Experimentação animal translacional em urologia

Transcrição

1 CURSO AVANÇADO EM MODELOS ANIMAIS DE DOENÇAS HUMANAS Experimentação animal translacional em urologia Edgar Tavares da Silva

2 Investigação Translacional Investigação translaccional European Society for Translational Medicine (EUSTM) interdisciplinary branch of the biomedical field supported by three main pillars: bench-side, bedside and community Requer conhecimentos e capacidades tanto de investigação fundamental ( laboratório ) como de prática clínica ( cabeceira do doente )

3 Urologia Especialidade médica que estuda e trata a patologia do aparelho génito-urinário Urologia Geral Oncologia Urológica Andrologia Litíase Urinária Urologia Funcional e Neuro-Urologia Urologia Pediátrica Transplantação Renal

4 Hot Topics em Urologia Oncologia Neoplasia da Próstata Neoplasia da Bexiga Neoplasia do Rim Bexiga Hiperactiva Disfunções Sexuais Líbido, Erecção, Orgasmo e Ejaculação Cirurgia minimamente invasiva Laparoscópica/Robótica, Endoscópica e Percutânea

5 Cirurgia Robótica

6 Cirurgia Endoscópica

7 Cirurgia Percutânea

8 Modelos Animais em Urologia 1. Patologia oncológica 2. Disfunções Vesicais 3. HBP 4. Litíase 5. Transplantação Renal 6. Outros

9 Modelos animais de patologia oncológica Tumor da próstata

10 Tumor da próstata Tipos de modelos: Heterotópicos Ortotópicos Espontâneos Xenoenxertos Indução hormonal Indução química Metastáticos

11 Tumor da próstata Tipos de modelos: Heterotópicos Mais simples Fácil seguimento Sem necessidade de cirurgia de implantação Não metastizam

12 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos Próstata animal Não produz PSA Lobos separados Anterior, Ventral, Lateral, Dorsal Partilha 95% dos genes com a humana

13 Tumor da próstata

14 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos Espontâneos Lobund-Wistar 10% aos 26 meses ACI/Seg 70% aos 36 meses 16% são macroscópicos Xenoenxertos Linhas celulares Indução hormonal Lobund-Wistar protocolos com testosterona ou testosterona e estrogénios Indução química N-metil-N-nitrosureia (MNU), N-nitrosobis-2-oxopropil-amina (BOP), 3,2 -dimetil-4-aminobifenil (DMAB) Transgénicos Oncogenes virais Knockout de genes supressores tumorais

15 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

16 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

17 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

18 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

19 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

20 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópicos

21 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópico localmente avançado Desenvolvido no nosso instituto Simular um estadio avançado da doença Aumentar a probabilidade de metastização

22 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópico localmente avançado

23

24 Tumor da próstata

25 Tumor da próstata

26 Tumor da próstata Tipos de modelos: Ortotópico localmente avançado

27 Tumor da próstata Tipos de modelos: Metastáticos Presentem responder à dificuldade em obter metastização a partir de modelos ortotópicos Tipos Injecção intra-cardíaca Metástases ganglionares Extremidades de ossos longos Injecção intra-óssea Injecção veia dorsal da cauda

28 Modelos animais de patologia oncológica Tumor da bexiga

29 Tumor da bexiga Tipos de modelos: Heterotópicos Ortotópicos Indução química Enxertos Singénicos Xenoenxertos Genéticamente modificados

30 Tumor da bexiga Tipos de modelos: Ortotópicos Indução química Usados para estudos de quimioprevenção Levam 8 a 14 meses a desenvolverem-se Químicos usados BBN (N-butil-N-(4-hidroxibutil)nitrosamina) É o agente mais usado porque lembra um TCT de alto grau Começa com atipia, passa a cis e finalmente MIBC FANFT (N-[4-(5-nitro-2-furyl)-2-tiazol]formamido) Tumores predominantemente uroteliais, com algum grau de diferenciação escamosa Também já se descreveu hiperplasia, displasia e cis MNU (N-metil-N-nitrosureia) Dá alterações neoplásicas progressivas, tornando-se cada vez menos diferenciadas Começa com cis, passa a papilar e depois MIBC volumosos

