com contraste de fase, a magnificação final utilizada foi de 200 a 400 x. Foram contados no mínimo 30 campos por câmara, escolhidos aleatoriamente (Utermöhl, 1958). A identificação dos gêneros mais abundantes de diatomáceas e cianobactérias presentes no biofilme foi realizada, quando possível, segundo Round et al. (1990), Komárek e Anagnostids (2005). Análise estatística Os dados referentes à sobrevivência, peso final, biomassa final e taxa de conversão alimentar aparente dos camarões cultivados foram submetidos ao teste t (Sokal e Rohlf, 1969). Para verificar variações significativas ao longo do experimento na taxa de crescimento dos camarões em cada intervalo entre as biometrias e na concentração de clorofila a, peso seco e a abundância de microorganismos do biofilme foi utilizada análise de variância ANOVA. Quando diferenças significativas foram determinadas foi aplicado o teste a posteriori de Tuckey (Sokal e Rohlf, 1969) (α=0,05) Quando os dados analisados não obedeceram às premissas necessárias para utilização do teste t ou da ANOVA, foram realizadas transformações matemáticas (log (x) ou log (x + 1)). A relação entre a concentração de clorofila a e o peso seco do biofilme foi determinada através da análise de correlação de Pearson (Snedecor e Cochran, 1982). 3. Resultados Qualidade da água A temperatura média da água na área do sistema de produção declinou ao longo do experimento, nos primeiros quarenta dias do ciclo de produção foram registrados valores médios em torno dos 26 ºC, enquanto que na segunda metade do período experimental as médias foram reduzidas para valores em torno dos 24 ºC. Com relação à salinidade ocorreu o inverso, foram registrados valores de 12 na primeira metade do ciclo de produção, enquanto que na segunda metade do

6 Criação do camarão-rosa em cercados 264 experimento a salinidade média foi de aproximadamente 18. Os valores de transparência da água registrados foram mais estáveis, com média de aproximadamente 60 cm durante todo o experimento. Os valores mínimos e máximos e a média ( DP) da temperatura, salinidade e transparência da água durante o período experimental são apresentados na Tabela 1. Tabela 1 - Valores médios ( DP), mínimos e máximos da temperatura (ºC), salinidade ( ) e transparência da água (cm) durante o ciclo de produção do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis em cercados no estuário da Lagoa dos Patos Variável Média ( DP) Mínimo Máximo Temperatura 8:00 23,9 1, Temperatura 17:00 26,9 2, Salinidade 15,26 7, Transparência 63,43 13, Em relação à concentração de oxigênio dissolvido, apenas no último dia de experimento foi registrado um valor abaixo do recomendado para a criação de camarões (2,2 mg L -1 ) (Van Wyk e Scarpa, 1999). Foram registrados valores estáveis de ph = 8,0 durante todo o ciclo de produção, sendo que não houve variação entre o ponto controle e o sistema de produção nos dias de medição; o mesmo foi verificado para as concentrações de amônia, cujo valor máximo registrado foi 0,08 mg L -1, bem abaixo dos níveis considerados nocivos para esta espécie (Wasielesky, 2000). Não foram detectadas diferenças significativas (p>0,05) entre os pontos controle e de cultivo para nenhuma destas variáveis. Os valores mínimos e máximos e a média ( DP) da concentração de oxigênio dissolvido (mg L -1 ), ph e concentração amônia total (mg L -1 ), são apresentados na Tabela 2. Tabela 2 - Valores médios ( DP), mínimos e máximos (mg L -1 ) do oxigênio dissolvido (OD), ph e amônia total (N-AT) registrados durante o ciclo de produção do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis em cercados. Variável Horário Média (±DP) Mínimo Máximo OD Cercados 6,0 2,3 2,2 9,9 8:00 OD Controle 6,8 1,6 4,5 