PROCEDIMENTOS OPERACIONAIS PADRÕES PARA MANIPULAÇÃO DE PRODUTOS/MATERIAIS QUÍMICOS E BIOLÓGICOS E OUTROS

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1 PROCEDIMENTOS OPERACIONAIS PADRÕES PARA MANIPULAÇÃO DE PRODUTOS/MATERIAIS QUÍMICOS E BIOLÓGICOS E OUTROS LABORATÓRIO: Biotecnologia de Reprodução Animal Docente responsável pelo laboratório: Prof. Adjunto Alicio Martins Júnior

2 1. Introdução Este documento visa estabelecer um rol de ações direcionadas para a prevenção, minimização ou eliminação de riscos relacionados com as atividades desenvolvidas dentro dos laboratórios do prédio de Biotecnologias de Reprodução Animal (LABRA), objetivando a saúde de pessoal lotado no mesmo, bem como a preservação do meio ambiente. Tais riscos envolvem principalmente a manipulação de produtos/reagentes químicos e biológicos; no entanto, não se deve limitar aos mesmos, uma vez que riscos de outra natureza, por exemplo, físicos, podem ocorrer em determinadas circunstâncias (quedas, coices etc). O LABRA consiste de uma série de laboratórios, salas e área externa de trabalho, descrita a seguir: a)- laboratório de preparo de meios/soluções, no qual são manipulados material químico e biológico para preparo de meios de cultivo, soluções corantes, soluções fixadoras, entre outras, utilizando produtos/reagentes em apresentação líquida, granulada ou em pó; b)- laboratório de lavagem e esterilização de materiais, no qual são lavados/esterilizados materiais, tais como: vidrarias, material de borracha e tubos plásticos; c)- laboratórios de manipulação de gametas e embriões, onde são desenvolvidos projetos de pesquisa; d)- laboratório de práticas laboratoriais, o qual tem sido provisoriamente utilizado para aulas práticas de graduação e de extensão, tais como: execução e/ou demonstração de técnicas, protocolos, materiais, atendimento reprodutivo de cães. e)- currais e troncos de contenção para bovinos e equinos, no qual são realizados exames reprodutivos durante aulas de graduação, extensão e pesquisa (área externa). Nos laboratórios de pesquisa e de preparo de meios é frequente a manipulação de reagentes químicos (reagentes diversos, com menor ou maior risco) e biológicos (soro fetal bovino, albumina sérica, heparina) para utilização em cultivo de oócitos e embriões, bem como para refrigeração e congelação de embriões e sêmen, além de soluções fixadoras e corantes

3 para análise de sêmen (fresco ou congelado) e de citologia vaginal e uterina, nas diferentes espécies animais. A maioria dos reagentes químicos apresenta em seu rótulo indicação de cuidado com manuseio devido ao risco de toxicidade, quando não manipulados de acordo com as recomendações do fabricante ou normas de segurança constante no Manual de Biossegurança da FMVA. No laboratório de lavagem e esterilização de material são utilizados detergentes de uso doméstico e laboratorial (Extran, o qual necessita de cuidados para manipulação - luvas de borracha). Nesse setor existe ainda um baú de madeira com lâmpada de ultravioleta (esterilização de material plástico e de borracha) e estufa de Pasteur para esterilização de vidraria. No laboratório de graduação e de pesquisa também são manuseados hormônios relacionados com reprodução animal, os quais, em sua maioria, apresentam bulas informando os cuidados a serem tomados durante sua manipulação, evitando-se assim riscos para a saúde. Existem ainda três contêineres (botijões criogênicos) para armazenamento de nitrogênio líquido e dois cilindros de ação para dióxido de carbono. No atendimento animal existe o risco de acidente biológico (contaminação) ao se manipular animais (por exemplo, sem vacinação), principalmente em relação às doenças infectocontagiosas (zoonoses). Como peças de animais de abatedouro/frigorífico (útero, ovários, testículos etc) são utilizadas em pesquisa e aulas de graduação, orientação do pessoal envolvido sobre risco de contaminação é prática obrigatória, evitando-se acidentes durante manipulação ou ocorrência de acidentes perfuro-cortantes (utilização de bisturi, tesoura, agulha etc). É prática rotineira a manipulação de material biológico (sêmen, ovários, líquido folicular, oócitos, embriões) e animais, bem como fezes, urina. Assim, existe o risco de contaminação, bem como durante a lavagem do material utilizado (vidraria, material de borracha, plástico etc), caso não sejam utilizados os EPIs apropriados para cada procedimento. Em relação aos acidentes físicos, os mesmos podem ocorrer durante manipulação de animais no curral e tronco de contenção, queimaduras quando utilizado o bico de Bunsen ou nitrogênio líquido. Qualquer atividade que possa oferecer risco à integridade física e/ou metal deve ser imediatamente comunicada ao responsável pelo laboratório, para que providências

