Hemoglobina A1c_3 Ensaio de pré-tratamento automatizado

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1 Hemoglobina Ensaio de pré-tratamento automatizado Sistema ADVIA 1200 ADVIA 1650/1800 ADVIA 2400 Informações novas Actualizações: Sem alterações técnicas Actualizações: Sem alterações técnicas Actualizações: Sem alterações técnicas Nota Os ensaios de ADVIA Chemistry e thb_3 são executados nos sistemas ADVIA Chemistry. Os resultados de e thb_3 utilizam a Razão de HbA1c% para determinar os resultados de HbA1c em unidades NGSP equivalentes (%). A Razão de HbA1cR é utilizada para determinar os resultados de HbA1c em unidades IFCC equivalentes (mmol/mol). Os ensaios e as parametrizações necessários encontram-se resumidos na tabela seguinte: Unidades do resultado Ensaios fotométricos Ensaios de razão NGSP (%) e thb_3 HbA1c% IFCC (mmol/mol) e thb_3 HbA1cR Resumo do ensaio Item Princípio do ensaio Tipo de amostra Estabilidade no sistema Temperatura de armazenamento do reagente Frequência de calibração Frequência do branco de reagente (RBL) Tipo de reacção Medição do comprimento de onda Descrição As concentrações de HbA1c () e de hemoglobina total (thb_3) são medidas separadamente e, de seguida, a respectiva razão é apresentada. Sangue total de origem humana (heparina de lítio ou EDTA dipotássico) Com chaminés de reagente 30 dias 7 dias 2 8 C Com chaminés de reagente 14 dias 30 dias No momento da calibração do ensaio : Rate (2PA) thb_3: Endpoint (EPA) : 694 nm thb_3: 410/694 nm Sem chaminés de reagente Sem chaminés de reagente _PT Rev. D, / 16

2 ADVIA Chemistry Systems Item Normalização Descrição International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) e National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) Intervalo analítico 2,9 15,4% (8 144 mmol/mol) Consulte a secção Intervalo analítico para obter mais informações. Valores esperados 4 6% (20 42 mmol/mol) Código do reagente (kit de teste 2 x 80) (kit de teste 4 x 200) Calibrador ADVIA Chemistry Calibrator: REF Aplicações Para utilização no diagnóstico in vitro na determinação quantitativa de Hemoglobina A1c, um marcador de diabetes, em sangue total nos sistemas ADVIA Chemistry. Essas medições são utilizadas para monitorizar os cuidados a longo prazo de pessoas com diabetes. Os valores de e hemoglobina total (thb_3) criados como parte dos ensaios de ADVIA Chemistry HbA1c% e HbA1cR destinam-se a ser utilizados no cálculo da razão de hemoglobina HbA1c/total e não devem ser utilizados individualmente para efeitos de diagnóstico. Resumo e explicação A HbA1c é formada pela glicosilação não enzimática do terminal N da cadeia ß da hemoglobina A. O nível de HbA1c é proporcional ao nível de glucose no sangue e é amplamente aceite como um indicador da concentração diária média de glucose no sangue durante os 2 meses anteriores. Estudos recentes demonstraram que a medição regular da HbA1c leva a alterações no tratamento da diabetes e a uma melhoria do controlo metabólico conforme indicado por uma redução dos valores de HbA1c 1,2. Princípios do procedimento As concentrações de HbA1c e de hemoglobina total são medidas e a respectiva razão é apresentada. Os ensaios de pré-tratamento automatizado (ADVIA Chemistry e ADVIA Chemistry thb_3) utilizam 3 reagentes ADVIA Chemistry: Aglutinador /Reagente 1 de hemoglobina total ( R1) Reagente 2 de anticorpos ( R2) Reagente desnaturante ( DENAT) Numa fase de pré-tratamento automatizado, a amostra de sangue total é misturada com o Reagente desnaturante de. Os glóbulos vermelhos são lisados e a cadeia de hemoglobina é hidrolisada pela protease presente no reagente. Para a medição de hemoglobina total, é utilizado o Reagente aglutinador ( R1). O ensaio baseia-se na determinação do heme libertado na região Soret a 410 nm 3. 2 / _PT Rev. D,

3 ADVIA Chemistry Systems Utiliza-se um ensaio de inibição da aglutinação em látex de uma HbA1c específica 4. Uma segunda protease no reagente R1 hidrolisa ainda mais a amostra de HbA1c para um pentapeptídeo glicado, que compete com o aglutinador (polímero sintético com múltiplas cópias da fracção imunoreactiva de HbA1c) para o anticorpo anti-hba1c, reduzindo assim a taxa de aglutinação. Uma curva de concentração é obtida através da monitorização da alteração em luz difusa a 694 nm como uma alteração de absorção. A alteração real na absorção é inversamente proporcional à concentração de HbA1c na amostra. Reagentes Os reagentes são embalados conforme indicado a seguir. Os componentes da embalagem só estão disponíveis como um conjunto. REF Tamanho da embalagem Símbolo Conteúdo Quantidade Número de testes Reagentes de Hemoglobina 2 x ml Aglutinador/Reagente 1 de hemoglobina total 2 x 8,0 ml 20 ml Reagente 2 de anticorpos 2 x 6,0 ml Garrafa de 40 ml Reagente desnaturante 1 x 31,0 ml Reagentes de Hemoglobina 4 x ml Aglutinador/Reagente 1 de hemoglobina total 4 x 17,6 ml 20 ml Reagente 2 de anticorpos 4 x 11,6 ml Garrafa de 40 ml Reagente desnaturante 4 x 36,5 ml Componentes e concentrações Reagente Componente Concentração Reagente 1 Polímero covalentemente ligado ao hapteno HbA1c 1 µg/ml Albumina de soro bovino 1,5% Tampão Conservante (azida sódica) < 0,1% Surfactante Reagente 2 Anticorpo anti-hba1c unido com látex (rato) 1,8 mg/ml Albumina de soro bovino 0,2% Tampão Conservante (contém 5-cloro-2-metil-2H-isotiazole-3-ona e 2-metil-2H-isotiazole-3-ona) Surfactante _PT Rev. D, / 16