9,9 OD Cercados 10,7 2,1 8,0 11,7 17:00 OD Controle 10,9 2,2 8,0 11,7 8:00 8,2 0,4 7,6 8,7 Ph 17:00 8,7 0,2 8,4 9,2 Amônia total 0,01 0,03 nd 0,08 nd = não detectável pelo método de análise Composição e variação nas densidades de microorganismos do biofilme O biofilme formado nos substratos artificiais era composto principalmente por diatomáceas, cianobactérias filamentosas, bactérias, flagelados, ciliados, copépodos, copepoditos, rotíferos e nematódeos. Entre as diatomáceas presentes no biofilme as mais abundantes eram dos gêneros Melosira, Surirela e Pleurosigma; enquanto que entre as cianobactérias dominavam Leptolyngbia, Phormidium e Homolothrix. Os ciliados

7 Criação do camarão-rosa em cercados 265 presentes no biofilme pertenciam aos grupos dos vorticelídeos e tintinídeos, enquanto que os copépodos a ordem dos Harpacticoides. Entre os nematódeos foram identificados organismos pertencentes aos gêneros Axonolaimus, Talassomonhystera e Theristus. Os nematódeos pertencentes a estes gêneros são classificados, em sua maioria, como comedores de depósito não seletivos. Os rotíferos encontrados no biofilme não foram identificados. A variação na concentração de clorofila a e do peso seco do biofilme são apresentados na Figura 1. A correlação de Pearson entre estas variáveis, apresentou um coeficiente r = 0,71. Cianobactérias e diatomáceas presentes no biofilme provavelmente estavam contribuindo com a maior parte da biomassa autotrófica. A análise da clorofila a e do peso seco revelou um padrão semelhante para as duas variáveis, ou seja, ambas apresentaram um aumento constante ao longo do período experimental e, no 42 o dia de experimento atingiram valores significativamente superiores (p<0,05) aos iniciais. Esta diferença significativa foi mantida até o 56 o dia, quando então foi registrada uma queda significativa destes valores (p<0,05) no 70 o dia de experimento e ambas as variáveis voltaram a aumentar significativamente (p<0,05) ao final do experimento (86 o dia) peso seco (mg.cm -2 ) clorofila a (ug.cm -2 ) Tempo (dias) Figura 1. Média ( EP) da variação nas concentrações de clorofila a e no peso seco do biofilme formado sobre substratos artificiais instalados em cercados para a produção de Farfantepenaeus paulensis. As variações das densidades de bactérias e flagelados presentes no biofilme são apresentados nas Figuras 2 e 3, respectivamente. Estes microorganismos apresentaram padrões de variação semelhantes. As bactérias atingiram valores significativamente maiores (p<0,05) no 28 o dia de experimento e no 42 o dia alcançaram à máxima densidade registrada durante o experimento (29,24 x 10 6 cm -2 ), sendo posteriormente registradas reduções significativas na sua abundância nos dias 56 e 70 e um novo aumento significativo no último dia de experimento. Quanto aos flagelados foi

8 Criação do camarão-rosa em cercados 266 registrado um aumento significativo na sua densidade no 42 o dia de experimento, seguido por uma redução na sua densidade nos dias 56 e 70, e voltando a subir significativamente no último dia de experimento, quando atingiu o valor máximo (10,4 x 10 4 cm -2 ) bactérias.cm tem po (d ias) Figura 2. Média ( EP) da variação na densidade de bactérias aderidas ao biofilme formado sobre substratos artificiais instalados em cercados para a produção de Farfantepenaeus paulensis flagelados.cm tem p o (d i as)

