2014/09/30 A93A00292MPT A11A01641 60 ml 15 ml 400 Reagente de diagnóstico para a determinação quantitativa in-vitro de Ureia/ Nitrogénio ureico sanguíneo em soro, plasma e urina por colorimetria. Instruções do teste ab Soro, plasma: Mundialmente, exceto nos EUA: Ureia: Urea4.xx BUN: BUN3.xx Apenas para os EUA: Ureia: Urea2.xx BUN: BUN2.xx Urina: Mundialmente, exceto nos EUA: Ureia: Urea-U5.xx BUN: BUN-U2.xx Apenas para os EUA: Ureia: Urea-U2.xx BUN: BUN-U2.xx Interesse clínico (1, 2) A ureia é o produto final, que contém nitrogénio, do catabolismo das proteínas. Os estados associados a níveis elevados de ureia no sangue são referidos como hiperuremia ou azotemia. A determinação paralela da ureia e creatinina é efectuada para diferenciar a azotemia pré-renal da pós-renal. A azotemia pré-renal, causada, por exemplo, por desidratação, catabolismo de proteínas aumentado, tratamento com cortisol ou perfusão renal diminuída, dá origem a níveis de ureia aumentados, enquanto que os valores de creatinina continuam dentro do intervalo de referência. Nas azotemias pós-renais, causadas pela obstrução do tracto urinário, tanto o nível de ureia como o de creatinina aumentam, embora o nível de creatinina não aumente tanto. Nas doenças renais, as concentrações de ureia são elevadas quando a taxa de filtração glomerular for muito reduzida e quando a absorção de proteínas for superior a 200 g/dia. Método (3) Urease - GLDH : teste UV enzimático. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.8 Utilização a O reagente de diagnóstico destinase à determinação quantitativa in vitro de ureia/nitrogénio ureico (um produto final do metabolismo do nitrogénio) em soro, plasma e urina humanos, com base num teste UV enzimático usando urease e glutamato desidrogenase. As medições obtidas por este dispositivo são utilizadas no diagnóstico e tratamento de determinadas doenças renais e metabólicas. a Modificação: capítulo adicionado. b Modificação: alteração da referência do folheto de A93A1216C para A93A00292M. Urease Ureia + 2H 2 O > 2NH + 4 + 2 HCO - 3 GLDH 2-Oxoglutarato + NH + 4 + NADH > L-Glutamato + NAD + + H 2 O (GLDH = Glutamato desidrogenase) 1 / 7
Reagentes c O está pronto a utilizar. Reagente 1: TRIS ph 7,8 2-Oxoglutarato ADP Urease GLDH (Glutamato desidrogenase) Azida sódica Reagente 2: NADH Azida sódica 150 9 0,75 7 ku/l 1 ku/l < 1 g/l 1,3 < 1 g/l O deve ser utilizado de acordo com esta nota de reagente. O fabricante não se responsabiliza pelo seu desempenho caso seja utilizado de outro modo. Preparação 1 x 10 ml + 1 x 10 ml Cada controlo deve ser analisado diariamente e/ou após a calibração. A frequência dos controlos e os intervalos de confiança devem estar de acordo com as normas laboratoriais e com as diretivas específicas de cada país. Deve cumprir as diretrizes federais, estaduais e locais relativamente ao teste de controlo de qualidade dos materiais. Os resultados devem ficar dentro do intervalo dos limites de confiança definidos. Cada laboratório deve estabelecer o procedimento a seguir se os resultados excederem esses limites de confiança. Materiais necessários mas não fornecidos d Analisador automático de química clínica: 400 Calibrador: Multical, Ref. A11A01652 Controlos: N Control, Ref. A11A01653, e P Control, Ref. A11A01654 Urine Control L/H, Ref. A11A01674 Equipamento standard de laboratório. 1. Retire as duas tampas da cassete. 2. Em caso de formação de espuma, retire-a com uma pipeta de plástico. 