CARACTERIZAÇÃO MORFOAGRONÔMICA E MOLECULAR DE MEIOS IRMÃOS DE Heliconia ssp.
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- Rebeca Maranhão Van Der Vinne
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1 CARACTERIZAÇÃO MORFOAGRONÔMICA E MOLECULAR DE MEIOS IRMÃOS DE Heliconia ssp. FÁBIO RODRIGO ARAÚJO PEREIRA Vivian Loges Orientadora Angelica Virginia Valois Montarroyos Walma Nogueira Ramos Guimarães Co-orientadoras Recife -PE Dezembro/2009
2 ROTEIRO 1. INTRODUÇÃO 2. OBJETIVOS 3. MATERIAL E MÉTODOS 4. RESULTADOS ESPERADOS 5. CRONOGRAMA DE ATIVIDADES 6. ORÇAMENTO
3 CULTIVO DE FLORES E PLANTAS ORNAMENTAIS INÍCIO Século XX CARACTERÍSTICAS Competitividade Conhecimento técnico Eficiência na distribuição PRODUÇÃO MUNDIAL ha PAÍSES PRODUTORES INTRODUÇÃO
4 INTRODUÇÃO FLORICULTURA BRASILEIRA ESTADOS PRODUTORES PARTICIPAÇÃO NO FLUXO INTERNACIONAL GERAÇÃO DE EMPREGO Produção Comércio varejista Apoio PRODUÇÃO DE FLORES CONCENTRAÇÃO DE PRODUÇÃO FLORES TROPICAIS
5 INTRODUÇÃO FLORES TROPICAIS CARACTERÍSTICAS Beleza Durabilidade Diversidade de cores e formas REGIÕES DE CULTIVO PRODUÇÃO EM PERNAMBUCO Famílias Araceae, Costaceae, Zingiberaceae, Heliconiaceae
6 INTRODUÇÃO HELICÔNIAS CARACTERIZAÇÃO BOTÂNICA Divisão: Magnoliophyta Classe: Liliopsida Ordem: Zingiberales Gênero:Heliconia ESPÉCIES NO BRASIL
7 INTRODUÇÃO HELICÔNIAS ORIGEM Neotropical OCORRÊNCIA AMÉRICA CENTRAL AMÉRICA DO SUL FONTE:mongay.com
8 HELICÔNIAS INTRODUÇÃO CARACTERÍSTICAS MORFOAGRONÔMICAS A) Aspecto geral de H. psittacorum B) Pseudocaule C) Folha D) Perfilho E) Inflorescência ereta, um plano, pequena F) Inflorescência ereta, um plano, grande G) Inflorescência ereta, mais de um plano H) Inflorescência pendente, em um plano I) Inflorescência pendente, mais de um plano Fonte: Flores tropicais - EMBRAPA, 2005
9 INTRODUÇÃO CULTIVARES EXPLORADAS COMERCIALMENTE NO BRASIL H. bihai H. rostrata H. wagneriana Grupo torch H. stricta H. psittacorum Fotos: Banco de imagens laboratório de Floricultura UFRPE
10 INTRODUÇÃO VARIABILIDADE EM HELICÔNIAS H. bihai Peach pink H. bihai Loster claw H. bihai Orange H. bihai H. bihai Chocolate H. bihai Nappy yellow Fotos: Banco de imagens laboratório de Floricultura UFRPE e LORENZI, 2008
11 INTRODUÇÃO FORMAS DE PROPAGAÇÃO ASSEXUADA Rizoma SEXUADA Agentes polinizadores Fruto
12 INTRODUÇÃO USO DE MARCADORES MOLECULARES Estimar a diversidade genética Identificar germoplasma Construir mapas genéticos Similaridade genética Polimorfismo
13 INTRODUÇÃO ISSR (INTER SIMPLE SEQUENCE REPEATS) Permitem a detecção de polimorfismos Dominantes Método amplamente aplicável Rápido, barato e requer pequenas quantidades de modelo DNA Não necessita de prévio conhecimento de sequências de DNA
14 OBJETIVOS OBJETIVO GERAL Avaliar populações de meios irmãos de duas espécies de helicônias, através de marcadores moleculares ISSR e caracterização morfoagronômica, a fim de obter genótipos para subsidiar programas de melhoramento genético de espécies deste gênero
15 OBJETIVOS OBJETIVOS ESPECÍFICOS Determinar a similaridade e distância genética de meios irmãos de duas espécies de helicônias obtidos a partir de embriões zigóticos Caracterizar morfologicamente os meios irmãos de acordo com caracteres de interesse morfoagronômico para os programas de melhoramento Efetuar a seleção massal das populações de meios irmãos das espécies de Heliconia
16 MATERIAL E MÉTODOS MATERIAL VEGETAL População de meios irmãos de duas espécies de helicônias provenientes da extração de embriões zigóticos, aclimatizadas e cultivadas em casa de vegetação da UFRPE EXTRAÇÃO DO DNA O DNA genômico será extraído de folhas pelo método CTAB segundo o protocolo descrito por Doyle e Doyle (1990) com adaptações
