EPLNA_2012 AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS E PRODUÇÃO DE MATERIAL DE REFERÊNCIA DE FORRAGEM PARA NUTRIENTES E CONTAMINANTES INORGÂNICOS
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- Márcia Schmidt Pinho
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1 AVALIAÇÃO DE PARÂMETROS E PRODUÇÃO DE MATERIAL DE REFERÊNCIA DE FORRAGEM PARA NUTRIENTES E CONTAMINANTES INORGÂNICOS Doutoranda: Carla M. Bossu Orientadora: Dra. Ana Rita de Araujo Nogueira Co-orientador: Dr. Gilberto B. Souza
2 Introdução Centro Colaborador em Defesa Agropecuária: Produção de Materiais de Referência Certificados e Organização de Ensaios de Proficiência para Resíduos e Contaminantes Inorgânicos CENA-USP Piracicaba; Embrapa Pecuária Sudeste; Faculdade de Farmácia e Bioquímica-USP Ribeirão Preto.
3 Introdução Forrageira (Brachiaria brizantha cv. Marandu) Bom valor nutritivo; Tolerância à solos ácidos e de baixa fertilidade. CONTAMINANTES INORGÂNICOS MONTEIRO F.A. et al., Sci. Agric., Piracicaba 52 (1): , 1995
4 Objetivo Produzir material candidato a material de referência nacional: Forrageira (Brachiaria brizantha Stapf. cv. Marandu) Para futura distribuição aos 6 laboratórios da LANAGRO (LABORATÓRIO NACIONAL AGROPECUÁRIO) da Rede MAPA (MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO) e dos laboratórios participantes do Ensaio de Proficiência para Laboratórios de Nutrição Animal (EPLNA). Serão realizadas as seguintes determinações: os contaminantes Pb, Cd, Cr e As e os macro e micronutrientes Ca, P, Mg, K, Cu, Fe, Mn, Zn e Na. ISO Guias 33, 34 e 35.
5 Etapas Realizadas Montagem do experimento vasos de 25 L; Figura 1. Vasos plantados com forrageira Brachiaria brizantha Stapf. cv. Marandu, instalados em casa de vegetação.
6 Etapas Realizadas Estudo da Adição de Contaminantes: Cd, As, Pb e Cr : 0; 12,5; 25; 50 mmol/vaso 0 12,
7 Espectrometria de Massa com Plasma Acoplado Indutivamente (ICP- MS) Condições de operação do ICP-MS Características Parâmetros Gerador de frequência (MHz) 27 Potência de radio-frequência (kw) 1,4 Vazão do gás do plasma (L min -1 ) 18 Vazão do gás auxiliar (L min -1 ) 1,8 Vazão do gás de nebulização (L min -1 ) 0,93 Vazão do sheath gas (L min -1 ) 0,19 Pontos por pico 2 Varredura/replicata 5 Replicatas/amostra 5 Tempo de leitura (ms) 100 Cone skimmer Ni Cone de amostragem Nebulizador Câmara de nebulização Temperatura da câmara de nebulização Processamento do sinal Ni Seaspray Scott 2 o C Peak Hopping Isótopos monitorados 75 As +, 112 Cd +, 114 Cd +, 52 Cr +, 53 Cr +, 208 Pb +, 206 Pb +,207 Pb +
8 Resultados Teores de contaminantes na dose 25 mmol/vaso (16 vasos; mg kg -1 ; n = 4) e valor de peso seco (g) 25 mmol/vaso Peso seco 52 Cr + 75 As Cd Pb + 1 o corte 17,7±8,5 0,7±0,2 0,70±0,61 32±11 1,6±0,4 2 o corte 10,3±4,2 0,6±0,2 0,9±0,2 7±2 2,3±0,4
9 Estudo da temperatura de secagem
10 Experimental 20 vasos liofilizador Estufa à 45 o C Estufa à 65 o C Moinho criogênico Moinho de facas
11 Resultados Teste t entre as médias Diferença significativa Sem diferença significativa Sem diferença significativa
12 Preparo do material candidato a material de referência
13 Adição da dose 25 mmol/vaso em 375 vasos Vasos contaminados depois de ~ 60 dias
14 Distribuição de Tamanho de Partícula Moinho de facas Peneira de 500µm Frequência Acumulada (%) % abaixo de 530 µm Tamanho de Partícula (µm) 7 4 Frequência (%)
15 Distribuição de Tamanho de Partícula Moinho ultracentrífugo ZM 200 Peneira de 250µm Frequência Acumulada (%) % abaixo de 350 µm Tamanho de Partícula (µm) 4 1 Frequência (%)
16 Preparação do material candidato 380 frascos de vidro âmbar contendo 50 g destinados aos testes de homogeneidade, estabilidade, umidade
17 Preparação do material candidato 1 00 frascos plástico contendo 20 g destinados ao ensaio de proficiência. Irradiação de 5 a 1 0 kgy
18 Distribuição de Tamanho de Partícula Foram 3 leituras de cada um dos 3 frascos 90% do material <280 µm
19 Preparação do material candidato 10 frascos para o teste de homogeneidade entre frascos 1 frasco para o teste de homogeneidade dentro do frasco 3 frascos para o teste de estabilidade a curto prazo 3 frascos para o teste de estabilidade a longo prazo 3 frascos para o teste de umidade
20 Estudo de homogeneidade entre os frascos e dentro do frasco
21 Preparo da Amostra 200 mg de amostra 2,0 ml de H 2 O 2 (30% m/m) 4,0 ml HNO 3 (50% v/v) 4,0 ml de H 2 0 ICP OES Programa de aquecimento Tempo (min) Potência (W) Temperatura ( o C )
22 Espectrometria de emissão óptica com plasma acoplado indutivamente Parâmetros Instrumentais utilizados em ICP OES conf. axial Potência de radio frequência 1,0 KW Vazão do nebulizador 0,75 L.min -1 Vazão do gás do plasma 15 L.min -1 Vazão do gás auxiliar 1,5 L.min -1 Nebulizador V-Groove Câmara de Nebulização Sturman-Masters Comprimento de onda (nm) P 177,434 Ca 422,673 Mg 279,553 Mn 259,372 Zn 213,857 Cu 213,598 Na 588,995 K 769,897 Fe 234,350
23 Teste de homogeneidade Análise de variância ANOVA one-way e o F crítico foi comparado ao F analítico. Quando o F crítico é maior que o F analítico, aceita-se H 0 e o material é considerado homogêneo.
24 Teste de homogeneidade
25 Teste de homogeneidade
26 Teste de homogeneidade
27 Conclusões Parciais F crítico > F analítico :todos os frascos apresentaram médias dentro do intervalo de confiança de 95% Indica que o material tem a sua homogeneidade assegurada para Cu, Mg, Mn, Zn, P, Fe
28 Agradecimentos Dr. Alberto C. de Campos Bernardi Marcio A. Bacchi
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