UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JÚLIO DE MESQUITA FILHO INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS RIO CLARO

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1 unesp UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JÚLIO DE MESQUITA FILHO INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS RIO CLARO CURSO DE ESPECIALIZAÇÃO EM ENTOMOLOGIA URBANA: TEORIA E PRÁTICA DELIMITAÇÃO PREDITIVA DE ÁREAS DE RISCO PARA CASOS DE FEBRE MACULOSA BRASILEIRA A PARTIR DE ANÁLISE DE IMAGENS. DEBORA FUMIE MURAKAMI Monografia apresentada ao Instituto de Biociências do Câmpus de Rio Claro, Universidade Estadual Paulista, como parte dos requisitos para obtenção do título de Especialista em Entomologia Urbana. 12/2015

2 unesp UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JÚLIO DE MESQUITA FILHO INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS RIO CLARO CURSO DE ESPECIALIZAÇÃO EM ENTOMOLOGIA URBANA: TEORIA E PRÁTICA DELIMITAÇÃO PREDITIVA DE ÁREAS DE RISCO PARA CASOS DE FEBRE MACULOSA BRASILEIRA A PARTIR DE ANÁLISE DE IMAGENS. DEBORA FUMIE MURAKAMI ORIENTADOR: Dr. Adriano Pinter dos Santos Monografia apresentada ao Instituto de Biociências do Câmpus de Rio Claro, Universidade Estadual Paulista, como parte dos requisitos para obtenção do título de Especialista em Entomologia Urbana. 12/2015

3 595.7 M972d Murakami, Debora Fumie Delimitação preditiva de para áeas de risco para casos de febre maculosa brasileira a partir de análise de imagens / Debora Fumie Murakami. - Rio Claro, f. : il., figs., gráfs., tabs., fots. Trabalho de conclusão de curso (especialização - Entomologia urbana: teoria e prática) - Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências de Rio Claro Orientador: Adriano Pinter dos Santos 1. Inseto. 2. Cães. 3. Amblyomma aureolatum. 4. Carrapato. 5. Fragmentação florestal. I. Título. Ficha Catalográfica elaborada pela STATI - Biblioteca da UNESP Campus de Rio Claro/SP

4 Dedico este trabalho aos meus filhos Felipe e Rafaela, minhas duas grandes motivações a cada passo dado adiante.

5 AGRADECIMENTOS Ao meu orientador e colega Adriano Pinter dos Santos, pela confiança, paciência, calma e atenção durante todo o processo de elaboração deste trabalho. À Profa. Ana Eugênia de Camargo Campos pelo incentivo, extrema dedicação e carinho dedicado a todos os alunos. Aos Professores Odair José e Osmar Malaspina pela grata hospitalidade no Câmpus de Rio Claro, pelos ensinamentos e sabedoria compartilhados, carinho e dedicação dispensada. Ao colega Adriano pelo vasto conhecimento compartilhado com toda a turma, na identificação de espécies sob as mais variadas e, por vezes, adversas situações apresentadas. Aos queridos Márcia Valbuza e Paulo de Jesus pela amizade, empenho e carinho dedicados ao preparo e condução das aulas. Às queridas Marylin, Marilda, Juliana, Márcia pela amizade, sensibilidade, incentivo, carinho nos momentos mais difíceis. Ao primeiro amigo Odelço e aos queridos Fábio Barros, Ricardo, Roberto, Denis, Jefferson, companheiros eternos. Aos demais amigos da famíia T7, não menos queridos, Joaninha, Elisa, Edna, Simone, Fábio Tatu, Murilo, Osmar, Thayrine, pelos momentos de concentração e de total descontração. Aos colegas e amigos do Núcleo de Controle e Prevenção de Arboviroses da Prefeitura de Mogi das Cruzes pelo incentivo. Aos amigos e eternos parceiros Jefferson Renan de Araújo Leite, Andréa Oliveira Costa e Fernando Hideyuki Orii, pela amizade, pela ajuda direta na coleta de amostras, paciência em enfrentarem situações adversas e apoio total em todos os momentos.

6 Aos parceiros do Centro de Controle de Zoonoses da Prefeitura de Mogi das Cruzes, Enio Roberto Carreiro, Osmar Aragão, Cecília dos Santos, Eduardo Sigahi, pela colaboração direta nas coletas e José Antonio pelo processamento das amostras no laboratório do CCZ. Às minhas eternas amigas Carol, Paula, Timila, Raquel e Mandú que, a despeito da estranheza pela área escolhida, sempre prestaram total apoio e incentivo. A Superintendência de Controle de Endemias, através do Dr. Adriano Pinter dos Santos, meu orientador, por permitir e contribuir com a processamento final das amostras e realização dos testes laboratoriais. Ao Instituto Biológico e ao Centro de Estudos em Insetos Sociais da Universidade Estadual Paulista pela oportunidade de acesso a estas duas renomadas e memoráveis instituições e seus grandes profissionais. A todos que direta ou indiretamente tenham contribuído para a realização e conclusão deste trabalho e que por ventura não tenham sido aqui mencionados. Às amigas Vanda Lúcia e Rosa Azevedo, por tornarem menos dolorosas e penosas as minhas ausências na rotina materna. À minha família, base essencial à minha formação e motivação.

7 RESUMO A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma zoonose que tem como agente patogênico a bactéria Rickettsia rickettsii. O município de Mogi das Cruzes (SP) é considerado área endêmica e, assim como outras áreas da Região Metropolitana de São Paulo, tem o carrapato Amblyomma aureolatum (Acari: Ixodidae, Amblyominae) como principal vetor. O A. aureolatum realiza seu ciclo no interior das matas, e o cão doméstico, que atua como principal hospedeiro do estágio adulto desse carrapato em áreas degradadas tem papel significativo na manutenção do ciclo da doença, ao transportar carrapatos infectados das áreas de mata para o ambiente urbanizado. O presente trabalho teve como objetivo classificar três áreas do Município de Mogi das Cruzes quanto ao risco da transmissão da FMB para a população humana baseando-se em características paisagísticas florestais e validar modelo preditivo utilizando-se levantamento sorológico canino para avaliar a circulação de R. rickettsii nessas áreas. Foram selecionadas três áreas com diferentes graus de cobertura florestal e coletadas amostras de sangue de 317 cães. As amostras foram submetidas a teste sorológico de imunofluorescência indireta para a bactéria R. rickettsii. A soroprevalência encontrada variou de 0 a 82,32%. A análise combinada dos resultados sorológicos e a métrica das imagens aéreas, demonstrou que áreas mais preservadas, com menor fragmentação florestal, têm menores chances de ocorrência de casos de FMB, em relação a áreas com maior fragmentação, sugerindo relação entre a soroprevalência de infecção por R. rickettsii em cães domésticos e o grau de degradação. A análise da cobertura florestal através de imagens de satélite reforça o uso deste recurso como ferramenta de delimitação preditiva de áreas de risco para FMB onde o A. aureolatum é o principal vetor, como na Região Metropolitana de São Paulo. Palavras-chave: Febre Maculosa Brasileira. Amblyomma aureolatum. Rickettsia rickettsii. Imagens aéreas. Cães.