3. Coloque a cassete no compartimento de refrigeração de reagentes do 400. Calibrador Para calibrar, utilize: Multical, Ref. A11A01652 (não incluído) 10 x 3 ml (liofilizado) Controlo Para controlo de qualidade interno, utilize: N Control, Ref. A11A01653 (não incluído) 10 x 5 ml (liofilizado) P Control, Ref. A11A01654 (não incluído) 10 x 5 ml (liofilizado) Urine Control L/H, Ref. A11A01674 (não incluído) Amostra e f Soro. Plasma em heparina de lítio. Urina fresca Os anticoagulantes que não estão presentes na lista não foram testados pela HORIBA Medical e, portanto, não são recomendados para utilização com este ensaio. Estabilidade em soro/plasma (1): 2 dias à temperatura ambiente 1 semana a 4-8 C Estabilidade em urina (4): 4 semanas a - 20 C se ph < 7,0 4 dias a 4-8 C se ph < 7,0 2 dias a 20-25 C se ph < 7,0 c Modificação: Reagentes : modificação. d Modificação: alteração dos materiais necessários. e Modificação: recomendação adicionada. f Modificação: alteração da estabilidade da amostra. 2 / 7
Intervalo de referência g Cada laboratório deve estabelecer os seus próprios intervalos de referência. Os valores aqui fornecidos são utilizados apenas como linhas de orientação. Soro, plasma (1): Ureia BUN Adultos: [] [] [] Global 17-43 2,8-7,2 7,9-20,2 Mulheres < 50 anos 15-40 2,6-6,7 7,3-18,8 Mulheres > 50 anos 21-43 3,5-7,2 9,8-20,2 Homens < 50 anos 19-44 3,2-7,3 9,0-20,5 Homens > 50 anos 18-55 3,0-9,2 8,4-25,8 Ureia BUN Crianças: [] [] [] 1-3 anos 11-36 1,8-6,0 5,1-16,8 4-13 anos 15-36 2,5-6,0 7,0-16,8 14-19 anos 18-45 2,9-7,5 8,1-21,1 Urina (5): Ureia [mmol/24h] BUN [mg/24h] 430-710 1207-1993 Armazenamento e Estabilidade h Os reagentes, nas cassetes por abrir, mantêm-se estáveis até à data de validade indicada no rótulo se forem armazenados entre 2-8 C. Estabilidade após a abertura: consulte o parágrafo Desempenho do 400. Não congelar os reagentes. Deterioração da embalagem i No caso de deterioração da embalagem de protecção, não utilizar o reagente se o dano puder interferir no desempenho do produto. Gestão de resíduos j É favor consultar os requisitos da legislação local. Este reagente contém menos de 0,1% de azida sódica como conservante. A azida sódica pode reagir com o chumbo e o cobre, formando azidas de metal explosivas. Precauções gerais Este reagente destina-se apenas a diagnóstico in vitro profissional. Não engolir. Evitar o contacto com a pele e com as membranas mucosas. Cumpra as normas preventivas de laboratório relativas à utilização. As cassetes de reagente são descartáveis e devem ser eliminadas de acordo com os requisitos da legislação local. Consulte a MSDS (folha de dados de segurança do material) relacionada com o reagente. Não utilizar o produto se houver evidência visível de deterioração biológica, química ou física. Desempenho do 400 Os dados de desempenho enunciados em seguida foram obtidos a partir do analisador 400. Soro, plasma Número de testes: 220 testes k Se o número de testes solicitados for baixo e o utilizador do 400 pretender utilizar a cassete com a máxima estabilidade no equipamento, a HORIBA Medical recomenda utilizar o componente consumível XEC084 (membrana do kit) para atingir o número de testes descrito nesta nota. Estabilidade dos reagentes no equipamento: Depois de aberta, a cassete de reagente colocada no compartimento de refrigeração 400 mantémse estável durante 70 dias. Volume da amostra: 3,0 µl/teste g Modificação: alteração do intervalo de referência. h Modificação: modificação de armazenamento e estabilidade. i Modificação: adição de deterioração da embalagem. j Modificação: modificação da gestão de resíduos. k Modificação: nova recomendação. 3 / 7
