SIMP.TCC/Sem.IC. 2018(13); FACULDADE ICESP / ISSN:

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1 CURSO DE MEDICINA VETERINÁRIA Análise para detecção de resíduos de antibióticos e teste de lactofermentação no leite cru, pasteurizado e UAT comercializados na região do Gama-DF. Analysis for the detection of antibiotic residues and lactofermentation test in raw milk produced, pasteurized and UAT marketed in the Gama-DF region. Como citar esse artigo: Gomes KM, Souza SMOS. Análise para detecção de resíduos de antibióticos e teste de lactofermentação no leite cru, pasteurizado e UAT comercializados na região do Gama- DF. Anais do 13 Simpósio de TCC e 6 Seminário de IC da Faculdade ICESP. 2018(13); Karina Martins Gomes Stefânia Márcia de Oliveira Souza Resumo A longevidade da sociedade é influenciada também pela qualidade alimentar. Um dos quesitos para que seja mantida a mesma deve-se pela ausência de resíduos medicamentosos de uso veterinário nos alimentos, consequentemente evitando possíveis doenças no homem e qualificando as boas práticas de manejo desde a obtenção do alimento in natura até o processo que chegará o consumidor final, em específico para o leite, a ausência de substâncias irá produzir derivados com composições organolépticas própria de sua matéria-prima. Neste trabalho realizou-se um estudo para detecção de resíduos de antibióticos no leite cru produzido, pasteurizado e UAT comercializados na região do Gama-DF por meio da análise de 30 amostras, utilizando o Kit BALLYA Bio BT Sensor. Obteve-se resultado positivo para presença de Betalactâmicos na amostra LUAT3, sendo em nível superior ao LMR s apresentado pelo fabricante, indicativo de risco para consumo humano. Palavras-chaves: qualidade alimentar; manejo; alimento. Abstract The longevity of society is also influenced by food quality. One of the requirements for maintaining the same is due to the absence of veterinary drug residues in food, consequently avoiding possible diseases in the man and qualifying the good practices of handling from obtaining the food in natura until the process that will arrive the final consumer, in particular for milk, the absence of substances will produce derivatives with their own organoleptic compositions of their raw material. In this work a study was carried out to detect residues of antibiotics in raw milk produced, pasteurized and UAT marketed in the Gama-DF region by means of the analysis of 30 samples, using the BALLYA Bio BT Sensor Kit. A positive result was obtained for the presence of beta-lactams in the LUAT3 sample, being higher than the MRLs presented by the manufacturer, indicative of risk for human consumption. Keywords: food quality; management; food. Contato: karinakary@hotmail.com Introdução O leite é um produto de grande importância para alimentação e economia do país. Possui alta demanda de consumo diário tornando-se necessário o controle da produção, visando à segurança alimentar principalmente com relação a perigos microbiológicos e químicos (ALBERTO et al., 2011). A qualidade do leite é conceituada por características organolépticas, composição físico-química, baixa contagem bacteriana e somática, ausência de conservantes químicos e resíduos de antibióticos (ARAUJO et al., 2014). Dentre os principais problemas de contaminação do leite, temos por antibióticos, oriundos de leite obtido de animais ordenhados e que foram submetidos a tratamento medicamentoso. As doenças desencadeadas pelos micro-organismos causam grandes prejuízos para a produção leiteira, estas devem ser tratadas corretamente respeitando o período de carência do princípio ativo evitando assim seus resíduos no leite que será consumido pela 2397