4 ADVIA Chemistry Systems Reagente Componente Concentração Reagente desnaturante Pepsina de suíno 0,3% Tampão Conservante (contém 5-cloro-2-metil-2H-isotiazole-3-ona e 2-metil-2H-isotiazole-3-ona) H317 P280, P272, P302+P352, P333+P313, P501 Aviso! Pode provocar uma reacção alérgica cutânea. Usar luvas de protecção/vestuário de protecção/protecção ocular/protecção facial. A roupa de trabalho contaminada não pode sair do local de trabalho. SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE: lavar com sabonete e água abundantes. Em caso de irritação ou erupção cutânea: Consulte um médico. Eliminar o conteúdo e o recipiente em conformidade com todos os regulamentos locais, regionais e nacionais. Contém: 5-cloro-2-metil-2H-isotiazole-3-ona e 2-metil-2H-isotiazole-3-ona; Reagente 2, Reagente desnaturante PRECAUÇÃO Este dispositivo contém material de origem animal e deve ser manuseado como um potencial portador e transmissor de doenças. Nota A azida sódica pode reagir com canalizações de cobre e chumbo, formando azidas metálicas explosivas. Quando eliminar os reagentes, utilize água em abundância para evitar a acumulação de azidas se a eliminação destes materiais através da rede de esgotos cumprir os requisitos federais, estatais e locais. Fichas de Segurança (MSDS/SDS) disponíveis em siemens.com/healthcare. Para utilização em diagnóstico in vitro. Preparação e utilização dos reagentes Os reagentes estão prontos a usar. Agite suavemente o reagente antes de utilizar, para eliminar as bolhas e garantir a homogeneidade. Antes de utilizar, aspire as bolhas ou a espuma que estejam presentes no tubo de reagente, utilizando uma pipeta de transferência limpa. Ao executar o ensaio de ADVIA Chemistry nos sistemas ADVIA 1650, 1800 e 2400 Chemistry, o Reagente desnaturante ( DENAT) tem de ser colocado na bandeja da Placa rotativa de controlo (CTT) na posição 60. Ao executar estes ensaios no sistema ADVIA 1200 Chemistry, o Reagente desnaturante ( DENAT) tem de ser colocado na bandeja da Placa rotativa do reagente (RTT-1) na posição 13. O Reagente Desnaturante poderá ficar turvo durante o prazo de validade sem afectar o seu desempenho. Para todos os sistemas ADVIA Chemistry, defina o tipo de tubo DENAT através do mesmo processo utilizado para definir outras posições na CTT ou na RTT-1. Nota Para mais informações relativas à preparação de reagentes de Hemoglobin nos sistemas ADVIA Chemistry, consulte o Boletim do Cliente intitulado: Setup Guidelines for Hemoglobin, Automated and Manual Pretreatment Assays (073D0579, última versão). 4 / _PT Rev. D,

5 ADVIA Chemistry Systems Estabilidade do reagente no sistema (OBS) Estabilidade Sistema Com chaminés de reagente Sem chaminés de reagente ADVIA dias 7 dias ADVIA 1650/ dias 7 dias ADVIA dias 7 dias Em todos os sistemas, os reagentes por abrir são estáveis até à data de validade impressa no rótulo do produto, quando armazenados de 2 a 8 C. Não congele os reagentes. Para todos os sistemas, o Reagente desnaturante de que foi aberto e armazenado de 2 a 8 C é estável durante 30 dias. Não congele o reagente. Nota As inserções do tubo de reagente não é recomendável para o Reagente desnaturante ( DENAT). Manuseamento das amostras As directrizes para o manuseamento de amostras encontram-se listadas abaixo: Utilize venipunctura ou amostras de sangue total capilar para este ensaio 5. Os anticoagulantes validados são etilenodiaminotetraacetato de potássio (K2-EDTA) e heparina de lítio. O sangue total preservado com K-2 EDTA e heparina de lítio pode ser armazenado nas seguintes condições 6 : Temperatura -70 C 2 8 C Temperatura ambiente Duração 6 meses 7 dias 48 horas O objectivo das informações de manuseamento e armazenamento é fornecer orientação aos utilizadores; contudo, pode validar os seus próprios procedimentos para manusear e armazenar amostras de doentes. Descongele amostras congeladas à temperatura ambiente e misture cuidadosamente antes de utilizar. Não volte a congelar amostras descongeladas. Misture cuidadosamente todas as amostras de sangue imediatamente antes de proceder ao teste para garantir resultados precisos _PT Rev. D, / 16

6 ADVIA Chemistry Systems Para garantir que a amostra é correctamente aspirada, as amostras devem ser misturadas e imediatamente colocadas nos sistemas ADVIA Chemistry ou como uma amostra STAT no sistema de automação do laboratório. Os resultados serão apresentados se a amostra for testada 10 minutos depois de misturar. Se a amostra assentar durante demasiado tempo, os glóbulos vermelhos ficarão depositados e apenas o plasma será aspirado. Se tal ocorrer, os sistemas ADVIA Chemistry não irão apresentar resultados e irão sinalizar a amostra como tendo uma inaceitável baixa concentração de thb_3. Neste caso, volte a misturar e a testar a amostra. Para a maioria das amostras, pode prolongar o limite de 10 minutos ao transferir 200 µl da amostra para o respectivo copo de amostra para teste. Esta abordagem prolonga o tempo possível entre a mistura e a aspiração para, pelo menos, 45 minutos. Para obter mais informações, consulte Preparação e colheita de amostras na secção Introdução aos métodos do guia do operador correspondente ao sistema. Para obter instruções sobre a introdução de reagentes e a análise de amostras, consulte a secção Operações diárias do guia do operador correspondente ao sistema. Encontra-se também disponível um ensaio com pré-tratamento manual que elimina o limite de 10-minutos. Consulte as Instruções de utilização do ensaio de pré-tratamento manual de ADVIA Chemistry Hemoglobin M (M) para mais informações. Materiais necessários mas não fornecidos A lista seguinte contém os materiais necessários, mas não fornecidos, para executar este ensaio: Tubos de amostras Soluções do sistema Calibrador (consulte a secção Resumo do ensaio para conhecer as REF)* Materiais de controlo (consulte a secção Controlo de qualidade)* Adaptadores de contentores de reagente: adaptador de 20 ml (REF ; ) para a posição de 40 ml (ADVIA 1200, ADVIA 1800) adaptador de 20 ml (REF ; ) para a posição de 70 ml (ADVIA 1200) adaptador de 20 ml (REF ; ) para a posição de 70 ml (ADVIA 1650, ADVIA 2400) Chaminés de reagente (REF ) *Para obter informações sobre armazenamento e estabilidade, consulte o folheto do produto. 6 / _PT Rev. D,

