Universidade Federal da Paraíba Centro de Ciências da Saúde Departamento de Ciências Farmacêuticas Trabalho de Conclusão de Curso

Universidade Federal da Paraíba Centro de Ciências da Saúde Departamento de Ciências Farmacêuticas Trabalho de Conclusão de Curso CARACTERIZAÇÃO DO ESTADO SÓLIDO DE DISPERSÕES SÓLIDAS DE NIFEDIPINO OBTIDAS POR SECAGEM POR ASPERSÃO Lays de Oliveira Baltazar João Pessoa PB Setembro 2013

Lays de Oliveira Baltazar CARACTERIZAÇÃO DO ESTADO SÓLIDO DE DISPERSÕES SÓLIDAS DE NIFEDIPINO OBTIDAS POR SECAGEM POR ASPERSÃO Trabalho de Conclusão de Curso apresentado à Coordenação do Curso de Graduação em Farmácia, do Centro de Ciências da Saúde, da Universidade Federal da Paraíba, como requisitos para obtenção do título de Bacharel em Farmácia. Orientador: Profa. Dr. Fabio Santos de Souza João Pessoa PB Setembro 2013

Lays de Oliveira Baltazar ESTUDO DE ESTABILIDADE DE DISPERSÕES SÓLIDAS DE NIFEDIPINO OBTIDAS POR SPRAY-DRIER Aprovada em 13/09/2013 Trabalho de Conclusão de Curso apresentado à Coordenação do Curso de Graduação em Farmácia, do Centro de Ciências da Saúde, da Universidade Federal da Paraíba, como requisitos para obtenção do título de Bacharel em Farmácia. Profa. Dr. Fabio Santos de Souza Orientador Dr. Severino Antônio de Lima Neto Examinador Prof. Dr. Ionaldo José Lima Diniz Basílio Examinador

B197c Baltazar, Lays de Oliveira. Caracterização do estado sólido de dispersões sólidas de nifedipino obtidas por secagem por aspersão / Lays de Oliveira Baltazar. João Pessoa : [s.n.], 2013. 58 f. : il. Orientador: Fabio Santos de Souza. Monografia (Graduação) UFPB/CCS. 1. Nifedipino. 2. Análise térmica. 3. Estabilidade.

Dedico este trabalho aos meus pais Valdemir e Gleidilene que, mesmo longe, estão sempre presente em minha vida.

AGRADECIMENTOS Agradeço ao bom Deus que me ilumina e me guia; Agradeço aos meus pais Valdemir e Gleidilene, e aos meus irmãos Bruno e Thaís pelo amor, a paciência, e a confiança que tiveram em mim; A toda minha família pelo incentivo; Ao meu namorado e amigo Victor Vilela com seu amor e carinho, por aconselhar e ajudar a acreditar que tudo vai dar certo; Ao Prof.Fábio Santos Souza, pela orientação, que mesmo com seu tempo escasso sempre esteve disposto a ajudar; Aos colegas de Laboratório de Controle de Qualidade (LUDEM) em especial a Taynara Batista e a Renata Leite pelo apoio e dedicação; Aos meus amigos, mesmo distantes, que me apoiaram e comemoraram cada etapa vencida em minha vida; À Universidade Federal da Paraíba pela estrutura física;