Limite de deteção: O limite de deteção é determinado de acordo com o protocolo Valtec (6) e equivale a: Ureia: 0,31 (1,86 ) BUN: 0,9 Exactidão e Precisão: Repetibilidade (precisão no mesmo ciclo) 3 amostras de concentrações baixa, média e alta e 2 controlos são testados 20 vezes de acordo com as recomendações especificadas no protocolo Valtec (6). 6,68 40,1 2,27 25,93 155,6 1,66 Amostra 1 2,15 12,9 2,76 Amostra 2 7,43 44,6 1,58 Amostra 3 30,45 182,7 1,80 Valor médio BUN () CV % 18,73 2,27 72,78 1,66 Amostra 1 6,02 2,76 Amostra 2 20,86 1,58 Amostra 3 85,46 1,80 Reprodutibilidade (precisão total) 2 amostras (níveis baixo e elevado) e 2 controlos são testados em duplicado durante 20 dias (2 séries por dia) de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP5-A (7). 6,57 39,4 2,14 25,54 153,2 1,93 Amostra 1 6,86 41,1 2,14 Amostra 2 24,98 149,9 1,97 Valor médio BUN () CV % 18,45 2,14 71,69 1,93 Amostra 1 19,24 2,14 Amostra 2 70,12 1,97 Intervalo de medição l : Ureia: O ensaio confirmou uma gama de medição de 0,37 a 49,49 (2,20 a 297,22 ), com pós-diluição automática de até 250,00 (1500,0 ). A linearidade do reagente foi avaliada para até 50,00 (300,00 ), de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (8). BUN: O ensaio confirmou uma gama de medição de 1,03 a 138,89, com pós-diluição automática de até 701,5. A linearidade do reagente foi avaliada para até 140,3, de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (8). Correlação m : 136 amostras de pacientes (soro e plasma) estão correlacionadas com um reagente já comercializado tomado como referência de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP9-A2 (9). Valores de ureia no intervalo de 0,37 a 49,49 (2,20 a 297,22 ). Valores de BUN de 1,03 a 138,89. A equação da linha alométrica obtida por meio do procedimento de regressão Passing-Bablock (10) é: Ureia: Y = 0,99 X - 0,02 () Y = 0,99 X - 0,12 () com um coeficiente de correlação r 2 = 0,996. BUN: Y = 0,99 X - 0,06 () l Modificação: alteração do intervalo de medição. m Modificação: alteração da correlação. 4 / 7
com um coeficiente de correlação r 2 = 0,996. Interferências: Hemoglobina: Não se observa influência significativa até 267 µmol/l (460 ). Triglicéridos: Não se observa influência significativa até uma concentração de Intralipid (representativa de lipémia) de 7 (612,5 ). Bilirrubina total: Não se observa influência significativa até 380 µmol/l (22,23 ). Bilirrubina directa: Não se observa influência significativa até 400 µmol/l (23,40 ). Outros limites são fornecidos por Young através de uma lista de medicamentos e variáveis pré-analíticas conhecidas que afectam esta metodologia (11, 12). Estabilidade de calibração: O reagente é calibrado no Dia 0. A estabilidade de calibração é verificada testando 2 amostras de controlo. A estabilidade da calibração é de 8 dias. Nota: Recomenda-se uma recalibração quando os lotes de reagente mudam e quando os resultados do controlo de qualidade ficam fora do intervalo de valores estabelecido. Instruções do teste: Mundialmente, exceto nos EUA: Ureia: Urea4.xx BUN: BUN3.xx Apenas para os EUA: Ureia: Urea2.xx BUN: BUN2.xx Urina Número de testes: 220 testes k Se o número de testes solicitados for baixo e o utilizador do 400 pretender utilizar a cassete com a máxima estabilidade no equipamento, a HORIBA Medical recomenda utilizar o componente consumível XEC084 (membrana do kit) para atingir o número de testes descrito nesta nota. Volume da amostra: 3,0 µl/teste Limite de deteção n : O limite de deteção é determinado de acordo com o protocolo Valtec (6) e equivale a: Ureia: 12,6 (75,6 ) BUN: 35 Exactidão e Precisão: Repetibilidade (precisão no mesmo ciclo) 3 amostras de concentrações baixa, média e alta e 2 controlos são testados 20 vezes de acordo com as recomendações especificadas no protocolo Valtec (6). 129,13 774,8 1,24 223,73 1342,4 0,74 Amostra 1 91,55 549,3 1,76 Amostra 2 173,65 1041,9 1,44 Amostra 3 521,62 3129,7 0,72 Valor médio BUN () CV % 363 1,24 628 0,74 Amostra 1 257 1,76 Amostra 2 488 1,44 Amostra 3 1465 0,72 Reprodutibilidade (precisão total) 2 amostras (níveis médio e elevado) e 2 controlos são testados em duplicado durante 20 dias (2 séries por dia) Estabilidade dos reagentes no equipamento: Depois de aberta, a cassete de reagente colocada no compartimento de refrigeração 400 mantémse estável durante 70 dias. k Modificação: nova recomendação. n Modificação: modificação do limite de deteção. 5 / 7