7 ADVIA Chemistry Systems Calibração Consulte o folheto do produto fornecido com o ADVIA Chemistry Calibrator (REF ) para conhecer as instruções de manuseamento e valores. Para conhecer as instruções de preparação e utilização, consulte a secção Análise geral da calibração do guia do operador correspondente ao sistema. Nota Ao calibrar o thb_3, o número de réplicas tem de ser definido para 3. Frequência de calibração Execute uma calibração quando este ensaio for implementado no sistema. Execute a recalibração após as seguintes ocorrências: Quando o número do lote dos reagentes for alterado Após a substituição de componentes ópticos ou hidráulicos vitais Quando for indicado pelos procedimentos de controlo de qualidade A Siemens Healthcare Diagnostics validou a estabilidade de calibração para este ensaio, conforme indicado na tabela seguinte: Estabilidade de calibração mínima* Sistema Com chaminé de reagente Sem chaminé de reagente ADVIA dias 30 dias ADVIA 1650/ dias 30 dias ADVIA dias 30 dias *ou sempre que for indicado pelos dados de controlo de qualidade A Siemens recomenda a calibração das embalagens de reagentes novas se a embalagem anterior tiver sido calibrada em qualquer altura durante a sua estabilidade no sistema e não seja uma embalagem nova. Os programas e procedimentos individuais de controlo de qualidade do laboratório podem exigir uma calibração mais frequente. Frequência do branco de reagente (RBL) O branco de reagente (RBL) é medido no momento da calibração do ensaio. Se, na embalagem de reagente anterior, o RBL executado tiver sido outro que não de uma nova embalagem, execute um RBL com a nova embalagem de reagente. Controlo de qualidade Seguir as normas governamentais ou os requisitos de validação quanto à frequência do controlo de qualidade. A Siemens recomenda a utilização de materiais de controlo de qualidade disponíveis no mercado com, pelo menos, 2 níveis (baixo e alto). É obtido um nível de desempenho satisfatório quando os valores de analitos obtidos se encontram dentro do Limite de Controlo Aceitável para o sistema ou dentro do seu limite, conforme determinado por um esquema de controlo de qualidade interno do laboratório adequado. Os controlos têm de ser pré-tratados utilizando os mesmos procedimentos que são utilizados para amostras _PT Rev. D, / 16

8 ADVIA Chemistry Systems A frequência real do controlo num laboratório baseia-se em muitos factores, como o fluxo de trabalho, a experiência do sistema e as regulamentações governamentais. Cada laboratório deve avaliar os controlos com base na frequência estabelecida pelas suas directrizes laboratoriais. Quando executar o ensaio, analise pelo menos 2 níveis de controlo diariamente. Além disso, teste os controlos nas seguintes condições: Sempre que utilizar um novo lote de reagente A seguir à realização de procedimentos de manutenção, limpeza ou resolução de problemas de qualquer sistema Após a execução de uma nova calibração Para obter mais informações, consulte a secção Análise geral do controlo de qualidade do guia do operador correspondente ao sistema. Limitações do procedimento O ensaio de ADVIA Chemistry proporciona resultados precisos para um intervalo de hemoglobina total que varia entre 7 g/dl e 24 g/dl. A maioria dos doentes têm valores de hemoglobina dentro deste intervalo. No entanto, de acordo com livros especializados, os doentes com anemias graves poderão ter concentrações de hemoglobina inferiores a 7 g/dl e os doentes com policitemia poderão ter concentrações de hemoglobina superiores a 24 g/dl. Os doentes com concentrações de hemoglobina fora do intervalo aceitável, e que se sabe que sofrem deste problema, devem ser examinados através de um teste que utilize um princípio de ensaio diferente. Qualquer causa de uma redução da sobrevivência dos glóbulos vermelhos (por exemplo, anemia hemolítica ou outras doenças hemolíticas, gravidez ou perdas de sangue significativas) irá reduzir a exposição de glóbulos vermelhos à glucose com uma diminuição subsequente nos valores de HbA1c. Os resultados de HbA1c não são fiáveis em doentes com perdas de sangue crónicas e consequente variação do tempo de vida dos eritrócitos. A Hemoglobina fetal (HbF) consiste em 2 cadeias alfa e 2 cadeias gama que não são reconhecidas pelo anticorpo anti-hba1c. As amostras que contêm elevadas quantidades de HbF (> 10%), geralmente encontradas em algumas pessoas com talassemia, em bebés e algumas mulheres grávidas, poderão apresentar um resultado de HbA1c inferior ao esperado com este ensaio. Para amostras de sangue com HbF (> 10%), os resultados de HbA1c obtidos através deste ensaio não devem ser comparados a resultados normais ou patológicos publicados. Diversas substâncias causam alterações fisiológicas nas concentrações de analito. Um debate exaustivo sobre possíveis substâncias interferentes e respectivas possíveis implicações fisiológicas está para além do âmbito deste documento. Consulte a lista da bibliografia para obter informações detalhadas sobre as substâncias potencialmente interferentes conhecidas 7. Tal como sucede com qualquer reacção química, o utilizador deve ser alertado para os possíveis efeitos resultantes de potenciais interferências de medicação ou substâncias endógenas desconhecidas. O laboratório e o médico devem efectuar uma avaliação de todos os resultados consoante o estado clínico do doente. 8 / _PT Rev. D,

9 ADVIA Chemistry Systems Conversão de valores NGSP para valores IFCC equivalentes O National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) e a International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) formaram um grupo de trabalho para desenvolver melhores métodos de referência primários. O relacionamento entre os resultados de HbA1c da rede NGSP e rede IFCC foram avaliados e foi desenvolvida a seguinte equação principal 6,8 : IFCC = (NGSP - 2,15)/0,092 Os resultados criados pelos sistemas ADVIA Chemistry estão em unidades NGSP equivalentes (HbA1c%) ou unidades IFCC equivalentes (HbA1cR). As unidades para a razão de HbA1c% estão em % enquanto as unidades para a razão de HbA1cR estão em mmol/mol. Interferências Foi realizado um estudo de interferência da variante de hemoglobina utilizando amostras que se sabe que são heterozigóticas para hemoglobina C, D, E, F ou S. As interferências por hemoglobina glicosilada e carbamilada lábil também foram testadas. Os resultados deste ensaio incluem: A Hemoglobina fetal (HbF) consiste em 2 cadeias alfa e 2 cadeias gama que não são reconhecidas pelo anticorpo anti-hba1c. As amostras que contêm elevadas quantidades de HbF (> 10%) poderão apresentar um resultado de HbA1c inferior ao esperado com este ensaio. Estes elevados níveis de HbF são geralmente encontrados em algumas pessoas com talassemia, em bebés e algumas mulheres grávidas. Para amostras de sangue com HbF (> 10%), os resultados de HbA1c obtidos através deste ensaio não devem ser comparados a resultados normais ou patológicos publicados. Um painel de amostras de HbC e HbS foi comparado com um método de HPLC e não demonstrou qualquer propensão clinicamente significativa a 6% (42 mmol/mol) e 9% (74 mmol/mol) de HbA1c quando comparado com HbA utilizando análises de regressão linear 9. As amostras com HbD e HbE não demonstraram qualquer interferência significativa (uma percentagem de 10% é considerada interferência significativa). A hemoglobina glicosilada lábil (6% e 9% [42 e 74 mmol/mol] de HbA1c) e a hemoglobina carbamilada (6% e 9% [42 e 74 mmol/mol] de HbA1c) não demonstraram interferência significativa (um efeito de percentagem de 10% é considerada uma interferência significativa) _PT Rev. D, / 16