8 ABSTRACT Brazilian Spotted Fever (BSF) is a zoonotic tick-borne disease caused by the bacterium Rickettsia rickettsii. Mogi das Cruzes county is a well-known endemic area and, as well as others counties in the Metropolitan Region of São Paulo, the tick Amblyomma aureolatum (Acari: Ixodidade, Amblyominae) is the main vector. Since the A. aureolatum needs moist habitats like inner rainforests, domestic dog may play an important role in carrying adult ticks from inside the forest to the human environment, acting as a main host e maintening the natural cycle of BSF. The present study aimed to classify three areas in Mogi das Cruzes county about the risk of transmission of BSF to human population based on forest landscape features and validate predictive model using survey selected three areas with different degrees of coverage forestry and collected blood samples from 317 dogs. Samples were subjected to Indirect Immunofluorescence Serologic Test for the bacterium R. rickettsii. The seroprevalence ranged from 0 to 82.32%. The combined analysis of serological results and the metric of aerial images showed that areas with less forest fragmentation, have lower chances of occurrence of BSF, in relation to areas with greater fragmentation, suggesting a relationship between the prevalence of infection R. rickettsii in domestic dogs and the degree of degradation. Analysis of forest cover using satellite images enhance the use of this resource as a predictive tool demarcation of risk areas for BSF where the A. aureolatum is the main vector, as in the Metropolitan Region of São Paulo. Keywords: Brazilian Spotted Fever. Amblyomma aureolatum. Rickettsia rickettsii. Aereal images. Dogs.

9 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO REVISÃO DE LITERATURA JUSTIFICATIVA OBJETIVO MATERIAL E MÉTODOS Áreas de estudo Métrica e variáveis de paisagem Área de floresta 2 km Perímetro de borda Área de floresta 10 km Amostragem dos animais Colheita de sangue Reação de imunoflorescência indireta (RIFI) Análise dos dados RESULTADOS DISCUSSÃO CONLUSÕES REFERÊNCIAS... 42

10 8 1 INTRODUÇÃO Dentro do filo Arthropoda, os carrapatos são considerados vetores de um número de agentes infecciosos, maior do que qualquer outra ordem superando, inclusive, a dos mosquitos (HOOGSTRAAL, 1985). As espécies de maior importância médico-veterinária, envolvidas na epidemiologia de doenças zoonóticas representa cerca de 10% das espécies descritas. (BARROS-BATTESTI 1998; NAVA et al, 2009). A Febre Maculosa Brasileira é uma doença febril aguda, transmitida por carrapatos e causada pela bacteria Rickettsia rickettsii (PINTER et al., 2008). Mogi das Cruzes, município de 388 mil habitantes da Grande São Paulo, registrou os primeiros casos de febre maculosa brasileira em seu território no ano de 1998, na forma de um surto, quando 05 (cinco) casos humanos de uma mesma família foram confirmados, com letalidade de 80%, em região da zona rural do município denominada Distrito de Taiaçupeba, área de mananciais, vizinha a Serra do Mar, com ilhas de mata isoladas e população aproximada de 3500 habitantes. Nos anos seguintes, a doença passa a se manifestar de forma endêmica (CAMPOS et al., 2014). Na grande maioria destas áreas endêmicas, o carrapato Amblyomma cajennense é incriminado como o principal vetor da doença, estando geralmente presente em populações numerosas, fruto de desequilíbrio causado pela abundância de alguns de seus hospedeiros primários, tais como eqüinos e capivaras. No entanto, o foco endêmico de Mogi das Cruzes se diferencia por apresentar o carrapato Amblyomma aureolatum como vetor (PINTER E LABRUNA, 2006). O A. aureolatum é típico das áreas de Mata Atlântica, onde condições de alta umidade e temperaturas amenas ocorrem durante todo o ano (PINTER et al., 2004) a exemplo da região de Taiaçupeba. Em condições naturais, em ambientes ecologicamente inalterados, o A. aureolatum parasita carnívoros selvagens, entretanto, em áreas rurais próximas a fragmentos florestais remanescentes, são encontrados parasitando cães domésticos, o que consiste em uma importante forma de carreamento do vetor das áreas florestais para as áreas habitadas pelo homem ocasionando um parasitismo acidental do homem (PINTER et al., 2004). Segundo estimativa da Organização Mundial de Sáude (OMS), cerca de um quarto das doenças de ação global pode ser atribuída a modificações ambientais

11 9 (PERIAGO et al., 2007). O contínuo processo de urbanização e suas consequentes alterações nos habitats naturais têm causado importantes alterações nos padrões de infestação dos artrópodes e das doenças emergentes nas quais estão envolvidos (GENCHI, 1992).

12 10 2 REVISÃO DE LITERATURA A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma zoonose que ocorre nos Estados Unidos da América (EUA) com o nome de Febre Maculosa das Montanhas Rochosas (FMMR), Febre Manchada no México e Febre de Tobia na Colômbia (GUEDES et al., 2005). No Brasil foi descrita pela primeira vez em 1929 na cidade de São Paulo, por José Toledo Piza, considerada, entretanto, como tifo exantemático, hipótese desconsiderada em 1932 quando o mesmo autor, após estudos epidemiológicos, verificou semelhança desta doença com a FMMR. Em 1939 estudos realizados por Travassos e Dias concluem serem doenças causadas pelo mesmo agente (TRAVASSOS e DIAS, 1939) A FMB tem sido relatada no Brasil desde a década de As décadas subsequentes seguiram com poucos relatos até o início dos anos 80, quando houve uma clara reemergência da doença, e novos casos passaram a ser relatados em São Paulo e Minas Gerais. A partir de 2001, quando se tornou de notificação compulsória no país, casos de FMB passaram a ser notificados em outros Estados como Rio de Janeiro, Espírito Santo, Bahia, Distrito Federal, Paraná, Santa Catarina e Rio Grande do Sul (GALVÃO et al, 2003; LABRUNA, 2009; SÃO PAULO, 2011). A taxa de letalidade da FMB no Brasil está entre de 20% a 40%, chegando a 80% em pacientes que retardam o tratamento. A provável causa do diagnóstico tardio é a inespecíficidade dos sintomas iniciais, como: febre, cefaleia, mialgia, malestar, náuseas e vômito, comuns a outros agravos febris como dengue, leptospirose, gripe, meningite meningocócica. (ANGERAMI et al, 2006; BRASIL 2008; LABRUNA et al, 2014) Atualmente, os casos de FMB são frequentemente relatados no sudeste e sul brasileiro, nos Estados do Rio de Janeiro, Minas Gerais, São Paulo, Espírito Santo e Paraná, sendo a maior incidência de casos relatados no Estado de São Paulo (SZABÓ et al, 2013) onde foram notificados 555 casos de FMB com 224 óbitos (letalidade de 40%), entre 1985 e 2012 (São Paulo- Secretaria de Estado da Saúde). Diferentes espécies de carrapatos têm sido implicadas como vetores da bactéria R. rickettsii em diferentes regiões (LABRUNA et al., 2011). Nos EUA a FMMR é transmitida por carrapatos do gênero Dermacentor e Riphicephalus (DENISON et al, 2014; DEMMA et al, 2005), no México, carrapatos do gênero