9 Criação do camarão-rosa em cercados 267 Figura 3. Média ( EP) da variação na densidade de flagelados presentes no biofilme formado sobre substratos artificiais instalados em cercados para a produção de Farfantepenaeus paulensis. As variações nas densidades de copépodos, copepoditos, tintinídeos, vorticelídeos, rotíferos e cistos de ciliados encontrados no biofilme são apresentados na Figura 4. Foi registrada uma redução significativa no número de tintinídeos, vorticelídeos, cistos de ciliados e rotíferos entre os dias 28 e 42. Entre os dias 56 e 70 o número de tintinídeos e rotíferos voltou a ser reduzido significativamente. Apesar de terem sido registradas variações nas densidades de copépodos e copepoditos, não foram detectadas diferenças significativas na sua densidade ao longo do experimento (p>0,05). Durante as contagens foi observada uma sensível redução no número de nematódeos com mais de 500 µm de comprimento, a partir do 42 o dia de experimento (Figura 5), o mesmo não foi observado para os nematódeos < 500 µm que apresentaram um aumento considerável em sua abundância após o 28 o dia de experimento (Figura 5). Após o 56 o dia de experimento, foi registrada uma redução significativa no número de nematódeos com comprimento maior que 500 µm e no número de tintinídeos e rotíferos (Figuras 4 e 5). A redução da densidade destes microorganismos acompanhou a redução do peso seco do biofilme no mesmo período (Figura 1). Após este período, foi registrado um aumento significativo (p<0,05) na densidade de bactérias, flagelados, nematódeos menores que 500 µm e rotíferos, o que coincide com o aumento no peso seco do biofilme registrado entre os dias 70 e 86. Figura 4. Média ( EP) da variação na densidade de copépodos, copepoditos, tintinídeos, vorticelídeos, rotíferos e cistos de ciliados encontrados no biofilme formado sobre substratos artificiais instalados em cercados para a produção de Farfantepenaeus paulensis.

10 Criação do camarão-rosa em cercados 268 Figura 5 - Média ( EP) da variação nas densidades do número total de nematódeos e do número de nematódeos com comprimento maior que 500 µm encontrados no biofilme formado sobre substratos artificiais instalados em cercados para a produção de Farfantepenaeus paulensis. Desempenho dos camarões Ao final do experimento não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) entre os valores de peso, sobrevivência, taxa de conversão alimentar aparente e biomassa produzida, para os camarões cultivados nos tratamentos CS e SS (Tabela 3). Na Figura 6 é apresentado o aumento de peso dos camarões durante o experimento e na Figura 7 é apresentada à taxa de crescimento dos camarões nos períodos compreendidos entre as biometrias. Não foram detectadas diferenças significativas entre as taxas de crescimento dos camarões cultivados nos dois tratamentos (P>0,05), entretanto, tanto para o tratamento SS quanto para o tratamento CS, foram registradas taxas de crescimento significativamente maiores (p<0,05) nos períodos compreendidos entre os dias 28 e 42 e entre os dias 56 e 70 (Figura 7). Tabela 3 - Valores médios (± DP) de peso final, sobrevivência, biomassa final e taxa de conversão alimentar aparente (TCA) durante o ciclo de produção de Farfantepenaeus paulensis em cercados com e sem substrato artificial. Diferenças significativas entre os tratamentos não foram encontradas (p>0,05). Tratamento Peso Final Sobrevivência Biomassa TCA g % g m 2 Com Substrato 11,17 ± 1,72 79,4 ± 3,0 177,3 ± 6,2 1,63 ± 0,18 Sem Substrato 10,99 ± 1,87 85,6 ± 10,1 187,3 ± 14,4 1,65 ± 0,18

11 Criação do camarão-rosa em cercados CS SS 6 Peso (g) Tempo (dias) Figura 6 - Média ( EP) do peso de juvenis de Farfantepenaeus paulensis cultivados em cercados com (CS) e sem (SS) substratos artificiais durante 86 dias. 3,0 2,5 2,0 CS SS 1,5 Taxa de crescimento (g) 1,0 0, Tempo (dias) Figura 7 - Média ( EP) da taxa de crescimento de juvenis de Farfantepenaeus paulensis cultivados em cercados com (CS) e sem (SS) substratos artificiais durante 86 dias. 4. Discussão A qualidade da água, monitorada durante o experimento, foi considerada aceitável para a produção do camarão-rosa. Apesar de terem sido registrados valores

