Métodos de Propagação em. Ornamentais. Cultura de Tecidos Vegetais

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4 Métodos de Propagação em Ornamentais Cultura de Tecidos Vegetais Floricultura e Plantas Ornamentais Prof. Dr. Paulo Hercílio Viegas Rodrigues phrviegas@usp.br

5 Cultivo in vitro Produção em grande escala, pequeno espaço, durante o ano todo Propagação de espécies de difícil propagação por sementes Produção clonal de plantas, alta qualidade fitossanitária Conservação de germoplasma Recuperação de plantas livres de doenças através de cultura de meristema Manipulação genética

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7 Quais Cultura são as de possibilidades? Tecido Planta Estaca Meristema Tecido Embrião Célula Gene Plantas Idênticas Plantas livres de doenças Plantas Mutantes Plantas Haploides Plantas Híbridas Plantas Transgênica Partes de Plantas

8 Etapas de desenvolvimento no processo de propagação in vitro T0 T 1 T 2 T 3 T 4 Preparo da planta matriz para coleta dos explantes. Seleção, coleta e desinfestação dos explantes e introdução in vitro em condições assépticas. Propagação dos explantes através de subculturas sucessivas, em meio de cultura apropriado. Alongamento e enraizamento dos propágulos produzidos. Transplante das plântulas obtidas para substrato e aclimatização em casa de vegetação.

9 Assepsia x Banco de Gemoplasma (T0)

10 Estágios da propagação in vitro Chapter 4 Chapter 2 Chapter 3 Chapter 4 0 I II Selection of a superior Stage I: Introduction of germplasm aseptic cultures Stage II: Multiplication III Stage III: Rooting and preparation IV Stage IV: Acclimatization Growth In vitro under photomixotrophic conditions In vitro under photoautotrophic conditions Ex vitro under controlled environment conditions with artificial light Adaptado de Couceiro (2006))

11 Meios de Cultivo MS (Murashige & Skooge, 1972) WPM (Wood Plant Media)

12 Equipamentos para o cultivo in vitro

13 Fluxo Laminar - Funcionamento:

14 Fluxo Laminar -Horizontal

15 Fluxo Laminar -Vertical

16 Fluxo Laminar Requisitos para trabalhar no fluxo laminar: -Higiene (pessoal e do equipamento); - Habilidade; - Concentração. Repicagem das mudas! -Custo: R$ 6.474,00

17 Autoclave Funcionamento: T =120 C P = 1 atm Time = 20 min Esterilizar meio de cultura!

18 Autoclave Custo: R$ 8.000,00 a R$ ,00 Plasma (R$ ,00)

19 Balança de Precisão - Pesagem dos SAIS (Macro e micronutrientes) -0,00-0,000-0,0000 -Preço R$ 1.500,00 a R$ 2.500,00

20 Balança Analítica -0,00-0,000-0, Preço: R$ 2.000,00 a R$ 3.000,00

21 Medidor de ph - Eletrodo parte + sensível! -Mede a condutividade elétrica que é convertida em ph. - Custo: R$ 600,00 a R$ 2.000,00 - Mede o ph do meio de cultivo!!

22 Qualidade da Água Destilador Custo: R$ a R$ 2.000,00

23 Qualidade da Água Deionizador/Osmose reversa (eliminação de componentes orgânicos e inorgânicos da água). Osmose Reversa

24 Qualidade da Água Deionizador/Osmose reversa (eliminação de componentes orgânicos e inorgânicos da água). Custo: R$...

25 Qualidade da Água -Destilada; -Deionizada;? -Torneiral (Fe ou Na).

26 Outros equipamentos: - Microondas/Fogão Industrial (panelão Inox); - Agitador Magnético; - Geladeira (Frost-Free); - Ar condicionada; - Distribuidor de meio de cultura; - Barrilete; - Carrinhos transporte (meio de cultura); - Estufa; - BOD (germinação e cultivo de calos); - Etc Total parcial R$ ,00

