Atlas Microbiologia e Parasitologia

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1 Atlas Microbiologia e Parasitologia Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - USP Departamento de Biologia Celular e Molecular e dos Bioagentes Patogênicos Atlas elaborado por: -Letícia Graziela Bachette aluna do curso de Medicina, monitora do departamento durante o ano de Marcelo Rodrigues Pinto pós-graudando -Profa. Dra. Angela Kaysel Cruz -Profa. Dra. Claudia Maria Leite Maffei -Prof. Dario Simões Zamboni -Prof. Dr. Eurico Arruda -Prof. Dr. Luiz Ricardo Orsini Tosi

2 Vermes: -Ancylostomidae sp. 4 e 5 -Ascaris lumbricóides 6 e 7 -Enterobius vermicularis 8 -Schistosoma mansoni 9, 10 e11 -Strongyloide stercoralis 12 -Taenia sp 13, 14 e 15 -Trichuris trichiura 16 e 17 Protozoários: -Amebas 18,19,20 e 21 -Giardia lamblia 22 -Leishmania donovani 23 e 24 -Plasmodium sp 25,26, 27, 28 e 29 -Trichomonas hominis 30 -Trypanosoma cruzi 31 Fungos: -Micológico direto Malassezia furfur 33 Dermatofito 34 Cromomicetos 35 Candida albicans 36 Cryptococcus neoformans 37

3 -Coloração gram:positivo para levedura 38 -Histopatológico Paracoccidiodes brasiliensis 39 Histoplasma 40 Coccidioides immitis 41 Cromomicose 42 Eumicetoma 43 Zigomicose (Rhizopus) 44 Aspergillus sp 45 -Trichophyton rubrum 46 -Trichophyton mentagrophytes 47 -Trichophyton tonsurans 48 -Microsporum canis 49 -Epidermophyton floccosum 50 -Paracoccidioides brasiliensis 51 -Histoplasma capsulatum 52 -Sporothrix schenckii 53 -Coccidioides immitis 54 -Fonsecaea pedrosoi 55 -Esporulação tipo Phialophora 56 -Penicillium sp 57 -Aspergillus sp 58 -Fusarium sp 59 -Rhizopus 60 -Candida albicans 61 -Provas bioquímicas para leveduras 62 -Cryptococcus neoformans 63 e 64

4 A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Ancylostomidae sp. (A) Os ovos estão indicados pelas setas (lugol, x10); (B) (x40). No ovo indicado pela seta vermelha notamos a presença da larva, mas não no ovo indicado pela seta preta. Ovo de Ancylostomidae tem formato oval e mede cerca de 60µm por 40µm. A C B Fotomicroscopia. Extremidade posterior do Ancylostomidae. (A) Extremidade posterior afilada de uma fêmea do verme (x10); (B) Extremidade posterior de um macho, presença de bolsa copuladora (x10); (C) Bolsa copuladora em maior aumento.

5 A B Fotomicroscopia. Aparelho bucal do Ancylostomidae. (A) Ancylostoma braziliense, presença de dois pares de dentes desiguais. (B) Necator americanus, presença de cápsula bucal profunda com duas lâminas cortantes semilunares ( x40). Fotomicroscopia. Aparelho bucal do Ancylostoma caninun. Cápsula bucal profunda com três pares de dentes (x40).

6 A B C Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Ascaris lumbricóides. (A) Os ovos estão indicados pelas setas (lugol, x10); (B) (x40); (C) Ovos de Ascaris, onde podemos observar a membrana externa mamilonada e as células germinativas no interior (lugol, x40). Ovo de Ascaris lumbricoides tem em média 50µm de diâmetro. A B Fotomicroscopia. Corte de pulmão com larva de Ascaris lumbricoides. (A) A larva está indicada pela seta. Presença de células inflamatórias e hemorragia devido a presença da larva (H&E, x10); (B) Larva em maior aumento (x20).

7 Fotomicroscopia. Corte transversal do verme Ascaris lumbricóides. O verme adulto macho mede cerca de 20 a 30 cm de comprimento, já a fêmea mede de 30 a 40 cm.

8 Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Enterobius vermicularis. Os ovos estão indicados pelas setas (lugol, x40). Ovo do Enterobius vermicularis mede cerca de 20µm de largura. A B C Fotomicroscopia. Verme Enterobius vermicularis fêmea (A e B) Extremidade posterior (x10); (C) Extremidade anterior (x10). Fêmea do Enterobius vermicularis mede cerca de 1 cm de comprimento, macho mede 5mm.