13 11 Riphicephalus são considerados os principais vetores, junto com carrapatos do gênero Amblyomma, que possui o principal complexo de espécies vetoras na América central e sul (MCDADE; NEWHOUSE, 1986; PIRANDA et al 2011; SARAIVA, et al 2014). No Brasil, são estimadas 61 espécies de carrapatos (DANTAS-TORRES et al., 2009), sendo o gênero Amblyomma o mais numeroso e o de maior importância médica, uma vez que inclui as principais espécies que parasitam humanos (RIBEIRO et al., 2013). No Estado de São Paulo, duas espécies de carrapatos estão envolvidas na transmissão de Rickettsia rickettsii aos humanos: Amblyomma cajennense na região centro-oeste e o carrapato Amblyomma aureolatum na região metropolitana, composta por 39 municípios e repleta de remanescentes de Floresta Pluvial Atlântica (PINTER, LABRUNA, 2006). Os casos de FMB nesta área estão restritos a região sul e leste da metrópole, incluindo os municípios de São Paulo, Diadema, São Bernardo, Santo André, Mauá, Ribeirão Pires e Mogi das Cruzes, sendo a letalidade média na região superior a 50% (OGRZEWALSKA et al, 2012). A bactéria Rickettsia rickettsii é considerada a espécie de Rickettsia mais patogênica do mundo e, depois do vírus rábico possivelmente o agente mais letal para humanos no Brasil, uma vez que casos humanos não tratados de FMB apresentam uma letalidade de 100% (LABRUNA; MACHADO 2006; GUEDES et al, 2011). As riquétsias são mantidas na natureza em determinados artrópodes como carrapatos, piolhos e pulgas. Embora primariamente associadas a artrópodes, as riquettsias também são frequentemente capazes de infectar vertebrados, incluindo o homem, que são usualmente, hospedeiros acidentais (LEVINSON, 2010; MARTINEZ; TRABULSI, 2010) A distribuição de R. rickettsii está restrita às Américas, havendo relatos no Brasil, Estados Unidos, Canadá, México, Panamá, Colômbia, Costa Rica e Argentina, (HORTA, et al, 2010; PINTER; LABRUNA 2006; LABRUNA; MACHADO 2006; GUEDES et al, 2005, LABRUNA et al 2011). As rickettsias podem ser mantidas nas populações de carrapatos por transmissão transovariana (da fêmea para os ovos) e perpetuação transestadial (através da mudança para cada novo estágio do ciclo de vida do vetor) do agente, sendo o carrapato considerado o reservatório da bactéria na natureza (LABRUNA; MACHADO, 2006; GRASPERGE, 2012)

14 12 Na América Latina e Caribe um total de treze espécies de Rickettsia foram reportadas, e oito estão relacionadas com doenças humanas. No Brasil são relatadas a R. rickettsii, R. parkeri, R. typhi e R. felis. (LABRUNA et al, 2011). Recentes estudos realizados em São Paulo referem uma nova riquettsia do Grupo Febre Maculosa (GFM) denominada Rickettsia sp cepa Mata Atlântica (SPOLIDORIO et al, 2010). No Brasil, somente a espécie R. rickettsii foi isolada em humanos, enquanto outras espécies já foram isoladas em carrapatos e pulgas em diferentes regiões do país, incluindo R. parkeri, R. belli, R. amblyommi e R. rhipicephali, em carrapatos, e R. felis em pulgas. (MELLES; COLOMBO; SILVA, 1992; LABRUNA et al, 2004b LABRUNA, et al, 2005; NASCIMENTO et al, 2005; PINTER; LABRUNA, 2006; LABRUNA et al, 2007; SILVEIRA et al, 2007; TAMEKUNI et al, 2011; TOLEDO et al, 2011). A principal técnica para o diagnóstico sorológico de riquetsias no homem e nos animais é a imunofluorescência indireta (HORTA et al, 2007; PINTER et al, 2008). Carrapatos são artrópodes ectoparasitas, hematófagos, de distribuição mundial, sendo encontrados parasitando uma grande diversidade de hospedeiros como: anfíbios, répteis, aves e mamíferos. Estão compreendidos no Filo Arthropoda, Subclasse Acari, Classe Arachnida, Ordem Parasitiformes, Subordem Ixodida (KLONPEN et al, 1996; BARROS-BATTESTI, 1998; SÃO PAULO, 2004a). Atualmente existem cerca de 880 espécies de carrapatos descritas no mundo, sendo divididas em três famílias: família Ixodidae (denominados carrapatos duros) com aproximadamente 692 espécies descritas; família Argasidae (denominados carrapatos moles) com 186 espécies; e a família Nuttalliellidae representada por apenas uma espécie. Enquanto representantes das famílias Argasidae e Ixodidae distribuem-se amplamente em todos os continentes, a última família é restrita ao continente Africano (BARROS-BATTESTI, 2006; NAVA et al, 2009). Todos os carrapatos da família Ixodidae passam por quatro estágios em seu ciclo de vida: ovo, larva, ninfa e adulto, com apenas um estágio ninfal. Todos os estágios, exceto os ovos, necessitam parasitar um hospedeiro para dar sequência ao seu ciclo. Alguns carrapatos parasitam um único hospedeiro, sendo denominados de carrapatos monoxenos, outros parasitam diferentes hospedeiros em cada estágio, sendo denominados de carrapatos trioxenos sendo este comportamento um

