DNA Darwin Não Atento? PÁGINA 1 DE 6 CIÊNCIAS BIOLOGIA QUÍMICA Darwin foi um dos maiores cientistas de todos os tempos. Ele percebeu que variações ocorrem nas populações ou seja, diferenças são encontradas entre os indivíduos da mesma espécie. Darwin também observou que essas diferenças podem passar à próxima geração (são herdadas). A ciência trata de descobrir coisas novas e usar evidências para corroborar ou desmentir idéias sobre o mundo natural. Darwin sabia o que ele não sabia. Ele percebeu que as características tendem a passar de pai para filho, mas muitos anos passariam até que tivéssemos uma idéia mais clara sobre como isso acontece. Sabemos agora que a informação hereditária é passada na forma de DNA que, é claro, não significa Darwin Não Atento, mas sim ácido desoxirribonucleico. Esta atividade permitirá que você extraia DNA de uma planta como ervilha ou cebola. Você verá o que Darwin não viu. Materiais ervilhas cerca de 50g (podem ser congeladas, mas descongele-as primeiro) detergente líquido, 10cm³ (use um tipo aguado) sal de mesa, 3g água, 90cm³ etanol (álcool) muito frio, 10cm³, direto do freezer (veja medidas de segurança) Novozymes neutrase (uma protease), duas a três gotas gelo, em um jarro com água fria filtro de papel de café (não utilize filtro de laboratório) 1cm³ seringa de plástico (sem agulha) grande funil de plástico 2 beakers de 250cm³ tubo de ensaio ou tubo plástico com gradação vara de vidro para mexer
PÁGINA 2 DE 6 Atividade Você vai extrair o DNA de células de uma planta. Talvez precise adaptar o método para trabalhar com plantas facilmente encontradas onde você mora. Talvez precise ajustar os volumes das soluções, especialmente se não estiver usando material de vidro tradicional de laboratórios. Se usar material de plantas diferente de ervilhas ou cebolas, talvez precise alterar o método ajustando uma variável a cada vez para obter melhores resultados. Isso transformará a experiência em uma verdadeira investigação científica, pois ninguém poderá lhe dizer o que vai funcionar melhor para o material que você tem em mãos. Seu professor irá aconselhá-lo. Preparação O etanol usado deve estar gelado. Coloque-o em uma garrafa plástica no freezer por pelo menos 24 horas antes de começar a atividade. Por favor, leia as notas de segurança abaixo. Duração Leva cerca de 35 minutos para isolar o DNA, incluindo um período de incubação de 15 minutos.
PÁGINA 3 DE 6 Segurança etanol (álcool) no freezer A maioria dos freezers não é à prova de fagulhas. Há casos de explosões quando vapores inflamáveis (ex: do etanol) se acumulam dentro de um freezer e são acesos por uma fagulha. Se seu freezer não for à prova de fagulhas, coloque o etanol em um recipiente plástico fechado a vácuo. Se não tiver acesso a um freezer, coloque gelo em um recipiente fechado e isolado, coloque a garrafa de álcool dentro dele por várias horas antes de usar. A orquídea estrela de Madagascar (Angraecum sesquipedale) possui um tubo de néctar de 25-30cm. Darwin teorizou que deveria existir uma mariposa cuja probóscide seria longa o bastante para alcançar o néctar. A mariposa-gavião foi identificada mais de 40 anos após a morte de Darwin. Peter Whitehead e Colin Keates, Museu da História Natural, Londres.
PÁGINA 4 DE 6 Atividade 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Dissolva o sal em 90cm3 de água. Adicione o detergente e misture com cuidado. Amasse as ervilhas com a vara de vidro ou uma colher. Adicione a polpa das ervilhas em um beaker com a solução salgada de detergente. Deixe o beaker em banho-maria morno por exatamente 15 minutos. Esfrie a mistura colocando o beaker em água gelada por cinco minutos, mexendo frequentemente. Opcional: coloque a mistura em um liquidificador e bata por não mais que cinco segundos. Filtre a mistura em um segundo beaker. Certifique-se que a espuma por cima do líquido não contamine o filtrado. Opcional: Adicione duas ou três gotas de protease a cerca de 10cm3 do extrato de ervilha em um tubo de ensaio e misture bem. Com cuidado despeje o etanol gelado pelo lado do tubo de ensaio para formar uma camada por cima do extrato de ervilha. Deixe o tubo repousar por alguns minutos. O ácido nucléico (DNA e RNA) precipitará sobre a camada superior (etanol).
PÁGINA 5 DE 6 1. Dissolva o sal em 90cm3 de água. Adicione o detergente e misture com cuidado. 2. Amasse as ervilhas com a vara de vidro ou uma colher. Adicione a polpa das ervilhas em um beaker com a solução salgada de detergente. célula de planta 3. Deixe o beaker em banho-maria morno por exatamente 15 minutos. parede da célula cloroplasto DETERGENTE vacúolo membrana celular mitocôndria núcleo 4. Esfrie a mistura colocando o beaker em água gelada por cinco minutos, mexendo frequentemente. 5. Opcional: coloque a mistura em um liquidificador e bata por não mais que cinco segundos. 6. Filtre a mistura em um segundo beaker. Certifique-se que a espuma por cima do líquido não contamine o filtrado. GELO 7. Opcional: Adicione duas ou três gotas de protease a cerca de 10cm3 do extrato de ervilha em um tubo de ensaio e misture bem. 8. Com cuidado despeje o etanol gelado pelo lado do tubo de ensaio para formar uma camada por cima do extrato de ervilha. 9. Deixe o tubo repousar por alguns minutos. O ácido nucléico (DNA e RNA) precipitará sobre a camada superior (etanol).
PÁGINA 6 DE 6 Pontos para Discussão 1 2 O DNA é encontrado dentro do núcleo 3 das células das plantas. As plantas têm resistentes paredes celulares de celulose e membranas celulares feitas de lipídio (gorduras/óleos). Com seus colegas, discuta e explique como os estágios da atividade pretendiam: a quebrar a parede celular (dica: as paredes celulares são resistentes) b quebrar as membranas celulares (dica: as membranas celulares são 4 feitas de lipídios e eles não são solúveis em água, mas como graxa em um prato, podem ser removidos se misturados com outra substância). O que você acha que permanece no filtro de papel ou peneira depois de ter filtrado a sua mistura? O DNA é a receita da vida passada de uma geração à próxima. Mudanças no DNA podem alterar a aparência das criaturas vivas e levar a variações. Descreva com suas próprias palavras o que você acha que Darwin não sabia, mas que o teria ajudado a explicar os mecanismos da evolução pela seleção natural. Para garantir que o precipitado que você obteve realmente é DNA, você precisaria realizar alguns testes químicos. Ao olhar para o longo nome do DNA, você consegue sugerir um tipo de teste químico que poderia ajudá-lo a decidir?