Relatório Global da Sétima Avaliação Externa da Qualidade dos Testes de CD 4 / CD 8

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1 MINISTÉRIO DA SAÚDE Secretaria Executiva Coordenação Nacional de DST e Aids Relatório Global da Sétima Avaliação Externa da Qualidade dos Testes de CD 4 / CD 8 Série C. Projetos, Programas e Relatórios Brasília DF 2003

2 2003. Ministério da Saúde. É permitida a reprodução parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte. Circulação restrita destinada aos Laboratórios e Instituições participantes da Avaliação Externa da Qualidade dos Testes de CD4 / CD8 (AEQ7CD4) Série C. Projetos, Programas e Relatórios Tiragem: 100 exemplares Elaboração, distribuição e informações: MINISTÉRIO DA SAÚDE Secretaria Executiva Coordenação Nacional de DST e Aids Av. W3 Norte, SEPN 511, bloco C CEP: , Brasília DF Home Page: Disque Saúde/Pergunte Aids: Impresso no Brasil / Printed in Brazil Ficha Catalográfi ca Brasil. Ministério da Saúde. Secretaria Executiva. Coordenação Nacional de DST e Aids. Relatório Global da Sétima Avaliação Externa da Qualidade dos Testes de CD4 / CD8. Secretaria Executiva, Coordenação Nacional de DST e Aids. Brasília: Ministério da Saúde, p.: il. (Série C. Projetos, Programas e Relatórios) 1. CD4 / CD8. I. Brasil. Ministério da Saúde. II. Brasil. Secretaria Executiva. Coordenação Nacional de DST e Aids. III. Título. IV. Série. NLM QW H6 Catalogação na fonte Editora MS EDITORA MS Documentação e Informação SIA, Trecho 4, Lotes 540/610 CEP: , Brasília DF Tels.: (61) /2020 Fax: (61)

3 SUMÁRIO Introdução Objetivos Metodologia Resultados Conclusões

4

5 INTRODUÇÃO Dando continuidade ao Sistema da Garantia da Qualidade dos Testes Laboratoriais em DST e Aids da CN-DST/AIDS/MS, este relatório traz os resultados da Sétima Avaliação Externa de Qualidade (AEQ7-CD4), realizada no mês de outubro de Nesta Avaliação Externa da Qualidade, foram enviados quatro tubos contendo amostras de três indivíduos HIV negativos, visando a avaliar a qualidade dos resultados obtidos pelos laboratórios. OBJETIVOS Avaliar a reprodutibilidade dos resultados obtidos entre as duas amostras provenientes do mesmo doador. Avaliar o desempenho individual dos laboratórios mediante a precisão dos seus resultados, quando comparados à média geral obtida por todos laboratórios participantes. 5

6 METODOLOGIA Amostras de sangue de três doadores soronegativos distintos foram colhidas no Laboratório de Imunologia da Disciplina de Doenças Infecciosas e Parasitórios da Escola Paulista de Medicina da Universidade Federal de São Paulo (DIPA/EPM/UNIFESP), às 14 horas do dia 28/10/02, sendo as amostras 1 e 3 de doadores distintos e as amostras 2 e 4, de um mesmo doador (Tabela 1). Após homogeneização, as amostras foram divididas em alíquotas com volumes aproximados de 1,0 ml e armazenadas em criotubos, em número suficiente para compor 78 painéis com quatro criotubos cada. Os painéis foram então, acondicionados em caixas de isopor contendo gelo reciclável, para impedir aquecimento excessivo da amostra durante o transporte. Na manhã seguinte, os painéis foram enviados para todos laboratórios da rede. Posteriormente, os laboratórios enviaram seus resultados à Unidade de Diagnóstico, Assistência e Tratamento da CN-DST/AIDS/MS, onde foram analisados utilizando-se os programas Microsoft Excel, versão 97 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, EUA) e Statistica. versão 4.1 (StaSoft, Inc., Tulsa, OK, EUA). Tabela 1. Origem das amostras colhidas e enviadas aos laboratórios. Rótulo do tubo Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Amostra- Doador 1, HIV- Doador 2, HIV- Doador 3, HIV- Doador 2, HIV- Foram analisadas a data de recebimento, data da execução dos testes e resultados obtidos das análises para contagem das subpopulações de linfócitos T, T /CD4+ e T /CD8+. Os resultados foram expressos em tabelas e gráfi cos demonstrativos sem identifi cação dos laboratórios participantes, de forma a garantir a confi dencialidade do processo. RESULTADOS Os 78 laboratórios que compõem a Rede de CD4 receberam o painel da AEQ7/CD4. A participação foi signifi cativa, com resultados obtidos de 66 6

