Inclusão de Fitase na Dieta de Girinos de Rã-touro para Diminuição da Excreção de Fósforo na Água

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1 EIXO TEMÁTICO: ( ) Bacias Hidrográficas, Planejamento e Gestão dos Recursos Hídricos ( ) Biodiversidade e Unidades de Conservação ( x ) Campo, Agronegócio e as Práticas Sustentáveis ( ) Cidade, Arquitetura e Sustentabilidade ( ) Educação Ambiental ( ) Geotecnologias Aplicadas à Análise Ambiental ( ) Gestão dos Resíduos Sólidos ( ) Gestão e Preservação do Patrimônio Arquitetônico, Cultural e Paisagístico ( ) Mudanças Climáticas ( ) Novas Tecnologias Sustentáveis ( ) Paisagem, Ecologia Urbana e o Planejamento Ambiental ( ) Saúde, Saneamento e Ambiente ( ) Turismo e o Desenvolvimento Local Inclusão de Fitase na Dieta de Girinos de Rã-touro para Diminuição da Excreção de Fósforo na Água Addition of Fitase in the Feed of Bullfrog Tadpoles to Reduce Phosphorus Excretion in Water Adición de Fitase en la Dieta de Renacuajo de Rana toro para Disminución de la Excreción de Fósforo en el Agua. Cleber Fernando Menegasso Mansano Professor Doutor, Universidade Brasil, Brasil clebermansano@universidadebrasil.edu.br Bruna Cristina de Lima Candido Graduanda, UNESP, Brasil. bruna_lcandido@hotmail.com Náira Roberta Marucci Graduanda, UNESP, Brasil. nairaromarucci@hotmail.com 627

2 1 Introdução Em geral, a produção de organismos aquáticos, a qual inclui a ranicultura, tem se intensificado nos últimos anos, e desta forma despertado o interesse sobre o impacto do fósforo e do nitrogênio na eutrofização de água doce; o fósforo além disso, tem sido considerado um dos principais nutrientes responsável por poluir os ambientes aquáticos. A utilização de dietas completas e os altos níveis de alimentação na aquicultura estão resultando no acúmulo elevado de resíduos, o que pode alterar o balanço do ecossistema, principalmente em razão da multiplicação do fitoplâncton, proporcional à quantidade de dejetos lançados (BOCK et al., 2006). Desta forma, nos últimos anos, nutricionistas têm direcionado seus estudos no sentido de obter informações que possam contribuir para reduzir os teores de nitrogênio e fósforo das dietas. Trabalhos recentes têm demonstrado a possibilidade de utilizar dietas isentas de farinha de peixe, desde que suplementadas com fonte inorgânica de fósforo e aminoácidos sintéticos. Pela possibilidade de aumentar a disponibilidade do fósforo presente nos ingredientes de origem vegetal, por meio da suplementação de fitase exógena, tornam-se necessários estudos que avaliem a redução na inclusão de fonte inorgânica de fósforo, objetivando o máximo desempenho produtivo dos peixes, o menor custo com a alimentação e a manutenção da qualidade da água, de modo a permitir a criação sustentável de organismos aquáticos (SILVA et al., 2007). No entanto, poucas pesquisas têm sido realizadas com os minerais na nutrição de peixes tropicais e não há trabalhos que tenham testado a utilização da enzima fitase na alimentação de girinos de rã-touro, já que vários fatores dificultam a condução destes estudos, como a contaminação pelo próprio alimento, a dificuldade e custo das análises, a disponibilidade dos minerais presentes nos alimentos, entre outros. Desta forma torna-se importante a busca por informações relativas a esta espécie animal, pois somente a partir de dietas capazes de atender as exigências nutricionais, será possível obter melhores respostas de conversão alimentar, maximizar os lucros e, principalmente, minimizar o impacto que alguns desses nutrientes podem causar ao meio. Este estudo tem como objetivo avaliar a disponibilidade de fósforo de rações formuladas com diferentes níveis de suplementação da enzima fitase para girinos de rã-touro e verificar o efeito da inclusão desta enzima no desempenho e qualidade da água de girinos até sua completa metamorfose. 2 Metodologia O presente trabalho foi conduzido na Universidade Estadual Paulista, Campus Jaboticabal, no Centro de Aquicultura da UNESP, no Setor de Ranicultura e no Laboratório de Nutrição de Organismos Aquáticos (LANOA). Foram utilizados aproximadamente 1800 girinos de rã touro no estágio 25 da tabela simplificada de Gosner (1960), oriundos de uma mesma desova, divididos em 24 tanques 628