9 Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Schistosoma mansoni. Os ovos estão indicados pelas setas (lugol, x10). Ovo tem formato oval e apresenta espículo voltado para trás e mede cerca de 150µm de comprimento por 60 de largura. Fotomicroscopia. Corte de intestino contendo ovos de Schistosoma mansoni. Os ovos estão indicados pela seta (H&E, x10).

10 Fotomicroscopia. Corte de fígado contendo granuloma provocado pelo ovo de Schistosoma mansoni. As setas pretas indicam o granuloma e a seta vermelha o ovo (H&E, x20). Fotomicroscopia. Tecido hepático contendo granulomas provocados pelos ovos de Schistosoma mansoni (H&E, x10).

11 Fotomicroscopia. Vermes adultos de Schistosoma mansoni. A seta indica o macho, e cabeça de seta a fêmea. A seta vermelha indica a ventosa ventral e a seta azul a ventosa oral, importante lembrar que tanto a fêmea como o macho apresentam ventosas (x10,composição de imagens devido comprimento do verme). Fêmea mede cerca de 1,5 cm e o macho 1cm de comprimento. Fotomicroscopia. Fêmea do Schistosoma mansoni. A seta indica um ovo no interior da fêmea (x40).

12 Fotomicroscopia. Larva rabditóide de Strongyloide stercoralis (x20). As larvas medem 0,2-0,3mm de comprimento por 0,015 de largura. Fotomicroscopia. Larva filarióide de Strongyloide stercoralis (x20). As larvas medem de 0,35-0,5mm de comprimento por 0,01-0,003 de largura. É a forma infectante do parasita.

13 A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Taenia sp. (A) Os ovos estão indicados pelas setas (lugol, x10); (B) (x40). Os ovos são esféricos e medem cerca de 30mm de diâmetro. Fotomicroscopia. Tecido nervoso com a presença de cisticerco de Taenia solium (H&E, x4).

14 Fotomicroscopia. Proglote jovem de Taenia saginata (x4). Fotomicroscopia. Proglote madura de Taenia saginata (x4, composição de imagens).

15 Fotomicroscopia. Proglote madura de Taenia saginata (x2). Fotomicroscopia. Proglote grávida de Taenia saginata (x2).

16 A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo ovos de Trichuris trichiura. (A) O ovo está indicado pela seta (lugol, x20); (B) (x40). Ovo de Trichuris trichiura mede cerca de 22µm de largura por 55µm de comprimento, formato elíptico com poros salientes e transparentes em ambas as extremidades. Fotomicroscopia. Corte de intestino grosso (ceco) contendo vermes de Trichuris trichiura. As setas indicam os vermes cortados transversalmente (H&E,x10). O verme mede de 3 a 5 cm.

17 A B C Fotomicroscopia. Extremidade posterior do verme Trichuris trichiura. (A) A seta indica o espículo presente na curvatura ventral do macho (x2); (B) (x4); (C) Extremidade posterior da fêmea; ausência de curvatura e espículo (x2). A B Fotomicroscopia. Vermes adultos de Trichuris trichiura. (A) Fêmea e (B) macho.

18 Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo trofozoíto de Entamoeba coli. A forma trofozoíta está indicada pela seta (x100). O trofozoíto mede cerca de 20 a 50µm. O núcleo apresenta a cromatina grosseira e irregular e o cariossoma grande e excêntrico. A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo cistos de Entamoeba coli. (A e B) Cistos (x100). Os cistos medem 15-20µm, são esféricos e podem conter até 8 núcleos com corpos cromatoídes finos.

19 Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo trofozoíto de Iodamoeba butschlii. A forma trofozoíta está indicada pela seta (x100). O trofozoíto mede cerca de 10-15µm. A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo cistos de Iodamoeba butschlii. (A e B) As setas indicam os cistos de Iodamoeba butschlii (x100). Os cistos medem cerca de 10-15µm, possuem um único núcleo e um grande vacúolo contendo glicogênio.

20 Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo trofozoíto de Entamoeba histolytica. A forma trofozoíta está indicada pela seta (hematoxilina férrica, x100). O trofozoíto mede de 20 até 40µm, apresentando núcleo com cariossoma central; o citoplasma é finamente granuloso e com vacúolos. Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo cisto de Entamoeba histolytica. O cisto está indicado pela seta (hematoxilina férrica, x100). O tamanho dos cistos varia de 10 a 20µm, têm forma esférica, citoplasma finamente granular, com raros vacúolos. Núcleos em número variável de 1 a 4.