10 ADVIA Chemistry Systems A Siemens testou os seguintes potenciais interferentes e determinou os resultados indicados a seguir: ADVIA 1200 Interferente Nível de interferência Concentração de amostra de HbA1c Interferência Bilirrubina (conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,32%, 10,18% (34 mmol/mol, 87 mmol/mol) NSI* Bilirrubina (não conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,26%, 10,11% (34 mmol/mol, 87 mmol/mol) NSI* Lipemia (Intralipid) 1000 mg/dl (11,3 mmol/l)** 5,43%, 10,18% (36 mmol/mol, 87 mmol/mol) NSI* Factor reumatóide (RF) 936 IU/ml 5,05%, 10,19% (32 mmol/mol, 87 mmol/mol) NSI* *NSI = Sem interferência significativa. Um efeito de percentagem 10% é considerado uma interferência significativa. **como a trioleína ADVIA 1650/1800 Interferente Nível de interferência Concentração de amostra de HbA1c Interferência Bilirrubina (conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,03%, 9,78% (31 mmol/mol, 83 mmol/mol) NSI* Bilirrubina (não conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,16%, 9,90% (33 mmol/mol, 84 mmol/mol) NSI* Lipemia (Intralipid) 1000 mg/dl (11,3 mmol/l)** 5,16%, 9,84% (33 mmol/mol, 84 mmol/mol) NSI* Factor reumatóide (RF) 936 IU/ml 5,25%, 10,24% (34 mmol/mol, 88 mmol/mol) NSI* *NSI = Sem interferência significativa. Um efeito de percentagem 10% é considerado uma interferência significativa. **como a trioleína ADVIA 2400 Interferente Nível de interferência Concentração de amostra de HbA1c Interferência Bilirrubina (conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,23%, 10,66% (33 mmol/mol, 93 mmol/mol) NSI* Bilirrubina (não conjugada) 60 mg/dl (1026 µmol/l) 5,38%, 10,52% (35 mmol/mol, 91 mmol/mol) NSI* Lipemia (Intralipid) 1000 mg/dl (11,3 mmol/l)** 5,33%, 10,50% (35 mmol/mol, 91 mmol/mol) NSI* Factor reumatóide (RF) 936 IU/ml 5,15%, 10,00% (33 mmol/mol, 85 mmol/mol) NSI* *NSI = Sem interferência significativa. Um efeito de percentagem 10% é considerado uma interferência significativa. **como a trioleína 10 / _PT Rev. D,

11 ADVIA Chemistry Systems Características de desempenho Precisão Cada amostra foi ensaiada 2 vezes por corrida, em 2 corridas por dia, durante pelo menos 20 dias. As estimativas de precisão foram calculadas de acordo com o documento CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline 10. Os dados contidos nesta secção representam o desempenho normal dos sistemas ADVIA Chemistry. Os dados do laboratório podem ser diferentes destes valores. ADVIA 1200 Tipo de amostra Nível Na corrida Total DP CV (%) DP CV (%) Unidades NGSP (%) Controlo normal 5,31 0,12 2,2 0,14 2,6 Controlo patológico 8,68 0,12 1,4 0,16 1,8 Unidades IFCC (mmol/mol) Controlo normal 34 1,27 3,7 1,52 4,4 Controlo patológico 71 1,30 1,8 1,70 2,4 ADVIA 1650/1800 Tipo de amostra Nível Na corrida Total DP CV (%) DP CV (%) Unidades NGSP (%) Controlo normal 5,45 0,07 1,3 0,13 2,4 Controlo patológico 8,70 0,06 0,7 0,14 1,6 Unidades IFCC (mmol/mol) Controlo normal 36 0,78 2,2 1,41 3,9 Controlo patológico 71 0,67 0,9 1,47 2,1 ADVIA 2400 Tipo de amostra Nível Na corrida Total DP CV (%) DP CV (%) Unidades NGSP (%) Controlo normal 5,84 0,17 2,9 0,18 3,1 Controlo patológico 9,35 0,25 2,7 0,27 2,9 Unidades IFCC (mmol/mol) Controlo normal 40 1,87 4,7 1,99 5,0 Controlo patológico 78 2,71 3,5 2,97 3, _PT Rev. D, / 16

12 ADVIA Chemistry Systems Intervalo analítico Os intervalos analíticos dos ensaios de ADVIA Chemistry encontram-se listados abaixo: O ensaio de pode ser utilizado para concentrações específicas de A1c entre 1,0 e 8,83 µmol/l. O ensaio de thb_3 pode ser utilizado para concentrações de hemoglobina total entre 7e24g/dl. O ensaio de HbA1c% é linear entre 2,9 e 15,4% de HbA1c. O ensaio de HbA1cR é linear entre 8 e 144 mmol/mol. Valores esperados O intervalo de referência do ensaio de ADVIA Chemistry é de 4,0% a 6,0% (20 a 42 mmol/mol) 11. A Siemens indica estas informações apenas como referência. Cada laboratório deve estabelecer o seu próprio intervalo normal. Os valores dos intervalos normais e os valores dos intervalos fora do normal podem ser introduzidos na janela Analytical Parameters (Chemistry). Correlação do sistema O desempenho do ensaio de ADVIA Chemistry (y) foi comparado com o desempenho do ensaio de comparação no sistema indicado (x). ADVIA 1200 Tipo de amostra Sangue total* Ensaio de comparação (x) N Equação de regressão Sy.x r Intervalo da amostra Tosoh G7 68 y = 0,99x - 0,00 y = 0,99x - 0,20 0,15 1,60 0,997 0,997 4,5 12,5% mmol/mol Sangue total* no ADVIA 1650/ y = 0,98x + 0,07 y = 0,98x + 0,40 0,21 2,30 0,997 0,997 4,4 15,3% mmol/mol *EDTA de potássio ADVIA 1650/1800 Tipo de amostra Sangue total* Ensaio de comparação (x) N Equação de regressão Sy.x r Intervalo da amostra Tosoh G7 68 y = 0,97x + 0,23 y = 0,97x + 1,81 0,16 1,76 0,997 0,997 4,5 12,5% mmol/mol Sangue total* A1c no ADVIA 1650/ y = 1,00x - 0,27 y = 1,00x - 2,90 0,37 3,97 0,994 0,994 3,14 14,92% mmol/mol Sangue Total (EDTA de potássio) Sangue Total - (Heparina de Lítio) no ADVIA 1650/ y = 1,01x - 0,03 y = 1,01x - 0,24 0,09 0,93 0,999 0,999 2,91 14,15% mmol/mol *EDTA de potássio 12 / _PT Rev. D,