3 experimentais com capacidade de 150 litros cada, mantidos sob aeração e abastecimento contínuos por água proveniente de mina, com taxa de renovação de aproximadamente 1 vez ao dia, utilizando-se uma densidade de ½ animal/litro de água. Durante o ensaio foram monitoradas as seguintes variáveis físico-químicas da água: ph (8,2±0,27), temperatura (30,91±2,11 C) e oxigênio dissolvido (3,6±0,25 mg/l), utilizando-se peagômetro da marca Corning ph-30 e oxímetro YSI 55. A concentração de amônia, nitrato e nitrito médio foram determinados pelo método colorimétrico, com leitura no espectrofotômetro, de acordo com método de Golterman et al. (1978). A cada dois dias, eram realizadas a sifonagem dos tanques para a retirada dos resíduos de alimento e fezes, evitandose o entupimento do tanque e a queda na oxigenação da água. As dietas experimentais utilizadas durante o ensaio foram formuladas para serem isoenergéticas e isoprotéicas com kcal/kg de energia digestível e 26 % de proteína digestível (Tabela 1), de acordo com a recomendação de Pinto et al. (2015). Ingredientes Tabela 1: Fórmula e composição nutricional da dieta basal utilizada. Inclusão Proteína Digestível Energia Digestível (cal/g) Fibra Bruta Calcio Fósforo Farelo de Soja 50,4 22, ,7 3,02 0,017 0,156 Milho, grão 26,6 2,62 893,9 2,28 0,005 0,006 Farelo de Trigo 9,75 1,73 284,7 1,27 0,001 0,03 Amido de milho 0,9-30, Óleo de Soja 5,94-379, Premix 0, Bht 0, Calcário 1, ,959 - Fosfato 4, ,015 0,812 Total 100,00 27, ,81 6,57 2,00 1,00 Foram testados seis tratamentos (Tabela 2), um controle positivo, ou seja, a dieta com suplementação de fósforo em forma de fosfato bicálcico e cinco sem suplementação de fósforo, mas com inclusão de diferentes níveis de fitase (0, 500, 1.000, e UF/kg) (Natuphos 5000, BASF, Brasil). As dietas foram elaboradas com ingredientes energéticos e proteicos de origem vegetal, com o objetivo de torna-las deficiente em fósforo. Os ingredientes foram moídos a granulometria de 0,45 mm de diâmetro, sendo homogeneizados manualmente. As dietas permaneceram mantidas em refrigeração a 4,0ºC durante todo o período de duração do ensaio. 629

