Isolamento viral- cultivo celular Coleta e remessa de amostras Diagnóstico Tecidos refrigerados Raiva, RS Méd. Vet. José Carlos Ferreira CRMV-RS Laboratório de Virologia Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF) Fepagro Saúde Animal
Introdução Coleta e remessa de amostra para diagnóstico da Raiva Resultados do diagnóstico da Raiva no IPVDF
Remessa de amostra CÃES E GATOS Animal com sintomatologia de Raiva (óbito); Animal com sintomatologia nervosa inespecífica (óbito); Casos de agressão (óbito durante a observação); Animais atropelados (óbito); Remessa da cabeça ou encéfalo coletado.
Remessa de amostra MORCEGOS Enviar o animal inteiro, de preferência morto. ANIMAIS DE PRODUÇÃO São encaminhados pela Secretaria de Agricultura; Enviar encéfalo coletado.
Remessa de amostra para Raiva Enviar a amostra refrigerada! Previsão envio superior 72 horas: congelar Nunca enviar em: Álcool Formol Outro conservante químico Colocar amostra em: Recipiente plástico ou de vidro com tampa rosca Sempre bem vedado.
Remessa de amostra para Raiva Tipos de gelos recicláveis
Falha na remessa de amostra NÃO ENVIAR GELO SOLTO
Falha de remessa de amostra Enviar cabeça envolta em saco plástico apropriado.
Remessa de amostra www.ipvdf.rs.gov.br
Identificação da remessa de amostra Formulário de encaminhamento da caixa térmica www.ipvdf.rs.gov.br
Formulários de solicitação de exame da Raiva para ruminantes Formulário Síndrome Neurológica (FORM_SN):Casos Crônicos 1. Animal c/ sinais clínicos de doença nervosa, por mais de 15 dias 2. com doença crônica, caquetizante ou depauperante, por mais de 15 dias 3. em decúbito ou que não se locomove sem ajuda 4. encontrado morto na fazenda ou no transporte Formulários: FORM_IN ou FORM _COM: Casos agudos Animal c/distúrbios nervosos por menos de 15 dias INFORMATIVO CRHE Nº 01//2014
INFORMATIIVO CRHE Nº 01//2014
Eleição de amostra - Encéfalo Medula, cerebelo e cérebro.
Eleição de amostra - fragmentos
Diagnóstico da Raiva Observação clínica: suspeita de Raiva; Diagnóstico laboratorial: Imunofluorescência Direta (IFD) Prova biológica IFD Prova biológica
Diagnóstico da Raiva Imunofluorescência direta É um método rápido, sensível e específico; Anticorpos anti-vírus da Raiva marcados com fluoresceína (conjugado antirrábico) O antígeno rábico reage com conjugado emite uma luz esverdeada fluorescente. Observado em microscópio
Imunofluorescência (IFD) Identificação do antígeno viral Negativo Positivo
Preparação das lâminas 1
Preparação das lâminas 2
Preparação das lâminas 3
Preparação das lâminas 4
Preparação das lâminas 5
Preparação das lâminas 6
Leitura das lâminas Microscópio óptico
Resultado Raiva 1 Lâmina positiva IFD
Resultado Raiva 2 Lâmina positiva IFD Lâmina negativa IFD
Resultado Raiva 3 Lâmina positiva IFD
Prova biológica Confirmação de amostras negativas em IFD Inoculação intracerebral de camundongos lactentes Observação até 30 dias Confirmação por IFD dos óbitos
Retirada de cérebro para confirmação
Retirada de cérebro 2
Retirada de cérebro 3
Preparação da lâmina
Resultado Raiva Lâmina positiva IFD
Resultados da Raiva no IPVDF Resultados da análise laboratorial Animais silvestres Animais domésticos Animais de produção Resultados são informados para: Secretaria da Saúde e Secretaria de Agricultura Via laudos e relatórios mensais Participa da Rede de Laboratórios para Diagnóstico da Raiva no Brasil.
Submissões da Raiva IPVDF 2014 Espécie Total Silvestres 448 Animais de produção 318 Cães/gatos 117 Amostras impróprias 6 Total 889
Submissões para Raiva IPVDF 2014 Impróprias 1% Animais de produção 36% N=889 Silvestres 50% Cães/gatos 13%
Resultados da Raiva IPVDF 2014 Espécie Positivo Total Percentagem de positivos Silvestres 24 448 5 % Animais de produção 167 318 53% Cães/Gatos 1 117 1% Total 192 883 22%
Resultados da Raiva IPVDF 2014 Número de casos 450 400 350 300 250 200 150 100 Negativo Positivo 50 0 Silvestres Animais de produção Cães/Gatos
Número de casos 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 Quirópteros positivos para Raiva Tadarida brasiliensis Eptesicus furinalis IPVDF 2014 Artibeus lituratus Desmodus rotundus Espécies analisadas Molossus molossus N=24/390 Não identificado Lape et al., 2015
ResultadosRaivaem animaisde produção, IPVDF em 2014 Número de amostras analisadas 30 25 20 15 10 5 N=167/318 negativo positivo 0 jan fev mar abr mai jun jul ago set out nov dez Período
Desde 1946, o IPVDF trabalha com diagnóstico da Raiva no RS, realizando prestação de serviços e pesquisa científica. www.ipvdf.rs.gov.br
Muito obrigado! jose-ferreira@fepagro.rs.gov.br