Microbiological quality of organic strawberry treated with propolis and essential oils

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1 Qualidade microbiológica de morango orgânico tratado com própolis e óleos essenciais Henrique Kovacs Scalice 1 ; Emi Rainildes Lorenzetti 1, Carolina Valeriano 1, Paulo Estevão de Souza 1 ; Rovilson José de Souza 1, 1 UFLA Universidade Federal de Lavras. Campus Universitário. Caixa Postal 3037, Lavras- MG, hique@agronomia. ufla.br; elorenzetti@gmail.com, carolina@dca.ufla.br; rovilson@dag.ufla.br; pauleste@dfp.ufla.br RESUMO O morango por suas características é um substrato ideal à proliferação de microrganismos. Em um produto de cultivo orgânico, há de se considerar, ainda que os riscos de contaminação microbiana afetam a segurança tanto do produto in natura como processado. A água utilizada na cultura, o esterco animal, biofertilizantes e resíduos fecais humanos são uma fonte significativa de patógenos que podem contaminar o produto. Investigações com relação ao efeito de substâncias naturais com propriedades antimicrobianas tornam-se uma alternativa efetiva ou suplementar para o controle de microrganismos. Assim, objetivou-se avaliar a atividade antimicrobiana de óleos essenciais, extrato de própolis e um fungicida comercial em morangos orgânicos. Foram tratados morangos da cultivar Aromas, selecionados conforme padrão comercial, com aplicações de própolis, óleos essenciais (capim limão, canela e menta) e fungicida. Posteriormente realizaram-se análises microbiológicas com os frutos, em pós-colheita, para comparação dos tratamentos. Própolis e os óleos essenciais mostram-se como potenciais agentes antimicrobianos para aplicação em morango orgânico. PALAVRAS-CHAVE agricultura orgânica, contaminação microbiológica, biofertilizante, Fragaria x ananassa. ABSTRACT Microbiological quality of organic strawberry treated with propolis and essential oils The strawberry by its features is an ideal substrate for microorganisms proliferation. Since this is a product of organic farming, must be considered, the risk of microbial contamination affecting the safety of raw and processed products. The water used in the crop, animal manure, biofertilizers and human fecal matter represent a significant source of pathogens that can contaminate the product. Thus investigations of the effect of natural substances with antimicrobial property could be an effective alternative or S4322

2 supplement to the control of microorganisms. The objective was evaluate the antimicrobial activity of essential oils, propolis extract and a commercial fungicide in organic strawberries. Treating strawberries of Aroma cultivar, selected by a comercial pattern, with applying propolis and essential oils were made microbiological analysis with the strawberries in post-harvest and comparing the treatments. Propolis and the essential oils shows up as a potential antimicrobial agent for application in organic strawberry. Keywords: organic agriculture, microbiological contamination, liquid manure, Fragaria x ananassa. INTRODUÇÃO O morangueiro (Fragaria x ananassa Duch. Ex. Rozier) é cultivado em várias regiões do mundo principalmente pelas características alimentares. A produção mundial da fruta em 2007 foi de t em uma área de ha. Os maiores produtores mundiais são os Estados Unidos com uma produção de Kg, seguido da Espanha com uma produção de Kg (Fao, 2009). O Brasil apesar de não se enquadrar entre os maiores produtores apresenta uma área representativa de pelo menos ha plantados em todo o território (Duarte Filho, 2006), notadamente no sul de Minas Gerais, maior produtor nacional. O morango tem destaque como uma boa fonte de ácido ascórbico e compostos flavonóides. Apesar das excelentes características sensoriais é muito perecível, possui limitada vida útil pós-colheita, apresenta alta taxa respiratória e suscetibilidade ao desenvolvimento de agentes patogênicos (Henrique & Cereda, 1999). Objetivando reduzir o impacto dos efeitos promovidos pelos pesticidas e melhorando a qualidade dos alimentos produzidos, visando uma agricultura sustentável, buscam-se novas formas de proteção de plantas, dentre elas o emprego de extratos, hidrolatos e óleos essenciais de plantas medicinais (S tangarlin, 2007). Trabalhos com diversas espécies vegetais empregando formas alternativas de controle de doenças e mesmo de pragas são realidade dentro da prática orgânica de produção. Em virtude dos altos teores de umidade (90%), de açú cares (9,9%), e de ácidos, o morango é um substrato ideal à proliferação de microrganismos. Em se tratando de um produto de cultivo orgânico há de se considerar, ainda que os risco de contaminação S4323

3 microbiana afetam a segurança tanto do produto in natura como processado. A água utilizada na irrigação da cultura, o esterco animal, biofertilizantes e resíduos fecais humanos são uma fonte significativa de patógenos que podem contaminar o produto. Assim, objetivou-se avaliar a atividade antimicrobiana de três óleos essenciais (capimlimão, canela e menta), extrato de própolis (10%) e um fungicida comercial em morangos orgânicos. MATERIAL E MÉTODOS O experimento foi realizado no laboratório de Epidemiologia e Controle de Doenças de Plantas do Departamento de Fitopatologia da Universidade Federal de Lavras. Os morangos, da cultivar Aromas, utilizados no experimento foram oriundos de uma área experimental, em sistema de produção orgânico, situada no Setor de Olericultura da Universidade Federal de Lavras. Nesta área, quinzenalmente, foi aplicado biofertilizante, obtido através da fermentação de estercos animais, com resíduos vegetais e água. A irrigação foi feita por aspersão conforme necessidade da cultura. Os tratamentos empregados foram três óleos essenciais (capim-limão, canela e menta), extrato de própolis (10%), um fungicida comercial (tiofanato metílico) na dosagem recomendada pelo fabricante e uma testemunha com a aplicação apenas de água. As aplicações foram feitas quinzenalmente com o emprego de pulverizador pressurizado a CO 2, posteriormente a aplicação do biofertilizante. Quando todos os tratamentos apresentavam frutos, estes foram selecionados de acordo com a uniformidade de cor, tamanho e ausência de injúrias mecânicas e fisiológicas, coletados em recipientes plásticos mantidos sobre refrigeração até o momento de realização das análises. Amostras de 25 gramas de cada tratamento e do controle foram retiradas, e em seguida feita a homogeneização em 225 ml de água peptonada 0,1% (p/v), sendo realizadas diluições seriadas em tubos de ensaio para realização das análises microbiológicas. O teste presuntivo para bactérias do grupo coliformes foi realizado com a incubação de 1 ml das diluições adequadas da amostra em três séries de três tubos contendo caldo lauril sulfato triptose e tubos de Duran invertidos, os tubos foram incubados em estufa a 35-37ºC, por 24-48h. Foram considerados positivos os tubos que apresentaram turvação e produção de gás. Dos tubos positivos foram transferidas alíquotas com auxilio da alça de replicagem para tubos contendo Caldo Verde Brilhante (VB), e estes foram S4324