4 cabíveis possam ser adotadas (exemplo: presença de escorpiões no interior do prédio, incluindo interior de gavetas e armários, como já acontecido, fraturas, desmaios etc). 2. NORMAS BÁSICAS DE BIOSSEGURANÇA Higiene Pessoal: requisito para bom desempenho pessoal e profissional. São adotadas normas visando boas práticas de higiene, tais como: Cabelos: quando longos devem ser mantidos presos durante as atividades dentro dos laboratórios. Mãos: sempre limpas, lavando-as antes e após qualquer atividade laboratorial, e devidamente calçadas com luvas, quando a atividade a ser desempenhada exigir. Unhas: mantidas limpas e curtas, não devendo ultrapassar a ponta dos dedos. Vestimenta: de preferência calça comprida, sempre com jaleco. Calçados: fechados, obrigatoriamente nos laboratórios. Na parte externa, uso de calçados de segurança sempre que necessário para proteção dos pés. O uso de tamancos, sandálias e chinelos ou similares é proibido no ambiente do laboratório. Luvas: previnem contra a contaminação por agentes químicos e biológicos durante os diferentes procedimentos (ver tipos no Manual de Biossegurança). Lentes de contato: o ideal é não usar lentes de contato nos laboratórios; se for necessário, não devem ser manuseadas durante o trabalho e necessitam ser protegidas com o uso de óculos de proteção. Evitar manipular produtos químicos usando lentes de contato, uma vez que podem ser susceptíveis aos vapores ou retenção de substâncias que podem provocar irritações ou lesões nos olhos. Cosméticos: não é permitido aplicar cosméticos na área laboratorial nas partes do corpo que tenham contato direto com as superfícies de trabalho, material, animais etc. Aneis: não devem conter reentrâncias, incrustações de pedras; pulseiras e colares que possam tocar as superfícies de trabalho, materiais, equipamentos ou pacientes não podem ser utilizados.

5 3. Procedimentos operacionais padrão para manipulação de animais, amostras biológicas ou agentes químicos. Observação: todas as pessoas envolvidas em trabalho no LABRA devem ler o Manual de Biossegurança da FMVA, bem como serem informadas da obrigatoriedade de se verificar o risco de contaminação de cada produto químico, biológico ou animal, utilizando, assim, os EPIs apropriados. A ciência dos POPs será obrigatória e conterá assinatura para comprovar entrega de material para leitura. Todas as atividades no Laboratório de Biotecnologia de Reprodução Animal devem ser realizadas de acordo com as condições de biossegurança previstas neste documento, bem como, em casos não observados no mesmo, o Manual de Biossegurança da FMVA-UNESP. Desta forma, no mesmo, são mencionados os procedimentos operacionais padrões relacionados com a manipulação de reagentes químicos, biológicos e animais, visando a segurança de pessoal dentro de cada laboratório, curral e tronco de contenção de grandes animais. Informações sobre os riscos referentes a cada laboratório, para as diferentes atividades laboratoriais, estão disponíveis em lugares visíveis para pronta consulta. 3.1 Procedimentos antes do início dos trabalhos Manter as bancadas de exame, equipamentos, instrumentais e de trabalho sempre limpas e desinfetadas; quando necessário material esterilizado. Somente pessoas e animais autorizados podem permanecer no laboratório. Outras devem ser informadas dos riscos. Durante o trabalho, as portas devem ser mantidas fechadas. Não permitir o armazenamento de produtos não identificados ou sem data de validade. Os produtos inflamáveis não devem ser armazenados em armários fechados para se evitar riscos de explosão. Antes de manipular um produto químico é necessário saber suas propriedades, bem como saber o grau de risco que se está exposto. Ler o rótulo no recipiente ou na embalagem.