15 13 facilitador para a transmissão dos patógenos na natureza, permitindo o contato do agente com diferentes hospedeiros (SÃO PAULO, 2004a) A família Ixodidae pode ser dividida em dois grupos, Prostriata e Metastriata. O primeiro representado por um único gênero, Ixodes (subfamília Ixodinae) e o segundo grupo com quatro subfamílias: Amblyominae, Haemaphysalinae, Hyalomminae e Rhipicephalinae (BLACK; PIESMAN, 1994). Registram-se 126 espécies válidas do gênero Amblyomma, distribuídas nas Américas, Ásia, África e Oceania, sendo metade dessas espécies endêmicas do continente americano. Das 126 espécies pertencentes ao gênero Amblyomma, 57 são restritas a região Neotropical e são encontradas parasitando uma grande diversidade de hospedeiros como anfíbios, répteis, pássaros e mamíferos, além de atuarem como reservatórios e vetores de diversos agentes patogênicos (BALASHOV, 1993; MARRELLI et al, 2007). Na América do Sul, os gêneros Amblyomma e Ixodes são representados por 50 e 40 espécies respectivamente. O gênero Amblyomma destaca-se com 21 espécies já coletadas parasitando seres humanos, o que demonstra sua significativa importância na saúde pública do continente, em contraste ao gênero Ixodes com uma única espécie coletada. O inverso ocorre na América do Norte, Europa e Ásia, onde o gênero Ixodes tem maior representatividade quanto ao parasitismo humano (GUGLIELMONE et al, 2006). No Brasil, a fauna de carrapatos é composta por 65 espécies e dividida entre as famílias Ixodidade e Argasidae. A primeira família é a maior e composta pelos gêneros Amblyomma (34 espécies), Ixodes (8), Haemaphysalis (3), Rhipicephalus (2), e Dermacentor (1), espécies de maior importância médico-veterinária (SÃO PAULO, 2004a; SABATINI et al, 2010). O carrapato da espécie A. aureolatum foi primeiramente descrito por Pallas em 1772, em um estudo realizado no Rio de Janeiro, Brasil. Posteriormente, em 1844, Koch descreve a mesma espécie com a denominação Amblyomma striatum. A descrição feita por Kock prevaleceu por muitos anos, até 1961, quando Aragão e Fonseca concluíram tratarem-se de uma única espécie. Desde então a terminologia utilizada e mantida é a proposta por Pallas (ARAGÃO;FONSECA, 1961; RODRIGUES et al, 2002; GUGLIELMONE et al, 2003). Esta espécie ocorre na Argentina, Brasil, Guiana Francesa, Paraguai, Suriname e Uruguai. (LAVINA et al, 2011). Em 1936, Aragão menciona a espécie

16 14 como possível transmissora do agente causador da FMB em São Paulo, e traz dados sobre sua distribuição geográfica e seus hospedeiros, citando o cão como um hospedeiro comum desse carrapato (ARAGÃO, 1936) Casos humanos de FMB associadas a A. aureolatum ocorrem quando adultos do carrapato parasitam cães domésticos que tem acesso a áreas de mata, trazendo carrapatos para as residências humanas adjacentes a fragmentos de Mata Atlântica (SÃO PAULO, 2011; ANGERAMI et al, 2012). Por serem considerados sentinelas para FMB, onde esta é transmitida por carrapatos da espécie A. aureolataum, estudos de soroprevalência de R. rickettsii em cães podem ser úteis na determinação de áreas endêmicas para a doença (PINTER et al, 2008; OGRZEWALSKA et al, 2012) Estudo experimentais realizados por Labruna e colaboradores (2011), mostraram que essa espécie é capaz de manter a bactéria R. rickettsii por perpetuação transestadial e transmissão transovariana a uma taxa de 100%, o que demonstra a competência vetorial dessa espécie. Entretanto, a infecção por R. rickettsii mostrou exercer efeito deletério nesses carrapatos, contribuindo assim para a manutenção de baixas taxas de infecção (<1%) dessas populações na natureza, como demonstrado por Pinter e Labruna (2006). A crescente urbanização e consequente destruição das matas fazem com que o A. aureolatum esteja atualmente restrito às fragmentações de Mata Atlântica na Região Metropolitana de São Paulo. A principal característica de uma mata fragmentada com capacidade para sustentar uma população de A. aureolatum é a formação arbórea com cobertura vegetal suficiente para impedir que os raios solares alcancem diretamente o chão, além de alta umidade e temperaturas amenas. As comunidades sob risco de parasitismo por esta espécie são aquelas localizadas próximas às bordas destas áreas (PINTER et al, 2004; SÃO PAULO, 2004). Os estágios imaturos do carrapato da espécie A. aureolatum utilizam aves passeriformes e algumas espécies de roedores como hospedeiros primários, enquanto o estágio adulto tem como hospedeiros primários carnívoros silvestres em áreas mais preservadas, e o cão doméstico em áreas com maior alteração antrópica. Os hospedeiros secundários para os estágios imaturos são desconhecidos e os demais carnívoros, como os felinos, são os hospedeiros secundários para o estádio adulto. O homem só é parasitado pela forma adulta do carrapato, geralmente por um

17 15 único carrapato (ARZUA et al, 2003; SÃO PAULO, 2004; LABRUNA et al, 2009; OGRZEWALSKA et al, 2012). Estudo recente realizado por Saraiva e colaboradores (SARAIVA et al., 2014) demonstrou que são necessários dez minutos de fixação no hospedeiro para que haja transmissão da R. rickettsii se o carrapato estiver sendo alimento previamente em outro animal. Assim como o homem, cães também são susceptíveis a infecção pela bactéria R. rickettsii, (PIRANDA et al, 2008); porém com menor letalidade do que em humanos. A capacidade de resposta imunológica à bactéria, desenvolvida pelos cães, permitiu estudo realizado por Pinter e colaboradores (2008), demonstrando o monitoramento sorológico de cães como importante ferramenta para determinar a circulação da bactéria R. rickettsii em regiões onde os casos humanos estão relacionados ao vetor A. aureolatum, cujo cão é hospedeiro primário do estágio adulto. O homem, por meio de suas ações no ambiente, tem modificado significativamente a estrutura e função das mais diversas paisagens, resultando em mudanças das mais variadas. Uma dessas mudanças, resultante da ação antrópica, é o processo de fragmentação florestal, que pode ser definido como a progressiva divisão de uma área grande e homogênea de floresta, em pequenos fragmentos. As consequências da fragmentação incluem a perda de habitat para algumas espécies de plantas e animais, o favorecimento de espécies mais resilientes, diminuição no tamanho dos fragmentos, aumento na distância entre os fragmentos e aumento de borda (perímetro) em detrimento da área (REED, 1996). A emergência de doenças infecciosas, também é um resultado potencial do processo de fragmentação, uma vez que a alteração no ambiente pode favorecer o contato de agentes patogênicos, seus vetores e hospedeiros, além da perda de biodiversidade nesses locais, que também leva à perda do efeito diluição (MCCALLUM, 2008; OGRZEWALSKA, et al, 2011) A hipótese do efeito de diluição sugere que a biodiversidade é capaz de reduzir o risco de certas doenças infecciosas, incluindo doenças transmitidas por vetores. Quando ocorre um aumento na biodiversidade, a probabilidade de um vetor encontrar um hospedeiro altamente competente, com capacidade de transmitir um patógeno é reduzida, levando a uma diluição desse patógeno na natureza, quando o