RESUMO O nifedipino droga praticamente insolúvel em água usada terapeuticamente como antagonista de canais de cálcio para o tratamento de angina e agente anti-hipertensivo. Este estudo tem como finalidade a caracterização do estado sólido e estabilidade térmica do nifedipino, como de suas dispersões sólidas (DS) obtidas através do método de secagem por aspersão, investigando as interações físicas fármaco-carreadores, correlacionando os dados térmicos e de difratometria de Raios X, além da quantificação do fármaco liberado no processo de dissolução. Para tanto, fizemos uso das técnicas termoanalíticas Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), DSC fotovisual, Análise Térmica Diferencial (DTA) e Termogravimética (TG). As dispersões sólidas foram preparadas pelos métodos de secagem por aspersão com diferentes carreadores, lauril sulfato de sódio (LSS), polivinilpirrolidona (PVP), polietileno glicol 400 e 6000 (PEG 400 e PEG 6000). Tanto as curvas TG dinâmicas como as curvas de DTA dos carreadores e das DSs foram obtidas na razão de aquecimento 10ºC.min -1. As curvas DSC do fármaco evidenciaram a fusão ocorrendo na faixa relatada na literatura, enquanto que suas curvas DTA e TG dinâmica mostram diferenças das faixas de temperaturas de termodecomposição com o aumento da razão de temperatura. Observou-se que as DS com PVP K30, PEG 400 e PEG 6000 apresentaram uma maior estabilidade em relação ao fármaco cristalino. Os difratogramas das DS mostraram um padrão de difração de substância amorfa, diferentemente do fármaco. As dispersões sólidas, com LSS, PVP resultaram em uma aumento na taxa de dissolução em relação ao fármaco (43% ± 1,06 e 18% ± 6,94 aos 5 minutos, respectivamente) no meio USP tampão fosfato ph 7,5, e no meio USP fluido gástrico sem enzima ph 1,2 com 0,5% (m/v) de lauril sulfato de sódio ( 62,43 % ± 7,01 e 27,90 ± 2,7 aos 5 minutos), em comparação com fármaco ( 0,45 % ± 0,24 aos 5 minutos). Palavras-chave: Nifedipino, Análise térmica, estabilidade.

ABSTRACT The drug nifedipine practically insoluble in water used therapeutically as calcium antagonists for the treatment of angina and anti-hypertensive agent. This study aimed at the characterization studies of the solid state and thermal stability of nifedipine, as its solid dispersions (SD) obtained by spray drying, investigating the physical interactions of the drug and the excipients, correlating the thermal data and X-ray diffraction, as well as the quantification of the drug released in the process of disoolução. For this purpose, we use the thermal analysis Differential Scanning Calorimetry (DSC) DSC photovisual, Differential Thermal Analysis (DTA) and thermogravimetry (TG). Solid dispersions were prepared by spray drying with different excipients, sodium lauryl sulfate (SLS), polyvinyl pyrrolidone (PVP), polyethylene glycol 400 and 6000 (PEG 400 and PEG 6000). Both the dynamic TG and DTA curves of excipients and SDs were obtained at heating rate 10 C min-1. DSC curves showed the drug fusion occurring in the range reported in the literature, while its dynamic TG and DTA curves show differences in the thermodecomposition temperature ranges with increasing ratio. It was observed that DS had a higher stability compared to the pure drug. The XRD patterns of the DS showed diffraction pattern of amorphous substance, unlike the pure drug. In dissolving the solid dispersion, both with PVP as the LSS resulted in increased dissolution of nifedipine (43% ± 1.06 and 18 ± 6.94% after 5 minutes, respectively) in the middle of USP phosphate buffer ph 7.5, and means USP gastric fluid without enzyme ph 1.2 with 0.5% (w / v) Sodium Lauryl Sulfate (62.43% ± 7.01 and 27.90 ± 2.7 after 5 minutes) compared with drug (0.45% ± 0.24 at 5 minutes). Key Words: Nifedipino, thermal analysis, stability.

LISTA DE FIGURAS Figura 1: Fórmula estrutural da Nifedipino... 16 Figura 2: Estrutura química das impurezas encontradas nas amostras de Nifedipino... 16 Figura 3: Estrutura química dos PEGs... 20 Figura 4: Estrutura química do PVP... 21 Figura 5: Estrutura química do LSS... 21 Figura6: Curvas calorimétricas do insumo nifedipino nas razões de aquecimento de 2, 5, 10, 20 e 40 C.min -1... 35 Figura 7: Imagens do DSC-fotovisual do nifedipino... 36 Figura 8: Curvas de DTA do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40ºC.min -1... 37 Figura 9: Curvas termogravimétricas dinâmicas do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40 ºC.min -1... 39 Figura 10: Curvas TG isotérmica do nifedipino nas temperaturas de 180, 190, 200, 210, 220 C.min -1... 41 Figura 11. Curvas de DTA do NFD e dos carreadores na razão de aquecimento de 10 C.min -1 até 250 C... 42 Figura 12: Curvas de DTA das dispersões sólidas com os carreadores LSS, PVP, PEG 6000 e PEG 400... 43 Figura 13: Curvas termogravimétricas dinâmicas do nifedipino e dos adjuvantes tecnológicos na razão de 10 C.min -1... 44 Figura 14: Curvas de TG das dispersões sólidas com os carreadores LSS, PVP, PEG 6000e PEG 400... 45 Figura 15: Perfil de dissolução das dispersões sólidas no meio de dissolução USP tampão fosfato ph 7,5... 48 Figura 16: Perfil de dissolução das dispersões sólidas no meio de dissolução USP fluido gástrico... 49 Figura 17: Difratograma do nifedipino... 50 Figura 18: Difratograma do nifedipino e das dispersões sólidas... 51

