Rev. K, Ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra (100 testes) Sistema ADVIA Centaur Sistema ADVIA Centaur XPT

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1 ADVIA Centaur ADVIA Centaur XP ADVIA Centaur XPT Immunoassay Systems TSH3-Ultra () Revisão e data actuais a Nome do produto Sistemas Rev. K, Ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra (500 testes) Ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra (100 testes) Sistema ADVIA Centaur Sistema ADVIA Centaur XP Sistema ADVIA Centaur XPT REF REF Materiais necessários, mas não fornecidos Tipos de amostras Intervalo do ensaio Armazenamento dos reagentes Estabilidade no sistema dos reagentes ADVIA Centaur Wash 1 (2 x 1500 ml) REF (112351) ADVIA Centaur Wash 1 (2 x 2500 ml) REF Soro, plasma heparinizado, plasma com EDTA 0, µiu/ml (miu/l) 2 8 C 60 dias a Na Rev. B ou posterior, uma barra vertical na margem indica uma actualização técnica à versão anterior. Aplicação Para utilização em diagnóstico in vitro na determinação quantitativa da hormona estimuladora da tiróide (TSH, tirotropina) no soro, plasma heparinizado e com EDTA utilizando os sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT. As medições da hormona estimuladora da tiróide produzida pela pituitária anterior são utilizadas no diagnóstico de patologias da tiróide ou da glândula pituitária. Resumo e explicação A hormona estimuladora da tiróide é uma glicoproteína com duas subunidades não ligadas por covalência. A subunidade alfa é semelhante às da hormona foliculostimulante (FSH), da gonadotropina coriónica humana (hcg) e da hormona luteinizante (LH) 1 4. A subunidade beta da TSH é única, o que resulta nas suas propriedades bioquímicas e imunológicas específicas. A TSH é sintetizada e secretada pela pituitária anterior em resposta a um mecanismo de feedback negativo que envolve concentrações de FT 3 (T 3 livre) e FT 4 (T 4 livre). Adicionalmente, o tripéptido hipotalâmico, a hormona libertadora de tirotropina (TRH), estimula directamente a produção de TSH. A TSH interage com receptores celulares específicos na superfície das células da tiróide e exerce duas acções principais. A primeira acção consiste em estimular a reprodução e hipertrofia das células. Em segundo lugar, a TSH estimula a glândula tiróide para sintetizar e secretar T 3 e T _PT Rev. K, / 14

2 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT A capacidade de quantificar os níveis circulantes de TSH é importante para avaliar o funcionamento da tiróide. É especialmente útil no diagnóstico diferencial entre hipotiroidismo primário (tiróide), secundário (pituitária) e terciário (hipotálamo). No hipotiroidismo primário, os níveis de TSH são significativamente elevados, enquanto no hipotiroidismo secundário e terciário, os níveis de TSH são reduzidos. A estimulação da TRH diferencia entre hipotiroidismo secundário e terciário ao observar a alteração nos níveis de TSH do doente. Regra geral, a resposta da TSH à estimulação da TRH está ausente em casos de hipotiroidismo secundário e é normal a exagerada em casos de hipotiroidismo terciário. Historicamente, a estimulação da TRH tem sido utilizada para confirmar o hipotiroidismo primário, indicado por níveis elevados de T 3 e T 4 e níveis reduzidos ou indetectáveis de TSH. Os ensaios de TSH com sensibilidade e especificidade aumentadas proporcionam uma ferramenta de diagnóstico primário para diferenciar entre doentes hipertiróides e eutiróides. Princípios do procedimento O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é um ensaio de terceira geração que utiliza um anticorpo anti-fitc monoclonal covalentemente associado a partículas paramagnéticas, um anticorpo anti-tsh monoclonal de captura marcado com FITC e um detector ("tracer") composto por um éster de acridinio exclusivo e um anticorpo anti-tsh mab conjugado com albumina sérica bovina (BSA) para detecção quimioluminescente. Reagentes Reagente Descrição Armaze-n amento Estabilidade dos reagentes Embalagem de reagente primário ADVIA Centaur TSH3-Ultra ReadyPack ; Reagente Lite 6,0 ml/embalagem de reagente albumina sérica bovina (BSA) conjugada com um anticorpo anti-tsh monoclonal (~0,3 µg/ml) marcado com éster de acridinio em solução salina com tampão HEPES, IgG de ratinho, BSA, soro de cabra, tensioactivo e conservantes 2 8 C Fechado: Estável até ao fim do prazo de validade indicado na caixa No sistema: 60 dias Embalagem de reagente primário ADVIA Centaur TSH3-Ultra ReadyPack; Reagente na Fase sólida 21,0 ml/embalagem de reagente anticorpo anti-fluoresceína monoclonal covalentemente associado a partículas paramagnéticas (PMP) (~85 µg/ml) em solução salina com tampão HEPES, BSA, soro de cabra, tensioactivo e conservantes 2 8 C Fechado: Estável até ao fim do prazo de validade indicado na caixa No sistema: 60 dias Embalagem de reagente primário ADVIA Centaur TSH3-Ultra ReadyPack; Reagente auxiliar 6,0 ml/embalagem de reagente FITC conjugado com anti-tsh monoclonal (~3 μg/ml) num tampão HEPES de solução salina, IgG de rato, BSA, soro caprino, tensioactivo e conservantes 2 8 C Fechado: Estável até ao fim do prazo de validade indicado na caixa No sistema: 60 dias ADVIA Centaur TSH3-Ultra calibrator 2,0 ml/frasco após a reconstituição, níveis baixos e elevados de hormona estimuladora da tiróide (TSH) em soro de equídeos com tampão HEPES com azida de sódio (< 0,1%) e conservantes 2 8 C Fechado: (Liofilizado) Estável até ao fim do prazo de validade indicado no frasco Reconstituído: 28 dias No sistema: 4 horas 2 / _PT Rev. K,

3 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Reagente ADVIA Centaur Wash 1 a (Lavagem 1) ADVIA Centaur Wash 1 a (Lavagem 1) Descrição 1500 ml/embalagem solução salina com tampão fosfato com azida de sódio (< 0,1%) e tensioactivo 2500 ml/embalagem solução salina com tampão fosfato com azida de sódio (< 0,1%) e tensioactivo a Consulte Materiais necessários, mas não fornecidos Armaze-n amento 2 25 C 2 25 C Estabilidade dos reagentes Fechado: Estável até ao fim do prazo de validade indicado na embalagem No sistema: 1 mês Fechado: Estável até ao fim do prazo de validade indicado na embalagem No sistema: 1 mês Advertências e precauções Fichas de dados de segurança (MSDS/SDS) disponíveis em siemens.com/healthcare. PRECAUÇÃO Este dispositivo contém material de origem animal e deve ser manuseado como um possível transportador e transmissor de doenças. As medições da hormona estimuladora da tiróide produzida pela pituitária anterior são utilizadas no diagnóstico de patologias da tiróide ou da glândula pituitária. Contém azida de sódio como conservante. A azida de sódio pode reagir com os tubos de cobre ou de chumbo das canalizações de esgotos formando azidas metálicas explosivas. Aquando da sua eliminação, irrigue os reagentes com grandes quantidades de água para evitar a acumulação de azidas. A eliminação para os sistemas de esgotos deve ser efectuada de acordo com os requisitos das regulamentações em vigor. H412 P273, P501 Elimine todos os materiais perigosos ou contaminados biologicamente de acordo com as boas práticas da sua instituição. Elimine todos os materiais de maneira segura e aceitável, e de acordo com os regulamentos legais em vigor. Para utilização em diagnóstico in vitro. Preparação dos reagentes Todos os reagentes são líquidos e estão prontos a usar. Agite manualmente todas as embalagens de reagente primário antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da embalagem de reagente para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e ressuspensas. Para informações detalhadas acerca da preparação dos reagentes para utilização, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Nota Elimine as embalagens de reagente primário no final do intervalo de estabilidade no sistema. Não utilize reagentes para além do prazo de validade. Armazenamento e estabilidade Nocivo para os organismos aquáticos com efeitos duradouros. Evitar a libertação para o ambiente. Eliminar o conteúdo e o recipiente em conformidade com todos os regulamentos locais, regionais e nacionais. Contém: 0,05% de azida de sódio; ADVIA Centaur TSH3-Ultra Calibrator Guarde os reagentes na vertical a 2 8 C. Proteja as embalagens de reagente de todas as fontes de calor e luz. As embalagens de reagente carregadas no sistema estão protegidas da luz. Guarde as embalagens de reagente a 2 8 C, longe de fontes de calor e de luz _PT Rev. K, / 14