12 Criação do camarão-rosa em cercados 270 de concentração de oxigênio dissolvido abaixo do recomendado para a produção de camarões peneídeos (Van Wyk e Scarpa, 1999), estes registros foram pontuais e o desempenho dos camarões foi considerado satisfatório quando comparado com outros estudos realizados em condições semelhantes (Wasielesky et al., 2001; Soares et al., 2004). Os resultados de crescimento e sobrevivência dos camarões cultivados neste estudo comprovam a viabilidade da produção de camarão-rosa em cercados no estuário da Lagoa dos Patos, pois, em 86 dias, os camarões atingiram tamanho comercial (aproximadamente 11 gramas) e sobrevivência e taxa de conversão alimentar comparável a estudos realizados com outras espécies de camarões peneídeos (Peixoto et al., 2003; Krumenauer et al., submetido). No presente estudo, a utilização de substratos artificiais para aumento da área para crescimento de biofilme não resultou em diferença significativa no desempenho dos camarões cultivados nos tratamentos avaliados. Entre as possíveis hipóteses para explicar tal fato estão à baixa densidade de estocagem utilizada no experimento e também à presença dos substratos dos próprios cercados (malha de polyester dos próprios cercados) que proporcionaram área para o desenvolvimento de biofilme mesmo no tratamento SS, disponibilizando assim, biofilme para o consumo dos camarões ali cultivados. Em estudos anteriores os resultados do emprego de substratos artificiais para aumento da quantidade de biofilme com o objetivo de melhorar o desempenho de camarões cultivados tem sido variável. Enquanto Bratvold e Browdy (2001) e Otoshi et al. (2006) obtiveram maior produtividade durante o ciclo de produção de juvenis do camarão-branco Litopenaeus vannamei utilizando substratos artificiais (Aquamats ), Samocha et al. (1993) não observou aumento na sobrevivência ou no crescimento de pós-larvas de camarão-branco cultivadas na presença de substratos extras e KumLu et al. (2001) reportaram crescimento significativamente menor (p<0,05) para Metapenaeus monoceros cultivados em aquários que receberam substratos artificiais para aumentar a área disponível para o crescimento de biofilme em aproximadamente 200% em relação ao tratamento controle, sem adição de substratos. Segundo Bratvold e Browdy (2001) a presença dos substratos além de disponibilizar alimento na forma de biofilme para os camarões cultivados, permite uma melhor distribuição dos camarões nos tanques de produção, reduzindo assim o efeito negativo do aumento da densidade de estocagem sobre a sobrevivência e o crescimento dos camarões. Este relação inversa entre densidade de estocagem e desempenho já foi demonstrada para outras espécies de camarões peneídeos (Rodriguez et al., 1993; Martin et al., 1998; Moss e Moss, 2004), incluindo o próprio camarão-rosa (Wasielesky et al., 2001). Como no presente estudo a densidade de estocagem utilizada foi relativamente baixa (20 camarões m -2 ), não foi possível verificar o efeito da maior distribuição dos camarões proporcionados pela presença dos substratos. Entretanto, em estudos anteriores, realizados com pós-larvas de camarão-rosa cultivadas em uma densidade de 300 camarões m -2, em gaiolas instaladas na mesma área onde foi implantado o sistema de produção descrito neste estudo, o efeito do biofilme e dos substratos artificiais proporcionou aumento significativo no desempenho dos camarões (Ballester et al., 2003; Ballester et al., 2007). Estudos a respeito da dieta de camarão-rosa demonstraram que estes camarões consomem microalgas, macroalgas, vegetais superiores, moluscos, poliquetas,

