PRATICIDADE NA DETERMINAÇÃO DO CONTEÚDO ENERGÉTICO DE LEITE HUMANO UTILIZANDO MÉTODO CREMATÓCRITO

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1 PRATICIDADE NA DETERMINAÇÃO DO CONTEÚDO ENERGÉTICO DE LEITE HUMANO UTILIZANDO MÉTODO CREMATÓCRITO A.C. Ribeiro 1, K. de P. Correa 1, M. C. Demartini 1, R. M. S. Fonseca 2, E.A.F. Fontes 1, J.C. dos R. Coimbra 1 1- Departamento de Tecnologia de Alimentos Universidade Federal de Viçosa CEP: Viçosa MG Brasil, Telefone: +51 (31) Fax: +55 (31) (alessandra.ribeiro@ufv.br), (kelypaula@yahoo.com.br), (marcela.demartini@ufv.br); (eaffontes@ufv.br), (jcoimbra@ufv.br). 2- Banco de Leite Humano da Casa de Caridade de Viçosa - Hospital São Sebastião CEP: Viçosa MG Brasil, Telefone: +55 (31) ramal (rafaelamsfonseca@yahoo.com.br) RESUMO - O valor energético do leite humano (LH) é de suma importância para o seu direcionamento nas UTIs-Neonatal. Leites com elevado conteúdo energéticos devem ser usados para alimentação de recém-nascidos de baixo peso. Os bancos de leite humano (BLH) determinam o conteúdo energético do LH processado nas suas unidades utilizando um crematócrito. Esse trabalho teve como objetivo sugerir uma tabela com leitura direta para valor calórico facilitando as determinações na rede brasileira de bancos de leite humano (BLH). Os dados de conteúdos de gordura e energéticos coletados nos BLH com valores de 2,68 (± 1,47) e 590,67 (± 143,29) respectivamente, permitiram a escolha da faixa de creme e coluna total utilizados da tabela desenvolvida. Portanto a ferramenta criada irá facilitar os cálculos de conteúdo energético nas unidades da rede brasileira BLH. PALAVRAS-CHAVE: Leite humano, gordura; tabela conteúdo energético. ABSTRACT The energy content of human milk (LH) is very important for your guidance in the ICU, Neonatal. Milks with high energy content should be used for feeding infants of low birth weight. The human milk banks (HMB) determine the energy content of LH processed in units using a creamatocrit. This study aimed to suggest a table with direct reading for calorie facilitating the determinations in the Brazilian network of human milk banks (HMB). Data from fat content and energy collected in HMB with values 2.68 (± 1.47) and (± ) respectively, allowed the choice of cream range and full column used in the developed table. Therefore the created tool will facilitate the calculations of energy content in the units of the Brazilian Network BLH. KEYWORDS: fat; Gerber; energetic value. 1. INTRODUÇÃO Existe um consenso que o leite da própria mãe é o melhor alimento para os bebes nascidos daquela espécie, portanto não existem dúvidas sobre a importância do leite humano. Sua relevância está na capacidade de suprir as necessidades do recém-nascido, que ainda é incapaz de produzir certas substâncias como enzimas digestivas, IgA secretora, nucleotídeos, taurina e ácidos graxos poliinsaturados de cadeia longa. Entretanto são diversos os motivos que impedem algumas mães de alimentarem seus filhos e buscam-se alternativas para alimentação dessas crianças. O Brasil tem sido pioneiro na implantação de uma alternativa de sucesso: os bancos de leite humano (BLH) em hospitais. Nesses bancos é possível ás mães doarem o excedente do seu leite que será destinado a lactantes, com prioridades aos internados em Unidades de Tratamento Intensivo (UTIs-Neonatal) (Brasil, 2008).

