Análise sensorial por Eficácia Clínica e Percebida da redução de rugas e linhas de expressão (Relatórios EM J e EM K)

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1 Análise sensorial por Eficácia Clínica e Percebida da redução de rugas e linhas de expressão (Relatórios EM J e EM K) Avaliar via análise sensorial por eficácia percebida a redução de rugas e linhas de expressão da região periorbital proporcionada pelo produto investigacional após 30 dias de uso domiciliar. Avaliar via análise sensorial por eficácia clínica a redução de rugas e linhas de expressão da região periorbital proporcionada pelo produto investigacional após 30 dias de uso domiciliar. Diretor do estudo: Dra. Daniela Brotto Lopes Terci. Aspectos éticos: O estudo foi planejado e conduzido segundo as determinações da Resolução 466/12 do Conselho Nacional de Saúde, sobre Diretrizes e Normas Regulamentadoras de Pesquisa Envolvendo Seres Humanos. Participantes da pesquisa: 22 participantes da pesquisa finalizaram o estudo. Idade média: 52 ± 3 anos; Fototipo (Fitzpatrick) 9% fototipo II, 18% fototipo III e 73% fototipo IV; Grau de rugas (Horibe) 73% grau III e 27% grau IV. Não houve relatos ou evidências de reação adversa durante o estudo. Cronologia do estudo: O estudo foi executado entre 04/09/2014 e 06/10/2014. Desenho experimental: No recrutamento das participantes da pesquisa, as mesmas foram instruídas para suspender o uso de qualquer produto de uso tópico no rosto 48 horas antes do início do estudo. No dia do estudo, as participantes da pesquisa recrutadas que compareceram ao laboratório foram esclarecidas pelo pesquisador sobre os procedimentos do estudo, aspectos éticos e legais, riscos e benefícios, suporte médico, formas de ressarcimento dos custos de participação e solicitadas a assinarem o TCLE em duas vias. A metodologia consistiu na análise sensorial por eficácia percebida e eficácia clínica através da aplicação de um questionário respondido pelas participantes da pesquisa e pelo pesquisador no início do estudo e após 30 dias. Objetivo foi verificar a redução da intensidade de rugas, avaliada através de uma escala hedônica de nove pontos baseada em imagens representativas padrão de cada intensidade de rugas. Modo de uso: Aplicar 5 gotas na palma da mão e espalhar na face. Aplicar uma vez ao dia. Página 1 de 11

2 Conclusão: Ao término do tratamento com o produto investigacional Precious Elixir Infusion Diamond foi constatado que: 100% das participantes perceberam que o produto reduziu as rugas e linhas de expressão ao redor dos olhos, reduziu a da flacidez da pele, notaram melhora da firmeza da pele, melhora da textura da pele deixando-a mais lisa e uniforme, melhora da hidratação da pele deixando-a mais macia e hidratada, melhora do viço da pele deixando-a mais luminosa, perceberam que o produto rejuvenesceu a pele deixandoa com aspecto mais jovem, revitalizou a pele deixando-a com aspecto mais saudável, promoveu ação anti-aging e protetora para sua pele, proporcionou efeito mate", reduzindo o brilho da pele causado pela oleosidade e melhorou a aparência geral da pele; 91% das participantes perceberam melhora na tonalidade da pele deixando-a mais uniforme, notaram que o produto reduziu as rugas e linhas de expressão na região dos lábios e na região da testa. De acordo com os resultados obtidos na análise sensorial por eficácia clínica, o produto investigacional Precious Elixir Infusion Diamond proporcionou redução da intensidade de rugas e linhas de expressão da região periorbital de até 10,6% após 30 dias de uso domiciliar. Este resultado foi evidenciado para 82% das participantes da pesquisa. Porcentagem de participante da pesquisa que perceberam a eficácia do produto investigacional em cada atributo avaliado na análise sensorial por eficácia percebida (n = 11). Página 2 de 11

3 Porcentagem de participante da pesquisa que perceberam a agradabilidade do produto investigacional em cada atributo avaliado na análise sensorial por eficácia percebida (n = 11). Efeito do produto sobre a melhora do relevo cutâneo: Página 3 de 11

