INSTANT PROV Conjunto de corantes para coloração diferencial rápida em hematologia

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1 PRODUTOS PARA LABORATÓRIO LTDA INSTANT PROV Conjunto de corantes para coloração diferencial rápida em hematologia APRESENTAÇÕES 1. Conjunto de 500ml Cód. COH06 1 frasco com 500ml de Instant Prov I 1 frasco com 500ml de Instant Prov II 1 frasco com 500ml de Instant Prov III 2. Conjunto de 1000 ml Cód.COH36 1 frasco com 1000ml de Instant Prov I 1 frasco com 1000ml de Instant Prov II 1 frasco com 1000ml de Instant Prov III INFORMAÇÕES TÉCNICAS PRINCÍPIO DE AÇÃO O conjunto de corantes INSTANT PROV é um produto para coloração panóptica (rápida) diferencial dos elementos figurados do sangue. As células sanguíneas apresentam estruturas, tanto nucleares como citoplasmáticas, com afinidades eletivas por corantes ácidos, básicos ou neutros. Esta variação de afinidade pelos corantes é que permite a classificação morfológica dos diferentes tipos de células sanguíneas. Os núcleos das células tomam as cores básicas, enquanto os corantes ácidos agem sobre elementos citoplasmáticos. Os corantes neutros ou policrômicos, coram além dos constituintes acidófilos e basófilos, também outros componentes de reação neutrófila. O INSTANT PROV é composto de corantes ácidos e básicos, assim todas as estruturas celulares podem ser coradas conforme sua afinidade. AMOSTRA : EXTENSÃO SANGUÍNEA CONFECÇÃO DA EXTENSÃO SANGUÍNEA A extensão sangüínea, também denominado de esfregaço sanguinolenta, deve ser confeccionado a partir sangue, recém coletado, sem anticoagulante, em lâminas perfeitamente limpas, isentas de gordura e polidas. Prepara -se a extensão conforme descrito abaixo: 1. Colocar aproximadamente duas gotas de sangue em um dos lado da lâmina, a quantidade de sangue não deve ser muito grande para que a extensão não fique muito espesso; 2. Com auxílio da lâmina extensora realizar a extensão sanguínea ; 3. Os fatores que influenciam na qualidade da extensão sanguínea são a quantidade de sangue, a velocidade empregada no movimento com a lâmina extensora, o ângulo entre a lâmina extensora e a lâmina de microscopia e a limpeza e qualidade das lâmina de microscopia e extensora. 4. A extensão satisfatória deve ser fina e homogênea, de margens livres, pois só as que reunem estas condições apresentam os leucócitos e eritrócitos sem deformações e convenientemente distribuídos. 5. As extensões devem ter boa qualidade e serem feitas no dia da coloração e leitura. Extensões velhas coradas um ou mais dias após sua confecção não apresentam boa coloração. 6..A extensão sanguínea deve ser feita rapidamente, antes que comece a coagulação. 7. Deixar secar ao ar.