LISTA DE TABELAS Tabela 1. Variação da temperatura do pico, onset e endset de pico de fusão do nifedipino nas razões 5,10,20,40 C.min - 1... 36 Tabela 2. Dados das curvas térmicas diferenciais do pico de fusão do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40 C.min -1 38 Tabela 3. Dados das curvas termogravimétricas dinâmicas do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40 ºC.min -1... 39 Tabela 4. Valores da constante cinética de perda de massa para o nifedipino... 41 Tabela 5. Temperaturas do pico fusão e entalpias correspondentes do nifedipino e das dispersões sólidas... 43 Tabela 6. Principal faixa de decomposição térmica do nifedipino e das dispersões sólidas... 46 Tabela 7. Representação dos dados termogravimétricos do nifedipino e das dispersões sólidas... 46 Tabela 8. Avaliação do percentual de nifedipino liberado em dissolução utilizando o meio USP tampão fosfato ph 7,5... 48 Tabela 9. Mostras o percentual de nifedipino liberado em dissolução utilizando o USP fluido gástrico sem enzima ph 1,2 com 0,5% (m/v) de lauril sulfato de sódio... 49

SUMÁRIO 1. Introdução... 12 2. Fundamentação teórica... 15 2.1. Nifedipino... 15 2.1.1 Propriedades Farmacológicas... 15 2.1.2 Propriedades Físico-químicas... 15 2.2. Dispersão Sólida... 17 2.2.1 Carreadores... 19 2.2.2. Estabilidade das dispersões sólidas... 21 2.3. Análise Térmica... 24 2.3.1. Termogravimetria (TG)... 24 2.3.2. Análise Térmica Diferencial... 25 2.3.3. Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC)... 26 2.4. Dissolução... 27 2.5. Difração de Raio X... 28 3. Objetivos... 29 3.1. Objetivo Geral... 29 3.2. Objetivos Específicos... 29 4. Metodologia... 30 4.1. Materiais... 30 4.2. Métodos... 30 4.2.1. Preparação das dispersões sólidas... 30 4.2.3. Análise Termica Diferencial (DTA)... 31 4.2.4. Termografimetria (TG)... 32 4.2.5. Dissolução do Fármaco Nifedipino e dispersão sólida... 33 4.2.6. Difração de Raio X... 33 5.Resultado e Discussão... 34 5.1. Caracterização do Nifedipino... 34 5.1.1. Dados calorimétricos ( DSC)... 34 5.1.2. Dados Calorimétricos acoplado ao sistema fotovisual... 35

5.1.3. Estudos Térmicos Diferencial (DSC)... 36 5.1.4. Dados Termogravimetrico (TG)... 37 5.1.4.1. Investigação da Cinética pelo método de Ozawa... 39 5.1.4.2 Investigação da Cinética pelo método de Arrhenius... 39 5.2. Caracterização das dispersões sólidas... 41 5.2.1 Estudos Térmicos Diferenciais (DTA)... 41 5.2.2. Dados Termogravimetricos (TG)... 43 5.3. Dissolução das dispersões sólidas... 46 5.4. Estudos de Difração de Raio X (DRX)... 48 6. Conclusão... Referências... 50 51