2 população (SILVA et al., 2013). Com o objetivo de aprimorar a segurança do leite produzido no Brasil, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) instituiu, em 1999, o Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes (PNCR), onde foram selecionadas e analisadas amostras de leite quanto à presença de resíduos (BRASIL, 1999). Boas práticas de produção devem ser seguidas, e incluem a separação do leite dos animais que estão em tratamento, evitando o consumo deste leite, a ingestão de resíduos e prevenindo prejuízos tanto financeiro quanto para saúde humana (FAO, 2013). Pesquisa realizada por KORB et al., 2011, destacou que os princípios ativos mais utilizados por produtores de gado leiteiro no estado de SC, foram Espiramicina, Penicilina G (procaína e benzatina), Oxitetraciclina, Ampicilina, Cloridrato de Tetraciclina, Cloxacilina e Neomicina. Pesquisadores da Universidade Federal Rural de Pernambuco, avaliaram a frequência de resíduos de antibióticos em leite in natura (galões e tanques), de propriedades rurais da região Garanhuns, Pernambuco. Estes utilizaram o kit CharmCowsideII, onde verificou-se que 12 das amostras estudadas (14,29%) foram positivas. A pesquisa revelou nas amostras positivas que os princípios ativos mais utilizados foram tetraciclina e aminoglicosídeos (PEREIRA & SCUSSEL, 2017). A importância do leite no consumo humano O leite como principal fonte de cálcio contribui para formação óssea e também em seu crescimento, além de regular o sistema nervoso e na resistência contra de doenças infecciosas (AMANCIO et al., 2015). Dentre vários componentes do leite as proteínas e sais minerais são fontes indispensáveis para consumo diário em diversas fases da vida desde o nascimento, na juventude, quando adulto e idoso, destaca-se a presença de vitaminas lipossolúveis associadas a moléculas de gordura representando 46% a 53% de seu valor energético, esta irá variar de acordo com a alimentação do gado leiteiro (TOMBINI, et al., 2012). Importância econômica da pecuária leiteira no Brasil De acordo com o historiador DIAS, 2012, ilustrou em seu livro As raízes leiteiras do Brasil a primeira ordenha ocorrida em 1641, numa propriedade rural próxima de Recife. Em 1961, o Brasil produziu cerca de 2,5 milhões de toneladas, dados registrados pela FAO, mesmo com preços limitados e demais dificuldades para os produtores leiteiros a produção o país vem-se desenvolvendo. Dados obtidos em 2015 apresenta a produtividade de 35 milhões de toneladas e em milhões de toneladas de leite (IBGE, 2016). De acordo com VILELA (2015), o Brasil chegará a produzir 47,5 milhões de toneladas de leite. A produção vem aumentando graças a demanda do consumidor cada vez maior pelo próprio leite, produtos lácteos e demais derivados. Qualidade do leite no Brasil e a importância da implementação de tecnologias A qualidade do leite depende do estado de saúde da glândula mamária do animal poderá interferir na qualidade do leite nos rebanhos leiteiros, por esse motivo a contagem de células somáticas é um dos indicadores de qualidade, laboratórios credenciados da Rede Brasileira de Laboratórios de Controle da Qualidade do Leite (RBQL) monitoram a CCS dos rebanhos leiteiros (VEIGA, 2013). Em 2011 foram analisadas 2,4 milhões de amostras de leite de tanque e em 2012 quase 2,8 milhões, 45% das amostras analisadas apresentaram CCS < CS/mL em 2011 e em 2012 próximo de 48%, esse valor estaria dentro dos limites quando o valor máximo prevalecia

3 CS/mL, resultando em 27% das amostras estiveram acima do valor máximo (VEIGA, 2013). No cenário atual, de acordo com a IN62 atualizada em 2018, o nível máximo de CCS aceitável chega até CS/mL. Já a análise de contagem bacteriana total (CBT) as amostras de 2011, 43% ultrapassaram o limite de UFC/mL e em 2012 dessas amostras 40% resultou acima de UFC/mL (VEIGA, 2013). Atualmente de acordo com a IN 62 o limite máximo é UFC/mL (VEIGA, 2013). Produtores têm investido para obtenção do leite com qualidade, consequentemente aprimorando seus derivados para chegada ao consumidor final com segurança, implementando materiais de higiene no local da ordenha e exigindo a utilização destas, solicitando a assistência do médico veterinário para ensinar os melhores métodos para uma boa produção, a instalação correta para receber