13 Criação do camarão-rosa em cercados 271 pequenos crustáceos além de matéria orgânica, detritos e sedimento (Jorgensen, 1998; Silva e D Incao, 2000; Soares et al., 2005). Soares et al. (2005) demonstraram que organismos bentônicos, como poliquetas e tanaidáceos estão entre os itens preferenciais ingeridos por camarão-rosa cultivados em cercados. Entretanto, foi demonstrado que durante o ciclo de produção de camarões, a densidade de invertebrados bentônicos é rapidamente reduzida, em períodos que variam de três a oito semanas (Allan et al., 1995; Soares et al., 2005). No presente estudo, o declínio na abundância de microorganismos do biofilme foi mais evidente a partir da sexta semana de cultivo, além de uma redução na biomassa total do biofilme formado nos substratos, conforme indicam os valores de clorofila a e peso seco do biofilme. Estas alterações da biomassa e da composição do biofilme são um indício de que os camarões estavam buscando ali, o alimento necessário para seu desenvolvimento quando, provavelmente, já havia declinado a abundância de organismos bentônicos disponíveis para sua ingestão. O posterior aumento na biomassa do biofilme registrado entre os dias 70 e 86 é derivado, provavelmente, da recuperação das comunidades de microorganismos que ali se desenvolveram, devido ao recrutamento, proporcionado pelo ambiente natural adjacente e a presença de nichos vagos decorrentes da redução na abundância de organismos presentes no biofilme. Apesar do desempenho dos camarões não ter sido afetado pela maior quantidade de biofilme disponível no tratamento CS, houve um aumento considerável das taxas de crescimento dos camarões cultivados nos dois tratamentos em dois períodos do experimento (28-42 e 56-70) coincidindo com uma redução significativa de determinados grupos de microorganismos presentes no biofilme (Figuras 6 e 7). As variações nas densidades de microorganismos registradas durante o experimento podem ter sido causadas por variações ambientais e/ou relações tróficas existentes entre os diferentes grupos de microorganismos. Porém, é mais provável, que a predação seletiva dos camarões foi o fator principal que determinou a redução na abundância de determinados microorganismos presentes no biofilme. O padrão de variação na densidade de bactérias e flagelados acompanhou o crescimento de peso seco do biofilme até o 42 o dia de experimento, entretanto, a partir desta data o peso seco do biofilme continuou a subir, enquanto a densidade de bactérias e flagelados diminuiu, indicando que outros organismos poderiam estar consumindo bactérias e flagelados. Apesar das variações entre flagelados e bactérias terem mostrado uma relação próxima, provavelmente resultado de interações tróficas, cabe salientar que as bactérias podem sofrer predação por outros microorganismos presentes no biofilme, como os ciliados e nematódeos. Além disso, os flagelados também sofrem predação por ciliados e rotíferos. Os nematódeos < 500 µm foram os organismos que apresentam maior crescimento entre os dias 42 e 56, e estes organismos são comedores de depósitos e possíveis consumidores de bactérias. No período compreendido entre os dias 56 e 70 foi registrada uma redução significativa no número de rotíferos, tintinídeos e nematódeos (> 500 µm), indicando uma possível seletividade dos camarões por estes organismos. Da mesma forma, no período compreendido entre os dias 28 e 42 foram registradas reduções significativas na densidade de rotíferos, vorticelídeos, tintinídeos e cistos de ciliados, presentes no biofilme e, a partir do 42 o dia do ciclo de produção foi constatada a redução significativa na quantidade de flagelados e bactérias presentes no biofilme. Todos estes

