1/7 1. OBJETIVO Padronizar o procedimento de operação da autoclave. O laboratório disponibiliza de duas autoclaves, sendo uma de uso exclusivo para esterilização e outra exclusiva para descontaminação. 2. DEFINIÇÃO E CONCEITO Descontaminação: Procedimento utilizado para eliminação de microrganismos patogênicos de vidrarias e outros materiais contaminados usados no Laboratório. Esterilização: Procedimento utilizado para eliminação de qualquer forma de vida dos microorganismos contidos em vidrarias e outros materiais contaminados usados no Laboratório. 3. RESPONSABILIDADES / AUTORIDADES Atividades Responsabilidades/Autoridades Recolher material descartado do laboratório para descontaminação por autoclavação Esterilização dos meios de cultura e soluções produzidas pelo setor de microbiologia Auxiliares de Laboratório Técnico do Setor de Microbiologia Supervisionar e garantir o cumprimento das atividades Bioquímicos 4. DESCRIÇÃO DAS ETAPAS 4.1 Operação da Autoclave para descontaminação: Levantar a tampa da autoclave e girar a tampa para liberar a entrada da autoclave. Retirar o cesto e colocar água corrente até cobrir o apoio do cesto. Acondicionar as placas e tubos a descontaminar dentro do grau cirúrgico, e colocá-las dentro do cesto. Colocar o cesto na autoclave. Colocar o controle biológico acima do material a ser autoclavado (ponto frio da autoclave), também dentro de um grau cirúrgico. Fechar a tampa ajustando-a sobre as oito travas de rosca. Rosquear as travas duas a duas, diagonalmente. Ligar a tomada na extensão elétrica e girar o botão de ajuste de potência na base da autoclave para a posição 2 (máximo). Aguardar o início da saída do vapor e fechar a válvula de ajuste de pressão até a pressão alcançar 1,20 kg/cm 2. Ajustar a válvula de segurança para que a pressão se mantenha em 120 kg/cm 2 (marcação 1,2 no manômetro) por 30 minutos.
2/7 Terminado este processo, girar o botão de ajuste de potência para zero e abrir parcialmente a válvula para liberar a pressão. Quando a pressão tiver alcançado zero, abrir as travas de rosca e levantar a tampa da autoclave. Deixar sair todo o vapor e quando a temperatura tiver diminuído retirar o cesto. A drenagem de toda a água é feita através da tubulação apropriada. 4.2 Operação da Autoclave para esterilização: Levantar a tampa da autoclave e girar a tampa para liberar a entrada da autoclave. Retirar o cesto e colocar água corrente até cobrir o apoio do cesto. Colocar as vidrarias contendo meios de cultura ou soluções dentro do cesto. Colocar o cesto na autoclave. Colocar o controle de qualidade biológico acima do material a ser autoclavado (ponto frio da autoclave), dentro de um grau cirúrgico, e o controle físico-químico vedando os frascos e tubos contendo os meios e soluções. Fechar a tampa ajustando-a sobre as oito travas de rosca. Rosquear as travas duas a duas, diagonalmente. Ligar a tomada na extensão elétrica e girar o botão de ajuste de potência na base da autoclave para a posição 2 (máximo). Aguardar o início da saída do vapor e fechar a válvula de ajuste de pressão até a pressão alcançar 1,20 kg/cm 2. Ajustar a válvula de segurança para que a pressão se mantenha em 120 kg/cm 2 (marcação 1,2 no manômetro) por 15 minutos. Terminado este processo, girar o botão de ajuste de potência para zero e abrir parcialmente a válvula para liberar a pressão. Quando a pressão tiver alcançado zero, abrir as travas de rosca e afastar a tampa da autoclave. Deixar sair todo o vapor e quando a temperatura tiver diminuído retirar o cesto. A drenagem de toda a água é feita através da tubulação apropriada. 4.3 Manutenção Lavagem do cesto da autoclave de descontaminação - diariamente, lavar os cestos e esfregar com esponja e detergente. Lavagem do cesto da autoclave de esterilização - quinzenalmente, lavar os cestos e esfregar com esponja e detergente. Drenagem da Água Após o uso da autoclave Limpeza da Autoclave de descontaminação - diariamente, lavar autoclave com hipoclorito a 1 % e detergente e esfregar com esponja. Limpeza da Autoclave de esterilização - quinzenalmente, lavar autoclave com hipoclorito a 1 % e detergente e esfregar com esponja. Registrar as limpezas no formulário Controle de Manutenção de Equipamentos.