os animais para ordenha, a ração a ser fornecida e como processada, a qualidade do pasto a disponibilizar e quando rotacionar, o manejo racional com o gado, entre outros meios tecnológicos a serem utilizados influenciam na produção (VILELA et al., 2017). A exigência das indústrias e do consumidor está sendo maior pelo fato da população se informar mais sobre os critérios para haver segurança alimentar, malefícios e benefícios de cada alimento e sua composição. As exigências são importantes para que o produto obtido tenha um valor agregado e justo no comércio para que incentive o investimento para uma produção de qualidade (MEIDEIROS et al., 2017). Utilização medicamentosa na bovinocultura de leite A profilaxia medicamentosa é utilizada para evitar a ocorrência de doenças infecciosas no rebanho, também como tratamento terapêutico. Desvermifugações e vacinações como febre aftosa, raiva, carbúnculo sintomático, tuberculose são necessários para que o rebanho permaneça saudável e consequentemente produzindo um leite de qualidade (MIRANDA, 2012). Em sistemas intensivos de produção leiteira é comum observar o pedilúvio com solução de sulfato de cobre e formol a 5% na entrada e saída do local de ordenha para que se evitem doenças podais, limpeza de feridas, remoção cirúrgica de miíases tecido necrosado, tratamento terapêutico e curativo da ferida diariamente de acordo com o nível que estiver acometido, o casqueamento corretivo também é um modo de tratamento retirando dor e incômodo possibilitando melhor locomoção e beneficiando sua saúde e bem estar (FAO, 2013). Os antimicrobianos possuem capacidade em pequena escala de inibir o crescimento de bactérias e fungos, destruindo seus patógenos (SPINOSA & TÁRRAGA, 2014). O uso indiscriminado destes medicamentos geram consequências para as indústrias alterando a composição do leite e a qualidade de seus derivados, gerando resistência bacteriana para a população, desencadeando possíveis processos alérgicos pela presença de princípios ativos residuais (NUNES et al., 2016). Dentre os antimicrobianos mais utilizados no tratamento de mastite bovina destacam-se os grupos betalactâmicos, aminoglicosídeos, lincosamidas, macrolídeos, polimixinas, quinolonas, sulfas e tetraciclinas (SPINOSA & TÁRRAGA, 2014). Boas práticas na pecuária leiteira Os animais devem ser manejados com qualidade diariamente mantendo o equilíbrio constante de seu organismo para que resulte em boa produção. Seguindo a regra das cinco liberdades livres de sede, fome e desnutrição; livres de desconforto; livres de dor, injúrias e doenças; livres de medo e livres para expressarem os padrões normais de 2399

4 comportamento animal (FAO, 2013). Controlar o trânsito de animais na fazenda e conhecer o estado de saúde do animal que será recebido na propriedade, utilizar somente medicamentos registrados legalmente no comércio, respeitando a dosagem de acordo com o peso e a doença a ser tratada, observando tempo de carência específico de cada medicação (FAO, 2013). Devem ser dotadas medidas de higiene para o local da ordenha, glândula mamária dos animais, assim como para as mãos e roupas do ordenhador. Realizar a colheita somente do leite de animais saudáveis para que não contamine o leite e/ou mesmo os equipamentos da ordenha, após finalizar a ordenha higienizar corretamente os utensílios, mantendo o local de armazenagem do leite sempre limpo (FARJADO et al., 2012). A alimentação do animal varia de acordo com a produção de leite, o mesmo deve receber uma ração de qualidade a qual seja mantida armazenada adequadamente evitando quaisquer desequilíbrios nutricionais no animal, assim como a água deve ser de boa procedência (FAO, 2013). Riscos na ingestão de resíduos de antibióticos e prejuízos para as indústrias. De acordo com a IN 62, considera-se leite, o produto obtido através da ordenha completa da vaca sem interrupções, tendo condições favoráveis de higiene, animais saudáveis prevalecendo o bem estar animal. Leite de demais animais devem