31 Tumor da bexiga Tipos de modelos: Ortotópicos Enxertos Xenoenxertos requerem ratos imunocomprometidos Não dá para avaliar o papel da imunidade Problemas sucesso de implantação e seguimento oncológico Singénicos tumor de rato em ratos imunocompetentes MB49 e as MBT-2 A taxa de tumor varia de %, dependendo se há pré-tratamento Ratos geneticamente modificados Os tumores destes modelos são menos heterogéneos influencia a progressão e metastização A célula de origem pode não reflectir as dos tumores humanos Limitações longos períodos de latência, penetrância incompleta e requerem um elemento genético artificial

32 Tumor da bexiga Sucesso na implantação Depende de técnica e do pré-tratamento Sem pré-tratamento só surge tumor em 6 a 50% dos ratos Com o pré-tratamento surge em % Tipos de pré-tratamento - ácido clorídrico, tripsina, coagulação da mucosa com corrente eléctrica, traumatismo com catéter Visa lesar a barreira de GAGs Técnica de instilação Implantar uma concentração maior Aumentar o tempo de contacto Cerclagem em redor da uretra para impedir a saída das células 30 min-3 horas Mas o aumento do tempo de contacto aumenta: Tumores do urotélio alto Estenoses da uretra/perfuração vesical Mortalidade animal (pode chegar aos 20%)

33 Tumor da bexiga Seguimento do tumor Clínico Cistoscopia ultra-fina sensibilidade e especificidade >90% Ecografia transluminal ou transabdominal Valor preditivo do estadio de 95% Requer treino RMN tem mau poder de resolução para lesões pequenas e iniciais Todos requerem anestesia e cateterização, o que leva a perdas de animais

34 Tumor da bexiga

35 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada Procurava resolver o problema do seguimento Baseava-se na experiência dos modelos heterotópicos com sucesso de implantação de ~80%

36 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada

37 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada

38 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada

39 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada

40 Tumor da bexiga Modelo ortotópico com cistostomia fechada

41 Tumor da bexiga

42 Tumor da bexiga

43 Tumor da bexiga

44 Modelos animais de patologia oncológica Tumor do rim

45 Xenoenxerto Heterotópico

46 Crioablação Massas Renais

47 Modelos animais de disfunções vesicais

48 Incontinência Urinária

49 Incontinência urinária

50 Incontinência Urinária

51 Incontinência Urinária

52 Bexiga Hiperactiva

53 Disfunção Miccional

54 Disfunção Miccional

55 Cistite Intersticial

56 Cistite Intersticial

57 Disfunção Miccional

58 Modelos animais de HBP

59 HBP

60 HBP

61 Modelos animais de litíase urinária

62 Oxalato Cálcio

63 Oxalato Cálcio

64 Oxalato Cálcio

65 Oxalato Cálcio

66 Cistinúria

67 Litotrícia Extracorpórea

68 Lesão Renal Aguda

69 Hidronefrose

70 Modelos animais de transplantação renal

71 Ureterostomia Técnica Cirúrgica Microsurgery. 2004;24(4):345-9

72 Ureterostomia Técnica Cirúrgica

73 Outros modelos animais

74 Uretra - Hipospádias

75 Uretra - Uretroplastia

76 Disfunção Eréctil

77 Disfunção Eréctil

78 Hipertensão Arterial

79 Hipertensão Arterial

80 Dor Testicular

81 Doença Renal Poliquística

82 Conclusões

83 Conclusões Mamíferos estudo de funções humanas complexas, como p.e. o ciclo miccional Hiperplasia da Próstata só ocorre no Homem e no cão!!! Técnica cirúrgica porco, rato, gato, cão Xenoenxertos futuro da transplantação? Drosophila modelo pouco complexo para o estudo de litíase

84 Apresentação disponível em: Obrigado pela atenção E d g a r Ta v a r e s d a S i l v a edsilva@chuc.min-saude.pt F O L L O W U S O N : H O M E P A G E S /sutr.chuc sutr-chuc.pt nesu.pt