21 Fotomicroscopia. Corte de intestino com amebíase causada por Entamoeba histolytica. As forma invasivas estão apontadas pelas setas (H&E, x20).

22 A B Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo cistos de Giardia lamblia. (A e B) Os cistos estão indicados pelas setas (hematoxilina férrica, x100). O cisto mede cerca de 8-12µm de comprimento e 7-10µm de largura, tem citoplasma hialino ou finamente granular, apresenta de 2 a 4 núcleos, flagelos invaginados, axonemas e corpos parabasais. Fotomicroscopia. Material fecal humano contendo trofozoítos de Giardia lamblia. As formas trofozoítas estão indicadas pelas setas (hematoxilina férrica, x100). O trofozoíto mede cerca de 20µm de comprimento por 10µm de largura, tem simetria bilateral, apresenta 2 núcleos e 4 pares de flagelos.

23 Fotomicroscopia. Formas promastigotas de Leishmania donovani (Giemsa, x100). Fotomicroscopia. Esfregaço de fígado contendo formas amastigotas de Leishmania donovani. As setas indicam as formas amastigotas de L. donovani infectando macrófagos (Giemsa, x100).

24 Fotomicroscopia. Corte de fígado contendo macrófagos infectados com Leishmania donovani. As setas indicam macrófagos infectados com as formas amastigotas de L. donovani (x100). Fotomicroscopia. Corte de baço contendo células do sistema fagocítico mononuclear infectadas com as formas amastigotas de Leishmania donovani. Observa-se acentuada hiperplasia das células do sistema fagocítico mononuclear (H&E, x100).

25 Fotomicroscopia. Corte de fígado acometido por infecção malárica. O parênquima hepático está desorganizado e notam-se células de Kupfer contendo pigmento malárico (H&E, x40). Fotomicroscopia. Corte de baço acometido por infecção malárica (H&E, x40).

26 Fotomicroscopia. Estômago dissecado de anofelino. As setas indicam os oocistos de Plasmodium vivax presos a porção externa da parede (x2).

27 A B C D Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium falciparum. (A-D) As setas indicam as formas trofozoítas do parasito (Giemsa, x100). A A B C D Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium falciparum. (A-D) As setas indicam as formas esquizontes do parasito (Giemsa, x100).

28 A B C Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium falciparum. (A-C) As setas indicam as formas de gametócito do parasito (Giemsa, x100). A B C D Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium vivax. (A-D) As setas indicam as formas trofozoítas do parasito (Giemsa, x100).

29 A B C D Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium vivax. (A-D) As setas indicam a formas esquizonte do parasito (Giemsa, x100). A B C Fotomicroscopia. Esfregaço de sangue contendo hemácias infectadas por Plasmodium vivax. (A-D) As setas indicam a formas de gametócito do parasito (Giemsa, x100).

30 Fotomicroscopia. Trofozoíto de Trichomonas hominis. A forma trofozoíta está indicada pela seta (x100). O corpo é piriforme, medindo de 8 a 20µm. Como todos os tricomonadídeos, não apresenta forma cística.

31 Fotomicroscopia. Gota espessa corada revelando formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi. As setas indicam as formas tripomastigotas (Giemsa, x100). A B Fotomicroscopia. Corte de coração contendo formas amastigotas de Trypanosoma cruzi. (A e B) As setas indicam as formas amastigotas infectando células do tecido cardíaco (H&E, x40).

32 Micológico direto ( KOH 20%) Escamas de lesões hipocrômicas Leveduras arredondadas, agrupadas em cachos, associadas com pseudohifas irregulares, curvas, pouco ramificadas. Resultado: Malassezia furfur

33 Micológico direto ( KOH 20%) Cabelos Cabelos envolvidos por fragmentos de hifas Resultados: positivo para dermatófito Parasitismo ectothrix

34 Micológico direto ( KOH 20%) Escamas e unhas Hifas hialinas, septadas, artrosporadas, com Refringência esverdeada Resultados: positivo para dermatófito

35 Micológico direto ( KOH 20%) Lesão verrucosa-vegetante Células globosas, de parede grossa, com ou sem septos, de cor acastanhada (corpos escleróticos), geralmente agrupadas. Ocasionalmente observa-se hifas septadas, acastanhadas (demáceas). Resultados: positivo para cromomicetos