ser identificados de acordo com a espécie (BRASIL, 2011), esta matéria prima sendo consumida com resíduos químicos trazem sérios problemas para a saúde pública podendo desencadear reações alérgicas, resistência bacteriana, desequilíbrio na microbiota intestinal, doenças cancerígenas entre outros malefícios (KORB et al., 2011). O uso indiscriminado de medicamentos veterinários pode desenvolver o desequilíbrio na simbiose entre os microrganismos da microbiota entérica dos animais e humanos, outro fator importante é o consumo de leite com alto teor residual por gestantes, uma vez que alguns antibióticos possuem capacidade teratogênica (SILVA et al., 2013). A presença indesejável de resíduos nas indústrias lácteas interfere no crescimento das bactérias responsáveis pela elaboração de queijos, bebidas lácteas, iogurtes, entre outras consequências que alteram a qualidade do produto, podendo comprometer a saúde dos consumidores, consequentemente afetando a economia da região onde se encontra a produção (SILVA, 2011). Métodos de diagnóstico para detecção de resíduos de antibiótico no leite No mercado atual, estão disponíveis vários métodos para detecção de resíduos de antibióticos de acordo com o grupo ao qual deseja trabalhar. De acordo com o MAPA na Instrução Normativa 42/1999, são utilizados os testes ELISA - ensaio imunoenzimático, CLEA cromatografia líquida de alta eficiência, CCD cromatografia por camada delgada, DST - densitometria, CG cromatografia gasosa e EAA espectrofotometria de absorção atômica (BRASIL, 1999). Os métodos microbiológicos, físico-químicos ou imunoenzimáticos estão disponíveis através de Kit s comerciais de testes rápidos para detecção de resíduos, utilizados com maior frequência pelas indústrias, apresentando resultado em minutos (MORAIS et al., 2010). No teste imunoenzimático, o resíduo antimicrobiano irá se ligar as proteínas com seus receptores específicos, sem haver o crescimento bacteriano na amostra de leite, lendo-se o teste de acordo com a coloração apresentada na linha ou círculo de acordo com o kit fornecido como BALLYA bio BT Sensor, Cap Lab ECLIPSE 50 entre outros 2400

5 (BENETTI et al., 2011). Objetivo Detectar resíduos de antibióticos no leite cru, pasteurizado e UAT comercializados na cidade do Gama DF. Objetivos específicos Avaliar a presença de antibióticos betalactâmicos, Penicilina e Tetraciclina em amostras de leite cru, pasteurizado e UAT; Realizar teste de lactofermentação dos leites cru, pasteurizado e UAT. Materiais e Métodos Obtenção das amostras Foram coletadas 10 amostras de leite cru (LC) de propriedades leiteiras localizadas no Gama DF obtidas no momento da ordenha, 10 amostras de leite pasteurizado (LP) e 10 amostras de leite UAT (LUAT) estas foram armazenadas em recipientes estéreis e transportadas sob refrigeração até o laboratório de Bioquímica da faculdade ICESP, Águas Claras DF para realização dos testes e análises microbiológicas. Processamento das amostras Foram pipetadas 200 microlitros (μl) de cada amostra de leite cru e transferidos para os micropoços, procedimento repetido também com o leite de pasteurizado e UAT. No momento da análise as amostras foram mantidas em temperatura ambiente para detectar presença de resíduos de antibióticos. Análises de resíduos de antibióticos Na pesquisa de antibiótico foi utilizado o teste Kit BT Sensor Test (BALLYA bio, Laboratory, Cantão, CHINA ) em todas as amostras, conforme recomendações do fabricante. Este teste detecta resíduos de antibióticos dos grupos Betalactâmicos e Tetraciclinas, em níveis iguais ou inferiores aos limites máximos descritos para resíduos em leite de vaca. Análises de lactofermentação Foram coletadas 10 ml de cada amostra de leite cru, transferidas para tubos esterilizados e incubados a 35ºC por 24 horas; após esse período, foi verificado se houve formação de coágulo, estes foram classificados em D Digerido Resultados e discussão A amostra LUAT3 foi positivo para resíduos de antibióticos do grupo