Aprovado ' Elaborado por Wagner Luz/BRA/VERITAS em 18/08/2014 Verificado por Cintia Kikuchi em 18/08/2014 Aprovado por Ruben Verdier/BRA/VERITAS em 20/08/2014 ÁREA IPT Tipo Instrução Técnica Número 02 Título DETERMINAÇÃO DE COR EM SOLUÇÃO DE AÇÚCAR EM ph 7,0 POR MEIO DO REAGENTE MOPS Selecione o verificador do Documento: Cintia Kikuchi/BRA/VERITAS Wagner Luz18/08/2014 ÍNDICE: 1 OBJETIVO 2 APLICAÇÃO 3 ATRIBUIÇÕES E RESPONSABILIDADES 4 DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA 5 TERMINOLOGIA 6 DESCRIÇÃO DO PROCESSO 6.1 EQUIPAMENTOS, MATERIAIS E REAGENTES 6.2 PREPARAÇÃO DA SOLUÇÃO TAMPÃO MOPS-0,2 mol/l 6.3 METODOLOGIA 6.4 CÁLCULOS 6.5 RESULTADOS 6.6 PRECISÃO E TENDÊNCIA 7 LISTA DE REGISTRO 8 REVISÃO SUMÁRIO 1
TEXTO DO PROCEDIMENTO: 1 OBJETIVO Determinar cor ICUMSA, em amostras de açúcar cristal, açúcar refinado amorfo, açúcar refinado granulado, açúcar orgânico, açúcar VHP e açúcar VVHP por espectrofotometria. 2 APLICAÇÃO Todos os laboratórios da INSPECTORATE DO BRASIL 3 ATRIBUIÇÕES E RESPONSABILIDADES 3.1 CHEFE DE LABORATÓRIO: gestão,desenvolvimento e implementação 3.2 TÉCNICO LÍDER: Treinamento e implementação 3.3 TÉCNICO EM QUÍMICA: Aplicação prática, divulgação dos resultados, preparação e execução. 4 DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA ICUMSA Methods Book Method GS9/1/2/3-8 (2011): The Determination of Sugar Solution Colour at ph 7.0 by the MOPS Buffer Method. 5 TERMINOLOGIA ICUMSA: (International Commission for Uniform Methods of Sugar Analysis) Comissão Internacional para Métodos Uniformes de Análise de Açúcar. VHP: (Very High Polarization) Polarização muito alta. 2
VVHP: (Very Very High Polarization) Polarização muitíssimo alta. 6 DESCRIÇÃO DO PROCESSO 6.1 EQUIPAMENTOS, MATERIAIS E REAGENTES 6.1.1 Espectrofotômetro, Visível ou UV/Visível, com leitura digital em absorbância, banda de passagem menor ou igual a 10 nm e capacidade para uso de célula de 1,0 cm, 2,0 cm, 4,0 cm e 5,0 cm de percurso ótico; 6.1.2 Balança semi analítica, resolução 0,01 g; 6.1.3 phmetro com eletrodo de vidro combinado, para medições de 0,01 ph 6.1.4 Bomba de vácuo ou equivalente; 6.1.5 Agitador com suporte para balão volumétrico de 100 ml; 6.1.6 Balões volumétricos de 100 ml e 1000 ml 6.1.7 Pipeta volumétrica de 10 ml; 6.1.8 Células de vidro, 1,0 ± 0,001 cm, 2,0 ± 0,001 cm, 4,0 ± 0,01 cm e 5,0 ± 0,001 de percurso ótico; 6.1.9 Seringa plástica, capacidade 10 ml a 50 ml ( para uso com filtro Millex ); 6.1.10 Filtro tipo Millex, para membrana de diâmetro 25 mm; 6.1.11 Pré-filtro, de éster de celulose ou filtro tipo Millex 0,8 m e diâmetro 25 mm; 6.1.12 Membrana filtrante de éster de celulose com porosidade 0,45 mm e diâmetro de 25 mm. 6.1.13 Béquer de 10, 25 e 1000mL; 6.1.14 Água Deionizada. 6.1.15 Solução de hidróxido de sódio de concentração 1 mol/l 3