6 Evitar qualquer contato de produto químico com a pele e olhos. Não descartar na pia material líquido ou sólido que possam contaminar o meio ambiente. Usar o sistema de gerenciamento de produtos químicos. Resíduos biológicos (líquido e fluidos) devem ser submetidos á desinfecção química antes de descarte na rede de esgoto. Objetos de uso pessoal devem ser guardados em armário disponível para essa finalidade, incluindo mochilas, pastas etc. É proibido utilizar relógios, anéis, brincos ou outros objetos que possam interferir na utilização de luvas ou serem contaminados durante a manipulação de amostras. É proibida a utilização de aparelho celular durante a manipulação de amostras químicas ou biológicas. Não comer, beber, fumar, mascar chicletes, nem utilizar fones de ouvido nas dependências dos laboratórios Procedimentos durante a manipulação dos animais Uso de mordaça ou focinheira em cães. Uso de luvas e máscara para animais com potencial zoonótico ou sempre que o procedimento exigir. Uso de tronco de contenção (cordas se necessário) para exames em grandes animais. Uso de botas de borracha e luvas de cano longo para palpação por via retal em equinos e bovinos, bem como outros EPIs apropriados (luvas de procedimento, óculos de proteção etc), quando da manipulação de material e/ou animal que ofereça risco à saúde (por exemplo: hormônios) Procedimentos durante a execução dos trabalhos com agentes químicos e biológicos Lavar sempre as mãos antes de iniciar o trabalho e após a manipulação de reagentes químicos e/ou biológicos, mesmo após o uso de luvas de proteção, bem como antes de deixar o laboratório.

7 Adquirir o hábito de conservar as mãos longe da boca, nariz, olhos e rosto. É obrigatória a utilização dos seguintes equipamentos de proteção individual (EPI): Protetor ocular: utilizar óculos de proteção ao manipular qualquer reagente que possa ocasionar risco à saúde. Vestimenta: a utilização de jalecos é obrigatória no ambiente do laboratório. Calçados: como descrito nos procedimentos antes do início dos trabalhos Luvas: Para manipulação de amostras biológicas, utilize luvas de látex descartáveis e óculos de proteção. Para manipulação de reagentes químicos, utilize luvas de acordo com sua resistência química ( É proibido utilizar qualquer EPI em ambientes fora do laboratório, a não ser aqueles de uso exclusivo em ambiente externo, tais como: botas de borracha, avental plástico, macacão, luvas de cano longo para palpação retal, entre outros Procedimentos após o término dos trabalhos Qualquer material armazenado no laboratório deve estar organizado e claramente identificado. Produtos químicos e materiais biológicos devem ser armazenados de acordo com normas do fabricante; quando não houver, de acordo com procedimento padrão estabelecido para cada material. Sempre que necessário, utilizar frascos adequados para armazenamento. Sempre proceda a limpeza total de qualquer superfície ou equipamento, imediatamente após o uso, observando o protocolo estabelecido para cada atividade, de modo geral, papel toalha embebido em álcool 70%. Todo material biológico (fluidos), após devida desinfecção (hipoclorito de sódio) Quando se tratar de peças anatômicas, e não for possível sua remoção imediata, deve ser acondicionado em saco plástico reforçado, sendo mantido em freezer -20 o C até sua remoção definitiva para incineração ou vala asséptica. Da mesma forma, todo material de consumo