14 Criação do camarão-rosa em cercados 272 microorganismos já foram identificados como parte da dieta de camarões peneídeos em ambiente natural (Allan e Maguire, 1992; Allan et al., 1995; Nunes et al., 1997). Além disso, a redução na concentração de clorofila a do biofilme apontou, também, para um consumo das microalgas presentes no biofilme. Em estudos anteriores, foi observada uma seletividade de pós-larvas de camarão-rosa pelo consumo de diatomáceas cêntricas presentes no biofilme (Preto et al., 2005; Ballester et al., 2007). Estudos anteriores já demonstraram a contribuição que os microorganismos presentes no biofilme podem produzir, em termos nutricionais. Recentemente Silva et al. (2008) determinaram que as bactérias, cianobactérias filamentosas, flagelados e principalmente os nematódeos presentes no biofilme são uma importante fonte de lipídeos e que as diatomáceas cêntricas e os nematódeos contribuem significativamente para o teor de proteína do biofilme. Schlechtriem et al. (2004) demonstraram que os nematódeos podem ser uma fonte de alimento importante para larvas de carpa e salientaram a sua importância como fonte de ácidos graxos poliinsaturados. Além disso, Zhukova e Kharlamenko (1999) relatam que flagelados e ciliados são capazes de sintetizar ácidos graxos poliinsaturados de cadeias longas a partir de ácidos graxos insaturados, encontrados nas bactérias. Os resultados destes estudos demonstram que o consumo destes microorganismos pelos camarões pode acrescentar nutrientes de alta qualidade e fácil digestibilidade na sua dieta, portanto a presença de substratos para formação de biofilme no ambiente de criação seria uma maneira de estimular o crescimento destes microorganismos e disponibilizá-los para os camarões cultivados. Os resultados deste experimento demonstraram que os camarões utilizaram o biofilme como fonte de alimento e que a abundância de determinados microorganismos, de alto valor nutritivo, presentes na comunidade do biofilme foi significativamente reduzida ao longo do experimento. Coincidentemente, esta redução foi notável no período em que, como determinado em estudos anteriores, ocorre à redução dos organismos bentônicos, também consumidos pelos camarões. Entretanto, o aumento de 100% na área disponível para desenvolvimento do biofilme não resultou em melhoria do desempenho dos camarões cultivados. A presença dos substratos dos cercados (onde naturalmente ocorre o crescimento de biofilme) e a baixa densidade de estocagem de camarões utilizadas neste estudo podem ter reduzido o benefício do uso de substratos extras para disponibilização de maior quantidade de biofilme. Portanto, é recomendado que sejam realizados estudos com emprego densidades de estocagem maiores, onde provavelmente, o uso de substratos artificiais e biofilme possam colaborar para melhoria no desempenho do camarão-rosa. Agradecimentos Os autores gostariam de agradecer as pesquisadoras Clarisse Odebrecht, Marli Bergesh e Taciana Cramer pelo auxílio na identificação de diatomáceas, cianobactérias e nematódeos, respectivamente. Wilson Wasielesky Jr., Ronaldo O. Cavalli e Paulo César Abreu são bolsistas de produtividade do CNPq e Tito Luis Pissetti recebeu bolsa de mestrado do CNPq durante a realização deste estudo.