6.2 PREPARAÇÃO DA SOLUÇÃO TAMPÃO MOPS-0,2 mol/l 6.2.1 Pesar 41,8 g 0,1 g de MOPS (Ácido 3-(N-morfolinopropanosulfônico) - C 7 H 15 NO 4 S) e transferir para béquer de 1000 ml com aproximadamente 800 ml de água deionizada e agitar até completa dissolução; 6.2.2 Ajustar o ph dessa solução até 7,00 ± 0,01 pela adição de solução de hidróxido de sódio 1 mol/l, mantendo agitação constante durante o ajuste (cerca de 80 ml da solução poderão ser necessários); 6.2.3 Transferir para balão volumétrico de 1000 ml, completar o volume com água deionizada e homogeneizar; 6.2.4 Armazenar esta solução em frasco âmbar em refrigerador, por no máximo duas semanas. 6.2.5 Antes do uso, retirar da refrigerador a quantidade necessária da solução MOPS e aguardar até que atinja a temperatura ambiente; 6.3 METODOLOGIA 6.3.1 Homogeneizar a amostra 6.3.2 Pesar alíquota da amostra de açúcar em balança semi analítica, conforme tabela a seguir: Tabela 1 Célula b (cm) 1 ICUMSA Faixa de Cor IU 7,0 Concentração c (g/ml) Alíquota (g) 500 a 4000 0,2 20 ± 0,04 1000 a 8000 0,1 10 ± 0,02 4
2000 a 16000 0,005 5 ± 0,01 250 a 2000 0,2 20 ± 0,04 2 500 a 4000 0,1 10 ± 0,02 1000 a 8000 0,05 5 ± 0,01 até 1000 0,2 20 ± 0,04 4 250 a 2000 0,1 10 ± 0,02 500 a 4000 0,005 5 ± 0,01 500 a 4000 0,2 20 ± 0,04 5 1000 a 8000 0,1 10 ± 0,02 2000 a 16000 0,05 5 ± 0,01 6.3.3 Transferir para balão volumétrico de 100 ml água deionizada; 6.3.4 Agitar até completa dissolução, em temperatura ambiente; 6.3.5 Adicionar 10 ±0,1 ml da solução do MOPS e completar o volume (100 ml) com água deionizada, mantendo agitação; 6.3.6 Preparar uma solução de referência (branco), adicionando 10 ±0,1 ml da solução do MOPS em um balão volumétrico de 100 ml, completando o volume com água deionizada; 6.3.7 Montar o conjunto de filtração, conectando-o ao sistema de vácuo; 6.3.8 Filtrar a solução de referência à vácuo, em pré-filtro e depois em membrana 0,45 m; 6.3.9 Coletar o filtrado e transferir para um béquer; 6.3.10 Repetir a filtração e transferência com a amostra; 6.3.11 Ajustar o espectrofotômetro em absorbância a um comprimento de onda de 420 nm; 6.3.12 Zerar o espectrofotômetro utilizando a solução de referência; 5
6.3.13 Leitura em célula adequada conforme tabela 1; 6.3.14 Rinsar a célula com uma porção da amostra, descartando esta porção; 6.3.15 Realizar a leitura de absorbância da amostra, com precisão de 0,001 unidades; 6.3.16 Registrar os valores obtidos no registro FM LAB 008. 6.4 CÁLCULO Cor ICUMSA (UI 7,0 ) = (Abs/b X c)x 1000 Sendo: Abs = Leitura de absorbância da solução b = Percurso ótico da célula (cm); c = Concentração de sacarose na solução açucarada, conforme indicado na tabela 6.5 RESULTADOS Expressar os resultados em unidades de ICUMSA (UI 7.0 ) e com número inteiro, sob as seguintes condições: 6.5.1. Para resultados até 1000 UI 7.0, arredondar e expressar o valor para a unidade inteira mais próxima (1 UI 7,0 ); 6.5.2. Para resultados acima de 1000 UI 7.0, arredondar e expressar o valor para a dezena mais próxima (10 UI 7,0 ). 6.6 PRECISÃO E TENDÊNCIA Tabela 2 Unidade Repetibilidade Reprodutibilidade 6
de (cor) 95% r 95% R 50 a 200 9 18 200 a 500 23 68 1200 a 2500 2500 a 5000 48 140 210 320 7 LISTA DE REGISTROS Códi go Nome Responsáv el pelo Preenchime nto Forma de Arquiv o Local do Arquivo Responsáv el pelo Arquivo Tempo de Retenção FM LAB 008 Memória de cálculo açúcar Auxiliar/ Técnico Física Eletrôn ico Pasta de Certifica dos Auxiliar/ Técnico 1 ano 8 REVISÃO Revisão 00 em 06/08/2014 - Emissão Inicial no Lotus Notes 7