36 Micológico direto ( KOH 20%) Esfregaço vaginal Esfregaço vaginal Células epiteliais descamativas e leveduras coradas pelo Gram(+), em brotamento e formando pseudohifas. Resultado: Candida albicans

37 Micológico de líquor ( Tinta nankim) Leveduras arredondadas com ou sem brotamentos, capsuladas Resultado: Cryptococcus neoformans

38 Coloração Gram Escarro ou urina Células ovaladas ou arredondadas com pseudohifas e brotamento Resultado: positivo para levedura

39 Histopatológico de Paracoccidiodes brasiliensis Hematoxilina e eosina (H&E) Visualização de granulomas e Paracoccidioides brasiliensis

40 Histopatológico de Histoplasma H&E GSM Corte histológico de fígado, corado por HE, mostrando presença de macrófagos abarrotados por células leveduriformes do fungo. Coloração por GMS evidenciando a carga fúngica tecidual.

41 Corte histológico de pulmão Grocott- impregnação pela prata Escarro ou urina Visualização de esférulas com endosporos Coccidioides immitis

42 Histopatológico de Cromomicose H&E GSM Imagens cedida gentilmente pelo Departamento de Patologia e Medicina Legal Corte histológico de pele corado por HE ou GMS evidenciando células globosas, de parede grossa, com ou sem septos, de cor acastanhada (corpos escleróticos), geralmente agrupadas.

43 Agentes: Pseudoallescheria boydii, Acremonium falciforme, Madurella grisea Histopatológico de Eumicetoma H&E Prata Imagens cedida gentilmente pelo Departamento de Patologia e Medicina Legal Processo inflamatório contendo grão, constituído do entrelaçamento de hifas bem diferenciadas na periferia do grão.

44 Histopatológico de Zigomicose (Rhizopus) H&E Prata Imagens cedida gentilmente pelo Departamento de Patologia e Medicina Legal Zigomicose: hifas largas, irregulares, sem septos (cenocíticas), ramificadas em ângulo reto. Comprometimento do lume dos vasos, com formação de trombos. Zigomicose (Rhizopus)

45 Histopatológico de Aspergillus sp H&E Prata Imagens cedida gentilmente pelo Departamento de Patologia e Medicina Legal Aspecto microscópico: Corte de pulmão (H&E), hifas septadas, orientadas para uma direção, com ramificações tipicamente dicotômicas (em ângulo agudo). Vasos sanguíneos com trombos e hemorragia de parênquima. Corte de pulmão (prata) : Hifas septadas, numerosas, orientadas, com ramificação em forquilha.

46 Trichophyton rubrum Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa branca exuberante e verso com pigmento avermelhado a bordô. Aspecto microscópico: Fungo filamentoso hialino, septado e Microconídios em forma de lágrima, dispostos alternadamente pela hifa (tipo arame farpado). Raros macroconídeos.

47 Trichophyton mentagrophytes Aspecto macroscópico: Colônia com aspecto algodonoso a gisoso, cor branca, verso amarelo claro, castanho ou vinho Aspecto microscópico: Fungo filamentoso septado e hialino, macroconídios raros e microconídios abundantes, arredondados, dispostos em cachos. Hifas em espiral

48 Trichophyton tonsurans Aspecto macroscópico: Colônia com aspecto aveludado ou pulverulento, de cor branca a creme, crateriforme, com verso castanho escuro Aspecto microscópico: Fungo filamentoso hialino, com hifas septadas, microconídios abundantes, de várias formas e tamanhos dispostos em arame farpado

49 Microsporum canis Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa branca, rarefeita e verso com pigmento amarelo-alaranjado. Aspecto microscópico: Fungo filamentoso hialino com hifas septadas e macroconídios fusiformes, multiseptados, de parede grossa e granulosa.

50 Epidermophyton floccosum Aspecto macroscópico: Colônia com aspecto pulverulento, formando pregas e sulcos (crateriforme) de cor amareloesverdeado e verso com pigmento castanho Aspecto microscópico: Fungo filamentoso hialino, septado, com macroconídios em clava, multiseptados, parede lisa e sem granulações. Nunca produz microconídios

51 Paracoccidioides brasiliensis 25ºC 37ºC Aspecto macroscópico: 25ºC colônia aveludada, branca, fragmentada (pipoca) e verso castanho claro 37ºC colônia pastosa, seca, bastante enrugada, de cor creme Aspecto microscópico: leveduras hialinas com células arredondadas ou alongadas, de paredes grossas, apresentando múltiplos brotamentos e vacúolos intracitoplasmáticos.