3/7 4.4 Controle de Qualidade Controle Biológico: O controle de qualidade da esterilização e descontaminação é realizado através do indicador biológico Bacillus stearothermophilus. Após seu uso na autoclave, encaminhar para o setor de Microbiologia e incubar em caldo TSB por, no máximo, 7 dias. Considerar resultado adequado a ausência de turvação do meio após o período de incubação. Realizar o controle semanalmente e registrar o resultado no formulário Formulário para controle de qualidade dos meios de cultura e controle biológico da autoclave Controle Físico-químico: O controle de qualidade da esterilização é feito utilizando fitas adesivas termosensíveis que indicam por coloração quando a temperatura de trabalho (121 C) foi atingida. Considerar resultado adequado a mudança de coloração da fita para cor preta. Realizar o controle todas as vezes que utilizar a autoclave e registrar o resultado no formulário Formulário para controle de qualidade dos meios de cultura e controle biológico da autoclave 5. REGISTROS 5.1 Formulários Controle de Qualidade dos Meios de Cultura e Controle Biológico da Autoclave. 6. DADOS E INFORMAÇÕES DE CONSULTA Não se aplica 7. DOCUMENTOS EXTERNOS Não se aplica. 8. ANEXOS 8.1 Controle de manutenção de equipamentos. 8.2 Formulários Controle de Qualidade dos Meios de Cultura e Controle Biológico da Autoclave. 9. HISTÓRICO DE REVISÕES Pg. Natureza da Revisão Data da Revisão Versão Responsáveis 1/2 2 2 Introdução do uso do gral cirúrgico envolvendo o material a ser autoclavado, nas etapas de descontaminação e esterilização de material, e exclusão do uso do papel madeira ou jornal. Reavaliação dos registros, sendo postos em vigor os registros de manutenção da autoclave, registro de controle biológico e controle físico-químico. Descrição do formulário de Controle de manutenção de equipamentos como documento para registro das limpezas da autoclave. Descrição da incubação do controle biológico em TSB e documento para seu registro. Descrição do documento para registro do controle Físico-químico da 30/07/2005 1 Vitor Almeida 30/07/2005 1 Vitor Almeida 04/09/2008 2 Ana Cristina
4/7 1/2 02 autoclave. Alteração do tempo de exposição do material contaminado sob pressão controlada para processo de descontaminação Correção da pressão da autoclave Alteração de formulário 05/08/2009 3 Milena Soares 19/03/2010 4 Milena Soares 01 Correção na drenagem da água da autoclave. 5 02 Correção na manutenção da autoclave quanto ao procedimento de lavagem 5
CÓDIGO: 5/7 Código LAB-003-VR02 Elaborado Ana Cristina Aprovado Data 29/08/2013 CONTROLE DE MANUTENÇÃO EQUIPAMENTO LABORATÓRIO Pags. 5/7 MÊS/ANO: Setor: Responsável: 01 02 03 04 05 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 MANUTENÇÃO INTERNA SEMANAL ESTUFA BACTERIOLÓGICA MANUTENÇÃO INTERNA QUINZENAL AUTOCLAVE BANHO-MARIA A 37º C MANUTENÇÃO INTERNA MENSAL GELADEIRA MANUTENÇÃO INTERNA DIÁRIO CENTRIFUGA
CÓDIGO: 6/7 Código LAB-033-VR01 Elaborado Ana Cristina Aprovado Data 26/03/2013 Pags. 6/7 CONTROLE DE QUALIDADE DOS MEIOS DE CULTURA E CONTROLE BIOLÓGICO DA AUTOCLAVE MEIO LOTE VALIDADE ESTERILIDADE FÍSICO-QUÍMICO CEPA ATCC OU DOMÉSTICA RESULTADO INÍCIO TÉRMINO RESPONSÁVEL
CÓDIGO: 7/7