4 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Todos os reagentes permanecem estáveis a 2 8 C até ao fim do prazo de validade indicado na embalagem. Colheita e manuseamento de amostras O soro, plasma heparinizado e plasma com EDTA são os tipos de amostra recomendados para este ensaio. As seguintes recomendações relativas ao manuseamento e armazenamento de amostras de sangue são fornecidas pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) 5 : Proceda à colheita de todas as amostras de sangue observando as precauções universais relativas a punção venosa. Aguarde até que as amostras de soro coagulem adequadamente antes da centrifugação. Mantenha os tubos sempre tapados e na vertical. Não utilize amostras que tenham sido armazenadas à temperatura ambiente (18 24 C) durante mais de 24 horas. Tape bem e refrigere as amostras a 2 8 C se o ensaio não for concluído no espaço de 24 horas. A amostra pode ser conservada a 2 8 C durante 48 horas. Congele as amostras a uma temperatura igual ou inferior a -20 C se a amostra não for analisada no espaço de 48 horas. As amostras de soro e plasma com EDTA podem ser conservadas a uma temperatura igual ou inferior a -20 C durante um período máximo de 30 dias. As amostras com heparina de lítio podem ser conservadas a uma temperatura igual ou inferior a -20 C durante um período máximo de 14 dias. Congele as amostras apenas uma vez e misture exaustivamente após a descongelação. A finalidade das informações de manuseamento e armazenamento consiste em fornecer orientações aos utilizadores. É da responsabilidade de cada laboratório utilizar todas as referências disponíveis e/ou os seus próprios estudos ao estabelecer critérios de estabilidade alternativos para satisfazer necessidades específicas. Procedimento Materiais fornecidos São fornecidos os seguintes materiais: REF Conteúdo Número de testes embalagens de reagente primário ReadyPack com Reagente Lite, na Fase sólida e Reagente auxiliar ADVIA Centaur TSH3-Ultra Cartão de curva padrão ADVIA Centaur e ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra 2 frascos de calibrador baixo ADVIA Centaur TSH3-Ultra liofilizado 2 frascos de calibrador alto ADVIA Centaur TSH3-Ultra liofilizado Etiquetas de códigos de barras para os calibradores Cartões de valores atribuídos ao TSH3-Ultra Calibrador embalagem de reagente primário ReadyPack com Reagente Lite, na Fase sólida e Reagente auxiliar ADVIA Centaur TSH3-Ultra Cartão de curva padrão ADVIA Centaur e ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra 1 frasco de calibrador baixo ADVIA Centaur TSH3-Ultra liofilizado 1 frasco de calibrador alto ADVIA Centaur TSH3-Ultra liofilizado Etiquetas de códigos de barras para os calibradores Cartões de valores atribuídos ao TSH3-Ultra Calibrador / _PT Rev. K,

5 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Materiais necessários, mas não fornecidos Os seguintes materiais são necessários para efectuar este ensaio, mas não são fornecidos: Item REF (112351) REF Descrição ADVIA Centaur Wash 1 (Lavagem 1) ADVIA Centaur Wash 1 a (Lavagem 1) 2 x 1500 ml/embalagem 2 x 2500 ml/embalagem a para utilização com sistemas com uma capacidade de 2500 ml Materiais opcionais Item Os seguintes materiais podem ser utilizados para efectuar este ensaio, mas não são fornecidos: Descrição REF ADVIA Centaur TSH3-Ultra Master Curve Material 10 x 2 ml Procedimento do ensaio Para informações detalhadas acerca da realização do procedimento, consulte as instruções de funcionamento do sistema. O sistema realiza automaticamente as seguintes acções: Distribui 100 µl de amostra numa cuvete. Distribui 50 µl de Reagente auxiliar e 50 µl de Reagente Lite e efectua a incubação durante 2,75 minutos a uma temperatura de 37 C. Distribui 200 µl de Reagente na Fase sólida e efectua a sua incubação durante 5,5 minutos a uma temperatura de 37 C. Separa, aspira e lava as cuvetes com solução Wash 1. Distribui 300 µl de Reagente ácido e 300 µl de Reagente base para iniciar a reacção de quimioluminescência. Apresenta os resultados de acordo com a opção seleccionada, conforme descrito nas instruções de funcionamento do sistema. Existe uma relação directa entre a quantidade de TSH presente na amostra do doente e a quantidade de unidades relativas de luz (URL) detectadas pelo sistema. Preparação do sistema Certifique-se de que o sistema possui embalagens de reagente primário e auxiliar suficientes. Para informações detalhadas acerca da preparação do sistema, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Carregue as embalagens de reagente ReadyPack na área de reagente primário utilizando as setas como orientação para a colocação. O sistema mistura automaticamente as embalagens de reagente primário para manter uma suspensão homogénea dos reagentes. Para informações detalhadas acerca do carregamento de reagentes, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Preparação das amostras Este ensaio necessita de 100 µl de amostra para uma determinação única. Este volume não inclui o volume inutilizável no recipiente de amostra nem o volume adicional necessário aquando do processamento de duplicados ou de outros testes na mesma amostra. Para informações detalhadas acerca da determinação do volume mínimo necessário, consulte as instruções de funcionamento do sistema _PT Rev. K, / 14

6 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Antes de colocar amostras no sistema, certifique-se de que as amostras apresentam as seguintes características: As amostras não contêm fibrina nem outras partículas. As amostras não contêm bolhas. Estabilidade no sistema Os reagentes do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra permanecem estáveis fechados até ao final do prazo de validado indicado na caixa ou dentro do sistema durante 60 dias. Realizar a calibração Para efectuar a calibração do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra, utilize os ADVIA Centaur TSH3-Ultra Calibrators fornecidos com o kit. Os calibradores fornecidos neste kit correspondem à embalagem de reagente primário ReadyPack. Nota Os ADVIA Centaur TSH3-Ultra Calibrators fornecidos com este kit coincidem com a Fase sólida, o Reagente Lite e o Reagente auxiliar. Não misture lotes de ADVIA Centaur TSH3-Ultra Calibrator com diferentes lotes de Fase sólida, Reagente Lite e Reagente auxiliar. Preparar calibradores Prepare os calibradores executando os seguintes passos: 1. Adicione 2,0 ml de água reagente a cada frasco de calibrador utilizando uma pipeta de precisão ou volumétrica. Nota Para obter informações sobre a água reagente, consulte as instruções de funcionamento do sistema. 2. Deixe os calibradores em repouso durante minutos à temperatura ambiente (20 30 C) para permitir que o material liofilizado se dissolva. 3. Agite e inverta os frascos suavemente até o conteúdo ficar homogéneo. Frequência da calibração Calibre o ensaio no final do intervalo de calibração de 14 dias. Adicionalmente, o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra requer uma calibração de dois pontos: Aquando da mudança de números de lote das embalagens de reagente primário. Aquando da substituição de componentes do sistema. Quando os resultados de controlo de qualidade estão repetidamente fora do intervalo. Utilização de etiquetas de código de barras Nota As etiquetas de código de barras do calibrador são específicas de cada número de lote. Não utilize etiquetas de código de barras de um lote de calibradores com outro lote de calibradores. Utilize as etiquetas de códigos de barras do TSH3-Ultra Calibrador para identificar os copos das amostras do calibrador baixo e do calibrador alto ao executar o ensaio TSH3-Ultra. Coloque a etiqueta de código de barras no copo da amostra de forma a que os caracteres legíveis na parte lateral da etiqueta fiquem colocados na vertical no copo da amostra. 6 / _PT Rev. K,