18 16 contrário levaria a uma amplificação (JOHNSON; THIELTGES, 2010; OSTFELD; KEESING, 2012; MILLER;RUPPERT, 2013). O bioma Mata Atlântica brasileiro possui um dos maiores graus de biodiversidade e variedade de espécies endêmicas do planeta. Apesar dessa importância, esse bioma passou por grandes alterações na sua estrutura e tem sido degradado pelos processos de uso e ocupação do solo e exploração de recursos naturais, que influenciam os processos de desmatamento, fragmentação e reflorestamento (FREITAS, 2009; HILL et al, 2011; LIRA et al, 2012). Dados da Fundação SOS Mata Atlântica, indicam há ainda aproximadamente 12, 5% de remanescentes florestais de Floresta Pluvial Atlântica. A área original do bioma no Brasil abriga hoje uma população de 131 milhões de habitantes, além de 20 mil espécies de plantas e espécies animais. Altos níveis de desmatamento permanecem em algumas regiões. As taxas anuais na região Metropolitana de São Paulo estão acima de 2,9%. Apesar de ter havido um recuo nas taxas de perda florestal e fragmentação, ainda se observam efeitos prejudiciais para muitas espécies da fauna, particularmente em populações de aves, insetos e carnívoros de médio e grande porte (TABARELLI et al, 2010). A grande influência na dinâmica de doenças faz com que a epidemiologia de paisagem seja um campo de estudo crescentemente utilizado na saúde pública. Consiste no uso de ferramentas espaciais (sistema de informação geográfico, sensoriamento remoto e georreferenciamento) para um melhor entendimento da dinâmica das doenças, sendo assim capaz de descrever como a dinâmica de hospedeiros, vetores e patógenos interage espacialmente em um ambiente permissivo para que ocorra transmissão, através da caracterização espacial de particularidades como vegetação, clima, latitude, elevação e geologia (MCCALLUM, 2008; REISEN, 2010).

19 17 3 JUSTIFICATIVA O município de Mogi das Cruzes/SP tem sido área de amplos estudos sobre a epidemiologia da FMB transmitida por A. aureolatum, com ocorrência de casos da doenças entre os anos de 1998 e O desenvolvimento de estudos no sentido de permitir a classificação de áreas e delimitação preditiva do risco de transmissão para seres humanos é uma importante ferramenta para o planejamento de ações que visem a prevenção e/ou o controle da FMB em áreas cujo vetor seja o A. aureolatum.

20 18 4 OBJETIVO Classificar três áreas do Município de Mogi das Cruzes quanto ao risco da transmissão da Febre Maculosa para a população humana baseando-se em características paisagísticas florestais e validação do modelo preditivo utilizando-se inquérito sorológico canino para avaliar a circulação de R. rickettsii nessas áreas.

21 19 5 MATERIAL E MÉTODOS 5.1 Áreas de estudo Foram selecionadas três áreas (Figura 1) com diferentes graus de fragmentação florestal no município de Mogi das Cruzes, com registros de casos humanos de Febre Maculosa Brasileira e/ou potenciais áreas para ocorrência do carrapato A. aureolatum, segundo dados ecológicos e epidemiológicos. O perfil de cada área foi definido a partir de análises visuais de paisagem e registros de casos humanos. Cada área recebeu um código numérico (Tabela 1). Figura1. Foto de satélite. Áreas selecionadas para estudo de soroprevalência canina. Área 1 Área 2 Área 3

22 20 Tabela 1. Áreas selecionadas para o estudo, segundo o perfil de fragmentação. Área Longitude Latitude Bairro Grau de fragmentação florestal Registro de casos humanos Jardim Aracy Média Taiaçupeba Alta São Sebastião Baixa Métrica e variáveis de paisagem Imagens de satélite foram geradas por meio do aplicativo Google Earth Pro (Satélite Landsat, data de passagem em outubro de 2012), sendo esse mesmo aplicativo utilizado para o cálculo das métricas. Para cada localidade, um raio de 2km foi delimitado a partir da borda da área de ocupação humana, levando em conta o local de coleta de amostras dos cães selecionados para o estudo. O raio calculado, baseia-se no fato de cães percorrerem uma distância máxima de 2km entre o local onde vivem, e o interior dos fragmentos de mata que visitam (FRIGERI, 2013). A fragmentação florestal foi o parâmetro central que norteou a seleção de variáveis de paisagem utilizadas no estudo, dado que o processo de fragmentação depende de uma série de fatores para sua ocorrência. As variáveis selecionadas estão descritas a seguir: Área de floresta 2 km Quantidade de floresta, em hectares, com influência sobre os cães do estudo, situados dentro do raio delimitado. Fragmentos dentro do raio de 2km, e com pequenas distâncias entre si (máximo de 100m) também foram incluídos no cálculo, pois apesar de não haver uma conexão estrutural (física) entre os fragmentos, há uma conexão funcional entre eles, ou seja, os cães são capazes de acessar esses fragmentos.

23 Perímetro de borda Soma dos perímetros dos fragmentos de floresta contidos no raio de 2km mensurados no item 5.2.1, medidos em quilômetros Área de floresta 10 km Área de floresta presente em um raio de 10km. O raio de 10km foi delimitado com o objetivo de determinar se a quantidade de floresta presente em cada área de estudo aumentaria ou permaneceria a mesma em relação a área de floresta no raio de 2km. Somente áreas com conexão funcional em relação ao raio de 2km foram incluídas no cálculo. 5.3 Amostragem dos animais Para o estudo transversal de soroprevalência, foram coletadas amostras de 317 cães no total, distribuídos conforme tabela 2. O tamanho das amostras das áreas 1 e 3 basearam-se em estudo anterior realizado na região Metropolitana de São Paulo (OGZEWALSKA et al, 2012). Para a área 2 (249) foram utilizadas amostras coletadas durante trabalho do Programa municipal de prevenção, controle e monitoramento da FMB, mantido pelo serviço de controle de zoonoses da Prefeitura de Mogi das Cruzes desde o ano de Os critérios para a seleção dos cães seguiram sugestão da literatura (PINTER et al, 2008): cães nascidos e crescidos na área (no caso de serem positivos no teste sorológico, não haveria dúvida do local de infecção), sem alterações clínicas, particularmente em visão, propriocepção, locomoção e sistema neurológico, e ter acesso irrestrito e em abundância ao interior das áreas de mata. Tabela 2. Áreas selecionadas para o estudo, segundo o perfil de fragmentação. Área Tamanho da amostra (N)