15 Referências Bibliográficas Criação do camarão-rosa em cercados 273 Abreu, P.C.; E.L.C. Ballester, C. Odebrecht, W.Jr. Wasielesky, R.O. Cavalli, W. Granéli, e A.M. Anésio Importance of biofilm as food source for shrimp (Farfantepenaeus paulensis) evaluated by stable isotopes (d13c and d15n). Journal of Experimental Marine Biology and Ecology (347): Akiyama, D.; W.G. Dominy, e A.L. Lawrence Penaeid shrimp nutrition. In: FAST, AW e LJ LESTER. Marine shrimp culture: principles and practices. Elsevier, Amsterdan. P Allan, G.F.; e G.B. Maguire Effects of stocking density on production of Penaeus monodon Fabricius in model farming ponds. Aquaculture (107): Allan, G.F.; D.J.W. Moriarty, e G.B. Maguire Effects of pond preparation and feeding rate on production of Penaeus monodon Fabricius, water quality, bacteria and benthos in model farming ponds. Aquaculture (130): Anderson, R.K.; P.L. Parker, e A.L. Lawrence A 13 C/ 12 C tracer study of the utilization of presented feed by commercially important shrimp Penaeus vannamei in a pond growout system. Jornal of the World Aquaculture Society (18): Ballester, E.L.C.; W. Wasielesky, R.O. Cavalli, M.H.S. Santos, e P.C. Abreu Influência do biofilme no crescimento do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis em sistemas de berçário. Atlântica ( 25): Ballester, E.L.C.; D.W. Mutti, C.N. Fróes, L.H. Poersch, T.G. Machado e W.Jr. Wasielesky. 2007a. Larvicultura do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis. In: XII COLACMAR - Congresso latinoamericano de ciências do mar, 2007, Florianópolis. XII COLACMAR, Ballester, E.L.C.; W.Jr. Wasielesky, R.O. Cavalli, e P.C. Abreu Nursery of the pink shrimp Farfantepenaeus paulensis in cages with artificial substrates: biofilm composition and shrimp performance. Aquaculture (265): Bratvold, D.; e C.L. Browdy Effects of sand sediment and vertical surfaces (AquaMats TM ) on production, water quality, and microbial ecology in an intensive Litopenaeus vannamei culture system. Aquaculture (195): Cuzon, G.; A. Lawrence, G. Gaxiola, e J. Guillaume Nutrition of Litopenaeus vanamei reared in pond or in tanks. Aquaculture (235): D incao, F Taxonomia, padrões distribucionais e ecológicos dos Dendobranchiata (Crustacea Decapoda) do Brasil e Atlântico Ocidental. Curitiba, UFP. (Tese de Doutorado) 365p. D incao, F.; H. Valentini, e L.F. Rodrigues Avaliação da pesca de camarões nas regiões Sudeste e Sul do Brasil. Atlântica (20): Epp, M.A Stable isotopes in shrimp aquaculture. World Aquaculture (33): Jeffrey, S.W. e G.F. Humphrey New espectrophotometric equations for determining chlorophylls a, b, c 1 and c 2 in higher plants, algae and natural phytoplankton. Biochemie Physiologiscken Pflanzen (167): Jensen, L.V.; W.Jr. Wasielesky, R.O. Cavalli, S. Peixoto, M.H.S. Santos, e E.L.C. Ballester Growth and survival of pink shrimp (Farfantepenaeus paulensis) postlarvae in cages and pen enclosures. Scientia Agricola (3): Jensen, L.V.; W.Jr. Wasielesky, E.L.C. Ballester, R.O. Cavalli, e M.H.S. SANTOS Role of the microalgae Thalassiosira fluviatilis in weight gain and survival of the shrimp Farfantepenaeus paulensis reared in indoor nursery tanks. Nauplius (14): Jorgensen, P Cultivo de Penaeus paulensis em cercados experimentais em uma enseada estuarina da Lagoa dos Patos, Brasil: Respostas da Associação de Macroinvertebrados bentônicos. Rio Grande, FURG. (Dissertação de Mestrado) 227p. Komarek, J.; e K. Anagnostidis Cyanoprokaryota. In: Büdel, B, G Gärtner, L Krienitz e M Scagerl. (eds.), Süsswasseflora von Mitteleuropa. Elsevier. 759 pp. Krumenauer, D.; R.O. Cavalli, E.L.C. Ballester e W.Jr. Wasielesky Feasibility of pacific white shrimp Litopenaeus vannamei culture in Southern Brazil: effects of stocking density and single or double crop management strategy in earthen ponds. Aquaculture Research (41): KumLu, M.; O.T. Eroldogan, e B. Saglatimur The effects of salinity and added substrates on growth and survival of Metapenaeus monoceros (Decapoda: Penaeidae) post-larvae. Aquaculture (196): Marchiori, M.A Guia ilustrado de maturação e larvicultura do camarão-rosa Penaeus paulensis Pérez-Farfante, Rio Grande, Editora da FURG. 79p.