4 incubados a 35ºC por horas, observando crescimento e formação de gás. Dos tubos positivos de LST, foram também transferidas alíquotas com auxílio de uma alça de replicagem para tubos contendo caldo Escherichia coli (E.C.) e tubos de Durhan, e incubado em banho-maria à 45ºC, durante 24horas, para determinação de coliformes termotolerantes. Os resultados foram expressos em logaritmo decimal por grama apresentados em NMP (número mais provável) para coliformes totais e termotolerantes por ml. Os fungos filamentosos e leveduras foram quantificados pelo método de plaqueamento em superfície do meio de cultura BDA. As placas foram incubadas a 25 ºC por 5 dias. Após este período foram realizadas as contagens e os resultados expressos em logaritmo decimal de unidade formadora de colônia (Log UFC.g -1 ). RESULTADOS E DISCUSSÃO No teste para o crescimento de microorganismos todos os tratamentos: canela, capim limão, menta, própolis e fungicida, demonstraram resultados superiores a testemunha (tabela 01), reduzindo a presença de microorganimos nos frutos de morangueiro. Ressaltam-se os resultados obtidos com o extrato de própolis. Contra fitopatógenos, o extrato de própolis 10% empregado em testes in vitro mostrou potencial controle contra bactérias Agrobacterium tumefaciens, Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis e Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli (Bianchini & Bedendo, 1998). Todos os tratamentos apresentaram valores próximos ao fungicida, considerado padrão químico de comparação, mostrando a eficiência de princípios ativos naturais, como os óleos essenciais, no controle das contaminações microbiológicas. Nguefack et al. (2004) avaliando o efeito do óleo essencial de C. citratus no crescimento micelial de fungos in vitro, observaram a redução de 64% do desenvolvimento de Fusarium moniliforme na concentração de 200 ppm, Aspergilus flavus em 48% e Aspergilus fumigatus em 77% na concentração de 500 ppm, além de inibição total em 300 ppm para F. moniliforme e 1200 ppm para A. flavus e A. fumigatus. Não foi encontrada contaminação para bactérias do grupo coliformes, através dos dois testes efetuados caldo lauril e caldo verde-brilhante, em todos os seis tratamentos. Apesar do emprego de diversas substâncias potencialmente contaminadas como é o caso do biofertilizante e da água de irigação, usados na área experimental, na análise realizada, quanto a coliformes não houve contaminação dos frutos. Contudo, para que S4325

5 resultados mais conclusivos possam ser obtidos períodos diferentes após a aplicação dos biofertilizantes e dos tratamentos devem ser analisados, visto que nem a testemunha apresentou contaminação. AGRADECIMENTOS À FAPEMIG e ao CNPq pela concessão de bolsas de estudo e ao auxílio financeiro. REFERÊNCIAS BIANCHINI, L.; BEDENDO, I.P. 1998, Efeito antibiótico do própolis sobre bactérias fitopatogênicas. Scientia agricola. 55:1, DUARTE FILHO, J Cultivares de morango. In: CARVALHO, S. P. (Coord.). Boletim de morango: cultivo convencional, segurança alimentar e cultivo orgânico Belo Horizonte: FAEMG, p FAO. Dados agrícolas de FAOSTAT, 2010, 25 OUTUBRO Disponível em: HENRIQUE, C. M.; CEREDA, M. P Utilização de biofilmes na conservação pós-colheita de morango ( Fragaria Ananassa Duch) cv IAC Campinas. Ciência e Tecnologia de Alimentos 19: 2, NGUEFACK, J.; LETH, V.; AMVAM ZOLLO, P.H.; MATHUR, S.B Evaluation of five essential oils from aromatic plants of Cameroon for controlling food spoilage and mycotoxin producing fungi. International Journal Food Microbiology 94:3, STANGARLIN, J. R Uso de extratos e óleos essenciais no controle de doenças de plantas - Fitopatologia Brasileira 32, s94 s96. Tabela 1 Contagem de microorganismos totais, fungos e leveduras, em meio BDA em Log UFC.g -1. (Counts of total microorganisms, fungi and yeasts, in PDA in Log UFC.g - 1 ) Ufla Lavras- MG, Tratamento Contagem de microorganismos Óleo Essencial de Canela 2,6 x 10 4 Óleo Essencial de Capim Limão 2,8 x 10 4 Óleo Essencial de Menta 2,7 x 10 4 Própolis 1,7 x 10 4 Fungicida 2,3 x 10 4 Testemunha 4,3 x 10 4 S4326