24 Colheita de sangue A punção venosa foi realizada através da veia cefálica ou safena, colhido por médicos veterinários (Figura 2), após autorização dos proprietários. Figura 2: Procedimentos para colheita de sangue Fonte: Próprio autor Foram utilizadas luvas de procedimento e a antissepsia do local da colheita foi realizada por meio de uso de álcool iodado 1%. Os cães foram contidos amordaçados garantir a segurança dos profissionais e proprietários durante o procedimento. O volume de sangue coletado variou de 1 a 3 ml de acordo com porte do animal, pressão e calibre venosos, utilizando-se seringa (3mL) e agulha (25x8) descartáveis. O sangue coletado foi transferido para tubos S. Monovette Sarstedt (Figura 3), identificados por numeração sequencial, acondicionados em recipiente térmico com gelo reciclável para preservação. As amostras foram encaminhadas ao laboratório do Centro de Controle de Zoonoses do município para processamento que consistiu em centrifugação por 5 minutos a rpm levando ao processo de separação do soro. O soro obtido após a centrifugação foi separado e transferido para microtubos plásticos (1,5 ml), os quais foram etiquetados e estocados em congelador a -20º C até encaminhamento ao laboratório de imunodiagnóstico da

25 23 Superintendência de Endemias do município de São Paulo, onde foram realizadas as análises sorológicas através de Reação de Imunofluorescência Indireta. Figura 3: Materiais de coleta. Fonte: próprio autor Durante as coletas, uma ficha de dados foi preenchida, com a finalidade de obter informações complementares sobre os cães (Apêndice 1), como sexo, idade, endereço, presença de carrapatos, etc. A cada ponto de coleta foram obtidas as coordenadas geográficas para posterior georreferenciamento. 5.5 Reação de imunoflorescência indireta (RIFI) A reação de imunofluorescencia indireta (RIFI) é o método sorológico mais utilizado para o diagnóstico das rickettsioses, sendo considerado padrão-ouro e o mais disponível na rotina laboratorial (BRASIL, 2005). Os soros dos 317 cães foram descongelados e testados para determinação individual do título de anticorpos anti-rickettsia, conforme protocolo adaptado e recomendado pelo National Center for Infectious Diseases /EUA. 5.6 Análise dos dados Partindo do princípio que as variáveis de paisagem apresentam características particulares em cada área de estudo (áreas de mata de tamanhos diferentes, perímetros de borda variados), cada uma dessas variáveis pode ter uma

26 24 maior ou menor importância na variação da soroprevalência entre os locais do estudo. Cada variável de paisagem recebeu um código, demonstrado a seguir: Área de floresta 2km(B) Perímetro de borda (A) Área de floresta 10km (C) Os valores das variáveis paisagísticas foram utilizados para determinação de fatores de risco e proteção quanto a transmissão de FMB para seres humanos, como descrito por Scinchi (SCINACHI, 2015). O tamanho de área de floresta é associado diretamente a um fator de proteção, visto que grandes áreas florestais em um raio de 2 km diminuem a chance de um cão doméstico adentrar significativamente o interior da mata e grandes áreas florestais em um raio de 10 km indicam maior conexão funcional e portanto maior chance de existência de canídeos nativos, como o cachorro-do-mato, animal que compete com o cão doméstico pelo uso da matriz florestal (FRIGERI, 2013) O tamanho do perímetro da área florestal dentro do raio de 2 km é associado diretamente a um fator de risco, visto que quanto maior o perímetro em relação a área, maior será o nível de fragmentação da matriz florestal e por consequência maior será a quantidade de bordas florestais que potencialmente podem ser utilizadas por cães domésticos como porta de entrada para a floresta, estudos mostram que em áreas altamente fragmentadas, os cães domésticos podem adentrar até metros na matriz florestal (FRIGERI, 2013). Assim, como determinando por Scinachi (SCINACHI, 2015) o fator de proteção (P) e o fator de risco (R) são calculado da seguinte forma: P = log(área2km). log(área10km) R = perímetro de borda / ÁREA2km Sendo que Área2km é referente a área florestal em hectares dentro de um raio de 2 km, ÁREA10km é referente a área floresal em hectares dentro de um raio

27 25 de 10 km e perímetro de borda é o valor em quilômetros da soma dos perímetros dos fragmentos dentro de um raio de 2 km.

28 26 6 RESULTADOS As imagens das três áreas de estudo geradas por satélite (Landsat -Google Earth Pro), estão demonstradas a seguir juntamente com suas métricas (Figuras 4 a 15). A cada área estão vinculadas quatro imagens: a primeira corresponde ao traçado da área selecionada (2 km de raio a partir dos pontos de coleta de amostras), a segunda destaca as bordas das fragmentações florestais dentro do raio de 2 km, a terceira amplia a área selecionada em um raio de 10 km, e a quarta imagem traça as bordas das áreas florestais remanescentes nas duas áreas (2 e 10km) para avaliação da conexão funcional. Figura 4 Área 1 Jardim Aracy raio de 2 km

29 27 Figura 5 Área 1 Jardim Aracy Raio de 2km e traçado de perímetro do remanescente florestal (borda) Figura 6 Área 1 Jardim Aracy Raio de 10 km

30 28 Figura 7 Área 1 Jardim Aracy Conexão funcional entre as áreas de mata remanescentes nos raios de 2 e 10 km Figura 8 Área 2 Taiaçupeba raio de 2km

31 29 Figura 9 Área 2 Taiaçupeba Raio de 2km e traçado de perímetro do remanescente florestal (borda) Figura 10 Área 2 Taiaçupeba Raio de 10 km

32 30 Figura 11 Área 2 Taiaçupeba - Conexão funcional entre as áreas de mata remanescentes nos raios de 2 e 10 km Figura 12 Área 3 São Sebastião Raio de 2km

33 31 Figura 13 Área 3 São Sebastião - Raio de 2km e traçado de perímetro do remanescente florestal (borda) Figura 14 Área 3 São Sebastião Raio de 10 km

34 32 Figura 15 Área 3 São Sebastião - Conexão funcional entre as áreas de mata remanescentes nos raios de 2 e 10 km A Tabela 3 traz os dados relativos às variáveis de paisagem, resultantes do cálculo das métricas. De modo geral, as áreas mais preservadas apresentaram uma maior área de floresta nos raios de 2 km e 10 km, enquanto a área mais alterada apresentou maior razão entre os valores de perímetro de borda pela área de floresta. Tabela 3. Variáveis de paisagem e soroprevalência segundo áreas de estudo, São Paulo. Razão do (A) Perímetro (B) Área - raio (C) Área raio Log (B) x perímetro pela Área de borda (km) de 2km (ha) de 10km (ha) Log (C) área (A)/(B) 1 66,19 577, ,09 3,74 0, ,97 111,2 166,2 2,22 0, ,41 557, ,8 4,25 0,10

35 33 A Figura 16 mostra a distribuição dos componentes paisagísticos de acordo com um gradiente de risco para a transmissão de FMB. A área 3 mostra-se como a de menor risco para ocorrência de casos de FMB em humanos, enquanto a área 2 mostra-se como a de maior risco. A área 1 está em uma situação intermediária, mas mais próxima da área 3. O gradiente de cores foi gerado levando-se em conta o valor médio das métricas, ou seja: 2,25 para o eixo Y e 0,09 para o eixo X, sendo verde para proteção e vermelho para risco. Figura 17. Gradiente de risco para ocorrência de FMB, nas 3 áreas de estudo.