7 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Realizar a calibração da curva padrão O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra requer a realização de uma calibração de curva padrão aquando da utilização de um novo número de lote de Fase sólida, Reagente Lite e Reagente auxiliar. Para cada novo número de lote de Fase sólida, Reagente Lite e Reagente auxiliar, utilize o leitor de códigos de barras ou o teclado para introduzir os valores da curva padrão no sistema. O Cartão de curva padrão contém os valores da curva padrão. Para informações detalhadas acerca da introdução dos valores de calibração, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Executar o controlo de qualidade Siga as normas governamentais ou os requisitos de acreditação quanto à frequência do controlo de qualidade. Para informações detalhadas acerca da introdução dos valores de controlo de qualidade, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Para monitorizar o desempenho do sistema e registar tendências, devem ser testados, no mínimo, dois níveis de material de controlo de qualidade sempre que forem analisadas amostras. Teste as amostras de controlo de qualidade aquando da realização de uma calibração de dois pontos. Trate todas as amostras de controlo de qualidade da mesma forma que as amostras de doentes. A Siemens Healthcare Diagnostics recomenda a utilização de materiais de controlo de qualidade comercialmente disponíveis com, pelo menos, 2 níveis (baixo e alto). É obtido um nível satisfatório de desempenho quando os valores do analito obtidos se situam dentro do Intervalo de controlo aceitável para o sistema ou do intervalo definido pela instituição em causa, conforme determinado por um esquema de controlo de qualidade laboratorial interno apropriado. Utilize materiais de controlo de qualidade de acordo com os regulamentos locais, estatais e/ou federais ou com os requisitos de acreditação. Tomar medidas correctivas Se os resultados dos controlos de qualidade não corresponderem aos Valores previstos ou aos valores estabelecidos pelo laboratório, não reporte os resultados. Tome as seguintes medidas: Certifique-se de que o prazo de validade dos materiais não foi ultrapassado. Certifique-se de que foi executada a manutenção necessária. Certifique-se de que o ensaio foi processado de acordo com as instruções de utilização. Volte a processar o ensaio com amostras de controlo de qualidade novas. Se necessário, contacte o seu fornecedor de apoio técnico ou o seu distribuidor local para obter ajuda. Resultados Cálculo de resultados Diluições Para informações detalhadas acerca da forma como o sistema calcula os resultados, consulte as instruções de funcionamento do sistema. O sistema apresenta os resultados de TSH em µiu/ml (unidades de massa) ou miu/l (unidades SI), consoante as unidades definidas aquando da configuração do ensaio. A fórmula de conversão é 1 µiu/ml = 1 miu/l. Geralmente não são necessárias diluições devido ao amplo intervalo de medição do ensaio. Na rara eventualidade de ser solicitada uma diluição de amostra, consulte os procedimentos do seu laboratório _PT Rev. K, / 14

8 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Interpretação de resultados Os resultados deste ensaio devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médico do doente, estado clínico e outros dados de interesse. Limitações Este ensaio não foi validado para testar amostras de recém-nascidos. Não volte a colocar os calibradores nos frascos após a calibração, pois poderia ocorrer evaporação, que, por sua vez, pode afectar o desempenho. Elimine qualquer quantidade de calibrador que permaneça nos copos das amostras durante mais de 4 horas. Não encha novamente os copos de amostras de calibrador quando o conteúdo se tiver esgotado. Se necessário, distribua mais calibradores. Os anticorpos heterofílicos presentes no soro humano podem reagir com as imunoglobulinas do reagente, interferindo com os imunoensaios in vitro 6. Os doentes rotineiramente expostos a animais ou a produtos derivados do soro de animais podem estar mais propensos a esta interferência e podem observar-se valores anómalos. Podem ser necessárias informações adicionais para o diagnóstico. Não utilize amostras que contenham fluoresceína. Níveis de fluoresceína > 0,24 μg/ml podem reduzir os resultados neste ensaio. As evidências sugerem que os doentes submetidos a uma angiografia de fluoresceína da retina podem reter quantidades de fluoresceína no seu organismo até 48 a 72 horas após o tratamento. Nos casos de doentes com insuficiência renal, incluindo muitos diabéticos, a retenção pode ser significativamente mais longa. Tais amostras podem produzir valores falsamente reduzidos quando testadas com este ensaio, não devendo por isso ser testadas. Os testes de amostras às quais foi adicionado o nível máximo teórico de fluoresceína (250 μg/ml) utilizado nestes doentes resultaram em níveis de TSH < 0,06 μiu/ml em vez do valor verdadeiro de 27,99 μiu/ml. Tal como com qualquer medição para imuno-reconhecimento de um péptido, variantes genéticas extremamente raras podem exibir graus de detecção variáveis. Valores previstos O intervalo de referência para adultos saudáveis (eutiróides) foi estabelecido para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra em conformidade com a norma EP28-A3c do CLSI 9. As amostras foram testadas relativamente a TSH, FT3 e FT4 e foram consideradas normais se os respectivos valores estivessem dentro dos intervalos aceitáveis. As amostras foram igualmente rastreadas quanto à presença de autoanticorpos da tiróide 10. O intervalo de referência foi determinado através do cálculo dos percentis 2,5 e 97,5 da distribuição dos valores. Intervalos de referência Grupo Número de amostras (µiu/ml) (miu/l) Adultos eutiróides 229 0,55 4,78 0,55 4,78 Os intervalos de referência para a população pediátrica (bebés, crianças e adolescentes) foram estabelecidos para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra em conformidade com a norma EP28-A3c do CLSI 9. As amostras foram colhidas prospectivamente da população pediátrica aparentemente saudável (eutiróide), utilizando critérios de inclusão predefinidos. 8 / _PT Rev. K,

9 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Para estabelecer os intervalos de referência para crianças e adolescentes, foi utilizada uma abordagem não paramétrica na qual foram calculados os percentis 2,5 e 97,5 da distribuição de valores. Para a população de bebés, o intervalo de referência foi calculado utilizando uma abordagem para acomodar o tamanho de amostra mais pequeno 11. Intervalos de referência Faixa etária pediátrica Número de amostras (µiu/ml) (miu/l) Bebés a (1 23 meses) Crianças (2 12 anos) Adolescentes (13 20 anos) 94 0,87 6,15 0,87 6, ,67 4,16 0,67 4, ,48 4,17 0,48 4,17 a O limite superior (percentil 97,5) do intervalo de referência para bebés foi determinado como sendo 6,15 μiu/ml (miu/l). Os dados desta população de bebés (n = 94) demonstraram uma distribuição altamente enviesada para a direita. Por conseguinte, a estimativa do limite superior do intervalo de referência possui alguma incerteza com uma probabilidade de 90% de que o limite superior do intervalo de referência pode situar-se entre 5,32 6,98 μiu/ml (miu/l). Tal como com todos os ensaios de diagnóstico in vitro, cada laboratório deve determinar os seus próprios intervalos de referência para a avaliação diagnóstica de resultados do doente 9. Características de desempenho Foram realizados estudos das características de desempenho nos sistemas ADVIA Centaur XP. Intervalo de medição analítico O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra mede as concentrações de TSH entre 0, µiu/ml (miu/l). Especificidade A especificidade do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra com hcg, FSH e LH foi determinada através da adição destas hormonas a amostras humanas contendo TSH. Demonstrou-se que a reactividade cruzada do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra não era detectável para hcg, FSH e LH testados em concentrações de µiu/ml (miu/l), 1500 µiu/ml (miu/l) e 600 µiu/ml (miu/l), respectivamente. Os testes de interferência foram determinados de acordo com o Documento EP7-A2 do CLSI 9. Sensibilidade O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra mede as concentrações de TSH até 150 µiu/ml (miu/l) com uma concentração de limite de branco de 0,001 µiu/ml (miu/l). O limite de branco é definido como a concentração de TSH que corresponde ao percentil 95 da distribuição do padrão zero de TSH. O padrão zero de TSH3-Ultra foi analisado 2 vezes em cada um de pelo menos 20 processamentos, utilizando 2 lotes de reagentes em 2 sistemas (n = 160), durante um período mínimo de 10 dias. O limite de detecção (LoD) é determinado de acordo com o protocolo EP17-A do CLSI 10. O limite de detecção é definido como a concentração mais baixa de TSH que pode ser detectada com uma probabilidade de 95%. O LoD foi determinado utilizando amostras de soro com baixo nível de TSH que foram analisadas 2 vezes em cada um de pelo menos 20 processamentos, utilizando 2 lotes de reagentes em 2 sistemas (n = 160), durante um período mínimo de 10 dias _PT Rev. K, / 14