13 ADVIA Chemistry Systems ADVIA 2400 Tipo de amostra Sangue total* Ensaio de comparação (x) N Equação de regressão Sy.x r Intervalo da amostra Tosoh G7 68 y = 0,97x - 0,16 y = 0,97x - 2,32 0,22 2,41 0,994 0,994 4,5 12,5% mmol/mol Sangue total* no ADVIA 1650/ y = 0,98x - 0,46 y = 0,98x - 5,45 0,23 2,45 0,997 0,997 4,6 15,9% mmol/mol *EDTA de potássio Normalização A normalização do ensaio de ADVIA Chemistry Hemoglobin é rastreável de acordo com os calibradores de referência da IFCC. Consulte os dados de correlação na secção Correlação do sistema quanto à relação dos resultados de HbA1c% de acordo com o método de referência de NGSP (Tosoh G7). Assistência técnica Para serviços de apoio ao cliente, contacte o seu distribuidor ou fornecedor de assistência técnica local. siemens.com/healthcare _PT Rev. D, / 16

14 ADVIA Chemistry Systems Bibliografia 1. Rohlfing CL, Wiedmeyer HM, Little RR, England JD, Tennill A, Goldstein DEl. Defining the Relationship Between Plasma Glucose and HbA1c: Analysis of glucose profiles and HbA1c in Diabetes Control and Complications Trial. Diabetes Care. 2002; 25: The Diabetes Control and Complications Trials Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long-term complication in insulin-dependent diabetes mellitus. N. Engl J Med 1993; 329: Fairbanks VF, Ziesmer SC, O'Brien PC. Methods for measuring plasma hemoglobin compared. Clin. Chem. 38/1, (1992). 4. Knowles BJ, Haigh WB, Michaud GC. A monoclonal antibody-based immunoassay for hemoglobin A1c. Diabetes. 1986;35 Supplement: 94A. 5. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by skin puncture; Approved Guideline- Third Edition. Villanova, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Publication H4-A3. 6. Data on file. 7. Young DS, Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 5th ed. Washington, AACC Press; Hoelzel W, Weykamp C, Jeppsson JO, et al. IFCC Reference System for Measurement of Hemoglobin A1c in Human Blood and the National Standardization Schemes in the United States, Japan, and Sweden: A Method-Comparison Study. Clin. Chem., 2004; 50: Roberts WL, Safar-Pour S, De BK, Rohlfing CL, Weykamp CW, Little RR. Effects of Hemoglobin C and S Traits on Glycohemoglobin Measurements by Eleven Methods. Clin. Chem., 2005; 51: Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document EP5-A Wu AHB. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th edition, Saunders Elsevier, St. Louis, MO. 2006; / _PT Rev. D,

15 ADVIA Chemistry Systems Definição dos Símbolos Os seguintes símbolos podem aparecer no rótulo dos produtos: Símbolo Definição Símbolo Definição Dispositivo médico para diagnóstico in vitro Número do catálogo Fabricante legal Marca CE Consultar as instruções de utilização 0088 Representante Autorizado na Comunidade Europeia Marca CE, com número de identificação do órgão notificado Risco biológico Manter protegido da luz solar e do calor Limites de temperatura Limite inferior de temperatura Limite máximo de temperatura Não congele (> 0 C) Para cima Use até Contém o suficiente para (n) testes Reciclar Impresso com tinta de soja Rev. Revisão YYYY-MM-DD Formato de data (ano-mês-dia) Código de lote _PT Rev. D, / 16

16 ADVIA Chemistry Systems Marcas comerciais ADVIA é uma marca comercial da Siemens Healthcare Diagnostics. Tosoh é uma marca comercial da Tosoh Bioscience, LLC. Intralipid é uma marca comercial da Fresenius Kabi AB Siemens Healthcare Diagnostics. Todos os direitos reservados. Made in: USA 16 / _PT Rev. D,

17 Hemoglobina Pré-tratamento Automático () Revisão e data atuais a Rev. D, Nome do produto Sistemas Materiais necessários mas não fornecidos Reagentes ADVIA Chemistry Hemoglobin Sistemas ADVIA Chemistry XPT Calibradores ADVIA Chemistry Adaptadores dos contentores de reagente Controlos disponíveis no mercado REF (2 80 testes por kit) REF (4 200 testes por kit) REF Tipos de amostra Princípio do ensaio Intervalo do ensaio Armazenamento do reagente Estabilidade do reagente no sistema Código do reagente Sangue total de origem humana (heparina de lítio ou EDTA com dipotássio) A concentração de HbA1c () e a concentração de hemoglobina total (thb_3) são medidas separadamente, sendo a sua relação reportada seguidamente. 2,9 15,4% (8 144 mmol/mol) 2 8 C 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente (REF , 2 80 testes por kit) (REF , testes por kit) a Na Rev. C ou posterior, a barra vertical na margem indica uma atualização técnica da última versão. Nota Os ensaios ADVIA Chemistry e ADVIA Chemistry thb_3 são processados nos sistemas ADVIA Chemistry. Ambos os ensaios utilizam a Relação HbA1c% para determinar os resultados de HbA1c em unidades equivalentes de NGSP (%). A Relação HbA1cR é utilizada para determinar os resultados de HbA1c em unidades equivalentes de IFCC (mmol/mol). Os ensaios e fichas de parâmetros necessários encontram-se resumidos na seguinte tabela: Unidades de Resultados Ensaios Fotométricos Ensaios de Relação NGSP (%) e thb_3 HbA1c% IFCC (mmol/mol) e thb_3 HbA1cR _PT Rev. D, / 16