36 34 Figura 16 Áreas de estudo e resultados soroprevalência Área 1 - Jardim Aracy Soroprevalência 0% Área 2 - Taiaçupeba Soroprevalência 82,32% Área 3 - São Sebastião Soroprevalência 0% Com relação a soroprevalência pôde-se observar que, nas áreas com média ou alta preservação florestal (1 e 3) nenhum cão apresentou resultados positivos nos testes sorológicos. A área 2, com alta fragmentação apresentou uma soroprevalência de 82,32% (205 cães com resultados positivos dentre os 249 amostrados) (Figura 16), sendo essa, a maior soroprevalência encontrada entre as diferentes áreas de estudo. (Tabela 4).

37 35 Tabela 4. Soroprevalência de R. rickettsii por áreas de estudo Soroprevalência de R. rickettsii Área Positivos Negativos Total N % N % N % , *N: número absoluto de animais positivos e negativos no teste sorológico

38 36 7 DISCUSSÃO Cães domésticos são considerados animais sentinelas para FMB, principalmente onde a bactéria R. rickettsii é transmitida por carrapatos da espécie A. aureolatum. Isso ocorre, por esses animais serem susceptíveis a infecção por R. rickettsii que, por sua vez, estimula a produção de anticorpos, que podem ser detectados por meio de testes sorológicos (Pinter et al, 2008). A sorologia em cães, hospedeiros primários e secundários de carrapatos, com o objetivo de detectar a circulação de riquétsias, tem sido uma ferramenta comumente utilizada no Brasil, pois os cães são animais constantemente parasitados por carrapatos de diferentes espécies, vivem em estreito contato com o homem e são facilmente encontrados tanto no ambiente urbano quanto no rural (LEMOS et al, 1996; SANGIONI et al, 2005; LABRUNA et al, 2007b; OTOMURA et al, 2010; MILAGRES et al, 2010; SILVA et al, 2010; TAMEKUNI et al, 2011; TOLEDO et al, 2011; COSTA, 2014). Na região Metropolitana de são Paulo, onde cães são considerados hospedeiros primários de carrapatos da espécie A. aureolatum, principal vetor da FMB, levantamentos sorológicos em cães encontraram uma soroprevalência de R. rickettsii de 20%, 27,3%, 50%, 64%, 69,2% e 69,6% nesses animais, distribuídas em diferentes localidades como São Bernardo do Campo, São Paulo, Diadema, Mogi das Cruzes e Santo André (HORTA et al, 2007; PINTER et al, 2008; MORAES- FILHO et al, 2009; OGRZEWALKA et al, 2012). No presente estudo, realizado em 3 áreas do município de Mogi das Cruzes, pertencente à Região Metropolitana de São Paulo, revelou-se soroprevalência negativa em duas áreas, nas quais a análise de imagens aéreas mostrou menores graus de fragmentação florestal. O maior valor de soroprevalência foi de 82,32%, na área 3, distrito de Taiaçupeba, área onde observa-se menor cobertura florestal e grande fragmentação, e onde estudos anteriores realizados por Pinter e colaboradores em 2008, haviam indicado soroprevalência de 64%. Os dados soroepidemiologicos corroboram o modelo preditivo de análise de paisagem, mostrando que nas áreas com menor fragmentação florestal não foi detectado a circulação da bactéria, enquanto na área com grande fragmentação, houve detecção da circulação da bactéria entre os cães. Vale ressaltar que em todas as três áreas, cães têm sido encontrados parasitados por carrapatos A. aureolatum,

39 37 assim, como proposto por Scinachi (SCINACHI, 2015) a ocorrência da circulação da bactérica não está relacionada somente com a existência do carrapato vetor, mas com condições paisagísticas que propiciam a amplificação da bactéria na população dos artrópodes. A fragmentação vegetal, é um processo complexo que pode influenciar a soroprevalência de R. rickettsii na Região Metropolitana de São Paulo, pois, as alterações no ambiente decorrentes desse processo facilitam a interação do agente patogênico, do vetor e seus hospedeiros (SCINACHI, 2015). Ribeiro et al (2009), analisou a distribuição espacial de todos os fragmentos remanescentes de Mata Atlântica no Brasil ( fragmentos), usando alguns parâmetros como tamanho do fragmento, área de borda, isolamento, conexão estrutural e distância até áreas de conservação. A comparação de dados paisagísticos entre áreas endêmicas e não endêmicas para FMB ao sul e norte da Região Metropolitana de São Paulo, feita por Ogrzewalska et al (2012), mostrou áreas endêmicas com fragmentos significativamente menores, maior distância entre fragmentos e menor abundância e riqueza de espécies. Variáveis de paisagem foram comparadas a soroprevalência para determinar a possível existência de relação entre elas e uma das variáveis que mostrou ter influencia na distribuição da soroprevalência foi a área de cobertura florestal. As áreas menos fragmentadas (1 e 3) apresentaram as maiores áreas de floresta no raio de 2km e 10km, ao passo que na área 2 a conexão vegetal se mostrou-se muito no raio de 10km. Nas áreas 1 e 2 nenhum cão apresentou resultados positivos na Reação de Imunofluorescência Indiretade para Rickettsia rickettsii, o que pode ser explicado pela maior preservação da cobertura florestal e provável existência de animais da fauna silvestre atuando como hospedeiros do carrapato no lugar do cão doméstico e fazendo com que a circulação da bactéria se mantenha em níveis enzoóticos. Carnívoros silvestres são considerados hospedeiros do carrapato A. aureolatum em áreas mais preservadas (SCINACHI, 2015). Em 2005, Labruna e colaboradores realizaram estudo no Brasil e encontraram esta espécie parasitando carnívoros como Puma concolor (onça-parda), Herpailurus yagouaroundi (gatomourisco), Cerdocyon thous (cachorro-do-mato), Chrysocyon brachyurus (loboguará) e Procyon cancrivorus (guaxinim). Guglielmone et al (2003) ao analisar dados relativos a hospedeiros de carrapatos dessa espécie, encontrou canídeos como