1. INTRODUÇÃO Atualmente, a hipertensão arterial, constitui um dos maiores problemas de saúde prevalecentes. O tratamento da hipertensão pode ser realizado com ou sem a utilização de medicação, e um tratamento farmacológico incluindo vários grupos de compostos farmacêuticos, por exemplo, diuréticos, inibidores adrenérgicos, vasodilatadores diretos, bloqueadores de canal de cálcio, inibidores da enzima conversora de angiotensina e antagonista dos receptores de angiotensina II (FILHO et al, 2009). O Nifedipino, cujo nome químico é dimetil-1,4-diidro-2,6-dimetil-4-(2- nitrofenil)-3,5-piridinodicarboxilato, bloqueia os canais de cálcio no miocárdio e nas células musculares lisas vasculares, induzindo vasodilatação e redução da resistência periférica. Estas propriedades fazem o nifedipino altamente efetivo no manejo da angina e hipertensão arterial (NÚÑEZ-VERGARA et al., 2002). Os anti-hipertensivos estão entre os medicamentos mais comumente prescritos. Diante disso, a qualidade do produto farmacêutico é de vital importância para segurança do paciente. A presença de impurezas pode influenciar a eficácia e segurança dos produtos farmacêuticos. As impurezas e os potenciais produtos de degradação podem provocar mudança química, farmacológica e alterar as propriedades toxicológicas dos medicamentos, tendo um impacto significativo sobre a qualidade e segurança do produto (IVANA et al, 2006). Sem dúvida, um dos maiores desafios das indústrias farmacêuticas, é a produção de medicamentos com qualidade, segurança e eficácia comprovadas, conforme determinam os órgãos sanitários reguladores, atendendo, portanto, as perspectivas de seus consumidores quando se trata de assegurar o restabelecimento da saúde dos indivíduos, seu bem-estar e qualidade de vida (GOODMAN; GILMAN, 2006). A pré-formulação é a primeira etapa do desenvolvimento racional de uma forma farmacêutica e se ocupa da investigação do comportamento físicoquímico de um insumo farmacêutico ativo isoladamente e combinado às outras substâncias presentes na formulação, tendo como objetivo gerar informações 12

que auxiliem o pré-formulador a desenvolver uma forma farmacêutica estável e com características de biodisponibilidade adequadas. Um estudo de préformulação bem elaborado inclui avaliação das propriedades organolépticas, pureza, tamanho, forma e área superficial das partículas, solubilidade, dissociação, parâmetros de absorção, propriedades cristalinas, polimorfismo, análise de estabilidade e interações entre fármaco e carreadores (LACHMAN; LIEBERMAN; KANIG, 2001; ALLEN JUNIOR; POPOVICH; ANSEL, 2007). Adicionalmente, não se pode esquecer que a seleção de carreadores compatíveis com o cumprimento dos objetivos propostos para a forma farmacêutica é de fundamental importância nos estudos de pré-formulação de um medicamento, uma vez que a seleção inadequada de carreadores pode, além de ter um impacto sobre a estabilidade e propriedades físico-químicas e organolépticas do produto final, diminuir a biodisponibilidade do fármaco, comprometendo sua eficácia clínica, ou resultar em fenômeno inverso, aumentando a possibilidade de ocorrência de reações indesejáveis ( MACEDO, 2008). Os estudos na fase de pré- formulação inclui a estabilidade no estado sólido do fármaco isolado e a estabilidade na presença dos carreadores. Estas etapas são realizadas para reduzir ou prevenir a ocorrência de deterioração devida à hidrólise, oxidação e outros processos (STULZER & SILVA, 2006 ). A monitorização da estabilidade dos medicamentos é um dos métodos mais eficazes para avaliação, previsão e prevenção de problemas relacionados à qualidade do produto durante a validade. A segurança e a eficácia também podem ser avaliadas, através do monitoramento da formação de produtos de degradação, que podem gerar perda de atividade terapêutica ou toxicidade (SILVA et al, 2009). No entanto, cada componente presente na formulação, ativo ou não, pode afetar a estabilidade de um produto. Variáveis relacionadas à formulação, ao processo de fabricação, ao material de acondicionamento e às condições ambientais e de transporte podem influenciar na estabilidade do produto, como os fatores externos aos quais o produto está exposto: tempo, temperatura, luz e oxigênio, umidade, material de acondicionamento, microorganismos e 13

