Efeito de agente indutor de diabetes no pâncreas de ratos Wistar tratados com a fração aquosa das partes aéreas da planta Piper aduncum

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1 1 Efeito de agente indutor de diabetes no pâncreas de ratos Wistar tratados com a fração aquosa das partes aéreas da planta Piper aduncum Autores: Augusto Cezar Marins Gomes¹; Drª.Doroty Mesquita Dourado¹. Anhanguera-Uniderp. Laboratório de Toxinologia e Plantas Medicinais. Resumo O objetivo deste trabalho foi vericar o efeito do extrato aquoso das partes aéreas da planta Piper aduncum no pâncreas de ratos Wistar induzidos a diabetes por aloxana.. Divididos em grupo (n=5) diabético controle diabético (GD), grupo diabético tratado com extrato aquoso da planta Piper aduncum (L) (GDT), diariamente (1mL), e o grupo controle (GC). Ao nal do tratamento os animais foram submetidos à eutanásia. Os animais do grupo diabético apresentaram hotas de Langerhans de vários tamanhos acompanhada de diminuição no número de células e com formato irregular. Algumas hotas mostravam poucas células e o espaço entre as células estava preenchido com material broso. No grupo tratado as hotas já apresentavam uma melhor arquitetura, tamanho normal e menor invasão por bras colágenas. Palavras-chave: atividade hipoglicemiante; produtos naturais, Piperaceae. Introdução O diabetes melito situa-se entre as dez principais causas de morte nos países ocidentais e, apesar dos progressos em seu controle clínico, ainda não foi possível controlar de fato suas consequências letais. O termo diabetes melito descreve uma desordem metabólica de etiologia múltipla, caracterizada por hiperglicemia crônica e distúrbios dos carboidratos, proteínas e gorduras resultantes de defeitos na secreção de insulina, ação da insulina ou ambos (ALBERTI, 2001). Uma das alternativas para minimizar os efeitos da doença é o uso de plantas com potencial medicinal. Muitas plantas têm sido usadas experimentalmente para tratar dos sintomas do diabetes melito (HUO et al., 2003). As plantas antidiabéticas demonstraram ter atividade hipoglicemiante e possuir constituintes químicos que podem ser utizados como modelos para novos agentes sensibizadores da insulina. Entretanto, as análises posteriores revelaram grande variedade de mecanismos de ação que podem levar ao efeito hipoglicemiante (HUO et al., 2003) O trabalho buscou avaliar o efeito da fração aquosa das partes aéreas da planta Piper aduncum no pâncreas de ratos Wistar diabéticos aloxânico. Materiais e Métodos Piper aduncum

2 2 As partes aéreas de Piper aduncum foram coletadas na Fazenda da Universidade. Acondicionadas em sacos de polieteno e transportadas, em forma de câmara úmida, ao Laboratório de Morfologia Vegetal e, então, herborizado e a exsicata identicada, descrita, catalogada, registrada e incorporada ao acervo da (número do registro- 6941). Indução ao diabetes aloxânico Foram usados 33 ratos da linhagem Wistar (Rattus novergicus albinus), machos, adultos. Após, foram separados em 5 animais para o grupo controle normal, os restantes seguiram os procedimentos para indução da diabetes. Após permanecerem em jejum por 24 horas, os animais foram pesados em balança analítica. Anetesiados com Xazina (5mg/kg) e Ketamina (30 mg/kg) administradas por via intraperitoneal (i.p.). De uma solução estoque de 50 mg de Aloxana e 0,8 ml de soro siológico preparada no momento de uso, aplicava-se 0,2 ml de solução para cada 100 gramas de peso corporal, conforme metodologia descrita por (Carvalho 2000). Seis horas após a indução, os animais receberam somente glicose a 10% ad libitum. Na indução ao diabetes com aloxano foram utizados 28 animais. Os animais foram mantidos em gaiolas plásticas forradas com maravalha, com água e ração e a seguir monitorados por um período de 72 horas. Os animais que apresentaram valores iguais ou superiores a 300mg/dl de sangue foram separados e identicados para dar andamento aos grupos experimentais. Modelo experimental No total de animais induzidos a diabetes pela aloxana foram utizados 14 ratos com peso aproximado de 250g. Os animais foram mantidos em ambiente ventado, com ração e água ad libitum, sendo separados em três grupos: grupo Controle (GC) tratado com solução salina estér a 0,9% via gavagem (v.g.), 1 ml; grupo Diabético (GD) inoculado com solução à base de aloxana via intraperitonial (i.p.); grupo Diabético tratado com extrato aquoso da planta (1,0mg/mL) Piper aduncum (GDT), v.g. Os ratos GDT foram tratados diariamente com extrato aquoso de Piper aduncum via gavagem, com administração de 1mL por meio de sonda oroesofágica por um período de 14 dias de tratamento. Resultados e Discussão Grupo de animais diabéticos aloxânico Aos 7 dias após a indução ao diabetes aloxânico as hotas de Langerhans se apresentavam de vários tamanhos acompanhada de diminuição no número de células e com formato irregular. Algumas hotas mostravam poucas células e o espaço entre as células estava preenchido com material broso.