27 Produção de Zantedeschia

28 Produção de Zantedeschia

29 Produção de Zantedeschia

30 Micropropagação de Bananeira Ornamental

31 Introdução de bromélias in vitro Vrisea guttata Vrisea hieroglyphica Vrisea unilateralis Nidularium fulgens

32 Introdução de bromélias in vitro Vrisea hieroglyphica Vrisea hieroglyphica Aechemea nudicaulis

33 Micropropagação de Bromélias

34 Cultura de tecidos vegetais em plantas ornamentais tropicais Prof. Dr. Paulo Hercílio Viegas Rodrigues

35 Table 1 Identification of bacterial contamination and antibiogram of Heliconia rauliniana explants cultured in vitro. Explant Bacteria Sensibility degree Sensible Less Sensible Resistent Pseudomonas sp. AMI, ATM, CAZ, AMP CFL Stem Apex CFD, CTX, CLO, GN, NET, SUT, TB, TET Klebsiella sp. AMI, ATM, CAZ, CLO, CTX, GN, AMP, CFL, CFD NET, SUT, TB, TET AMI - Amicacine, AMP Ampiciline, ATM - Aztreonam, CAZ - Ceftazitime, CLO chloramphenicol, CFD Cefalodril, CFL Cefalexine, CTX - Cefotaxime, GN Gentamicine, NET Netilmicine, SUT - Sulfametoxazol /Trimetropim, TB - Tobramicine, TET Tetracicline

36 Helicônias

37 PROPAGAÇÃO IN VITRO DE HELICÔNIAS MÉTODOS CONVENCIONAL E DE IMERSÃO TEMPORÁRIA.

38 PROPAGAÇÃO IN VITRO EMPREGANDO IMERSÃO TEMPORÁRIA.

39 Propagação em larga escala: TIB

40 Propagação em larga escala: TIB Unidades Experimentais (250ml)

41 Propagação em larga escala: TIB Escala semi-comercial (4,5l)

42 Propagação em larga escala: TIB Escala comercial (50l)

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44 PROPAGAÇÃO CONVENCIONAL: PREPARAÇÃO DOS RIZOMAS

45 Material Propagativo de helicônia

46 Mudas Aclimatizadas de H.champneiana Splash, em bandejas, prontas para o Plantio.

47 Plantio de H.rauliniana com 100% de mudas micropropagadas.

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50 Variantes Somaclonais de H.bihai, obtidas in vitro.

51 Variantes Somaclonais de H.bihai, obtidas in vitro. Variabilidade genética que ocorre em decorrência do processo in vitro! repicagens, reguladores de crescimento e tempo de cultivo.

52 Melhoramento Vegetal Formato das folhas como indicativo de variação

53 Laboratório de Cultura de Tecidos Vegetais Centro de Biotecnologia da Amazônia. Dr. Paulo Hercilio Viegas Rodrigues

54 Centro de Biotecnologia da Amazônia MCT MMA MDIC MDA MS Mapa

55 Centro de Biotecnologia da Amazônia

56 Centro de Biotecnologia da Amazônia

57 Centro de Biotecnologia da Amazônia

58 Centro de Biotecnologia da Amazônia

59 Centro de Biotecnologia da Amazônia

60 Centro de Biotecnologia da Amazônia

61 Centro de Biotecnologia da Amazônia

62 Microorganismos endofíticos em helicônias Região Nordeste: Pseudomonas e Klebsiela. Região Norte: Pseudomonas, Klebsiela e Stenotrofomonas.

63 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

64 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

65 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

66 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

67 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

68 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

69 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

70 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

71 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

72 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

73 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

74 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

75 Estabelecimento in vitro a partir de ápice floral

76 Resgate de Embrião (in vitro) de helicônia

77 Frutos de Heliconia

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79 Resgate de Embrião (in vitro) de helicônia

80 Resgate de Embrião (in vitro) de helicônia

81 Helicônias

82 Centro de Biotecnologia da Amazônia Bromeliacea Curauá

83 Rodrigues, Paulo Hercílio Viegas, Ferreira, Flávio Freires, Ambrosano, Glaucia Maria Bovi, & Gato, Arlena Maria Guimarães. (2013). Propagação in vitro de tucumã do Amazonas. Ciência Rural, 43(1), Epub November 27,

84 X caboquinho

85 BioSol SEBRAE/CBA Projeto Estruturante da Região Norte de Flores Tropicais da Amazônia

86 BioSol SEBRAE/CBA

87 BioSol SEBRAE/CBA

88 BioSol SEBRAE/CBA

89 BioSol SEBRAE/CBA

90 BioSol SEBRAE/CBA

91 BioSol SEBRAE/CBA

92 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

93 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

94 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

95 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

96 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

97 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

98 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

99 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

100 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

101 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

102 Mudas da Amazônia Nova Olinda do Norte-AM

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