8 (agulha, seringa, ponteiras, placas de Petri, tubos de plástico) que tenham tido contato com qualquer material biológico deve ser descartado no lixo branco ou Descarpak. Durante o procedimento, ou seja, manuseio de reagente químico ou biológico, manter saco de lixo de tamanho adequado próximo para pronto descarte do mesmo e, em seguida, no lixo branco. Todo material perfuro-cortante deve ser descartado no Descarpak. Nunca deixe qualquer material utilizado sobre a bancada, seja químico ou biológico. Somente material que não ofereça risco para a saúde e de uso continuado, por exemplo, equipamentos, micropipetas, lâminas de microscopia não utilizadas, ponteiras etc Descarte de resíduos químicos As substâncias químicas manipuladas no laboratório terão seus resíduos químicos devem ser embalados, rotulados e armazenados para posterior envio para destinação final, conforme preconizado pelo manual de descarte de resíduos químicos da unidade. Todos devem estar cientes de como fazê-lo Procedimentos em caso de acidentes Todo acidente ou risco iminente do mesmo deve ser comunicado ao chefe imediato, ou na sua ausência, à chefia do departamento para providências. Em caso de acidente, qualquer pessoa que trabalhe no laboratório deve informar imediatamente o chefe imediato e/ou chefia do departamento com finalidade de solicitar a devida ajuda profissional. Acidente com substâncias químicas FISPQ (Ficha de Informações de Segurança de Produtos Químicos) dos produtos químicos utilizados no laboratório deve estar acessível a todas as pessoas que manipulam agentes químicos no laboratório. As informações dessa ficha, referentes à identificação dos

9 perigos e medidas de primeiro-socorros, devem ser utilizadas para elaboração dos procedimentos necessários em caso de acidentes com agentes químicos. Em caso de acidentes durante a manipulação de agentes químicos e biológicos: Seguir recomendações do fabricante do produto. Caso não exista, observar: Como procedimento emergencial, em caso de: Contato com a pele: lavar abundantemente com água corrente e remover imediatamente as roupas contaminadas. Se necessário, utilizar o chuveiro de emergência, se houver. Contato com os olhos: lavar com o chuveiro lava-olhos por 15 minutos, se houver. No caso de mordeduras e/ou arranhaduras: lavar a ferida abundantemente com água corrente e sabão, enxaguar, enxugar com papel absorvente e realizar antissepsia com álcool 70%. Acidente com material biológico: Material biológico com status de contaminação desconhecido: Em caso de contato com a mucosa ocular, proceder à lavagem em chuveiro lava-olhos, com água corrente. Após contato com a pele, lavar com água e sabão, enxaguar e realizar antissepsia com álcool 70%. Local de atendimento médico e contatos de plantões de informações Quando necessário, a pessoa exposta a substâncias químicas ou agentes biológicos deverá ser encaminhada ao Pronto Socorro Municipal de Araçatuba no endereço: rua Dona Ida, 1350, Bairro Aviação (Telefone: ). Em caso de impossibilidade de encaminhamento, solicitar atendimento ao Serviço de Atendimento Municipal de Urgência SAMU (Telefone: 192). Para sanar dúvidas sobre qualquer tipo de intoxicação, utilize o Disque-Intoxicação, da ANVISA, pelo número A ligação é gratuita e o usuário é atendido por uma das 36 unidades da Rede Nacional de Centros de Informação e Assistência Toxicológica (Renaciat).

10 Outras alternativas para assistência em casos de intoxicação com produtos químicos: 1) Centro de Assistência Toxicológica de São José do Rio Preto/SP, Hospital de Base - Fundação Faculdade Regional de Medicina (FUNFARME). Av. Brigadeiro Faria Lima, 5416, Bairro São Pedro. Telefone (17) , ramais 1380 ou Atendimento 24 h pelo telefone (17) ceatox.hbase@famerp.br. 2) Centro de Assistência Toxicológica (CEATOX) do Instituto de Biociências, UNESP, Campus de Botucatu. O CEATOX oferece atendimento telefônico na prevenção, orientação e informações tóxico-farmacológicas a profissionais de saúde, hospitais, prontos-socorros, postos de saúde e à comunidade em geral por meio dos contatos: telefone (14) e plantão telefônico 24 horas pelo número ceatox@ibb.unesp.br. Os contatos de outros centros de assistência toxicológica estão relacionados no endereço CIENTE E DE ACORDO: Todos que realizam atividades no laboratório. Prof. Alicio Martins Júnior Magna Adriana da Silva Galvão Docente responsável pelo laboratório Técnico de laboratório Fernanda Nunes Marqui Pós-graduanda doutorado

11 Tairini Érica da Cruz Pós-graduanda mestrado Beatriz Yamada Ferreira Programa de Aprendizagem e Treinamento LABRA, 23 de março de 2017.