4 Avaliação do aumento da firmeza, elasticidade e viscoelasticidade da pele por cutometria (EM L) Diretor do estudo: Avaliar o aumento da firmeza, elasticidade e viscoelasticidade da pele após 30 dias de uso domiciliar do produto investigacional. Dra. Daniela Brotto Lopes Terci. Aspectos éticos: O estudo foi planejado e conduzido segundo as determinações da Resolução 466/12 do Conselho Nacional de Saúde, sobre Diretrizes e Normas Regulamentadoras de Pesquisa Envolvendo Seres Humanos. Participantes da pesquisa: 11 participantes da pesquisa finalizaram o estudo; Idade média: 52 ± 3 anos. Não houve relatos ou evidências de reação adversa durante o estudo. Cronologia do estudo: O estudo foi executado entre 04/09/2014 e 06/10/2014. Desenho Experimental: No recrutamento das participantes da pesquisa, as mesmas foram instruídas para suspender o uso de quaisquer produtos de uso tópico na face 48 horas antes do início do estudo. No primeiro dia do estudo, as participantes da pesquisa recrutadas que compareceram ao laboratório foram esclarecidas pelo pesquisador sobre os procedimentos do estudo, aspectos éticos e legais, riscos e benefícios, suporte médico, formas de ressarcimento dos custos de participação e solicitadas a assinarem o TCLE em duas vias. A metodologia consistiu na avaliação do aumento da firmeza da pele através de medidas de cutometria (Cutometer MPA-580 e Multiprobe Adapter MPA-580, CKeletronics, Alemanha) realizada no início do estudo e após 30 dias de uso domiciliar do produto investigacional. O aumento da firmeza da pele foi avaliado através do parâmetro Uv que corresponde a deformação viscoelástica da pele, que ocorre após a deformação elástica, e consiste no componente viscoso da pele. O aumento da firmeza da pele é evidenciado pela redução do parâmetro Uv, que reflete o aumento das propriedades das fibras elásticas e de colágeno. O aumento da elasticidade da pele foi avaliado através do parâmetro Ur/Uf que consiste na razão entre a retração imediata e a deformação total da pele e corresponde a elasticidade biológica. O aumento da elasticidade da pele é evidenciado pelo aumento do parâmetro Ur/Uf, que reflete o aumento das propriedades das fibras elásticas. O aumento da viscoelasticidade da pele foi avaliado através do parâmetro Uv/Ue que corresponde à razão entre a deformação atrasada e imediata da pele e caracteriza o componente viscoelástico da deformação da pele. O aumento da viscoelasticidade está relacionado com a melhora da hidratação da pele e é evidenciado pelo aumento do parâmetro Uv/Ue, que reflete a diminuição da viscosidade do fluido intersticial, resultando no aumento do conteúdo aquoso da derme. Página 4 de 11

5 Modo de uso: Conclusão: Aplicar 5 gotas na palma da mão e espalhar na face. Aplicar uma vez ao dia. De acordo com o protocolo de estudo e procedimentos utilizados para a avaliação do aumento da firmeza, elasticidade e viscoelasticidade da pele, proporcionado pela aplicação do produto investigacional Precious Elixir Infusion Diamond por 30 dias consecutivos sobre a pele da região periorbital, foi possível constatar que: 36% das participantes da pesquisa apresentaram aumento na firmeza da pele, indicando que a pele ficou mais densa e resistente. 36% das participantes da pesquisa apresentaram aumento na elasticidade da pele, indicando que a pele ficou mais uniforme e flexível. 45% das participantes da pesquisa apresentaram aumento na viscoelasticidade da pele, indicando que a pele ficou mais hidratada. Página 5 de 11