4 Tabela 2: Diluições para obtenção dos tratamentos utilizados no experimento. Dieta Basal Caulim* Fitase Controle 5000, ,5 207, ,5 205,0 2, ,5 202,5 5, ,5 200,0 7, ,5 197,5 10,0 *Minério composto de silicatos hidratados de alumínio Os parâmetros de desempenho, ganho em peso diário (GPD)= (peso final-peso inicial)/tempo); consumo alimentar diário (CDA)= (consumo de alimento)/tempo); conversão alimentar aparente (CAA)= (consumo de alimento)/(ganho em peso total) e taxa de crescimento específico= 100[(ln peso final médio ln peso inicial médio)/tempo] e os parâmetros de qualidade de água como fósforo total ; amônia ; nitrito e nitrato, foram analisados pelo programa SAS (2014), por meio de análise de variância (ANOVA), utilizando a ferramenta PROC ANOVA. Quando observado significância estatística, foi aplicado o teste de Duncan (P<0,05), para comparação entre as médias. 3 Resultados Na tabela 3 pode-se verificar que com o primeiro nível de inclusão de fitase (500 UF/Kg) já se obteve uma melhora significativa no ganho de peso conversão alimentar e taxa de crescimento específico, no entanto para consumo de ração, não observou-se o mesmo comportamento. Neste caso a enzima fitase melhorou o desempenho dos girinos de rã-touro, já com o primeiro nível de inclusão, não sendo necessário níveis mais altos. Tabela 3: Desempenho dos girinos de rãs-touro alimentados com dietas com diferentes níveis de inclusão da enzima fitase. Ganho em Peso Consumo de Ração Conversão Alimentar (g/g) Taxa de Crescimento Específico Controle 4,53±0,09 c 4,70±0,06 1,03±0,03 b 0,0741±0,0003 c 0 5,02±0,10 b 4,59±0,04 0,91±0,01 ab 0,0758±0,0003 b 500 5,48±0,19 a 4,61±0,07 0,84±0,04 a 0,0773±0,0003 a ,46±0,14 a 4,61±0,05 0,84±0,02 a 0,0772±0,0005 a ,52±0,02 a 4,64±0,04 0,83±0,03 a 0,0774±0,0004 a ,54±0,16 a 4,58±0,09 0,82±0,03 a 0,0775±0,0004 a Valor P 0,0001 0,854 0,0002 0,00007 *Letras minúsculas diferenciam médias na mesma coluna pelo teste de Duncan (p<0,05). Os nutrientes analisados apresentaram comportamento semelhantes entre os tratamentos que os animais receberam fitase via dietas (P>0,05), com exceção da dieta controle e sem inclusão de fitase onde foram detectados valores mais altos de fósforo total, amônia, nitrito e nitrato. 630

5 Tabela 4: Nutrientes avaliados na água de cultivo de girinos de rãs-touro alimentados com dietas com diferentes níveis de inclusão da enzima fitase. Fósforo total Amônia Nitrito Nitrato Controle 63,90±37,4 b 519,8±39,3 b 0,35±0,07 b 105,8±7,45 c 0 71,82±29,8 c 624,1±59,5 c 0,43±0,32 b 105,5±8,49 c ,22±25,5 a 423,2±80,8 a 0,04±0,03 a 82,3±12,01 a ,62±18,3 a 487,5±28,8 ab 0,07±0,08 a 93,7±1,81 b ,34±31,2 a 494,0±58,5 ab 0,10±0,09 a 94,0±3,35 b ,52±26,0 a 501,3±50,3 ab 0,12±0,01 a 99,1±1,21 bc Valor P ,042 0,011 *Letras minúsculas diferenciam médias na mesma coluna pelo teste de Duncan (p<0,05). Conclusão A inclusão de fitase em dietas práticas para girinos de rã-touro, proporcionou melhor desempenho dos animais avaliados e melhor qualidade de água, apresentando menores teores de fósforo total, amônia, nitrato e nitrito, o que demonstra ação mais intensa da fitase em diminuir a excreção de nitrogênio e fósforo na água. Nas dietas, controle e sem adição de fitase apresentaram maior quantidade de nitrito, fato que ocorre quando há poluição orgânica do meio aquático, que pode ocasionar menor desempenho nos animais, assim como encontrado nesse estudo, demostrando que a adoção de novas tecnologias é de extrema importância na aquicultura atual. AGRADECIMENTO A Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) pelo fornecimento da bolsa de pós-doutorado (Processo 2016/ ). Ao Centro de Aquicultura da Universidade Estatual Paulista e ao Laboratório de Ranicultura pelo acolhimento e suporte a pesquisa. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS BOCK, Cláudio Luis et al. Fitase e digestibilidade aparente de nutrientes de rações por tilápias-do-nilo. Revista Brasileira de Zootecnia. v. 35, n. 6, p , SILVA, Tarcila Souza de Castro et al. Fitase líquida em dieta extrusada para juvenis de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Acta Scientiarum. Animal Sciences., v. 29, n. 4, p , PINTO, Donovan Filipe Henrique et al. Optimal digestible protein level for bullfrog tadpoles. Aquaculture. v. 440, p , SAS Institute. SAS/STAT User s Guide. SAS Institute Inc., Cary, NC, USA, GOLTERMAN, Han et al. Methods for physical and Chemical Analysis of Freshwaters. Oxford: Blackwell Scientific, London, IBP Handbook, v. 8, p. GOSNER, Kenneth Lynn. A simplified table for staging anuran embryos and larvae with notes on identification. Herpetologica, v. 16, p ,