17 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE MOLECULAR QUANTIFICAÇÃO DO DNA Gel de agarose 0,8% e espectofotometria (LOPES, 2002) PCR As reações serão preparadas para um volume total de 25µl com primers ISSR
18 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE MOLECULAR DETECÇÃO DOS MARCADORES ISSR Gel de agarose 1,5 % Corados com Syber Gold e visualizados sob luz UV ANDRADE, 2005
19 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE MOLECULAR DETECÇÃO DOS MARCADORES ISSR ANDRADE, 2005
20 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE DAS BANDAS ANÁLISE MOLECULAR Presença e ausência de fragmentos polimórficos gerados por ISSR ANÁLISE DA DISTÂNCIA GENÉTICA Matriz Binária (Distância genética) Coeficiente de Jaccard (Similaridade entre os indivíduos) Método UPGMA (Árvore filogenética)
21 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE MORFOAGRONÔMICA Casa de vegetação Caracteres da planta
22 MATERIAL E MÉTODOS ANÁLISE MORFOAGRONÔMICA TRANSPLANTE DOS GENÓTIPOS PARA CAMPO Critérios de avaliação 1. Caracteres da planta 2. Caracteres da floração e inflorescência Seleção massal Foto: Guimarães, 2009
23 RESULTADOS ESPERADOS Selecionar indivíduos mais divergentes geneticamente, a fim de serem utilizados em programas de melhoramento genético dessas espécies de helicônias.
24 CRONOGRAMA ATIVIDADES 2009 J F M A M J J A S O N D Revisão de literatura x x x x x Redação de resumo para eventos científicos x x Acompanhamento das mudas aclimatadas x x ATIVIDADES 2010 J F M A M J J A S O N D Acompanhamento das mudas aclimatadas x x x x Manutenção e caracterização das plantas em casa de x x x x x x x x x vegetação Extração e Quantificação de DNA x x x x Realização de PCR s x x x x Transplante das mudas para campo x x x x x x Redação de resumo para eventos científicos x x Caracterização morfoagronômica em campo x x x x x x Revisão da literatura x x x x x x x x x x x x ATIVIDADES 2011 J F M A M J J A S O N D Caracterização morfoagronômica em campo x x x x x Revisão de literatura x x x x x Elaboração da dissertação x x Defesa da dissertação x
25 ORÇAMENTO Descrição Material/Reagentes Unid. Quant. Valor Unit. (R$) Valor Total (R$) CTAB (100g) Unid ,00 68,00 Tris ultra puro Kg ,73 181,73 Cloreto de sódio Kg 02 10,0 20,00 TAQ Polimerase (Kit) Unid ,00 680,00 2-mercaptoetanol (50 ml) Unid ,00 223,00 PVP g ,00 110,00 Álcool Isopropílico L 01 18,00 18,00 Álcool Isoamílico L 01 26,80 26,80 Álcool Etílico L 01 14,00 14,00 Clorofórmio L 01 30,00 30,00 EDTA (500g) Unid ,55 177,55 DNTP (100 mm) Unid ,00 600,00 Lambda 500 ng Unid ,00 400,00 Ladder 100pb 250ng Unid , ,00 Agarose (100g) Unid ,24 395,24 Ponteiras 1000µl (1000 unidade) Pcte 03 40,00 120,00 Ponteiras 200µl (1000 unidades) Pcte 03 35,00 105,00 Ponteiras 10µl (1000 unidades) Pcte 03 30,00 90,00 Tubos 0,2 ml (1000 unidades) Pcte ,00 263,00 Tubos 1,5 ml (1000 unidades) Pcte ,00 263,00 Tubos 50 ml (25 unidades) Pcte 02 30,00 60,00 Luvas Procedimento (10 unid.) Cx 05 13,00 65,00 Nitrogênio líquido L 18 7,50 135,00 Síntese de oligonucleotídeos Unid 200 4,00 800,00 Microplaca de PCR de 96 poços (10 peças) Pcte 5 95,07 475,35 total 7.070,67
26 APOIO Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
27 FÁBIO RODRIGO ARAÚJO PEREIRA MESTRANDO EM AGRONOMIA MELHORAMENTO GENÉTICO DE PLANTAS UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO
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