PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO PARA MANIPULAÇÃO DE PRODUTOS QUÍMICOS E AMOSTRAS BIOLÓGICAS

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1 PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO PARA MANIPULAÇÃO DE PRODUTOS QUÍMICOS E AMOSTRAS BIOLÓGICAS LABORATÓRIO: Andrologia Veterinária (LANDROVET) Docente responsável pelo laboratório: Profa. Marion Burkhardt de Koivisto

2 1. Introdução No Laboratório de Reprodução Animal, são manipuladas amostras de sêmen fresco e congeladas. Eventualmente são manipuladas peças cirúrgicas, com probabilidade muito baixa à exposição de microrganismos, classificados na Classe de Risco I (baixo risco individual e para a coletividade), que inclui os agentes biológicos conhecidos por não causarem doenças em pessoas ou animais adultos sadios. 2. Características de armazenamento do sêmen congelado O sêmen congelado é mantido em nitrogênio líquido (N2) a uma temperatura negativa de 196 C e armazenado em botijões criogênicos que permitem que o sêmen se conserve viável por tempo indeterminado, desde que nunca falte N2 para manter a temperatura interna do botijão. Nunca se deve deixar o nível do N2 no botijão ficar abaixo de 15 cm, pois a partir daí o sêmen começa a perder sua qualidade fecundante. Danos causados no pescoço do botijão devido ao descuido no manuseio podem causar a perda do vácuo. Como o vácuo é o maior responsável pelo isolamento térmico do botijão, a perda do mesmo causa aumento da temperatura interna e rápida evaporação do nitrogênio. O acúmulo de gelo na tapa do botijão indica evaporação rápida do nitrogênio. Se isto ocorrer, devemos transferir o sêmen o mais rápido possível para outro botijão. Lembrar que o N2 é um gás volátil e deverá sempre estar evaporando. Nunca, em hipótese alguma se deve vedar o botijão para evitar a saída do gás, este procedimento pode ser perigoso. A tampa do botijão é projetada para que haja uma pequena evaporação. O botijão deve ser reabastecido periodicamente, com uma boa margem de segurança, de acordo com a autonomia de cada modelo. Normalmente um intervalo de 30 a 45 dias costuma ser o ideal. O botijão deve ser mantido em local ventilado com boa iluminação e fora do alcance do Sol.

3 Deve-se evitar movimentação excessiva e desnecessária do botijão. Ele não deve ser arrastado, e quando levantar não pode bater no chão. Avaliar o nível de nitrogênio rotineiramente e anotar o gasto de nitrogênio, para identificar gasto excessivo devido a problemas. Lembrando que até botijões novos podem apresentar falhas; A temperatura do nitrogênio é muito baixa e exige cuidado ao manuseá-lo, podendo causar queimaduras sérias. MANUSEIO DO SÊMEN É muito importante que o sêmen seja manuseado sempre abaixo da boca do botijão, nunca expondo as palhetas à temperatura ambiente. Ao retirar o sêmen levantar somente até a altura da marcação da caneca. Lembrar-se de usar sempre luvas de procedimento e óculos de proteção. 3. Procedimentos operacionais padrão para manipulação de amostras biológicas ou reagentes químicos Todas as atividades no Laboratório de Reprodução Animal (LANDROVET) devem ser realizadas de acordo com as condições previstas para o Nível de Biossegurança 1 (NB-1). Neste documento, estão relacionados os procedimentos padrão comuns a todas as técnicas relacionadas à manipulação de amostras biológicas ou de reagentes químicos, visando à segurança do pessoal do laboratório. Os protocolos detalhados de cada técnica utilizada estão disponíveis no laboratório. Em hipótese alguma é permitido comer no laboratório. 3.1 Procedimentos antes do início dos trabalhos Somente pessoas autorizadas podem entrar no laboratório. Durante o trabalho, as portas devem ser mantidas fechadas.

4 O uso de tamancos, sandálias e chinelos é proibido no ambiente do laboratório. Utilize calçados fechados. Objetos de uso pessoal devem ser guardados em armário disponível para essa finalidade, incluindo mochilas, pastas, etc. É proibido utilizar relógios, anéis, brincos ou outros objetos que podem interferir na utilização de luvas ou ser contaminados durante a manipulação de amostras. É proibida a utilização de aparelho celular durante a manipulação de amostras químicas ou biológicas Procedimentos durante a execução dos trabalhos Lave as mãos antes de iniciar o trabalho e após a manipulação de reagentes químicos ou de amostras biológicas, mesmo após o uso de luvas de proteção, bem como antes de deixar o laboratório. Adquira o hábito de conservar as mãos longe da boca, nariz, olhos e rosto. É obrigatória a utilização dos seguintes equipamentos de proteção individual (EPI): Protetores faciais e oculares: utilize máscara de proteção facial e óculos de proteção ao manipular qualquer reagente (líquido ou pó) que possa ser inalado/ingerido Vestimenta tipo jaleco: a utilização de jalecos é obrigatória no ambiente do laboratório. Luvas: Para manipulação de amostras biológicas, utilize luvas de látex descartáveis e óculos de proteção. Para manipulação de reagentes químicos, utilize luvas de acordo com sua resistência química ( É proibido utilizar qualquer EPI em ambientes fora do laboratório. Equipamentos de proteção coletiva (EPC), como cabines de biossegurança ou cabines de exaustão devem ser utilizadas obrigatoriamente durante a manipulação de amostras biológicas ou de reagentes químicos destinadas a esses fins:

5 A manipulação de substâncias líquidas voláteis ou irritantes como éter, ácido clorídrico e ácido acético deve ser realizada na cabine de exaustão Procedimentos após o término dos trabalhos Qualquer material armazenado no laboratório deve estar organizado e claramente identificado. Não armazene amostras ou reagentes em sacos plásticos, frascos de margarina, papel alumínio, etc.. Utilize frascos e caixas adequadas para armazenamento. Sempre proceda à limpeza total de qualquer superfície ou equipamento, imediatamente após o uso, como pias, bancadas, fluxo laminar, armários, gavetas, banho-maria, balanças e centrífugas, utilizando papel toalha descartável embebido em álcool 70%. Após avaliação das amostras coradas com fluocromos, coloque as lâminas em solução de hipoclorito de sódio 2%, deixe a solução agir por 10 minutos antes de descartá-las no Coletor de Materiais Perfuro/Cortantes. Remova qualquer solução ou reagente (solução salina, PBS (tampão fosfato salino), formolsalina, fluocromos, solução de ácido tiobarbitúrico, corantes como eosina nigrosina, azul de toluidina e diff quick) presentes em equipamentos como balança, centrífugos logo após o uso, utilizando papel toalha descartável embebido em álcool 70%. Se o reagente for fluocromo utilize solução de hipoclorito de sódio 2%. Nunca deixe a limpeza e a desinfecção para serem realizadas no outro dia.

6 Micropipetas ou qualquer outro material utilizado para manipulação de material biológico devem ser descartados em recipiente adequado para lixo biológico, disponível no laboratório. Nunca deixe qualquer material sobre a bancada, como pedaços de papel alumínio, tubos, adesivos, fitas, grampos, etc Descarte de resíduos biológicos Resíduos de material biológico, incluindo amostras fecais e material de consumo contaminado com amostras biológicas deve ser descartado em recipiente adequado para lixo biológico, disponível no laboratório Descarte de resíduos químicos Várias substâncias químicas são manipuladas no laboratório. Os resíduos químicos devem ser devem ser embalados, rotulados e armazenados para posterior envio para destinação final, conforme preconizado pelo manual de descarte de resíduos químicos da unidade Descarte de material perfurocortante Os materiais perfurocortantes, tais como, agulhas de injeção, lâmina de bisturi, lâminas histológicas, lamínulas, ampolas de medicamentos ou qualquer vidraria quebrada e contaminada com amostra química ou biológica, devem ser descartados em caixas apropriadas para a coleta de materiais perfurocortantes. Vidraria quebrada e não contaminada pode ser descartada em lixo reciclável.

7 3.1.7 Procedimentos em caso de acidentes Acidente com substâncias químicas A FISPQ (Ficha de Informações de Segurança de Produtos Químicos) dos produtos químicos utilizados no laboratório deve estar acessível a todas as pessoas que manipulam agentes químicos no laboratório. As informações dessa ficha, referentes à identificação dos perigos e medidas de primeiro-socorros, devem ser utilizadas para elaboração dos procedimentos necessários em caso de acidentes com agentes químicos. Como procedimento emergencial, em caso de: Contato com a pele: lavar abundantemente com água corrente e remover imediatamente as roupas contaminadas. Se necessário, utilizar o chuveiro de emergência. Contato com os olhos: lavar com o chuveiro lava-olhos por 15 minutos. Material biológico com status de contaminação desconhecido: Em caso de contato com a mucosa ocular, proceder à lavagem em chuveiro lava-olhos, com água corrente. Após contato com a pele, lavar com água e sabão, enxaguar e realizar antissepsia com álcool 70%. Local de atendimento médico e contatos de plantões de informações Quando necessário, a pessoa exposta a substâncias químicas ou agentes biológicos deverá ser encaminhada ao Pronto Socorro Municipal de Araçatuba no endereço: rua Dona Ida, 1350, Bairro Aviação (Telefone: ). Em caso de impossibilidade de encaminhamento, solicitar atendimento ao Serviço de Atendimento Municipal de Urgência SAMU (Telefone: 192).

8 Para sanar dúvidas sobre qualquer tipo de intoxicação, utilize o Disque-Intoxicação, da ANVISA, pelo número A ligação é gratuita e o usuário é atendido por uma das 36 unidades da Rede Nacional de Centros de Informação e Assistência Toxicológica (Renaciat). Outras alternativas para assistência em casos de intoxicação com produtos químicos: 1) Centro de Assistência Toxicológica de São José do Rio Preto/SP, Hospital de Base - Fundação Faculdade Regional de Medicina (FUNFARME). Av. Brigadeiro Faria Lima, 5416, Bairro São Pedro. Telefone (17) , ramais 1380 ou Atendimento 24 h pelo telefone (17) ceatox.hbase@famerp.br. 2) Centro de Assistência Toxicológica (CEATOX) do Instituto de Biociências, UNESP, Campus de Botucatu. O CEATOX oferece atendimento telefônico na prevenção, orientação e informações tóxico-farmacológicas a profissionais de saúde, hospitais, prontos-socorros, postos de saúde e à comunidade em geral por meio dos contatos: telefone (14) e plantão telefônico 24 horas pelo número ceatox@ibb.unesp.br. Os contatos de outros centros de assistência toxicológica estão relacionados no endereço CIENTE E DE ACORDO: Todos que realizam atividades no laboratório.