10 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Precisão O limite de quantificação (LoQ, sensibilidade funcional) do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é a concentração mais baixa à qual a imprecisão total do ensaio não excede 20%. A sensibilidade funcional do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é de 0,008 µiu/ml (miu/l). Foi determinada utilizando várias amostras de doentes no intervalo de 0,003 a 0,013 µiu/ml (miu/l). Todas as amostras foram analisadas em duplicado, em 10 processamentos individuais em 2 sistemas, durante um período de 10 dias. Com base neste estudo, o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra cumpre os requisitos da definição de um ensaio de TSH de terceira geração 11,12. O intervalo do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra situa-se entre o LoQ e 150 µiu/ml (miu/l) (0,008 a 150 µiu/ml [miu/l]). A precisão foi avaliada de acordo com o protocolo EP5-A2 do CLSI 13. De acordo com este protocolo, 4 controlos e 6 pools de soro dos doentes foram analisados em duplicado em 2 processamentos em pelo menos 1 sistema ADVIA Centaur, utilizando 2 lotes de reagente e 2 lotes de calibrador, durante um período de 20 dias (n 80 para cada amostra). Foram obtidos os seguintes resultados: Amostra Média (µiu/ml) (miu/l) % CV intra-ensaio % CV processamento a processamento % CV total Controlo 1 0,026 4,69 3,62 6,64 Controlo 2 0,383 1,97 4,13 5,13 Controlo 3 4,17 1,95 4,28 5,58 Controlo 4 16,6 2,26 3,99 5,18 Pool de soro 1 1,03 2,85 2,35 4,45 Pool de soro 2 5,41 2,37 0,88 3,64 Pool de soro 3 10,7 1,70 1,20 3,77 Pool de soro 4 32,0 1,93 1,87 4,37 Pool de soro 5 56,7 1,44 1,59 4,29 Pool de soro 6 132,8 1,82 1,41 5,17 A precisão foi igualmente avaliada para pools de plasma dos doentes. Cinco pools de plasma foram analisados em duplicado em 2 processamentos por dia num sistema ADVIA Centaur, utilizando 2 lotes de reagente e 2 lotes de calibrador, durante um período de 20 dias (n = 80 para cada amostra). Foram obtidos os seguintes resultados: Amostra Média (µiu/ml) (miu/l) Exactidão/Comparação de métodos % CV intra-ensaio % CV processamento a processamento Para 241 amostras no intervalo de 0,009 a 148,2 µiu/ml (miu/l), a relação entre o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra e o ensaio ADVIA Centaur TSH-3 é descrita pela equação: ADVIA Centaur TSH3-Ultra = 0,99 (ADVIA Centaur TSH-3) + 0,09 µiu/ml Coeficiente de correlação (r) = 0,998 % CV total Pool de plasma 1 0,659 2,56 0,70 3,55 Pool de plasma 2 5,00 1,87 1,77 3,18 Pool de plasma 3 34,2 2,27 1,88 4,01 Pool de plasma 4 78,5 2,51 1,50 4,90 Pool de plasma 5 129,2 2,93 3,20 5,51 10 / _PT Rev. K,

11 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Análise de amostras equiparadas Plasma versus Soro Foi efectuada a colheita de amostras equiparadas de plasma heparinizado, plasma com EDTA e soro de 107 doentes no intervalo de 0,008 a 150 µiu/ml (miu/l). A relação entre as recuperações de TSH relativamente aos três tipos de amostras foi descrita por uma análise de regressão de Deming. Interferências ADVIA Centaur TSH3-Ultra (Heparina) = 0,96 (Soro ADVIA Centaur TSH3-Ultra) + 0,10 µiu/ml (miu/l) 92 pares de amostras, r = 0,995 ADVIA Centaur TSH3-Ultra (EDTA) = 0,95 (Soro ADVIA Centaur TSH3-Ultra) + 0,11 µiu/ml (miu/l) 93 pares de amostras, r = 0,997 Amostras séricas que se apresentam... Demonstraram 5% de alteração em resultados até... hemolisadas lipémicas ictéricas ictéricas 500 mg/dl de hemoglobina 1000 mg/dl de triglicéridos 40 mg/dl de bilirrubina conjugada 40 mg/dl de bilirrubina não conjugada Linearidade Os testes de interferência foram determinados de acordo com o Documento EP7-A2 do CLSI 9. Uma amostra com níveis elevados de soro foi misturada com uma de níveis baixos para preparar nove pools igualmente espaçados entre 0,006 e 160,03 µiu/ml (miu/l). A recuperação média das amostras variou entre 96,3 e 105,0%, demonstrando linearidade em todo o intervalo de ensaio. Efeito de prozona de dose elevada Níveis elevados de TSH podem provocar uma redução paradoxal nas URL (efeito de prozona de dose elevada). Neste ensaio, níveis de TSH tão elevados como 3000 µiu/ml (miu/l) produzirão resultados superiores a 150 µiu/ml (miu/l). Normalização A normalização do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é rastreável em relação ao 3.º Padrão Internacional (IRP 81/565) da World Health Organization (WHO) relativo à TSH humana. Uma comparação sobre o intervalo completo do ensaio produziu a seguinte correlação: ADVIA Centaur TSH3-Ultra = 1,103 (WHO) - 0,111 µiu/ml (miu/l) r = 1,000 Os valores atribuídos aos calibradores são rastreáveis a esta normalização. Assistência técnica Para serviços de atendimento ao cliente, contacte o seu fornecedor de suporte técnico ou distribuidor local. siemens.com/healthcare _PT Rev. K, / 14

12 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Referências 1. Chen IW, Sperling MI. Thyroxine. In: Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical Chemistry: Theory, Analysis, and Correlation. 2nd ed. St. Louis: CV Mosby, Fernandez-Ulloa M, Maxon HR. Thyroid. In: Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical Chemistry: Theory, Analysis, and Correlation. 2nd ed. St. Louis: CV Mosby, Watts NB, Keffer JH. Practical Endocrine Diagnosis. 3rd ed. Philadelphia: Lea and Febiger, , Chattoraj SC, Watts NB. Endocrinology. In: Tietz NW, editor. Fundamentals of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document H18-A3. 6. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem. 1988;34: Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document C28-A2. 8. Kratzsch J, Schubert G, Pulzer F, et al. Reference intervals for TSH and thyroid hormones are mainly affected by age, body mass index and number of blood leucocytes, but hardly by gender and thyroid autoantibodies during the first decades of life. Clin Biochem. (2008), doi: /j.clinbiochem Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Defining, Establishing and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Third Edition. CLSI Document EP28-A3c. CLSI 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA USA, Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; CLSI Document EP17-A. 11. Spencer CA, LoPresti JS, Patel A, et al. Applications of a new chemiluminometric thyrotropin assay to subnormal measurement. J Clin Endocrin Metab. 1990;70(2): Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M. Current status and performance goals for serum thyrotropin (TSH) assays. Clin Chem. 1996;42(1): Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document EP5-A2. 12 / _PT Rev. K,