52 Histoplasma capsulatum Aspecto macroscópico 25ºC colônia algodonosa, branca ou creme, sem pigmento no verso 37ºC Colônia pastosa, seca e enrugada, em meio enriquecido com sangue Aspecto microscópico a 25º C : Fungo filamentoso hialino, septado, com macroconídios redondos de parede grosa e granulosa (tuberculados).

53 Sporothrix schenckii Fase filamentosa - 25 C Aspecto macroscópico: Colônia de aspecto ceroso ou membranoso, com pregas e coloração bege ou enegrecida dependendo da cepa. Sem pigmento difuso. Aspecto microscópico: Fungo filamentoso, hialino, com hifas delgadas, septadas e microconídeos em forma de grão de arroz, dispostos ao redor do conidióforo, como pétalas de margarida

54 Coccidioides immitis Fase filamentosa 25 C Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa, branco amarelada Aspecto microscópico: Células artrosporadas, separadas por espaço vazios.

55 Fonsecaea pedrosoi Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa de cor castanho a negro Aspecto microscópico: Presença dos três tipos de esporulação: Cladosporium,Phialophora e Rinocladiella

56 Esporulação tipo Phialophora Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa de cor castanho a negro Aspecto microscópico: Fungo filamentoso demáceo com hifas septadas.os conídios se apresentam aglomerados em massa, no topo do conidióforo em forma de ânfora ou vaso

57 Penicillium sp Aspecto macroscópico: Colônia algodonosa, coberta por finos grãos que conferem a cor verde-acinzentada. Verso sem pigmento. Aspecto microscópico: Fungo filamentoso septado.o conidióforo sofre ramificações simples ou múltiplas (forma de pincel) que apresentam esterigmas responsáveis pela produção de conídeos arredondados dispostos em cadeias.

58 Aspergillus sp Aspecto macroscópico: colônia algodonosa coberta por grânulos que dão a tonalidade ao fungo, dependendo da espécie (amarela, terra, verde e preta). Verso sem pigmento. Aspecto microscópico: Fungo filamentoso hialino, septado. Conidióforo com vesícula arrendondada contendo esterigmas únicos ou duplos, responsáveis pela produção de esporos arredondados em cadeia

59 Fusarium sp Aspecto macroscópico: côlonia algodoada que pode apresentar que pode apresentar variações de coloração de dependendo da espécie (branca, amarela, lilás). Verso sem pigmento. Aspecto microscópico: fungo filamentoso hialino com hifas septadas e microconídios ou macroconídios fusiformes ou com formas de lua crescente, sem septos ou multissepstados, com parede fina e lisa.

60 Rhizopus Aspecto macroscópico: Colônias algodonosas não compactas porém exuberantes ( algodão doce), de cor branca com grânulos negros. Verso sem pigmento. Aspecto microscópico: fungo filamentoso hialino com sem septos (cenocítica). Esporângio longo formado por uma vesícula globosa com inúmeros esporangiosporos. Sob os esporângios formam-se rizóides.

61 Candida albicans Aspecto macroscópico: colônia úmida, cremosa, brilhante e esbranquiçada. Aspecto microscópico Leveduras ovaladas ou redondas, em brotamento

62 Provas bioquímicas para leveduras Assimilação de fontes de Carbono ou nitrogênio Crescimento da levedura no local onde foi acrescentado ao meio mímino uma fonte capaz de ser metabolizada pela levedura. Fermentação de fontes de Carbono Observar a produção ou não de gás (retido no tubo de Durhan) que corresponde ao produto final da fermentação da fonte de carbono testada.

63 Cryptococcus neoformans Aspecto macroscópico Colônia cremosa, brilhante, de cor amarelada e aspecto mucóide. Ágar-L-Dopa Levedura fenoloxidase (+), produzindo colônias escuras pela formação de melanina

64 Cryptococcus neoformans Ágar-uréia Leveduras urease +, alcalinizam o meio e modificam a sua cor, de amarelo para rosa. Meio CGB Levedura dos sorotipos B e C utilizam a glicina e são resistentes a canavanina, mudando a cor do meio (amarelo para azul cobalto)