18 ADVIA Chemistry XPT Aplicação Para utilização em diagnóstico in vitro na determinação quantitativa de Hemoglobina A1c, um marcador da diabetes, em sangue total nos sistemas ADVIA Chemistry XPT. Tais medições são utilizadas para a monitorização do tratamento a longo prazo de pessoas com diabetes. Os valores de e hemoglobina total (thb_3) gerados como parte dos ensaios ADVIA Chemistry HbA1c% e HbA1cR destinam-se a ser utilizados no cálculo da relação HbA1c/ hemoglobina total, e não devem ser usados individualmente para fins de diagnóstico. Resumo e explicação É formada HbA1c pela glicação não enzimática do N terminal da β cadeia de hemoglobina A. O nível de HbA1c é proporcional ao nível de glicose no sangue e é amplamente aceite como um indicador da concentração média diária de glicose no sangue durante os 2 meses anteriores. Recentes estudos demonstraram que a medição regular de HbA1c conduz a alterações no tratamento da diabetes e à melhoria do controlo metabólico conforme indicado por uma redução dos valores de HbA1c. 1,2 Princípios do procedimento A concentração de HbA1c e a concentração de hemoglobina total são medidas, e a sua relação é reportada. Os ensaios de pré-tratamento automático (ADVIA Chemistry e ADVIA Chemistry thb_3) utilizam 3 ADVIA Chemistry reagentes: Agglutinator/Total Hemoglobin Reagente 1 ( R1) Antibody Reagente 2 ( R2) Denaturant Reagente ( DENAT) Num passo do pré-tratamento automático, a amostra de sangue total é misturada com o Reagente Denaturant. Os glóbulos vermelhos são lisados e a cadeia da hemoglobina é hidrolisada pela protease presente no reagente. Para a medição de hemoglobina total, é utilizado o Reagente Aglutinador ( R1). O ensaio baseia-se na determinação do heme libertado na região Soret a 410 nm. 3 É utilizado um ensaio de inibição de aglutinação de látex para a medição de HbA1c específica. 4 Uma segunda protease no reagente R1 continua a hidrolisar a amostra de HbA1c para um pentapeptídeo glicado, que compete com o aglutinador (polímero sintético que contém múltiplas cópias da porção imunorreactiva de HbA1c) para o anticorpo anti-hba1c, reduzindo assim a velocidade de aglutinação. É obtida uma curva de concentração através da monitorização da alteração da luz difundida a 694 nm como uma alteração da absorvância. A alteração efetiva na absorvância é inversamente proporcional à concentração de HbA1c na amostra. 2 / _PT Rev. D,

19 ADVIA Chemistry XPT Reagentes Reagente Descrição Conservação Estabilidade do reagente REF Reagentes ADVIA Chemistry Hemoglobin Hemoglobin Reagente 1 8,0 ml em contentores de 20 ml Polímero ligado covalentemente a hapteno HbA1c (1 µg/ml) Albumina de soro bovino (1,5%) Tampão Conservante, NaN 3 (< 0,1%) Surfatante 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. No sistema: 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente Hemoglobin Reagente 2 6,0 ml em contentores de 20 ml Anticorpo Anti-HbA1c ligado a látex (rato) (1,8 mg/ml) Albumina de soro bovino (0,2%) Tampão Conservante (contém 5-cloro-2- -metil-2h-isotiazol-3-ona e 2- -metil-2h-isotiazol-3-ona) Surfatante 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. No sistema: 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente Denaturant Reagent 31,0 ml em recipientes de 40 ml Pepsina de suínos (0,3%) Tampão Conservante (contém 5-cloro-2- -metil-2h-isotiazol-3-ona e 2- -metil-2h-isotiazol-3-ona) 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. Aberto: Estável durante 30 dias quando aberto e conservado a 2 8 C. REF Reagentes ADVIA Chemistry Hemoglobin Hemoglobin Reagente 1 17,6 ml em contentores de 20 ml Polímero ligado covalentemente a hapteno HbA1c (1 µg/ml) Albumina de soro bovino (1,5%) Tampão Conservante, NaN 3 (< 0,1%) Surfatante 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. No sistema: 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente _PT Rev. D, / 16

20 ADVIA Chemistry XPT Reagente Descrição Conservação Estabilidade do reagente Hemoglobin Reagente 2 11,6 ml em contentores de 20 ml Anticorpo Anti-HbA1c ligado a látex (rato) (1,8 mg/ml) Albumina de soro bovino (0,2%) Tampão Conservante (contém 5-cloro-2- -metil-2h-isotiazol-3-ona e 2- -metil-2h-isotiazol-3-ona) Surfatante 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. No sistema: 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente Denaturant Reagent 36,5 ml em recipientes de 40 ml Pepsina de suínos (0,3%) Tampão Conservante (contém 5-cloro-2- -metil-2h-isotiazol-3-ona e 2- -metil-2h-isotiazol-3-ona) 2 8 C Por abrir: Estável até à data de validade indicada no produto. Aberto: Estável durante 30 dias quando aberto e conservado a 2 8 C. Advertências e precauções Fichas de segurança (MSDS/SDS) disponíveis em siemens.com/healthcare. Precaução Este dispositivo contém material de origem animal e deve ser manuseado como um potencial portador e transmissor de doenças. H317 P280, P272, P302+P352, P333+P313, P501 Aviso! Pode provocar uma reacção alérgica cutânea. Usar luvas de protecção/vestuário de protecção/protecção ocular/ protecção facial. A roupa de trabalho contaminada não pode sair do local de trabalho. SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE: lavar com sabonete e água abundantes. Em caso de irritação ou erupção cutânea: consulte um médico. Eliminar o conteúdo e o recipiente em conformidade com todos os regulamentos locais, regionais e nacionais. Contém: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolin-3-ona e 2-metil-2H-isotiazol-3-ona; Reagente 2, Reagente Desnaturante Contém azida sódica como conservante. A azida sódica pode reagir com o cobre e o chumbo existentes nas canalizações, formando azidas metálicas explosivas. Quando eliminar os reagentes, utilize água em abundância para evitar a acumulação de azidas. A eliminação destes materiais através da rede de esgotos tem de cumprir a legislação em vigor. Elimine materiais perigosos ou biologicamente contaminados de acordo com as práticas da sua instituição. Elimine todos os materiais de forma segura e aceitável em conformidade com os requisitos legais em vigor. Para utilização em diagnóstico in vitro. Preparação dos reagentes Todos os reagentes estão em estado líquido e prontos a serem utilizados. Antes de utilizar, inverta cuidadosamente o reagente tapado para eliminar as bolhas e garantir a homogeneidade. Antes de utilizar, aspire as bolhas ou a espuma que estejam presentes no contentor de reagente, utilizando uma pipeta de transferência limpa. 4 / _PT Rev. D,