13 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Definição dos Símbolos Os seguintes símbolos podem aparecer no rótulo dos produtos: Símbolo Definição Símbolo Definição Dispositivo médico para diagnóstico in vitro Fabricante legal Marca CE Número do catálogo Representante Autorizado na Comunidade Europeia Marca CE, com número de identificação do órgão notificado Consultar as instruções de utilização Risco biológico Não congele (> 0 C) Limites de temperatura Limite inferior de temperatura Limite máximo de temperatura Manter protegido da luz solar e do calor Para cima Use até Contém o suficiente para (n) testes Código de lote Agitar vigorosamente a embalagem de reagente. Consultar Preparação dos reagentes nas instruções do produto ADVIA Centaur específico do ensaio para obter informações detalhadas. YYYY-MM-DD Formato de data (ano-mês-dia) Rev. Revisão Definição da curva padrão Número variável hexadecimal que assegura que os valores da definição de Curva Padrão e de Calibrador são válidos. Detalhes do lote Ponto Verde Reciclar Impresso com tinta de soja _PT Rev. K, / 14

14 Sistemas ADVIA Centaur, ADVIA Centaur XP e ADVIA Centaur XPT Marcas comerciais ADVIA Centaur e ReadyPack são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. Todos os direitos reservados. US Pat 6,664,043 Made in: USA 14 / _PT Rev. K,

15 ADVIA Centaur CP Immunoassay System TSH3-Ultra () Resumo do ensaio Conteúdo Aplicação Tipo de amostra Soro, plasma com heparina, plasma com EDTA Volume da amostra 100 µl Calibrador TSH3-Ultra REF Conteúdo Número de testes embalagens de reagente primário ReadyPack contendo o Reagente Lite, a 500 Fase Sólida e o Reagente Auxiliar do ADVIA Centaur TSH3-Ultra Cartão de curva padrão do ADVIA Centaur e do ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra 2 frascos de calibrador baixo liofilizado TSH3-Ultra ou Para utilização em diagnóstico in vitro na determinação quantitativa da hormona estimulante da tiróide (TSH, tirotropina) no soro, plasma com heparina e plasma com EDTA utilizando o sistema ADVIA Centaur CP. As medições da hormona estimuladora da tiróide produzida pela pituitária anterior são utilizadas no diagnóstico de patologias da tiróide ou da glândula pituitária. Reagentes opcionais 2 frascos de calibrador alto liofilizado TSH3-Ultra Etiquetas de códigos de barras para os calibradores Cartões de valores atribuídos aos calibradores da TSH3-Ultra embalagem de reagente primário ReadyPack contendo o Reagente Lite, a Fase Sólida e o Reagente Auxiliar do ADVIA Centaur TSH3-Ultra Cartão de curva padrão do ADVIA Centaur e do ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra 1 frasco de calibrador baixo liofilizado TSH3-Ultra 1 frasco de calibrador alto liofilizado TSH3-Ultra Etiquetas de códigos de barras para os calibradores Cartões de valores atribuídos aos calibradores da TSH3-Ultra REF Descrição Conteúdo Material da curva padrão da TSH3-Ultra 10 x 2 ml _PT Rev. K, / 12

16 Sistema ADVIA Centaur CP Resumo e explicação do teste A hormona estimulante da tiróide é uma glicoproteína com duas subunidades não ligadas por covalência. A subunidade alfa é semelhante às da hormona foliculoestimulante (FSH), da gonadotropina coriónica humana (hcg) e da hormona luteinizante (LH) 1-4. A subunidade beta da TSH é única, o que resulta nas propriedades bioquímicas e imunológicas específicas desta hormona. A TSH é sintetizada e segregada pela pituitária anterior em resposta a um mecanismo de resposta negativa que envolve concentrações de FT 3 (T 3 livre) e de FT 4 (T 4 livre). Além disso, o tripéptido hipotalâmico, a hormona libertadora de tirotropina (TRH), estimula directamente a produção de TSH. A TSH interage com receptores de célula específicos na superfície da célula da tiróide e exerce duas acções principais. A primeira acção é estimular a reprodução de células e a hipertrofia. Em segundo lugar, a TSH estimula a glândula tiróide a sintetizar e segregar T 3 e T 4. A capacidade para quantificar os níveis de TSH em circulação é importante na avaliação do funcionamento da tiróide. É especialmente útil no diagnóstico diferencial entre o hipotiroidismo primário (tiróide), o secundário (pituitária) e o terciário (hipotálamo). No hipotiroidismo primário, os níveis de TSH são significativamente elevados, enquanto que no hipotiroidismo secundário ou terciário os níveis de TSH são baixos. A estimulação da TRH diferencia o hipotiroidismo secundário do terciário através da observação da alteração nos níveis de TSH do doente. Tipicamente, a resposta da TSH à estimulação da TRH está ausente nos casos de hipotiroidismo secundário e é normal a exagerada no hipotiroidismo terciário. Historicamente, a estimulação da TRH tem sido utilizada para confirmar o hipertiroidismo primário, indicado pelos níveis elevados de T 3 e de T 4 e níveis baixos ou não detectáveis de TSH. Os ensaios de TSH com sensibilidade e especificidade acrescidas proporcionam uma ferramenta de diagnóstico primária para diferenciar os doentes com hipertiróide dos que sofrem de eutiróide. Princípio do ensaio O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é um ensaio da terceira geração que emprega anticorpo monoclonal anti-fitc ligado por covalência a partículas paramagnéticas, um anticorpo monoclonal de captura anti-tsh marcado com FITC e um traçador composto por um éster de acridina próprio e um anticorpo mab anti-tsh conjugado com albumina de soro bovino (BSA) para detecção quimioluminescente. O sistema executa automaticamente as seguintes acções: Distribui 100 μl de amostra numa cuvete. Distribui 50 μl de Reagente Auxiliar e 50 μl de Reagente Lite e deixa-os a incubar durante 3,0 minutos a 37 C. Distribui 200 μl de Fase Sólida e deixa-os a incubar durante 6,3 minutos a 37 C. Separa, aspira e lava as cuvetes com a Solução de Lavagem 1. Distribui 300 μl de Reagente Ácido e de Reagente de Base para iniciar a reacção quimioluminescente. Comunica os resultados de acordo com a opção seleccionada, conforme descrito nas instruções de funcionamento ou no sistema de ajuda online. Existe uma relação directa entre a quantidade de TSH presente na amostra do doente e a quantidade de unidades relativas de luz (RLUs) detectadas pelo sistema. 2 / _PT Rev. K,

17 Sistema ADVIA Centaur CP Colheita e manuseamento das amostras O soro, o plasma com heparina e o plasma com EDTA são os tipos de amostra recomendados para este ensaio. As recomendações gerais que se seguem para o manuseamento e conservação de amostras de sangue são fornecidas pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, antiga NCCLS) 5 : Faça a colheita de todas as amostras de sangue seguindo as precauções universais para a punção venosa. Deixe o soro coagular correctamente antes da centrifugação. Mantenha sempre os tubos vedados e na vertical. Não utilize amostras que tenham estado armazenadas à temperatura ambiente (18 24 C) durante mais de 24 horas. Aperte bem a tampa das amostras e refrigere-as a uma temperatura entre 2 e 8 C caso o ensaio não seja executado antes de decorridas 24 horas. Os espécimes podem ser conservadas a uma temperatura de 2 a 8 C durante 48 horas. Congele as amostras a uma temperatura igual ou inferior a -20 C caso não venham a ser ensaiadas num período de 48 horas. As amostras de soro e plasma com EDTA podem ser conservadas a uma temperatura igual ou inferior a -20 C até 30 dias. As amostras de heparina de lítio podem ser conservadas a uma temperatura igual ou inferior a -20 C até 14 dias. Congele as amostras apenas uma vez e agite bem após o descongelamento. Antes de colocar as amostras no sistema, certifique-se de que as amostras têm as seguintes características: As amostras não contêm fibrina nem outras partículas. As amostras não apresentam bolhas. Reagentes Conserve os reagentes na posição vertical, a uma temperatura de 2 8 C. Agite manualmente todas as embalagens de reagentes primários antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da embalagem do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Para obter informações detalhadas sobre a preparação dos reagentes para utilização, consulte o guia do operador do sistema. Proteja da luz solar Proteja as embalagens dos reagentes de todas as fontes de calor e luz. As embalagens dos reagentes colocadas no sistema estão protegidas da luz. Conserve as embalagens de reagentes não utilizadas a uma temperatura de 2 8 C, num local afastado de fontes de luz. Embalagem de reagente Reagente Volume Ingredientes Embalagem de Reagente Lite 6,0 ml/ reagente primário embalagem ReadyPack do de reagente ADVIA Centaur TSH3-Ultra Fase Sólida 21,0 ml/ embalagem de reagente albumina de soro bovino (BSA) conjugada com anti-tsh monoclonal (~0,3 µg/ml) marcado com éster de acridina num tampão HEPES de solução salina, IgG de rato, BSA, soro caprino, tensioactivo e conservantes anticorpo monoclonal anti-fluoresceína ligado por covalência a partículas paramagnéticas (PMP) (~85 µg/ml) num tampão HEPES de solução salina, BSA, soro caprino, tensioactivo e conservantes Conservação Estabilidade 2 8 C Até à data de validade no rótulo da embalagem. Relativamente à estabilidade de utilização, consulte a secção Estabilidade de utilização e intervalo de calibração _PT Rev. K, / C Até à data de validade no rótulo da embalagem. Relativamente à estabilidade de utilização, consulte a secção Estabilidade de utilização e intervalo de calibração.