40 38 hospedeiros mais comuns de A. aurolatum, com destaque, dentre os silvestres, para a espécie Cerdocyon thous. A fragmentação de ecossistemas naturais oferece uma ameaça para carnívoros silvestres, principalmente os de maior porte, pois estes necessitam de grandes áreas para manutenção e sobrevivência. A diminuição e destruição de habitats, decorrentes do processo de antropização paisagística, resulta em uma redução e possível extinção das principais fontes de alimento desses animais (LABRUNA et al., 2005). Cães domésticos são animais que vivem em contato direto com o homem, de modo que quanto maior a urbanização, maior é o número esperado de cães, que tendo acesso a mata, podem ser parasitados por carrapatos e carreá-los para as residências, aumentando assim o risco de parasitismo humano. Estudo realizado por Torres e Prado (2010) em cães que habitavam áreas em paisagens fragmentadas na Mata Atlântica, verificou-se que a densidade de cães estava diretamente ligada a densidade de casas, enquanto que para animais silvestres a densidade estava relacionada a área de mata e disponibilidade de alimento. Observou-se ainda que as áreas mais alteradas apresentaram maior número de casas e valores positivos de soroprevalência. Piza (1932), relatou que os primeiros casos de FMB na cidade de São Paulo ocorreram nos bairros que hoje correspondem a Sumaré, Perdizes e Pinheiros que estavam passando por uma expansão urbana. Hoje essas áreas já não são consideradas de risco para ocorrência de casos da doença devido à total degradação da cobertura florestal, o que inviabiliza a manutenção de populações do carrapato vetor e resulta em uma gradativa diminuição do número de casos. Os dados obtidos permitem levantar a hipótese de que a soroprevalência guarda relação entre as variáveis analisadas: área de cobertura florestal remanescente, perímetro de borda e conexão funcional entre as fragmentações e coberturas preservadas. O efeito de borda tem sido constantemente citado como um dos fatores decorrentes da perda de habitat e fragmentação, que afeta diretamente o microclima das florestas, levando a alterações de luz, umidade, vento e temperatura, altera a estrutura da vegetação e leva a alterações biológicas relacionadas às mudanças na abundancia e distribuição de espécies, e mudanças na interação de comunidades

41 39 animais (STEVENS;HUSBAND, 1998; PARDINI et al 2005; LACERDA et al, 2009; PARDINI et al, 2009). Espécies tropicais, especialmente aquelas que dependem da floresta são extremamente susceptíveis a alterações de borda (RIBEIRO et al, 2009), porém, as respostas às mudanças no ambiente, como a diminuição de áreas de mata e aumento do perímetro de borda, dependem da espécie animal em estudo. Pardini e colaboradores (2009), ao estudarem diversas variáveis na Mata Atlântica, encontraram espécies generalistas com uma resposta positiva a tais modificações, sendo encontradas em maior número nas bordas dos fragmentos, enquanto as especialistas foram encontradas em maior número no interior dos fragmentos. Stevens e Husband (1998) ao estudarem pequenos mamíferos, na Mata Atlântica, verificaram que a diversidade de espécies era crescente conforme o aumento da distância em relação à borda. Constataram maior abundância e diversidade de espécies em fragmentos pequenos e isolados. Os cães domésticos têm atuado como espécie exótica invasora e interagem com animais silvestres como predadores, presas, competidores, reservatórios e/ou transmissores de doenças e parasitas, que podem levar a reduções drásticas nas populações de mamíferos silvestres. A intensidade de invasão por cães domésticos, na Mata Atlântica, é muito alta e é favorecida pelo tipo de manejo dos cães, que são criados soltos e com livre acesso ao interior da mata. Essa invasão parece ser mais negativa para a sobrevivência das espécies de fauna nativa, do que a perda de áreas de floresta (FRIGERI, 2013). Outros estudos, além de considerarem um papel dos cães como predadores da fauna silvestre, também reconhecem o seu papel como competidores por recursos e transmissores de doenças, destacando a importância da educação em saúde e posse responsável desses animais, com o objetivo de garantir-lhes uma melhor qualidade de vida por meio de cuidados veterinários constantes e manejo adequado (SRBEK-ARAUJO; CHIARELLO, 2008; TORRES;PRADO, 2010). Ao analisarmos em conjunto os dados no presente trabalho, pode-se concluir que quanto maior a área de mata e menor a quantidade de borda, menores são as chances de ocorrência de casos de FMB, sendo a área 3 a de menor risco, dentre todas as áreas. Locais com áreas de mata reduzida, ainda capazes de manter uma população de carrapatos, porém com grande quantidade de borda de contato entre casas e floresta, parecem ser os de maior risco para ocorrência de casos, como

42 40 observado na área 2. As áreas 1 e 3, apesar de ainda apresentarem uma grande quantidade de mata, podem se tornar áreas de risco, dependendo da intensificação dos processos de desmatamento e urbanização. Áreas de mata reduzidas a pequenos fragmentos, apresentam um maior perímetro de borda, o que facilita o acesso de cães a mata e favorece o contato com o vetor. Por outro lado, áreas de floresta continua e preservada, por apresentarem um perímetro de borda reduzido, dificultam o acesso dos cães. Os parâmetros de estrutura de paisagem têm sido constantemente utilizados para um melhor entendimento da epidemiologia das doenças, que é normalmente complexa e depende de um conjunto de fatores, principalmente no caso de agentes transmitidos por vetores, que dependem da interação entre vetor, hospedeiros, patógeno e o ambiente no qual todos estão inseridos. No presente estudo, a utilização de alguns parâmetros ambientais em conjunto com dados sobre a soroprevalência de R. rickettsii, indicam que essa ferramenta pode auxiliar a identificação de locais de maior ou menor risco para ocorrência de casos de FMB nas regiões onde o Amblyomma aureolatum atua como principal vetor, através da avaliação das características paisagísticas, de forma preditiva. A classificação de áreas utilizando imagens de satélite pode ser uma importante ferramenta para a prevenção da transmissão da Febre Maculosa, permitindo o desencadeamento de processos de controle do carrapato em áreas com maior risco de ocorrência da doenças diminuindo a incidência da doenças, assim como proporciona uma melhor chance de concentrar esforços junto a assistência médica nos locais onde há maior chance de transmissão da doença aumentando a atenção médica para os sintomas e diagnóstico precoce da doença, única estratégia capaz de diminuir a letalidade da Febre Maculosa nas áreas endêmicas.