21 ADVIA Chemistry XPT O reagente ADVIA Chemistry Denaturant ( DENAT) deve ser colocado no Prato Giratório do Calibrador/Controlo (CTT) na posição 60. Consulte a secção Procedimento do Ensaio para mais instruções sobre o processamento do ensaio ADVIA Chemistry. Armazenamento e estabilidade Os reagentes por abrir são estáveis até à data de validade impressa no rótulo do produto, quando armazenados a 2 8 C. Não congele os reagentes. O Reagente ADVIA Chemistry Denaturant pode ficar turvo durante a sua vida útil. Isto não afeta o desempenho do reagente. Colheita e manuseamento de amostras A Siemens Healthcare Diagnostics validou o sangue total de origem humana (heparina de lítio ou EDTA com dipotássio) para o ensaio ADVIA Chemistry. Siga estas diretrizes para as amostras utilizadas neste ensaio: Utilize amostras de sangue total por punção venosa ou de sangue total capilar para este ensaio. 5 Os anticoagulantes validados são etilenodiaminotetracético com potássio (K2-EDTA) e heparina de lítio. O sangue total preservado com K2-EDTA ou heparina de lítio pode ser conservado nas seguintes condições: 6 Temperatura -70 C 2 8 C Temperatura ambiente Duração 6 meses 7 dias 48 horas Consulte a secção Preparação das amostras para mais informações. O objetivo das informações sobre manuseamento e armazenamento é fornecer orientações aos utilizadores. É da responsabilidade do laboratório individual utilizar todas as referências disponíveis e/ou os próprios estudos ao estabelecer critérios de estabilidade alternativos para responder a necessidades específicas. Procedimento Materiais fornecidos São fornecidos os seguintes materiais: Item Conteúdo Número de testes REF REF Reagente 1: 2 contentores 20 ml Reagente 2: 2 contentores 20 ml Denaturant: 1 recipiente 40 ml Reagente 1: 4 contentores 20 ml Reagente 2: 4 contentores 20 ml Denaturant: 4 recipientes 40 ml _PT Rev. D, / 16

22 ADVIA Chemistry XPT Materiais necessários mas não fornecidos Os seguintes materiais são necessários para executar este ensaio, mas não são fornecidos: Item REF REF REF Descrição Calibradores ADVIA Chemistry Adaptador de contentor de reagente de 20 ml para a posição de 40 ml Adaptador de contentor de reagente de 20 ml para a posição de 70 ml Materiais de controlo disponíveis no mercado Materiais opcionais Os seguintes materiais podem ser utilizados para executar este ensaio, mas não são fornecidos: Item REF Descrição Inserção de contentor de reagente Nota As inserções de contentores de reagentes não são recomendadas para o Reagente ADVIA Chemistry Denaturant ( DENAT). Procedimento de ensaio A pipetagem, a dispensação do reagente, a mistura e o processamento dos Reagentes 1 e 2 são automaticamente efetuados pelo sistema ADVIA Chemistry XPT. Defina o tipo de contentor de reagente DENAT ADVIA Chemistry utilizando o mesmo processo usado para definir outras posições no Prato Giratório do Calibrador/Controlo (CTT). Nota Para mais informações sobre a configuração de reagentes de Hemoglobina nos sistemas ADVIA Chemistry, consulte o Boletim do cliente intitulado: Setup Guidelines for Hemoglobin, Automated and Manual Pretreatment Assays (PN 073D0579, última revisão). Para obter informações detalhadas sobre a execução do procedimento, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Preparação do sistema Para obter informações detalhadas sobre a preparação do sistema, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Preparação das amostras Antes de colocar as amostras no sistema, certifique-se de que as amostras têm as seguintes características: Descongele as amostras congeladas à temperatura ambiente e misture bem antes da utilização. Não volte a congelar as amostras descongeladas. Misture bem todas as amostras de sangue imediatamente antes do teste para assegurar resultados válidos. 6 / _PT Rev. D,

23 ADVIA Chemistry XPT Para assegurar que a amostra é aspirada corretamente, as amostras devem ser misturadas e imediatamente colocadas nos sistemas ADVIA Chemistry ou como uma amostra STAT no sistema automático do laboratório. Os resultados serão reportados se a amostra for testada dentro de 10 minutos após a mistura. Se a amostra repousar durante demasiado tempo, os glóbulos vermelhos irão sedimentar e apenas o plasma será aspirado. Se isto ocorrer, os sistemas ADVIA Chemistry não reportarão os resultados, e assinalarão a amostra como tendo uma concentração de thb_3 inaceitavelmente baixa. Neste caso, volte a misturar e a testar a amostra. Para a maioria das amostras, pode prolongar a limitação de 10 minutos transferindo 200 µl da amostra para um recipiente de amostra para teste. Esta abordagem prolonga o eventual tempo entre a mistura e a aspiração para 45 minutos, no mínimo. Também está disponível um ensaio alternativo com pré-tratamento manual que exclui a limitação de 10 minutos. Consulte as Instruções de Utilização do Ensaio ADVIA Chemistry Hemoglobin M (M) Manual Pretreatment para mais informações. Para obter informações adicionais sobre a preparação das amostras, consulte as instruções de funcionamento do sistema. Estabilidade no sistema Os reagentes ADVIA Chemistry são estáveis no sistema durante 7 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente e durante 30 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente. Nota As inserções de contentores de reagentes não são recomendadas para o Reagente ADVIA Chemistry Denaturant ( DENAT). Não utilize os reagentes para além da data de validade. Execução da calibração Para calibrar o ensaio ADVIA Chemistry, utilize o Calibrador ADVIA Chemistry (REF ). Introduza os valores do calibrador específicos para o lote que são fornecidos com cada lote de calibrador. Efetue a calibração conforme descrito nas instruções de utilização do calibrador. Nota Ao calibrar o reagente ADVIA Chemistry thb_3, o número de réplicas deve ser definido para 3. Frequência de calibração Calibre o ensaio a cada 30 dias quando não estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente. Calibre o ensaio a cada 14 dias quando estiver a utilizar uma inserção de contentor de reagente. Calibre o ensaio após as seguintes ocorrências: Quando o número do lote do reagente for alterado Quando uma embalagem de reagente for substituída por uma embalagem de reagente nova com o mesmo número de lote e a embalagem de reagente anterior tiver sido recalibrada durante a sua utilização Quando uma embalagem de reagente for substituída por uma embalagem de reagente nova com o mesmo número de lote e um branco de reagente tiver sido adicionalmente executado na embalagem de reagente anterior durante a sua utilização Após a substituição de componentes óticos ou hidráulicos vitais Quando for indicado pelos procedimentos de controlo de qualidade _PT Rev. D, / 16