2 A composição do leite humano sofre variações ao longo do período de lactação sendo a gordura o componente responsável por 20 % da variação sofrida. A variação em um componente sempre acarreta alteração nos demais componentes, portanto existe uma proporcionalidade entre os constituintes do leite humano. Esse fato permitiu Lucas et al., (1978) estabelecer uma relação matemática entre creme, soro, gordura e conteúdo energético que permite a utilização do método do crematócrito (Brasil, 2008; Saúde, 2001). Com isso pode-se afirmar que quanto maior o conteúdo de gordura maior será o aporte energético do leite humano(almeida & Gomes, 1998). Pode-se dizer então que a determinação do teor de gordura é fundamental para o direcionamento do leite humano processado em bancos de leite humano. Crianças com baixo peso necessitam de maior aporte energético para garantir seu ganho de peso em menor tempo e recuperação imediata. Essa determinação pode ser realizada por diversos métodos dentre eles pode-se citar Gerber e o método do crematócrito utilizado nos BLH. Esse trabalho teve como objetivo avaliar o teor de gordura pelo método de Gerber e comparar o resultado com o método utilizado nos bancos de leite humano sugerindo uma tabela com leitura direta para o valor calórico para ser utilizado na rede de bancos de leite humano. 2. MATERIAL E MÉTODOS O estudo foi realizado nos laboratórios de Química e Análise de Alimentos do Departamento de Tecnologia de Alimentos e de Nutrição Experimental da Universidade Federal de Viçosa (UFV), e no Banco de Leite Humano da Casa de Caridade de Viçosa, do Hospital São Sebastião em Viçosa, MG. 2.1 Amostras O leite humano utilizado em todo experimento foi oriundo do banco de leite humano do Hospital São Sebastião da cidade de Viçosa, MG. Foram coletados leites nos três estágios de lactação: colostro (até o 7º dia de lactação); leite de transição com 20 dias de lactação e leite maduro com 60 dias de lactação. Todo o leite utilizado no estudo foi armazenado a temperatura de congelamento (-20 C) até ser utilizado. No momento das análises, amostras de leite foram descongeladas em banhomaria a temperatura de 40 C. As determinações realizadas no banco de leite Banco de Leite Humano da Casa de Caridade (BLH-CC) de Viçosa ocorreram durante todo o mês de maio de 2016e foram analisadas 7 amostras no estágio de lactação colostro, 15 no estágio de lactação transição e 56 no estágio de lactação leite maduro. 2.2 Determinação de gordura e valor energético O teor de gordura foi determinado pelo método utilizando butirômetro de Gerber (AOAC, 2005), método oficial utilizado para quantificação de gordura em leite. Essa determinação é baseada na dissociação da caseína pela adição do ácido sulfúrico (d = l,825 g cm - ³) o qual não ataca a matéria gorda. Esse processo diminui a viscosidade do meio acarretando a um aumento da densidade da fase polar e fundindo a gordura. Em função da liberação de calor proveniente da reação há a separação da gordura, esse processo é favorecido pelo extrator (álcool isoamílico d= 0,811 g ml -1 ). O teor total de gordura também foi avaliado segundo método desenvolvido por Lucas et al.,

3 (1978) recomendado no manual de funcionamento dos bancos de leite humano no Brasil (Brasil, 2008) utilizando crematócrito. Para determinação em crematócrito, as amostras de leite humano foram homogeneizadas e inseridas em tubos capilares de vidro padrão (75 mm de comprimento x 1,5 mm de diâmetro externo). Após essa etapa são devidamente vedados com massa de modelagem (plasticina) e submetidos à centrifugação em uma centrífuga para Microhematócrito (modelo 10148, Sigma 1-15K) a x g por 15 minutos para separação de fases. Foram determinados dessa forma o teor de creme, de gordura e o conteúdo energético total (CET) segundo as equações (1, 2 e 3), respectivamente, propostas por Lucas et al. (1978): (1) (2) (3) Em que Cr é o teor de creme; C c é a coluna do creme (mm); C t é a coluna total (soro de leite e creme, mm); G é o teor de gordura. O conteúdo energético do leite humano também foi determinado utilizando os resultados obtidos da determinação de gordura pelo método de Gerber segundo a equação 4 abaixo: 2.3 Análise estatística {[ ] } (4) Todas as análises foram realizadas em triplicata. Foram realizadas análises estatísticas descritivas dos dados como média e desvio padrão e comparados pelo teste t de student. Os dados foram avaliados utilizado o programa estatístico SAS (2007) licenciado para a UFV. 3. RESULTADOS E DISCUSSÃO Seguem na tabela 1 os resultados obtidos nas determinações de creme, gordura e conteúdo energético do leite humano processado no BLH-CC no mês de maio de 2016 utilizando o crematócrito. No leite de conjunto calculou-se a médias dos 3 períodos de lactação: colostro, transição e maduro. De acordo com a Tabela 1 observa-se que o colostro apresenta um menor teor de gordura e consequentemente um menor valor calórico, visto que a gordura influencia no cálculo de valor calórico. Segundo Calil & Falcão, 2003, o conteúdo energético do colostro oscila em torno de 580kcal L -1. O colostro apresenta proteínas e minerais em maior quantidade, baixa concentração de gordura e lactose, essa composição mantém as necessidades do recém-nascido durante a primeira semana de vida (Nascimento & Issler, 2003).