2 . PRODUTOS PARA LABORATÓRIO LTDA TÉCNICA DE COLORAÇÃO.1. Após a extensão sanguíneas estar devidamente seca, submergí la no Instant Prov I. Cronometrar o tempo de dez segundos. É fundamental que este tempo seja rigorosamente marcado e seguido a risca. Durante estes dez segundos não há necessidade de se executar qualquer movimento. Após o tempo de dez segundos, retirar a lâmina do Instant Prov I e deixar escorrer durante cinco segundos ( também devidamente cronometrado). O corante pode escorrer para dentro da própria cuba que contém o corante. 2. Após o escorrimento de cinco segundos, submergir a lâmina no INSTANT PROV II. Seguir exatamente o procedimento descrito para o Instant Prov I. 3. Colocar a lâmina no Instant Prov III e deixar por 20 segundos (também devidamente cronometrado). Após o tempo de coloração, retirar a lâmina do corante e deixar escorrer durante cinco segundos. Este tempo também deve ser devidamente cronometrado. Após este tempo, lavar a lâmina em água corrente abundante. Recomenda se, durante a lavagem, limpar a lâmina na parte de trás para que o corante impregnado não interfira na microscopia. Deixar secar bem e levar ao microscópio na objetiva de imersão e efetuar a leitura. COMENTÁRIOS SOBRE A TÉCNICA DE COLORAÇÃO O Instant Prov I tem a finalidade de fixar a extensão e de promover uma coloração mais realçada para as plaquetas. O Instant Prov II faz a coloração do citoplasma e o Instant Prov III faz a coloração dos núcleos das células. O tempo total de coloração é de cinquenta e cinco segundos, 10 segundos no corante I e II e 20 segundos no corante III, com intervalos de 05 segundos entre um corante e outro para permitir que haja um escorrimento do excesso de corante. O tempo de coloração recomendado pode ser alterado com a diminuição dos tempos dos corantes Instant Prov II e Instant Prov III para se possa adaptar a coloração ao padrão definido pelos técnicos do laboratório. Porém estes tempos definidos como padrão no laboratório devem descritos em procedimentos internos e sempre cronometrados para padronização da técnica. A marcação do tempo é fundamental para uma boa coloração e durante o procedimento técnico a lâmina não deve ser retirada do corante, deve estar totalmente submersa. Um cuidado que deve ser tomado durante o procedimento técnico de coloração, é o de não contaminar o corante Instant Prov I com água. Esta contaminação ocorre, principalmente, quando se utiliza o procedimento técnico de corar várias lâminas ao mesmo tempo (cuba com berço). Quando o mesmo berço que terminou a coloração é reutilizado, sem que esteja devidamente seco, a água presente neste é carreada ao corante Instant Prov I. Na medida em que a contaminação aumenta a tendência é a crenação dos eritrócitos e até hemólise total. Nesta situação são observados leucócitos bem corados e eritrócitos deformados. Outra causa de artefatos eritrocitários (crenações e hemólise) é a permanência das lâminas a serem coradas no ambiente úmido do local onde se faz a coloração. Alterações no padrão da coloração são observadas quando as lâminas que receberam a extensão sangüínea, não estão devidamente secas, limpas e desengorduradas. Não devem ser realizados outros tipos de colorações (bacteriológicas, como exemplo) no mesmo local da coloração hematológica por alterarem a qualidade da coloração.

3 OBSERVAÇÕES 1. A técnica de coloração deve ser seguida rigorosamente observando o volume do corante (a extensão deve estar totalmente submersa no corante) e o intervalo de 5 segundos entre os corantes e o enxague (o corante deve escorrer bem). 2. Para evitar evaporação do corante I e alterações nos corantes II e III, as cubas devem ser guardadas bem fechadas. 3. Observar periodicamente o volume do corante I, pelo fato de ser a alcoólico pode evaporar. O seu volume pode ser completado sempre que necessário. 4. Os corantes II e III, que estão na cuba, não devem ser completados, e sim desprezados. O tempo para que os corantes sejam desprezados depende do número de lâminas que são coradas diariamente. Ao desprezar o corante, a cuba deve ser lavada com água deionizada e estar seca antes de se adicionar novo volume de corante. LEITURA E INTERPRETAÇÃO Através da coloração diferencial pelo INSTANT PROV, são visualizadas células sanguíneas com as seguintes características: 1. Eritrócitos - Coloração rósea; 2. Plaquetas - Coloração azulada a púrpura, com finas granulações azurrófilas; 3. Neutrófilos - Citoplasma: coloração rósea com granulações finas, específicas na cor vermelha violeta; Núcleo: coloração vermelha violácea intensa; 4. Eosinófilos - Citoplasma: coloração rósea e granulações eosinófilas em vermelho brilhante com leve tom alaranjado; Núcleo: coloração vermelha violáceo; 5. Basófilos - Citoplasma: granulações específicas de coloração parda escura a preta; Núcleo: coloração vermelha violácea; 6. Linfócitos - Citoplasma: coloração azul celeste; Núcleo: cromatina nuclear densa em coloração violeta purpura intensa; 7. Monócitos - Citoplasma: coloração cinza azulado com granulações Azurrófilas; Núcleo: coloração violácea, com cromatina nuclear, frouxa e estriada ; COMPOSIÇÃO Instant Prov I Solução alcoólica de Ciclohexadienos a 0,1% Instant Prov II Solução aquosa de Azobenzenosulfonico a 0,.1% Estabilizante I... 3% Conservante...0,26%