24 ADVIA Chemistry XPT Os programas e procedimentos individuais de controlo de qualidade do laboratório podem exigir uma calibração mais frequente. Frequência do Branco de Reagente (RBL) O sistema ADVIA Chemistry XPT mede o RBL durante a calibração do ensaio. Nota Utilize solução salina como a amostra para o RBL do ensaio ADVIA Chemistry. Execução do controlo de qualidade Seguir as normas governamentais ou os requisitos de validação quanto à frequência do controlo de qualidade. No mínimo uma vez por cada dia de utilização, analise 2 níveis (baixo e alto) de um material de controlo de qualidade (CQ) disponível no mercado com concentrações conhecidas de hemoglobina A1c. É obtido um nível de desempenho satisfatório quando os valores obtidos se encontram dentro do limite de controlo esperado para o sistema ou dentro do seu limite, conforme determinado por um esquema adequado de controlo de qualidade interno do laboratório. Os controlos devem ser pré-tratados utilizando os mesmos procedimentos que são usados para amostras. A frequência real do controlo num laboratório baseia-se em muitos fatores, como o fluxo de trabalho, a experiência do sistema e as regulamentações governamentais. Cada laboratório deve avaliar os controlos com base na frequência estabelecida pelas suas diretrizes laboratoriais. Além disso, teste os controlos nas seguintes condições: Sempre que utilizar um novo lote de reagente Após quaisquer procedimentos de manutenção, limpeza ou resolução de problemas do sistema Após a execução de uma nova calibração ou de um branco de reagente adicional Siga os procedimentos de CQ internos do seu laboratório se os resultados obtidos estiverem fora dos limites aceitáveis. 8 / _PT Rev. D,

25 ADVIA Chemistry XPT Implementação de ações corretivas Se os resultados do controlo de qualidade não se encontrarem dentro do limite de controlo esperado ou dentro dos valores estabelecidos pelo laboratório, não reporte os resultados. Execute as seguintes ações: 1. Determine e corrija a causa de resultados de controlo não aceitáveis: a. Verifique se o ensaio foi executado de acordo com as instruções de utilização. b. Verifique se os materiais se encontram dentro do prazo de validade. c. Verifique se a manutenção necessária foi efetuada. d. Repita o ensaio com novas amostras de controlo de qualidade e confirme que os resultados do controlo da qualidade se situam dentro de limites aceitáveis, antes de executar amostras de pacientes. e. Se os resultados do controlo de qualidade não se encontrarem dentro dos limites aceitáveis, execute a recalibração do ensaio e repita o passo anterior. f. Se necessário, contacte o seu distribuidor ou fornecedor de assistência técnica local para obter assistência. 2. Após a conclusão das ações corretivas, repita os testes necessários das amostras de pacientes antes de comunicar os resultados. Execute as ações corretivas de acordo com o protocolo definido pelo laboratório. Resultados Conversão de Valores NGSP em Valores Equivalentes IFCC O National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) e a International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) formaram um grupo de trabalho para desenvolver métodos de referência primários melhorados. A relação entre os resultados de HbA1c a partir da rede NGSP e da rede IFCC foi avaliada, e foi desenvolvida a seguinte equação principal: 6,7 Os resultados gerados nos sistemas ADVIA Chemistry são em unidades equivalentes NGSP (HbA1c%) ou unidades equivalentes IFCC (HbA1cR). As unidades para a relação de HbA1c% são em % enquanto que as unidades para a relação de HbA1cR são em mmol/mol. Fator de conversão: IFCC = (NGSP - 2,15)/0,092 Interpretação dos resultados Os resultados deste ensaio devem ser sempre interpretados em conjunto com o historial médico do paciente, o seu exame clínico e outras conclusões. Limitações O ensaio ADVIA Chemistry fornece resultados precisos para um intervalo de hemoglobina total que varia entre 7 g/dl e 24 g/dl. A maioria dos pacientes apresenta valores de hemoglobina dentro deste intervalo. De acordo com a literatura, contudo, os pacientes com anemias graves podem ter concentrações de hemoglobina inferiores a 7 g/dl, e os pacientes com policitemia podem ter concentrações de hemoglobina superiores a 24 g/dl. Os pacientes com concentrações de hemoglobina fora do intervalo aceitável e que apresentem estas condições devem ser analisados por um teste que empregue um princípio de ensaio diferente _PT Rev. D, / 16

26 ADVIA Chemistry XPT Qualquer causa de tempo de vida reduzido dos glóbulos vermelhos (por exemplo, anemia hemolítica ou outras doenças hemolíticas, gravidez ou recente perda de sangue significativa) irá reduzir a exposição dos glóbulos vermelhos à glicose com uma consequente diminuição dos valores de HbA1c. Os resultados de HbA1c não são fiáveis em pacientes com perda de sangue crónica e consequente tempo de vida de eritrócitos variável. A Hemoglobina Fetal (HbF) consiste em 2 cadeias alfa e 2 cadeias gama que não são reconhecidas pelo anticorpo anti-hba1c. As amostras que contêm elevadas quantidades de HbF (> 10%), normalmente encontradas em algumas pessoas com talassemia, em bebés e em algumas mulheres grávidas, podem produzir um resultado de HbA1c inferior ao esperado com este ensaio. Para as amostras de sangue que contêm HbF (> 10%), os resultados de HbA1c obtidos por este ensaio não devem ser comparados aos resultados normais ou anormais publicados. Diversas substâncias causam alterações fisiológicas nas concentrações de analito. O debate exaustivo sobre possíveis substâncias interferentes, respetivas concentrações e possíveis implicações fisiológicas está para além do âmbito deste documento. Consulte a lista da bibliografia para obter informações detalhadas sobre as substâncias potencialmente interferentes conhecidas. 8 Tal como sucede com qualquer reação química, o utilizador deve ser alertado para os possíveis efeitos resultantes de potenciais interferências de medicação ou substâncias endógenas desconhecidas. O laboratório e o médico devem efetuar uma avaliação de todos os resultados consoante o estado clínico do paciente. Valores esperados O intervalo de referência para o ensaio ADVIA Chemistry é 4,0 6,0% (20 42 mmol/mol). 9 A Siemens indica estas informações apenas como referência. Tal como em todos os ensaios de diagnóstico in vitro, cada laboratório deve determinar os seus próprios intervalos de referência para a avaliação de diagnóstico dos resultados dos pacientes. Considere estes valores apenas como diretrizes. Características de desempenho Intervalo de medição analítica Os intervalos analíticos para os ensaios ADVIA Chemistry estão indicados em baixo: O ensaio pode ser utilizado para concentrações de A1c específicas a partir de 1,0 8,83 µmol/l. O ensaio thb_3 pode ser utilizado para concentrações de hemoglobina total a partir de 7 24 g/dl. O ensaio HbA1c% é linear a partir de 2,9 15,4% HbA1c. O ensaio HbA1cR é linear a partir de mmol/mol. Sensibilidade O desempenho do ensaio ADVIA Chemistry a níveis baixos foi avaliado de acordo com a diretriz EP17 A2 do CLSI, e foi determinado o limite de deteção (LoD). 10 O LoD é a quantidade mais reduzida que este ensaio consegue detetar com fiabilidade para determinar a presença ou ausência de um analito. O LoD do ensaio ADVIA Chemistry é de 1,0 µmol/l. O LoD do ensaio ADVIA Chemistry thb_3 é de 7 g/dl. 10 / _PT Rev. D,