3 3 Ductos e vasos sanguíneos pancreáticos estavam preenchidos por secreção proteinácea. Além disso, no parênquima do pâncreas de alguns animais havia inftrado neutrofílico e hemorragia e todos mostravam hemácias congestas. Estes resultados conrmam os de Dumm et al. (1995), que observaram marcada redução no número, tamanho e distorção da citoarquitetura das hotas de animais diabéticos em decorrência da diminuição do número de células. A B C vs D E F ii vs ii Figura 2. Aspecto do pâncreas de ratos Wistar diabéticos. Ilhotas de Langerhans (); vasos sanguíneos (vs), inflamação (i), bras colágenas (fc). HE/400x. No grupo de animais induzidos ao diabetes por aloxana e tratados com extrato aquoso da planta P. aduncum as hotas já apresentavam uma melhor arquitetura e tamanho normal. Podia ser visto inftrado inflamatório pontual e hemorragia. As hemácias não estavam congestas, alguns ductos mostravam ainda resíduo de secreção e menor invasão de bras colágenas nas hotas e em todo tecido pancreático. A B C D E F Figura 4 Aspecto do pâncreas de ratos Wistar diabéticos e tratados com extrato aquoso da planta P. aduncum (L). Ilhotas de Langerhans (); vasos sanguíneos (vs), ductos com deposição protéica (dp), hemácias levemente congestas (hc)); HE/400x. O estudo mostrou a interferência da aloxana na arquitetura da hota pancreática e uma atenuação deste efeito no grupo tratado, vericando haver diferença estatisticamente signicativa no número, tamanho e distorção da citoarquitetura das hotas de animais diabéticos em decorrência da diminuição do número de células. hc As alterações encontradas nas hotas pancreáticas dos ratos diabéticos do grupo controle (desorganização arquitetural, diminuição de células, inftrado neutrofílico, hc dp

4 4 deposição proteinácea, hemorragia e hemáceas congestas e a presença de brose) e a diminuição desses fatores no grupo tratado (melhor organização celular, diminuição pontual do inftrado neutrofílico, diminuição da hemorragia e da deposição de colágeno) são encontradas também no experimento de (Zanoelo et al., 2002). Outro fator relatado é a deposição de colágeno nas áreas de vazios celulares na hota pancreática. (Brigstock el al., 2002) demonstraram que na presença de elevados níveis de glicose, a acumulação de matriz colágena ocorre por um desbalanço entre a síntese e degradação de glicosação não enzimática, a produção de um fator endotelial (CTGF) pela diabetes, que inibe a degradação de matriz extracelular, por estimular a expressão gênica e proteínas de muitos componentes desta, é outro fator que favorece a brose. CONSIDERAÇÕES FINAIS A aloxana foi capaz de modicar a estrutura da hota pancreática, diminuindo o número de células, promovendo inftrado inflamatório e áreas de hemorragia com presença de brose. O tratamento com fração aquosa das partes aéreas da planta Piper aduncun mostrou redução desses efeitos e ação hipoglicemiante. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALBERTI, K.G.; ZIMMET, P.; SHAW, J. Global and social implications of the diabetes epidemic. Nature, 414: , BRIGSTOCK, D.R. Regulation of angiogenesis and endothelial cell function by connective tissue growth factor (CTGF) and cysteine-rich 61 (CYR61). Angiogenesis. 5: , CARVALHO, P.T.C.; MAZZER, N.; REIS, F.A.; BELCHIOR, A.C.G.; SILVA, I.S. Analysis of the influence of low-power HeNe laser on the healing of skin wounds in diabetic and nondiabetic rats. Acta Cirúrgica Braseira, 21: , DUMM, C.L.A.G. et al. Quantitative immunocytochemical study of islet cell population in diabetic calmodulintransgenic mice. Virchows Archive. 425: n , HUO, Y.; WINTERS, W.D.; YAO, DA-LIN. Prevention of diet-induced type 2 diabetes in the C57BL/6J mouse model by an antidiabetic herbal formulae. Phytothererapy Research., 17: 48-55, ZANOELLO, M.A.; MELAZZO-MAZZANT, C.M.; GINDRI, J.K.; FILAPPI, A.; PRESTES, D.; CECIM, M. Efeito Protetor do Syzygium cumini contra Diabetes Mellitus induzido por Aloxano em Ratos. Acta Farmacologica Bonaerense 21: 31-6, 2002.

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