4 Instant Prov III Solução álcoolica de Fenotiazinas a 0,1% Estabilizante ,5% Conservante...0,26% DENOMINAÇÃO GENÉRICA : CORANTE PANÓTICO PARA HEMATOLOGIA CONTROLE DE QUALIDADE Devem ser confeccionadas extensões sanguíneas e as mesmas devem ser coradas pela técnica descrita e o padrão de coloração conforme o ítem que descreve leitura e interpretação. Este controle de qualidade deve ser realizado quando se iniciar o uso do conjunto de corantes. A periodicidade do controle de qualidade deve ser estabelecida pelo laboratório. CUIDADOS COM O MANUSEIO E DESCARTE DA AMOSTRA Devido ao fato do sangue transmitir doenças infecto contagiosas, recomenda se o uso de EPIs tais como luvas, mascaras e avental, durante o manuseio, inclusive durante a coleta. Utilizar somente seringas, agulhas e lancetas descartáveis. Depois de utilizadas as seringas, agulhas e/ou lancetas devem ser desprezadas em recipientes de paredes rígidas e depositados em lixo hospitalar. Não se deve reencapar agulhas, pois poderá causar acidentes. CONDIÇÕES ADEQUADAS DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE DO PRODUTO Conservar em temperatura ambiente entre 15 a 30º C Armazenar ao abrigo da luz. Validade até 02 anos após fabricação Verificar o prazo de validade na embalagem. CUIDADOS COM MANUSEIO E DESCARTE SEGURO DO PRODUTO O Instant Prov I possui Álcool Metílico que pode ser nocivo através de inalação, ingestão e absorção cutânea. Pode provocar efeitos agudos como: fadiga, náusea, desconforto visual, acidose e midríase. Os Instant Prov II e III possuem como estabilizante o produto Azida Sódica que pode ser nocivo á saúde se ingerido, podendo causar hipotensão, taquicardia e hipotermia. MATERIAIS NECESSÁRIOS E NÃO FORNECIDOS COM O PRODUTO Lâmina de microscopia, lâmina extensora, cronômetro.

5 GARANTIA DA QUALIDADE Este produto é fabricado e liberado para venda após testes de controle de qualidade para cada lote, conforme normas das Boas Praticas de Fabricação de Produtos para Diagnóstico in vitro. Para eficácia do produto é necessário: Utilizar amostras clínicas de qualidade obtidas de forma correta e em conservação adequada; Seguir rigorosamente todas as etapas descritas neste procedimento técnico. Utilizar de acessórios e equipamentos adequados e em boa conservação. Transportar e armazenar em condições indicadas. Nunca utilizar o produtos com prazo de validade expirado. Caso ocorra qualquer problema na utilização do produto relativo à qualidade intrínseca do mesmo, que tenha ocorrido por falha de fabricação comprovada, a Newprov resolverá a questão sem ônus ao cliente, conforme determinado na Lei 8.098/90 Código de Defesa do Consumidor. A Newprov disponibiliza aos seus clientes assessoria técnica para quaisquer esclarecimentos necessários quanto a utilização deste produto que não estejam contemplados neste procedimento, através de contato com o SAC - Serviço de Atendimento ao Consumidor. Laudos técnicos de cada lote estão disponíveis na empresa e podem ser encaminhados ao cliente sempre que previamente solicitados ao SAC. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS: IÓVINE, E. et all, El Laboratorio en La Clinica, Panamericana, Buenos Aires,1975. LIMA,O.A et all., Métodos de Laboratório Aplicados á Clinica,7 a Ed., Guanabara,Rio de Janeiro, 1992 LILLIE,R.D; CONNL,H,J, Biological Stain, 9ª Ed., Willians and Wilkins, Baltimore, Farmacopéia dos Estados Unidos do Brasil, 2 a E., Gráfica Siqueira, São Paulo, MIALE, JOHN B., Laboratory Medicine Hematology, 6ª Edição, Mosby Company, London, 1982 PRODUTO SOMENTE PARA USO EM DIAGNÓSTICO IN VITRO REGISTRO MS : RESPONSÁVEL TÉCNICO: Helena A. P. Homem de Mello de Souza CRF/PR: 1742 FABRICADO POR: Newprov Produtos para Laboratório Ltda Rua 1º de Maio, 590 / 596 Centro CEP Pinhais Paraná Industria Brasileira ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR: (41) Fax: (41) Editada em Março de 1996 Revisada em Maio de 2008