de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP5-A (7). 128,58 771,5 3,80 216,27 1297,6 4,13 Amostra 1 198,13 1188,8 3,42 Amostra 2 547,82 3286,9 3,08 Valor médio BUN () CV % 361 3,80 607 4,13 Amostra 1 556 3,42 Amostra 2 1538 3,08 Intervalo de medição l : Ureia: O ensaio confirmou uma gama de medição de 12,6 a 750,0 (75,6 a 4500 ), com pós-diluição automática de até 3750 (22500 ). A linearidade do reagente foi avaliada para até 750,0 (4500 ), de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (8). BUN: O ensaio confirmou uma gama de medição de 35 a 2106, com pós-diluição automática de até 10530. A linearidade do reagente foi avaliada para até 2106, de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP6-A (8). Correlação m : 108 amostras de pacientes (urina) estão correlacionadas com um reagente já comercializado tomado como referência de acordo com as recomendações incluídas no protocolo CLSI (NCCLS), EP9-A2 (9). Valores de ureia no intervalo de 16,0 a 722,5 (96 a 4340 mg/l). Valores de BUN de 45 a 2029. A equação da linha alométrica obtida por meio do procedimento de regressão Passing-Bablock (10) é: Ureia: Y = 1,14 X - 1,77 () Y = 1,14 X - 10,63 () com um coeficiente de correlação r 2 = 0,9946. BUN: Y = 1,14 X - 4,90 () com um coeficiente de correlação r 2 = 0,9946. Interferências o : Hemoglobina: Não se observa influência significativa até 290 µmol/l (500 ). Bilirrubina directa: Não se observa influência significativa até 650 µmol/l (38 ). Outros limites são fornecidos por Young através de uma lista de medicamentos e variáveis pré-analíticas conhecidas que afectam esta metodologia (11, 12). Estabilidade de calibração: O reagente é calibrado no Dia 0. A estabilidade de calibração é verificada testando 2 amostras de controlo. A estabilidade da calibração é de 8 dias. Nota: Recomenda-se uma recalibração quando os lotes de reagente mudam e quando os resultados do controlo de qualidade ficam fora do intervalo de valores estabelecido. Instruções do teste: Mundialmente, exceto nos EUA: Ureia: Urea-U5.xx BUN: BUN-U2.xx Apenas para os EUA: Ureia: Urea-U2.xx BUN: BUN-U2.xx Factor de conversão (1) Ureia () = Ureia () x 0,1665 BUN () = Ureia ()/ 2,14 BUN () = Ureia (mmol/l) / 0,3561 l Modificação: alteração do intervalo de medição. m Modificação: alteração da correlação. o Modificação: dados adicionados. 6 / 7
Aviso É da responsabilidade do utilizador verificar se este documento se aplica ao reagente utilizado. Bibliografia 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 st ed. Frankfurt: THBooks Verlagsgesellschaft (1998): 374-377. 2. Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company (1999): 1838. 3. Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung in Blut und Serum im optischen Test nach Warburg (Enzymatic determination of urea in blood and serum with the optical test according to Warburg). Klin. Wochenschr (1965) 43: 174-175. 4. Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics Samples. Samples: From the Patient to the Laboratory. 1 st Ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany) (2001): 52-53. 5. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 th Ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA) (2006): 2301. 6. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 7. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A (1999) 19 (2). 8. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 9. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 10. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 11. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 12. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. 7 / 7