Betalactâmicos, sugestivo de alterações na sua composição físico-química, uma vez que o leite contaminado por antimicrobianos pode acarretar sérios danos à saúde pública desencadeando reações alérgicas, resistência bacteriana, desequilíbrio na microbiota intestinal, doenças cancerígenas entre outros malefícios. Para as indústrias, há queda de produção quando se trata da colonização de bactérias para produção de derivados, uma vez que o resíduo presente irá inibir o crescimento bacteriano. Este teste apresentou resultado negativo no leite cru e pasteurizado, significa que as boas práticas de manejo estão sendo realizadas, respeitando a carência da medicação para consumo do leite, estes são considerados seguros para o consumo. No teste de lactofermentação, das amostras analisadas (n=30), todas as amostras de leite cru e leite pasteurizado resultaram em formação de coágulo, no leite cru houveram 5 resultados para coágulo esponjoso, isto significa más condições de higiene no momento da ordenha, as amostras de leite UAT não houve formação de coágulo, resultado esperado, pois o mesmo passa por um tratamento térmico rápido a uma temperatura de 135 a 150ºC durante 2 a 4 segundos, eliminando 95,5% das bactérias vegetativas presentes no leite, podendo passar por outro processo aprovado pela DIPOA em equipamentos específicos (tabela 1). 2401

6 No estado do Rio Grande do Norte foram colhidas 112 amostras aleatoriamente no momento da entrega do leite em usina de beneficiamento, 6 (seis) apresentaram resultado positivo para resíduos de antibiótico (BARBOSA et al., 2013). No estado de São Paulo foram analisadas 71 amostras de leite cru de tanques refrigerados Realeza, utilizando o kit SNAPduo Beta-Tetra ST Tests (Idexx Laboratories) 17 apresentaram positivo para resíduos de antibióticos dos grupos β- lactâmicos e tetraciclinas. Das 99 amostras de leite não pasteurizado foi realizado o teste para detecção de reríduos de antibióticos do kit ROSA Test (Charm Sciences Inc.) para o grupo de quinolonas e Tabela 1. Resultados das análises de detecção de resíduos de antibióticos e teste de lactofermentação no leite cru, pasteurizado e UAT (n=30) colhidas na região do Gama-DF. particulares e comunitários, no município de Marília 9 (nove) sendo 12,7% foram positivas para a detecção de resíduos de antibióticos da classe dos β- lactâmicos (COSTA et al., 2015). No estado de Rondônia, no ano de 2015 entre janeiro e dezembro foram analisadas amostras de leite em 10 laticínios de cidades em diferentes, dessas amostras foram realizados testes rápidos da marca Twin sensor e pelo teste lento da marca Eclipse 50. Das análises feitas 09 amostras resultaram positivo para resíduos de sulfonamidas, 4 (quatro) amostras foram positivas para quinolonas e 6 (seis) positivas para sulfonamidas (SCHLEMPER et al., 2017). Conclusão O Brasil possui grande escala de produção e comercialização do leite tanto para o próprio país quanto para o exterior. A manipulação para obtenção da matéria prima deve ser aprimorada para que aumente sua qualidade e derivados respeitando o período de carência de cada medicação, descartar o Legenda: LC Leite Cru; LP- Leite Pasteurizado; LUAT Leite Ultra Alta Temperatura; G - Gelatinoso; E Esponjoso; D - Digerido; SC Sem Coágulo. Círculo vermelho indica amostra LUAT3 com resultado positivo para presença de resíduos de antibióticos do grupo Betalactâmicos e Sem Coágulo SC no teste de lactofermentação. antibióticos, sendo 04 amostras detectadas pelo teste lento e 05 amostras detectadas pelo teste rápido (ALVES et al., 2016). leite contaminado por resíduos de antibióticos para garantir a segurança alimentar dos consumidores, realizar as boas práticas de manejo mantendo a TESTE PARA DETECÇÃO DE RESÍDUOS DE ANTIBIÓTICOS TESTE LACTOFERMENTAÇÃO Betalactâmicos Tetraciclinas LC LP LUAT LC LP LUAT LC LP LUAT LC1 = - LP1 = - LUAT1 = - LC1 = - LP1 = - LUAT1 = - LC1 = G LP1 = D LUAT1 = SC LC2 = - LP2 = - LUAT2 = - LC2 = - LP2 = - LUAT2 = - LC2 = G LP2 = D LUAT2 = SC LC3 = - LP3 = - LUAT3 = + LC3 = - LP3 = - LUAT3 = - LC3 = E LP3 = D LUAT3 = SC LC4 = - LP4 = - LUAT4 = - LC4 = - LP4 = - LUAT4 = - LC4 = E LP4 = D LUAT4 = SC LC5 = - LP5 = - LUAT5 = - LC5 = - LP5 = - LUAT5 = - LC5 = G LP5 = D LUAT5 = SC LC6 = - LP6 = - LUAT6 = - LC6 = - LP6 = - LUAT6 = - LC6 = E LP6 = D LUAT6 = SC LC7 = - LP7 = - LUAT7 = - LC7 = - LP7 = - LUAT7 = - LC7 = E LP7 = D LUAT7 = SC LC8 = - LP8 = - LUAT8 = - LC8 = - LP8 = - LUAT8 = - LC8 = E LP8 = D LUAT8 = SC LC9 = - LP9 = - LUAT9 = - LC9 = - LP9 = - LUAT9 = - LC9 = G LP9 = D LUAT9 = SC LC10 = - LP10 = - LUAT10 = - LC10 = - LP10 = - LUAT10 = - LC10 = G LP10 = D LUAT10 = SC Foram coletadas 100 amostras de leite pasteurizado de 13 marcas em diferentes estabelecimentos no estado do Paraná cidade saúde e bem estar do rebanho. 2402

7 Agradecimentos Primeiramente a Deus, sem ele não teria chegado até aqui, a minha família pelo apoio, ao meu companheiro de vida Hélio França que tanto me incentivou e ajudou na elaboração desta pesquisa e minha orientadora Stefânia Márcia por toda colaboração, dedicação e paciência que teve comigo, ao representante Renato da empresa BALLYA bio de Brasília - DF pela atenção e a todos meus professores que estão nessa missão de transmitir o conhecimento diariamente. Agradeço de coração. Referências: 1 - ALBERTO, D. C.; HOLLER, E. Trabalho de conclusão do curso de pós-graduação lato sensu em produção de leite. Monografia. Faculdade de Ciências Biológicas e Saúde da Universidade Tuiuti do Paraná ALVES, G. M. C.; MARTINOTTO, G.; BERTIPAGLIA, L. M. A.; MELO, G. M. P.Boletim técnico 16 Produção animal universidade Brasil: Avaliação de resíduos de antibióticos no leite no recebimento de matéria-prima em laticínios no estado de Rondônia. ISSN , Descalvado, SP. Novembro, AMANCIO, O. M. S.; PAIVA, S. A. R.; DOMENE, S. M. A.; MARCHIONI, D. M. L.; ONG, T. P.; CAS- SANI, R. S. L.; ROGERO, M. M.; FOCK, R. A. Importância do consumo de leite no atual cenário nutricional brasileiro. SBAN Sociedade Brasileira de alimentação e nutrição, ARAUJO, G. B.; SANTOS, H. A.; FARIAS, C. E.; VIANA, D. A. F.; VIEIRA, E. S.; JUNIOR, A. M. F. Detecção de resíduo de antibiótico em leite in natura em laticínio sob inspeção federal Monografia (Graduação em Medicina Veterinária) Faculdade Pio Décimo, Aracajú, Sergipe, BARBOSA, L. S.; GOUVEIA, C. M. E. P.; ANTONIO, S. G. N.; BERG, J. A. S. Resíduos de antimicrobianos em leite bovino cru no estado do Rio Grande do Norte. Monografia. Universidade Federal do Semi-Árido, Mossoró, RN, Brasil BENETTI, T. M.; ABRAHÃO, V. M.; NICKEL, R. Análise comparativa entre os ensaios imunoenzimáticos e microbiológicos para detecção de resíduos de antibiótico em leite. Rev. Inst. Latic. Cândido Tostes, Jul/Ago, nº 381, 66: 41-45, BRASIL. Instrução Normativa n. 42, de 20 de dezembro de Altera o Plano Nacional de Controle de Resíduos em produtos de origem animal PNCR e os Programas de Controle de Resíduos em Carne - PCRC, Mel PCRM, Leite PCRL e Pescado PCRP. In: BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Diário Oficial da União, Brasília, 22 dez., BRASIL. Instrução Normativa n. 62, de 29 de dezembro de Anexo I - Regulamento Técnico de Produção, Identidade e Qualidade do Leite Tipo A. Item In: BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. 9 COSTA, A. B. L.; SOUZA, J. B.; DIAS, L. S. B.; SILVA, L. P.; SPRESSÃO, R. L.; DE PAULA, R. A.; MAIOLINO, S.R.; NICOLAU, W. M. Avaliação de resíduos de antibióticos em leite cru produzido na região de Marília - São Paulo. Monografia. Hospital Veterinário da Universidade de Marília UNIMAR, Marília-SP, Food and Agriculture Organization of the United Nations. Rome: FAO; Disponível em: < e_english.pdf> Acesso em: 29 abr FARJADO, O. C.; EUSTÁQUIO, J. C. M. Gado de leite: o produtor pergunta, a Embrapa responde. 3ª ed. Ver. e ampl. Brasília, DF: Embrapa, IBGE. Pesquisa da pecuária municipal e censo agropecuário. Rio de Janeiro: Sidra, Disponível em:< lis- 2403

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