Prof. Baseado na aula do M.Sc.Cláudio C. Silva. UCG / BIO

Transcrição

1 Prof. Baseado na aula do M.Sc.Cláudio C. Silva. UCG / BIO

2

3 DNA Material genético cromatina DNA + Proteínas Cromossomos Cromatina duplicada e espiralizada

4 Braço Curto (p) Constricções Secundárias Centrômero (envolvido pelo Cinetócoro) Constrição Primária Braço Longo (q) Cromátide Telômeros

5 Função: manutenção e regeneração do organismo Uma célula-mãe dando origem a duas células-filhas idênticas a célula-mãe.

6 Método Cultura Celular: - Sangue periférico - Medula Óssea - Tumores sólidos, etc.

7 Amostra Heparinizada Amostra heparinizada é uma amostra de tecido submetida a um agente farmacológico anti-coagulante para a manutenção das condições de fluidez dos líquidos e colóides celulares. Meio de cultura Fitohemaglutina Colchicina Coleta / Lâmina. O meio de cultura é o substrato nutritivo onde as células ou as moléculas de DNA usadas no teste são mantidas em condições satisfatórias. Fitohemaglutinina (não hemaglutina) é uma proteína vegetal usada para facilitar a separação de células que serão submetidas a determinados tipos de exames (como o teste de cariótipo) A colchicina ou colquicina é uma alcalóide altamente venenoso. No teste de cariótipo é usada para facilitar a observação do cromossomos condensados no núcleo da célula, uma vez que, que esta substância inibe a polimerização das proteínas do fuso mitótico e para a divisão celular na metáfase, fase na qual os cromossomos se encontram no maior grau de condensação Coleta é a etapa de obtenção dos tecidos vivos de onde as células serão retiradas para exame. Lâmina é o preparo da amostra sobre uma lâmina de vidro que será levado ao microscópio para observação, neste caso, do cariótipo.

8

9

10

11 Características Grupo Tamanho Posição do Centrômero No. de Cromossomos Pares Cromossômicos A Grandes Meta Submeta Meta B Grandes Submeta 4 5 e 6 C Médios Submeta , 7, 8, 9, 10, 11, 12 e X D Médios Acro 6 13, 14 e 15 E Pequenos Submeta 6 16, 17 e 18 F Pequenos Meta 4 19 e 20 G Pequenos Acro , 22 e Y Total 46 Cromossomos

12 Baixa Resolução 400 bandas (regiões e bandas) Alta resolução 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas) Altíssima resolução bandas (regiões, bandas, sub-bandas e sub-subbandas)

13 Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação, envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática seguida da incorporação de corante DNA-específico Formação de bandas claras e escuras ou coloridas, evidenciando estruturas de 1-10Mb

14 Coloração Convencional Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc). Rápido, fácil e baixo custo Permite a contagem do número de cromossomos Permite avaliar a qualidade dos preparados cromossômicos Muito utilizado em dosimetria biológica

15 Autossomos (1 22) Heterossomos ou Cromossomos Sexuais (X e Y)

16 ISCN: An International System for Human Cytogenetic Nomenclature A G Grupos cromossômicos 1-22 Números de autossomos X, Y Cromossomos sexuais / Separar as linhagens celulares + ou - Indica se o cromossomo foi adicionado ou perdido; indica ganho ou perda no braço cromossômico? Identificação questionável do cromossomo ou da estrutura cromossômica * Indica que o cromossomo ou a estrutura deve estar explicada no rodapé

17

18 2N SPTZs (N)

19 2N Óvulos (N)

20 Numéricas: 1. Euploidias (monoploidia, triploidia, tetraploidia etc) 2. Aneuploidias (monossomia, nulissomia, trissomia, tetrassomia etc) Estruturais: 1. Deleção 3. Inversão 2. Duplicação 4. Translocação

21 Função: Produção de gametas Uma célula-mãe dando origem a quatro células-filhas com a metade da informação genética da célula-mãe. Gametas anormais (100%) Gametas anormais (50%)

22 Aberrações cromossômicas

23

24 47,XY,+21 Síndrome de Down (Trissomia do Cromossomo 21)

25

26 1:1000 nascimentos; Estatura média 1,83 m; Orelhas displásicas; Ponte nasal larga; Acnes; Dedos alongados; Hiperatividade; Fertilidade normal; Intelecto normal ou discreta oligofregnia; Descrita em 1961 por Sandberg e colaboradores 47,XYY

27 1:1000 nascimentos; Tendência a esquizofrenia; Amenorréia secundária; Hiperatividade; Fertilidade normal; Intelecto normal ou discreta oligofregnia; Descrita em 1959 por Jacobs e colaboradores 47,XXX

28 47,XX,+13 ou 47,XY, : nascimentos; Aplasia cutânea do cabelo; Microcefalia e microftalmia; Fissura lábio-palatal bilateral; Micrognatia, Surdez, Proboscis; Anomalias do SNC; Quadro convulsivo; 95% mortalidade nos até sexto mês

29 47,XX,+18 ou 47,XY,+18 1: 3000 nascimentos; Comprometimento cardíaco; Alterações pulmonares graves; 15% dos afetados sobrevivem ao primeiro ano de vida; Convexidade plantar; Poliesplenia; Hérnias umbilicais; Micrognatia;

30

31 Aberrações cromossômicas

32 Translocação Não recíproca Translocação Não recíproca Crossing-Over desigual (Duplicação / Deleção) Translocação Recíproca Translocação Recíproca (Robertsoniana)

33 p - q - Inversões (Pericêntrica e Paracêntrica) Deleções (Intertiscial, Terminal p e Terminal q)

34 Cromossomo em Anel (r)

35 Isocromossomos Iso q

36 1: nascimentos; Choro característico; Microcefalia e mandíbula pequena; Retrognatia; Faringe pequena anormal, epiglote flácida e glote hipotônica; Dismorfia cranio-facial; Oligofrenia.

37 i(x) r(x) del(xq)

38 Questão 01 Os conhecimentos atuais de biologia celular, biologia molecular e engenharia genética podem, muitas vezes, estabelecer com segurança o parentesco entre pessoas, mesmo quando elas pertencem a gerações afastadas entre si. O heredograma abaixo mostra os descendentes do casal João e Maria. Atualmente, de toda essa família, apenas Maria e todos os seus bisnetos estão vivos, e se apresentaram para a identificação de herdeiros do casal citado. Por não haver documentos legais comprobatórios da relação de parentesco, nem ser possível a coleta de material genético dos membros falecidos da família, foi utilizada, dentre outras, a técnica de identificação por meio do estudo do DNA extranuclear. Indique o número de: a) bisnetos do sexo masculino e do sexo feminino que poderiam ser identificados com aproximadamente 100% de certeza, por técnicas que determinam a homologia entre amostras de DNA extranuclear, e justifique sua resposta; b) netos e bisnetos de João e Maria que possuíram ou possuem o cromossomo Y idêntico ao de João e justifique sua resposta.