6 Avaliação da hidratação da pele por corneometria (EM A) Diretor do estudo: Aspectos éticos: Participantes da pesquisa: Avaliar a hidratação da pele após aplicação do produto investigacional. Dra. Daniela Brotto Lopes Terci. O estudo foi planejado e conduzido segundo as determinações da Resolução 466/12 do Conselho Nacional de Saúde, sobre Diretrizes e Normas Regulamentadoras de Pesquisa Envolvendo Seres Humanos. 11 participantes de pesquisa foram incluídas e finalizaram o estudo. Idade média: 48 ± 10 anos. Não houve relatos ou evidências de reação adversa durante o estudo. Cronologia do estudo: O estudo foi executado entre 26/08/2014 e 27/08/2014. Desenho Experimental: No recrutamento das participantes da pesquisa, as mesmas foram instruídas para suspender o uso de qualquer produto cosmético nos antebraços até 48 horas antes do início do estudo. No dia do estudo, as participantes da pesquisa recrutadas que compareceram ao laboratório foram esclarecidas pelo pesquisador sobre os procedimentos do estudo, aspectos éticos e legais, riscos e benefícios, suporte médico, formas de ressarcimento dos custos de participação e solicitadas a assinarem o TCLE em duas vias. Para a avaliação foram demarcados dois sítios de 2,5 x 4,0 cm no antebraço volar da participante da pesquisa, sendo que um sítio foi utilizado como controle (sem aplicação de quaisquer produtos). Após as medidas iniciais de corneometria (Corneometer 825 e Multiprobe Adapter MPA-5, CKeletronics, Alemanha), o produto investigacional foi aplicado e as participantes da pesquisa permaneceram no laboratório para medidas após 2 horas. Após a medida de 2 horas as participantes da pesquisa retornaram para a casa, sendo orientadas a não molhar ou lavar os braços. No dia seguinte, retornaram ao laboratório para a realização de medida após 24 horas da aplicação do produto investigacional. Conclusão: De acordo com os resultados obtidos, foi possível constatar que a aplicação do produto investigacional Precious Elixir Infusion Diamond manteve a pele hidratada por até 24 horas quando comparado ao controle (pele sem aplicação de quaisquer produtos). 100% das participantes apresentaram melhora da hidratação da pele. Página 6 de 11

7 Avaliação de eficácia na melhora do aspecto geral da pele (EN ) Investigador Principal: Avaliar a eficácia do produto investigacional na redução dos sinais do envelhecimento facial e aspecto geral da pele. Dra. Flávia A. S. Addor. Aspectos éticos: O estudo foi planejado e conduzido segundo as determinações da Resolução 466/12 do Conselho Nacional de Saúde, sobre Diretrizes e Normas Regulamentadoras de Pesquisa Envolvendo Seres Humanos. Participantes da pesquisa: Nº de voluntários incluídos = 23; Nº de voluntários que completaram o estudo = 22; Nº de voluntários com dados utilizados na conclusão = 22. Cronologia do estudo: à Desenho Experimental: Estudo clínico com avaliação dermatológica para verificação da redução dos sinais de envelhecimento facial. Na visita 01 (D0), foi realizada avaliação clínica e primos. Na visita 02 (D28) foi realizada nova avaliação clínica, primos e avaliações subjetivas. Conclusão: Avaliação de instrumental Observa-se que o produto investigacional promoveu uma redução da profundidade das rugas, porém não foi considerado estatisticamente significativo (p>0,05). Avaliação subjetiva Observou-se o que o produto apresentou aprovação de 91% para o parâmetro linhas finas estáticas, 86,4%% para o parâmetro rugas dinâmicas, 86,4% para contornos, 100% para textura e 100% para aparência mais saudável, sendo estatisticamente significativo em todos os parâmetros quando comparados à escala central (<3). Gráfico 1 Profundidade média das rugas. Média dos valores do parâmetro profundidade média das rugas, avaliado no início do estudo (D0) e após 28 dias de estudo (D28). Instituto de Pesquisa Medcin Instituto da Pele. Osasco/SP Página 7 de 11