18 Embalagem de reagente Reagente Volume Ingredientes Reagente Auxiliar Frascos de calibrador de TSH3-Ultra Calibradores 6,0 ml/ embalagem de reagente 2,0 ml/ frasco FITC conjugado com anti-tsh monoclonal (~3 µg/ml) num tampão HEPES de solução salina, IgG de rato, BSA, soro caprino, tensioactivo e conservantes após a reconstituição, níveis baixos e elevados de hormona estimulante da tiróide (TSH) num tampão HEPES de soro equino com azida sódica (< 0,1%) e conservantes Sistema ADVIA Centaur CP Conservação Estabilidade 2 8 C Até à data de validade no rótulo da embalagem. Relativamente à estabilidade de utilização, consulte a secção Estabilidade de utilização e intervalo de calibração. 2 8 C Liofilizado até à data de validade dos frascos ou reconstituído 28 dias ou utilização 4 horas. Advertências e Precauções Fichas de Segurança (MSDS/SDS) disponíveis em siemens.com/healthcare. H412 P273, P501 PRECAUÇÃO: Este dispositivo contém material de origem animal e deve ser manuseado como potencial portador e transmissor de doenças. As medições da hormona estimuladora da tiróide produzida pela pituitária anterior são utilizadas no diagnóstico de patologias da tiróide ou da glândula pituitária. NOTA: A azida sódica pode reagir com o cobre e o chumbo existentes nas canalizações, formando azidas metálicas explosivas. Quando eliminar os reagentes, utilize água em abundância para evitar a acumulação de azidas. Certifique-se primeiro de que a eliminação destes materiais através da rede de esgotos cumpre a legislação em vigor. A eliminação de material perigoso ou biologicamente contaminado deve ser efectuada de acordo com as práticas da sua instituição. Elimine todos os materiais de uma forma segura e aceitável e em conformidade com a legislação em vigor. Para utilização em diagnóstico in vitro. Carregar reagentes Nocivo para os organismos aquáticos com efeitos duradouros. Evitar a libertação para o ambiente. Eliminar o conteúdo e o recipiente em conformidade com todos os regulamentos locais, regionais e nacionais. Contém: Azida de sódio; ADVIA Centaur TSH3-Ultra Calibrator Certifique-se de que o sistema contém embalagens suficientes de reagentes primários e auxiliares. Para obter informações mais detalhadas sobre a preparação do sistema, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. Agite manualmente todas as embalagens de reagentes primários antes de as colocar no sistema. Inspeccione visualmente a parte inferior da embalagem do reagente, para se certificar de que todas as partículas estão dispersas e em suspensão. Coloque as embalagens de reagente primário na área do reagente primário. As setas no rótulo da parte de trás podem ser utilizadas para orientar a colocação. A colocação na posição à esquerda, ao centro e à direita das embalagens de reagente primário não é necessária porque existe apenas uma sonda de reagente no sistema ADVIA Centaur CP. O sistema mistura automaticamente as embalagens dos reagentes primários para manter uma suspensão homogénea dos reagentes. Para informações detalhadas sobre como colocar os reagentes, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. NOTA: Os Calibradores TSH3-Ultra fornecidos com este kit estão combinados com a Fase Sólida, o Reagente Lite e o Reagente Auxiliar. Não misture os lotes de Calibradores TSH3-Ultra com diferentes lotes de Fase Sólida, de Reagente Lite e de Reagente Auxiliar. 4 / _PT Rev. K,

19 Sistema ADVIA Centaur CP Estabilidade de utilização e intervalo de calibração Estabilidade de utilização 60 dias 28 dias Adicionalmente, o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra requer uma calibração de dois pontos: ao alterar os números de lote das embalagens dos reagentes primários quando substituir os componentes do sistema quando os resultados do controlo de qualidade se encontram repetidamente fora dos limites NOTA: Elimine as embalagens de reagente primário no final do intervalo de estabilidade de utilização. Não utilize os reagentes para além da data de validade. Calibração da curva padrão O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra requer uma calibração da curva padrão ao utilizar um novo número de lote da Fase Sólida, Reagente Lite e Reagente Auxiliar. Para cada novo lote de Fase Sólida, Reagente Lite e Reagente Auxiliar, utilize o leitor de códigos de barras ou o teclado para introduzir os valores da curva padrão no sistema. O cartão da curva padrão contém os valores da curva padrão. Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores de calibração, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. Preparar os calibradores Prepare os calibradores executando os seguintes passos: 1. Adicione 2,0 ml de água reagente 6 a cada frasco de calibrador utilizando uma pipeta volumétrica ou de precisão. 2. Deixe os calibradores em repouso durante 15 a 20 minutos à temperatura ambiente (20 a 30 C) para permitir que o material liofilizado se dissolva. 3. Agite e inverta os frascos suavemente até o conteúdo ficar homogéneo. Utilizar as etiquetas de códigos de barras NOTA: As etiquetas de códigos de barras dos calibradores são específicas do número do lote. Não utilize etiquetas de códigos de barras de um lote de calibradores com qualquer outro lote de calibradores. Utilize as etiquetas de códigos de barras do Calibrador TSH3-Ultra para identificar os copos de amostras com calibrador baixo e calibrador alto quando executar o ensaio TSH3-Ultra. Coloque a etiqueta de código de barras no copo da amostra de forma a que os caracteres legíveis na parte lateral da etiqueta fiquem na vertical no copo da amostra. Controlo de qualidade Intervalo de calibração Seguir as normas governamentais ou os requisitos de validação quanto à frequência do controlo de qualidade. Para informações detalhadas sobre a introdução dos valores do controlo de qualidade, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online _PT Rev. K, / 12