4 Tabela 1- Valores médios (± desvio-padrão) para determinação de gordura, creme e conteúdo energético total, pelo método crematócrito do leite humano processado no banco de leite humano do hospital São Sebastião em diferentes estágios de lactação. Leite Gordura (%) CET (kcal L -1 ) Creme (%) Colostro 2,38 ± 0,84 561,88 ± 82,28 4,07 ± 1,23 Transição 2,77 ± 1,51 599,27 ± 147,59 4,63 ± 2,21 Maduro 2,69 ± 1,53 591,97 ± 149,45 4,52 ± 2,24 Leite de conjunto 2,68 ± 1,47 590,67 ± 143,29 4,50 ± 2,15 Na Tabela 2 foi comparado os valores obtidos pelo crematócrito e os valores de gordura e conteúdo energético utilizando um método de butirômetro de Gerber. Tabela 2: Valores médios (± desvio-padrão) para determinação de gordura e conteúdo energético total, pelo método de crematócrito e butirômetro de Gerber do leite humano em três estágios de lactação (Colostro, Transição e Maduro). Método Estagio de lactação Crematócrito Gerber Gordura % CET (kcal. L -1 ) Gordura % CET (kcal. L -1 ) Colostro 2,42 ± 0,04 565,50 ± 3,61 2,90 ± 0,00 612,24 ± 0,00 Transição 1,72 ± 0,91 497,48 ± 88,40 3,00 ± 0,00 621,99 ± 0,00 Maduro 1,60 ± 0,95 485,07 ± 92,64 1,00 ± 0,00 426,94 ± 0,00 Leite de conjunto 1,81±0,84 a 505,67±82,29 b 2,3± 0,98 a 553,73±95,18 b * médias seguidas pela mesma letra numa linha não diferem entres si segundo teste t (p 0,05) Como os valores encontrados para gordura utilizando os dois métodos são bem próximos foi utilizado os resultados método do crematócrito para determinação de gordura e valor calórico do leite humano processado em BLH. Utilizando as equações 1 e 3 descritas acima calculou-se o conteúdo energético do leite humano e montou-se a Tabela 3. Os limites utilizados para coluna de creme (1-15 mm) e para coluna total (50-75 mm) foram estabelecidos baseados nos valores encontrados para as respectivas colunas e também para CET no BLH-CC e na literatura (Aparecida et al., 2004; Sjöström, Öhlund, Ahlsson, & Domellöf, 2016; Vieira, Soares, Pimenta, Abranches, & Moreira, 2011).

5 Coluna total em mm Tabela 3: Relação entre medida da coluna de creme (Cc) e medida da coluna total (C t ) obtidos na análise de crematócrito para determinação do contéudo energético (kcal L -1 ) em leite humano. Coluna de creme em mm *Relação de valor calórico obtido em bancos de leite humano pela análise de crematório ; onde: cr é o teor de creme; cc é a coluna do creme (mm); ct é a coluna total (soro de leite e creme, mm). 4. CONCLUSÕES Utilizando um crematócrito calcula-se de maneira simples, sem a necessidade de reagentes e laboratórios sofisticados o valor calórico do leite humano. A tabela desenvolvida no presente estudo apresenta uma maneira rápida e prática para determinar o valor calórico do LH e permite o direcionamento do leite em UTI-Neonatal de acordo com as necessidades individuais dos recémnascidos.

6 5. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem o apoio financeiro das seguintes agências brasileiras: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (Fapemig), Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e o Banco de Leite Hospital São Sebastião pela doação do leite humano. 6. REFERÊNCIAS Almeida, J. A. G. de, & Gomes, R. (1998). Amamentação: um híbrido natureza-cultura. Revista Latino-Americana de Enfermagem, 6(3), Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto / Universidade de São Paulo. Retrieved June 7, 2016, from AOAC. (2005). Official Methods of Analysis of Association Analytical Chemists (18th ed.). Gaithersburg, MD, USA. Aparecida, E., Bortolozo, F. Q., Tiboni, E. B., Lys, E., Cândido, M. B., Bortolozo, E. A. F. Q., Tiboni, E. B., et al. (2004). Leite humano processado em bancos de leite para o recém-nascido de baixo peso: análise nutricional e proposta de um novo complemento. Revista Panamericana de Salud Pública, 16(3), Brasil. (2008). Banco de Leite Humano: Funcionamento, Prevenção e Controle de Riscos. Calil, V. M. L. T., & Falcão, M. C. (2003). Composição do leite humano : o alimento ideal Human milk composition : the ideal nutrition for infants. Rev Med, 82(1), Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., & Baum, J. D. (1978). Creamatocrit: simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk. British medical journal, 1(6119), Nascimento, M. B. R. do, & Issler, H. (2003). BREASTFEEDING : MAKING THE DIFFERENCE IN THE DEVELOPMENT, HEALTH AND NUTRITION OF TERM AND PRETERM NEWBORNS, 58(1), Saúde, M. Da. (2001). Recomendações técnicas para funcionamento do banco de leite humano, Sjöström, E. S., Öhlund, I., Ahlsson, F., & Domellöf, M. (2016). Intakes of Micronutrients Are Associated With Early Growth in Extremely Preterm Infants. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition, 62(6), Retrieved from Vieira, A. A., Soares, F. V. M., Pimenta, H. P., Abranches, A. D., & Moreira, M. E. L. (2011). Analysis of the influence of pasteurization, freezing/thawing, and offer processes on human milk s macronutrient concentrations. Early Human Development, 87(8), Elsevier Ireland Ltd. Retrieved from