8 Avaliação in vitro da síntese de glicosaminoglicanas (GAG) (LSE-f087/15.113) Investigador Principal: Cultura de fibroblastos humanos Avaliar os efeitos do produto investigacional sobre a síntese de GAG em cultura de fibroblastos humanos in vitro, com o propósito de avaliar uma possível atividade no sistema de sustentação e firmador da pele. Wagner Vidal Magalhães, MSc e Ana Paula Machado Vilar Fibroblastos humanos (Clonetics, Cambrex/Lonza, USA) foram cultivados em estufa úmida a 37ºC em presença de 5% de CO2, utilizando meio de cultura específico e suplementado com soro fetal bovino a 10 % (v/v) (Vitrocell, Brasil). Ao atingiram confluência, as células foram semeadas em placas de 6 poços (Nunc, USA) para posterior incubação com o produto-teste e avaliação do mediador proposto. Uma hora antes do tratamento com o produto-teste, o meio de cultura foi trocado, empregando meio específico suplementado com 2 % de soro fetal bovino. Cronologia do estudo: Início: 05/10/2015 Término: 03/11/2015 Metodologia: Incubação com o produto-teste As culturas celulares foram incubadas com 3 concentrações não-citotóxicas do produto investigacional, determinadas previamente através da técnica de MTT. As concentrações avaliadas neste estudo foram de 0,097; 0,048 e 0,024% (p/v). As células foram mantidas em contato com o produto-teste por 72 horas para posterior coleta do sobrenadante. Quantificação de GAG O GAG foi mensurado utilizando kit comercial apropriado (BLYSCAN Sulfated Glycosaminoglycan Assay, Biocolor Co., UK). A concentração de GAG foi realizada com base na curva de calibração utilizando GAG padrão. Conclusão: Conclui-se que o produto investigacional alterou significativamente a síntese de GAG nas concentrações de 0,097; 0,048 e 0,024% (p/v) em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas; Instituto de Pesquisa Medcin Instituto da Pele. Osasco/SP Página 8 de 11

9 Gráfico 1 Síntese de GAG. experimentos independentes. Os dados representam a média de três Instituto de Pesquisa Medcin Instituto da Pele. Osasco/SP Página 9 de 11

10 Avaliação in vitro da síntese de colágeno (LSE-f086/15.113) Investigador Principal: Cultura de fibroblastos humanos Avaliar os efeitos do produto investigacional sobre a síntese de colágeno em cultura de fibroblastos humanos in vitro, com o propósito de avaliar uma possível atividade no sistema de sustentação e firmador da pele. Wagner Vidal Magalhães, MSc e Ana Paula Machado Vilar Fibroblastos humanos (Clonetics, Cambrex/Lonza, USA) foram cultivados em estufa úmida a 37ºC em presença de 5% de CO2, utilizando meio de cultura específico e suplementado com soro fetal bovino a 10 % (v/v) (Vitrocell, Brasil). Ao atingiram confluência, as células foram semeadas em placas de 6 poços (Nunc, USA) para posterior incubação com o produto-teste e avaliação do mediador proposto. Uma hora antes do tratamento com o produto-teste, o meio de cultura foi trocado, empregando meio específico suplementado com 2 % de soro fetal bovino. Cronologia do estudo: Início: 05/10/2015 Término: 03/11/2015 Metodologia: Incubação com o produto-teste As culturas celulares foram incubadas com 3 concentrações não-citotóxicas de cada produto, determinadas previamente através da técnica de MTT. As concentrações avaliadas neste estudo do produto investigacional foram de 0,097; 0,048 e 0,024% (p/v). As células foram mantidas em contato com o produto-teste por 72 horas para posterior coleta do sobrenadante. Quantificação de Colágeno O colágeno solúvel (representado em I+IV) foi mensurado utilizando kit comercial apropriado (SIRCOL Soluble Collagen Assay, Biocolor Co., UK). Em tubos plásticos próprios para microcentrífuga, 1mL do corante específico (Sircol Dye Reagent) foi adicionado em 100µL das amostras de ensaio e agitado em agitador orbital durante 30 minutos em temperatura ambiente (TA). O complexo colágeno-corante formado foi precipitado por centrifugação ( x g) por 10 minutos, o sobrenadante foi então descartado e o botão (complexo colágeno+corante) foi ressuspenso em 1mL de reagente álcali (solução NaOH 0.5 M). Alíquotas de 200 µl foram transferidas para uma placa de 96 poços e as absorbâncias determinadas em 540 nm. A concentração de colágeno foi realizada com base na curva de calibração utilizando colágeno padrão. Conclusão: Conclui-se que o produto investigacional foi capaz de alterar significativamente a síntese de colágeno nas concentrações de 0,097; 0,048 e 0,024% (p/v) em cultura de fibroblastos humanos por um período de 72 horas. Instituto de Pesquisa Medcin Instituto da Pele. Osasco/SP Página 10 de 11

11 Gráfico 1 Quantidade de colágeno. Efeitos do produto investigacional sobre a síntese de colágeno em cultura de fibroblastos humanos. Os dados representam a média de três experimentos independentes. Instituto de Pesquisa Medcin Instituto da Pele. Osasco/SP Página 11 de 11

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