20 Sistema ADVIA Centaur CP Para monitorizar o desempenho do sistema e as tendências verificadas nos gráficos, como requisito mínimo, ensaie dois níveis de material de controlo de qualidade em cada dia em que as amostras são analisadas. Ensaie amostras de controlo de qualidade quando realizar uma calibração de dois pontos. Trate todas as amostras de controlo de qualidade da mesma forma que as amostras dos doentes. A Siemens recomenda a utilização de materiais de controlo de qualidade comercialmente disponíveis com pelo menos 2 níveis (baixo e alto). É alcançado um nível de desempenho satisfatório quando os valores dos analitos obtidos estiverem dentro dos Limites de Controlo Aceitáveis para o sistema ou dentro dos vossos limites, conforme determinado pelo regime de controlo de qualidade laboratorial interno adequado. Utilize os materiais de controlo da qualidade em conformidade com os regulamentos locais e/ou governamentais ou com os requisitos de acreditação. Se os resultados do controlo de qualidade não coincidirem com os valores esperados ou com os valores estabelecidos pelo laboratório, não os deve reportar. Tome as seguintes medidas: Verifique se os materiais se encontram dentro do prazo da validade. Verifique se a manutenção necessária foi efectuada. Certifique-se de que o ensaio foi realizado de acordo com as instruções de utilização. Execute novamente o ensaio utilizando novas amostras de controlo de qualidade. Se necessário, contacte o seu distribuidor ou fornecedor de assistência técnica local para obter assistência. Volume da amostra Este ensaio requer 100 μl de amostra para uma única determinação. Este volume não inclui o volume não utilizável contido no recipiente da amostra nem o volume adicional necessário para efectuar duplicados ou outros testes com a mesma amostra. Para obter informações detalhadas sobre a determinação do volume mínimo necessário, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. Procedimento do ensaio Para informações detalhadas sobre os procedimentos, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. Notas sobre procedimentos Cálculos Para obter informações detalhadas sobre a forma como o sistema calcula os resultados, consulte as instruções de funcionamento do sistema ou o sistema de ajuda online. O sistema reporta os resultados da TSH em μiu/ml (unidades comuns) ou em miu/l (unidades do SI), dependendo das unidades definidas aquando da configuração do ensaio. A fórmula de conversão é 1 μiu/ml = 1 miu/l. Diluições Geralmente não são necessárias diluições devido ao amplo intervalo de medição do ensaio. Na rara eventualidade de ser solicitada uma diluição de amostra, consulte os procedimentos do seu laboratório. 6 / _PT Rev. K,

21 Sistema ADVIA Centaur CP Limitações Efeito de gancho de dose elevada Os níveis elevados de TSH podem causar uma redução paradoxal nas RLUs (efeito de gancho de dose elevada). Neste ensaio, os níveis de TSH tão elevados como 3000 μiu/ml (miu/l) darão resultados superiores a 150 μiu/ml (miu/l). Tal como com qualquer medição para imuno-reconhecimento de um péptido, variantes genéticas extremamente raras podem exibir graus de deteção variáveis. Interprete os níveis de TSH com cuidado durante o primeiro trimestre de gravidez ou sempre que estejam presentes níveis muito elevados de hcg. Este ensaio não foi validado para analisar amostras de recém-nascidos. Não volte a colocar os calibradores nos frascos, após a calibração, pois pode ocorrer evaporação, que, por sua vez, pode afectar o desempenho. Elimine qualquer quantidade de calibrador que permaneça nos copos das amostras durante mais de 4 horas. Não volte a encher os copos das amostras quando o conteúdo se tiver esgotado. Se necessário, distribua novos calibradores. Os anticorpos heterofílicos no soro humano podem reagir com imunoglobulinas reagentes e interferir com os imunoensaios in vitro 7. Os doentes expostos frequentemente a animais ou a produtos de soro animal podem ter tendência para esta interferência e podem ser observados valores anómalos. Poderá ser necessário obter informações adicionais para determinar o diagnóstico. Não utilize amostras que contenham fluoresceína. Níveis de fluoresceína > 0,24 μg/ml podem reduzir os resultados neste ensaio. As evidências sugerem que os doentes submetidos a uma angiografia de fluoresceína da retina podem reter quantidades de fluoresceína no seu organismo até 48 a 72 horas após o tratamento. Nos casos de doentes com insuficiência renal, incluindo muitos diabéticos, a retenção pode ser significativamente mais longa. Tais amostras podem produzir valores falsamente reduzidos quando testadas com este ensaio, não devendo por isso ser testadas. Os testes de amostras às quais foi adicionado o nível máximo teórico de fluoresceína (250 μg/ml) utilizado nestes doentes resultaram em níveis de TSH < 0,06 μiu/ml em vez do valor verdadeiro de 27,99 μiu/ml. NOTA: As substâncias interferentes endógenas foram determinadas para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra no sistema ADVIA Centaur de acordo com o Documento EP7-A2 do CLSI 8. As amostras de soro... Demonstram uma variação < 5% nos resultados até... hemolisadas 500 mg/dl de hemoglobina lipémicas ictéricas ictéricas Resultados esperados 1000 mg/dl de triglicéridos 40 mg/dl de bilirrubina conjugada 40 mg/dl de bilirrubina não conjugada O intervalo de referência para adultos saudáveis (eutiróides) foi estabelecido para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra em conformidade com a norma EP28-A3c do CLSI 9. As amostras foram testadas relativamente a TSH, FT3 e FT4 e foram consideradas normais se os _PT Rev. K, / 12

22 Sistema ADVIA Centaur CP respectivos valores estivessem dentro dos intervalos aceitáveis. As amostras foram igualmente rastreadas quanto à presença de autoanticorpos da tiróide 10. O intervalo de referência foi determinado através do cálculo dos percentis 2,5 e 97,5 da distribuição dos valores. Intervalos de referência Grupo Número de amostras (µiu/ml) (miu/l) Adultos eutiróides 229 0,55 4,78 0,55 4,78 Os intervalos de referência para a população pediátrica (bebés, crianças e adolescentes) foram estabelecidos para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra em conformidade com a norma EP28-A3c do CLSI 9. As amostras foram colhidas prospectivamente da população pediátrica aparentemente saudável (eutiróide), utilizando critérios de inclusão predefinidos. Para estabelecer os intervalos de referência para crianças e adolescentes, foi utilizada uma abordagem não paramétrica na qual foram calculados os percentis 2,5 e 97,5 da distribuição de valores. Para a população de bebés, o intervalo de referência foi calculado utilizando uma abordagem para acomodar o tamanho de amostra mais pequeno 11. Faixa etária pediátrica Bebés a (1 23 meses) Crianças (2 12 anos) Adolescentes (13 20 anos) Número de amostras Intervalos de referência (µiu/ml) (miu/l) 94 0,87 6,15 0,87 6, ,67 4,16 0,67 4, ,48 4,17 0,48 4,17 a O limite superior (percentil 97,5) do intervalo de referência para bebés foi determinado como sendo 6,15 μiu/ml (miu/l). Os dados desta população de bebés (n = 94) demonstraram uma distribuição altamente enviesada para a direita. Por conseguinte, a estimativa do limite superior do intervalo de referência possui alguma incerteza com uma probabilidade de 90% de que o limite superior do intervalo de referência pode situar-se entre 5,32 6,98 μiu/ml (miu/l). Tal como com todos os ensaios de diagnóstico in vitro, cada laboratório deve determinar os seus próprios intervalos de referência para a avaliação diagnóstica de resultados do doente 9. Características de desempenho Especificidade A especificidade do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra com hcg, FSH e LH foi determinada através da adição destas hormonas a amostras humanas contendo TSH. A reactividade cruzada do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra demonstrou-se não detectável para a hcg, FSH e LH testadas a µiu/ml (miu/l), 1500 µiu/ml (miu/l) e 600 µiu/ml (miu/l), respectivamente. As substâncias interferentes foram determinadas para o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra no sistema ADVIA Centaur de acordo com o Documento EP7-A2 do CLSI 8. Sensibilidade e limites do ensaio O ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra mede as concentrações de TSH no sistema ADVIA Centaur CP até 150 µiu/ml (miu/l) com uma concentração de limite de branco de 0,005 µiu/ml (miu/l). O limite de branco é definido como a concentração de TSH que corresponde ao 95 percentil da distribuição do padrão zero da TSH. O padrão zero da TSH3-Ultra foi ensaiado 2 vezes em cada uma de 20 corridas utilizando 2 lotes de reagente em 2 sistemas (n=160) durante um período de 10 dias. 8 / _PT Rev. K,