7 (84,6%) laboratórios participantes. Com base nas informações disponíveis, 23 laboratórios receberam as amostras no mesmo dia do envio, 29/10/02, 40 no dia 30/10/02 e três no dia 31/10/02. Vinte e cinco laboratórios acusaram vazamento das amostras recebidas. No caso específi co, o problema foi encontrado nas amostras 1 e 4. Dois laboratórios não procederam com os testes ao detectar o problema. Os demais processaram o material. Dos 66 laboratórios, 16 realizaram os testes no dia 29/10/02; 39 realizaram no dia 30/10/02 e 11 realizaram no dia 31/10/02. As médias e desvios-padrão das amostras analisadas, bem como os resultados seguidos de exclusão após uma depuração e depurações à exaustão (calculados com todos os dados, com acréscimo e subtração de dois desvios-padrão 2DP), estão demonstradas na tabela 2. Resultados que se apresentaram fora do limite de 2DP para cada etapa de depuração dos dados, foram excluídos. Os valores individuais dos laboratórios encontram-se na Tabela 3. Laboratórios que apresentaram valores além de 2DP e, portanto, excludentes, estão com numeração em vermelho. Com numeração em verde, estão identifi cados os laboratórios que foram excluídos considerando o critério anterior (valores além e 2DP) e/ou o critério de reprodutibilidade (amostras dos tubos 1 e 4). Tabela 2. Resultados iniciais e resultados obtidos após uma depuração e depurações à exaustão. Valores expressos em células/µl. Amostra do tubo 1 Amostra do tubo 2 Amostra do tubo 3 Amostra do tubo 4 CD4+ CD8+ CD4+ Todos os resultados CD8+ CD4+ CD8+ CD4+ CD8+ Média M+2DP M-2DP N Após uma depuração Média M+2DP M-2DP N continuação 7

8 Após depurações à exaustão Média M+2DP M-2DP N M+2DP: média mais dois desvios-padrão; M-2DP: média menos dois desvios-padrão; n: número de resultados analisados para cada variável. Tabela 3. Resultados das análises individuais dos laboratórios participantes. Valores expressos em células/µl. Lab. Amostra do tubo 1 Amostra do tubo 2 Amostra do tubo 3 Amostra do tubo 4 CD3/ CD4 CD3/ CD8 CD3 CD3/ CD4 CD3/ CD8 CD3 CD3/ CD4 CD3/ CD8 CD3 CD3/ CD4 CD3/ CD8 CD Não respondeu à AEQ Não respondeu à AEQ por detectar vazamento das amostras continuação 8

9 23 Enviou somente resultados percentuais Não respondeu à AEQ Não respondeu à AEQ por detectar vazamento das amostras 40 Não respondeu à AEQ 41 Não respondeu à AEQ porque o aparelho estava em manutencão Não respondeu à AEQ Não respondeu à AEQ Não respondeu à AEQ Não respondeu à AEQ continuação 9

10 Não respondeu à AEQ

11 Figura 1A. Distanciamento dos diversos parâmetros em relação à média geral, para cada um dos laboratórios participantes, em células/µl. 11

12 Figura 1B. Distanciamento dos diversos parâmetros em relação à média geral, para cada um dos laboratórios participantes, em células/µl (continuação). 12

13 Figura 1C. Distanciamento dos diversos parâmetros em relação à média geral, para cada um dos laboratórios participantes, em células/µl (continuação). 13

14 Figura 1D. Distanciamento dos diversos parâmetros em relação à média geral, para cada um dos laboratórios participantes, em células/µl (continuação). 14

15 Após análise crítica dos dados, foram identifi cados 13 laboratórios (19,7%) cujos resultados estavam além de dois desvios-padrão da média geral, em pelo menos uma das mensurações (Tabela 4). Amostra Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 Amostra 4 Tabela 4. Laboratórios com resultados além de dois desvios-padrão da média geral Parâmetro analisado Laboratórios com resultados além de 2DP da média, após uma depuração T CD4+ 5 T CD8+ 5, 66 T 5, 8, 66 T CD4+ 5, 66 T CD8+ 5, 6, 47, 48 T 5, 6, 47, 55, 66 T CD4+ 5, 66 T CD8+ 5, 6, 30, 44, 52 T 5, 6, 30, 44,66 T CD4+ 5 T CD8+ 5, 6, 49, 58 T 3, 5, 6, 44, 49, 58, 66 Procuramos avaliar se o vazamento detectado por alguns laboratórios comprometeu as respectivas avaliações. Não foi detectada relação entre mau desempenho com o problema descrito. Com o intuito de avaliar o critério de reprodutibilidade dos resultados, para verificar a qualidade da análise de cada laboratório, foram enviadas amostras provenientes de um mesmo doador, denominadas amostras 2 e 4. Para avaliar esse critério, foram calculados os resíduos para cada marcador (CD3, CD4 e CD8), subtraindo-se o valor obtido com um marcador na amostra 2 pelo valor obtido com o mesmo marcador na amostra 4. A média dessas diferenças foram calculadas, bem como a variação de 2DP. A Tabela 5 mostra o resíduo de variação médio e a variação dentro de 2 DP, com representação dos resultados iniciais. Laboratórios que apresentaram resultados fora do limite de 2DP nesta etapa foram excluídos. Laboratórios excluídos por apresentarem resultados além de 2DP estão listados na Tabela 6. A seguir, foram realizadas depurações à exaustão e laboratórios que se apresentaram dentro do limite de 2DP obtiveram desempenho de excelência. São eles: 7, 10, 11, 14, 15, 16, 18, 25, 35, 42, 61, 63, 69, 73,