16 Criação do camarão-rosa em cercados 274 Martin, J.-L.M.; Y. Veran, O. Guelordet e D. Pham Shrimp rearing: stocking density, growth, impact on sediment, waste output and their relationships studied through the nitrogen budget in rearing ponds. Aquaculture (164): Moss, K.R.K. e S.M. Moss Effects of artificial substrate and stocking density on the nursery production of pacific white shrimp Litopenaeus vannamei. Journal of the World Aquaculture Society (35): Nunes, A.J.P.; T.C.V. Gesteira e S. Goddard Food ingestion and assimilation by the Southern brown shrimp Penaeus subtilis under semi-intensive culture in NE Brazil. Aquaculture (149): Otoshi, C.A.; A.D. Montgomery, E.M. Matsuda, e S.M. Moss Effects of artificial substrate and water source on growth of juvenile pacific white shrimp, Litopenaeus vannamei. Journal of the World Aquaculture Society (37): Peixoto, S.; W.Jr. Wasielesky, e L. Louzada Comparative analysis of pink shrimp, Farfantepenaeus paulensis, and Pacific Whiteshrimp, Litopenaeus vannamei, culture in extreme southern Brazil. Journal of Applied Aquaculture (14): Poersch, L.; J.P. Castello, W.Jr. Wasielesky, e R.O. Cavalli The challenge of sustainable aquaculture: effects on the environment of the Patos Lagoon estuary. Journal of Coastal Research (47): Porter, K.G. e Y.S. Feig The use of DAPI for identifying and counting aquatic microflora. Limnology Oceanography (25): Preto, A.L.; R.O. Cavalli, T. Pissetti, P.C. Abreu, e W.Jr. Wasielesky Efeito da densidade de estocagem sobre o biofilme e o desempenho de pós-larvas do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis cultivadas em gaiolas. Ciência Rural (35): Rodriguez, E.M.; I. Bombeo-Tuburan, S. Fukumoto, e T.R. Ticar Nursery rearing of Penaeus monodon (Fabricius) using suspended (hapa) net enclousures installed in a pond. Aquaculture (112): Round, F.E.; R.M. Crawford, e D.V. Mann The Diatoms: Biology and Morphology of the Genera. Cambridge Univ. Press, Cambridge. 747 pp Santos, MH Alimentação do camarão-rosa Farfantepenaeus paulensis (Pérez Farfante, 1967) (Decapoda-Penaeidae) cultivado. Rio Grande, Tese de Doutorado em Oceanografia Biológica. Fundação Universidade Federal do Rio Grande, 229p. Samocha, T.M.; A.L. Lawrence, e J.M. Biedenbach The effect of vertical netting and water circulation pattern on growth and survival of Penaeus vannamei postlarvae in an intensive raceway system. Journal of Applied Aquaculture (1): Schlechtriem, C.; M. Ricci, U. Focken, e K. Becker Mass produced nematodes Panagrellus redivivus as live food for rearing carp larvae: preliminary results. Aquaculture Research (35): Silva, D.L., e F. D incao Análise do conteúdo estomacal de Farfantepenaeus paulensis (Pérez Farfante,1967) do estuário da Lagoa dos Patos, Rio Grande do Sul, Brasil (Decapoda: Penaeidae). In: Relatorio do Projeto Avaliação e gerenciamento da pesca de crustaceos no estuario da Lagoa dos Patos. Ed. D'Incao F., Brazil, pp Silva, C.F.; Ballester, E.L.C., J. Monserrat, L. Geracitano, W.Jr. Wasielesky, e P.C. Abreu Contribution of midroorganisms to the biofilm nutritional quality: protein and lipid contents. Aquaculture Nutrition (14): Snedecor, G., e W.G. Cochran Statistical Methods, 7th edn. State University Press, Ames, Iowa, USA, IA. 507 pp. Soares, R.B.; S. Peixoto, W.Jr. Wasielesky, e F. D incao Feeding rhythms and diet of Farfantepenaeus paulensis under pen culturein Patos Lagoon estuary, Brazil. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology (322): Soares, R.B.; S. Peixoto, C. Bemvenuti, W.Jr. Wasielesky, F. D incao, N. Murcia, e S. Suita Composition and abundance of invertebrate benthic fauna in Farfantepenaeus paulensis culture pens (Patos Lagoon estuary, Southern Brazil). Aquaculture (239): Sokal, R.R., e F.J. Rohlf Biometry. Principle and practices of statistics in biological research. W. H. Freeman e Co., 776p. Strickland, J.D.H., e T.R. Parsons A practical handbook of seawater analysis. Fishery Research Board of Canada. Ottawa, 310p. Thompson, F. L.; P.C. Abreu e R.O. Cavalli The use of microorganisms as food source for Penaeus paulensis larvae. Aquaculture (174):

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