23 Sistema ADVIA Centaur CP O Limite de Detecção (LoD) é determinado de acordo com o protocolo EP17-A do CLSI 11. O limite de detecção é definido como a concentração mais baixa de TSH que pode ser detectada com 95% de probabilidades. O LoD foi determinado utilizando amostras de TSH sérica de baixo nível que foram ensaiadas 2 vezes em cada uma de, pelo menos, 20 corridas utilizando 2 lotes de reagente em 2 sistemas (n=160) durante um período de pelo menos 10 dias. O Limite de Quantificação (LoQ, sensibilidade funcional) do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é a concentração mais baixa à qual a imprecisão total do ensaio não ultrapassa os 20%. A sensibilidade funcional do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é de 0,008 µiu/ml (miu/l). Foi determinada utilizando várias amostras de doentes no intervalo de 0,003 a 0,013 µiu/ml (miu/l). Todas as amostras foram ensaiadas em duplicado em 10 corridas, e em 2 sistemas, durante um período de 10 dias. Com base neste estudo, o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra satisfaz a definição de ensaio de TSH de terceira geração 12,13. O intervalo de limites do ensaio ADVIA Centaur situa-se entre o LoQ e 150 µiu/ml (miu/l) (0,008 a 150 µiu/ml (miu/l)). Comparação de métodos Para 254 amostras no intervalo de 0,0088 a 130,54 µiu/ml (miu/l), a relação entre o ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra e o ensaio ADVIA Centaur TSH-3 medido no sistema ADVIA Centaur CP é descrita pela equação: ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra = 0,99 (ADVIA Centaur CP TSH-3) - 0,06 μiu/ml Coeficiente de correlação (r) = 0,992 Análise de amostras com correspondência plasma versus soro Foram colhidas amostras com correspondência de plasma com heparina, plasma com EDTA e soro de 100 doentes no intervalo de 0,0078 a 146,95 µiu/ml (miu/l). A relação entre as recuperações de TSH para os três tipos de amostra é descrita pela análise da regressão de Deming. ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra (Heparina) = 0,99 (ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra soro) - 0,0003 µiu/ml (miu/l) 100 Pares de Amostras, r = 0,995 ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra (EDTA) = 0,96 (ADVIA Centaur CP TSH3-Ultra soro) + 0,05 µiu/ml (miu/l) 100 Pares de Amostras, r = 0,995 Linearidade Cinco amostras de soro de alto nível foram misturadas com cinco amostras de soro de baixo nível para preparar cinco pools de espaçamento igual, variando entre 0,052 e 126,8 µiu/ml (miu/l). A recuperação média das amostras variou entre 97,4 e 106,5% demonstrando linearidade ao longo do intervalo de limites do ensaio _PT Rev. K, / 12

24 Sistema ADVIA Centaur CP Precisão Normalização A precisão foi avaliada de acordo com o protocolo EP5-A2 do CLSI 14. De acordo com este protocolo, 4 controlos, 6 pools de soro de doentes e um calibrador alto foram ensaiados em duplicado em 2 corridas, em pelo menos 1 sistema ADVIA Centaur CP, utilizando 2 lotes de reagente e 2 lotes de calibrador, durante um período de 20 dias (n 80 para cada amostra). Foram obtidos os seguintes resultados: Amostra Média (µiu/ml) (miu/l) % CV intra-corrida % CV entre corridas % CV total Controlo 1 0,025 4,1 3,0 9,5 Controlo 2 0,361 2,5 3,1 4,9 Controlo 3 3,95 2,4 3,9 5,6 Controlo 4 15,7 2,9 4,4 6,0 Pool de Soro 1 0,944 2,1 1,9 2,9 Pool de Soro 2 4,95 2,1 1,6 2,7 Pool de Soro 3 27,0 2,5 1,7 3,3 Pool de Soro 4 69,9 3,8 1,5 4,2 Pool de Soro 5 114,4 4,4 3,8 6,3 Pool de Soro 6 132,2 4,9 2,7 9,9 Calibrador Alto 96,4 3,6 2,2 6,7 A precisão também foi avaliada para pools de plasma de doentes. Cinco pools de plasma foram ensaiados em duplicado em 2 corridas por dia, num sistema ADVIA Centaur CP, utilizando 2 lotes de reagente e 2 lotes de calibrador durante um período de 20 dias (n = 80 para cada amostra). Foram obtidos os seguintes resultados: Amostra Média (µiu/ml) (miu/l) % CV intra-corrida % CV entre corridas % CV total Pool de Plasma 1 0,599 2,3 1,4 3,0 Pool de Plasma 2 4,53 2,3 1,3 2,9 Pool de Plasma 3 30,3 2,9 1,4 3,7 Pool de Plasma 4 68,3 3,9 0,0 4,8 Pool de Plasma 5 109,0 4,5 2,8 6,2 A normalização do ensaio ADVIA Centaur TSH3-Ultra é rastreável em relação à 3ª norma internacional da Organização Mundial de Saúde (OMS) relativa à TSH humana (IRP 81/565). Uma comparação de todo o intervalo de ensaio resultou na seguinte correlação: ADVIA Centaur TSH3-Ultra = 1,103 (OMS) - 0,111 µiu/ml (miu/l) r = 1,000 Os valores atribuídos aos calibradores são rastreáveis em relação a esta normalização. Assistência técnica Para serviços de atendimento ao cliente, contacte o seu distribuidor ou fornecedor de assistência técnica local. siemens.com/healthcare 10 / _PT Rev. K,

25 Sistema ADVIA Centaur CP Referências 1. Chen IW, Sperling MI. Thyroxine. In: Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical chemistry: theory, analysis, and correlation. 2nd ed. St. Louis: CV Mosby, p Fernandez-Ulloa M, Maxon HR. Thyroid. In: Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical chemistry: theory, analysis, and correlation. 2nd ed. St. Louis: CV Mosby, p Watts NB, Keffer JH. Practical endocrine diagnosis. 3rd ed. Philadelphia: Lea and Febiger, p.1 27, Chattoraj SC, Watts NB. Endocrinology. In: Tietz NW, editor. Fundamentals of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, p Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document H18-A3. 6. Reagent Water Technical Bulletin. Siemens Healthcare Diagnostics, Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34: Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; CLSI document EP7-A2. 9. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Defining, Establishing and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Third Edition. CLSI Document EP28-A3c. CLSI 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA USA, Kratzsch J, Schubert G, Pulzer F, et al. Reference intervals for TSH and thyroid hormones are mainly affected by age, body mass index and number of blood leucocytes, but hardly by gender and thyroid autoantibodies during the first decades of life. Clin Biochem (2008), doi: /j.clinbiochem Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; CLSI document EP17-A. 12. Spencer CA, LoPresti JS, Patel A, et al. J Clin Endocrin Metab. 1990;70(2): Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M. Current status and performance goals for serum thyrotropin (TSH) assays. Clin Chem 1996;42(1): Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document EP5-A2. ADVIA Centaur e ReadyPack são marcas comerciais da Siemens Healthcare Diagnostics Siemens Healthcare Diagnostics. Todos os direitos reservados. US Pat 6,664, _PT Rev. K, / 12

26 Sistema ADVIA Centaur CP Definição dos Símbolos Os seguintes símbolos podem aparecer no rótulo dos produtos: Símbolo Definição Símbolo Definição Dispositivo médico para diagnóstico in vitro Fabricante legal Marca CE Número do catálogo Representante Autorizado na Comunidade Europeia Marca CE, com número de identificação do órgão notificado Consultar as instruções de utilização Risco biológico Não congele (> 0 C) Limites de temperatura Limite inferior de temperatura Limite máximo de temperatura Manter protegido da luz solar e do calor Para cima Use até Contém o suficiente para (n) testes Código de lote Agitar vigorosamente a embalagem de reagente. Consultar Preparação dos reagentes nas instruções do produto ADVIA Centaur específico do ensaio para obter informações detalhadas. YYYY-MM-DD Formato de data (ano-mês-dia) Rev. Revisão Definição da curva padrão Número variável hexadecimal que assegura que os valores da definição de Curva Padrão e de Calibrador são válidos. Detalhes do lote Ponto Verde Reciclar Impresso com tinta de soja 12 / _PT Rev. K,