16 Tabela 5. Média do resíduo entre as amostras 2 e 4 obtidos dos laboratórios participantes do AEQ5-CD4, apresentando os resultados excludentes de acordo com o parâmetro de reprodutibilidade. Valores expressos em células/µl. CD4+ Amostra do tubo 2 versus 4 CD8+ Todos os resultados Média M+2DP M-2DP n Após uma depuração Média M+2DP M-2DP n Após depurações à exaustão Média M+2DP M-2DP n M+2DP: média mais dois desvios-padrão; M-2DP: média menos dois desvios-padrão; n: número de resultados analisados para cada variável. 16

17 Tabela 6. Laboratórios com resultados obtidos além de dois desviospadrão da média geral Laboratórios com resíduo Amostra Parâmetro analisado além de 2DP da média, após uma depuração T CD4+ 2, 44, 48, 49, 58 Amostra 2 versus 4 T CD8+ 2, 29, 48, 49, 58 T 2, 3, 48, 49, 58 Na Figura 2, estão representados gráficos que demonstram a reprodutibilidade dos resultados obtidos de ambas amostras, tanto pela variação dos desvios-padrão, como no teste de correlação dos resultados. Nesses gráficos, somente estão representados os valores dos laboratórios que se mantiveram após uma depuração de resultados. Figura 2. Comparação dos resultados das amostras dos tubos 2 e tubo 4, provenientes do mesmo doador. (A) Médias e desvios-padrão dos resultados obtidos com as amostras 2 e 4 das três subpopulações de linfócitos. (B) Correlação entre os dados obtidos pelos laboratórios, para as variáveis CD4+, CD8+,. Dados expressos em células/µl. A Amostra 2 Amostra Células por µ L CD4+ CD8+ 17

18 B y = 0,9494x + 12,182 R 2 = 0, Amostra Amostra 2 CONCLUSÕES 1. Dos 66 laboratórios participantes, 51 (77,3%) apresentaram resultados dentro de dois desvios-padrão da média, em todos os parâmetros analisados, considerados aprovados. Esses resultados foram considerados satisfatórios por este Comitê Assessor. Esse percentual é semelhante ao obtido no AEQ5-CD4, de 77,1%. 2. Todos os resultados obtidos pelos laboratórios foram submetidos a depurações à exaustão, tanto no que se refere ao distanciamento da média, como ao resíduo da reprodutibilidade das amostras 2 e 4. Após o resultado final, os laboratórios que se mantiveram dentro de dois desvios-padrão, obtiveram desempenho considerado de excelência. Dos 66 laboratórios participantes, 15 (22,7%) apresentaram resultados considerados de excelência, pois mantiveramse dentro de dois desvios-padrão até a depuração dos dados à exaustão. Esse 18

19 resultado é semelhante ao obtido na AEQ5-CD4, que contou com 21,4% de aprovação com excelência. 3. Ocorreu uma falha na vedação de alguns tubos (amostras 1 e 4). Tal problema foi provavelmente ocasionado no Laboratório de Imunologia da Disciplina de Doenças Infecciosas e Parasitárias da Universidade Federal de São Paulo, na preparação do material para envio. Este Comitê está estudando medidas para prevenir nova ocorrência do problema. A CN-DST/AIDS agradece a participação de todos, fato este que revela o compromisso e preocupação dos laboratórios em prestar serviços com a qualidade exigida pelo Sistema Único de Saúde. Agradecimentos especiais para as técnicas do Laboratório de Imunologia da Disciplina de Doenças Infecciosas e Parasitárias da Universidade Federal de São Paulo: Helena Tomiyama, Milena K. C. Brunialti, Marta A. Viana, Maria Aparecida da Luz e a pós-graduanda Maria Teresa Maidana, pelo trabalho desenvolvido na preparação deste AEQ. Esper Georges Kallás Escola Paulista de Medicina UNIFESP Lilian do Amaral Inocêncio UDAT CN-DST e Aids Maria Cândida de Souza Dantas UDAT CN- DST e Aids Josué Nazareno de Lima UDAT CN-DST e Aids Paulo Roberto Teixeira Coordenador CN-DST e Aids 19

20 EDITORA MS Coordenação-Geral de Documentação e Informação/SAA/SE MINISTÉRIO DA SAÚDE (Normalização, revisão, editoração e impressão) SIA, Trecho 4, Lotes 540/610 CEP: Telefones: (61) Fax: (61) Brasília DF, maio de 2003 OS 0306/2003

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