vibração, assim como, os fatores relacionados à própria natureza das formulações e, sobretudo à interação de seus ingredientes entre si e ou com o material de acondicionamento resultando em incompatibilidades de natureza física ou química (ANVISA, 2004). A escolha de uma metodologia analítica adequada é de fundamental importância para se proceder ao controle de qualidade de uma substância ativa, como tal, ou sob uma determinada forma farmacêutica. Um método analítico devidamente validado fornece informações confiáveis e interpretáveis sobre a amostra. Nesse sentido, a monitorização da estabilidade dos medicamentos é um dos métodos mais eficazes para avaliação, previsão e prevenção de problemas relacionados à qualidade do produto durante a validade. A segurança e a eficácia também podem ser avaliadas, através do monitoramento da formação de produtos de degradação, que podem gerar perda de atividade terapêutica ou toxicidade (SANTOS, 2008; SILVA et al., 2003). Portanto, esse trabalho propõe a obtenção de um produto intermediário, e com isso estudar as características intrínsecas do fármaco e seus adjuvantes tecnológicos, através das técnicas termoanalíticas e difração de raio x, e avaliar os perfis de dissolução obtidas comparando-os com o fármaco cristalino. 14

2. FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA 2.1. Nifedipino 2.1.1. Propriedades farmacológicas A nifedipino é o éster dimetílico do ácido 1,4-diidro-2,6-dimetilpino -4-(2- nitrofenil)-3,5-piridinocarboxílico, derivado das dihidropiridinas, que atua farmacologicamente por bloqueio de canais de cálcio (LARINI, 2008; PITT, 1997; REVES et al, 1982). Ela foi utilizada inicialmente, no tratamento da angina e atualmente, é também utilizada como agente antihipertensivo (SORKIN et al, 1985; DE LUCIA et al, 2007). A nifedipino liga-se aos canais de cálcio presentes nas células musculares cardíacas e vasculares e inibe o influxo transmembranar de cálcio, resultando em diminuição das contrações musculares e consequente vasodilatação arterial periférica (ROSENDORFF et al, 2007; CROOM et al, 2006). A absorção desse fármaco é quase completa, 90% da dose é absorvida quando administrada oralmente, mas sua biodisponibilidade é reduzida devido ao metabolismo hepático de primeira passagem, em torno de 60 a 75%, além disso, ele liga-se fortemente, as proteínas plasmáticas, de 92 a 98% (GOODMAN & GILMAN, 2006; KOROLKOVAS, 2008; PFIZER, 2003). 2.1.2. Propriedades físico-químicas A nifedipino é um ácido fraco (pka = 3,93) e apresenta-se como um pó cristalino, amarelo, inodoro e insípido, praticamente insolúvel na água (~ 10μg / ml em água a 37 º C), facilmente solúvel na acetona e ligeiramente solúvel no etanol (FRIEDRICH, H. et al, 2005; (FARMACOPÉIA BRASILEIRA, 2010). O nifedipino, exposto à luz do dia e a certos comprimentos de onda da luz artificial, converte-se imediatamente num derivado da nitrosofenilpiridina. A 15

exposição à luz ultravioleta provoca a formação de um derivado da nitrofenilpiridina (FARMACOPÉIA PORTUGUESA VII, 2002). A fórmula estrutural é apresenta na Figura 1. Figura. 1. Fórmula estrutural da Nifedipino C 17 H 18 N 2 O (éster dimetílico do ácido 1,4-diidro-2,6-dimetilpino -4-(2-nitrofenil)-3,5-piridinocarboxílico). Apresentando peso Molecular de 346,33 (USP 34, 2011), e faixa de fusão entre 172 e 175 C, segundo Merck Index (1996). As impurezas que podem se encontradas são: A (R = NO2): dimetil 2,6- dimetil-4-(2-nitrofenil) piridina-3,5-dicarboxilato (análogo da nitrofenilpiridina), B (R = NO): dimethil 2,6-dimethyl-4-(2-nitrosofenyl) piridina-3,5-dicarboxilato (análogo da nitrosofenilpiridine), C: metil 2-(2 nitrobenzilideno)-3-oxobutanoato e D: metil 3-aminobut-2-enoato (FARMACOPÉIA BRITÂNICA,2003). A/B C D 16

Figura. 2 Fórmula estrutural química das impurezas encontradas nas amostras de Nifedipino. 2.2. Dispersão Sólida A primeira descrição de dispersões de sólidos foi de Sekiguchi e Obi, em 1961. Eles observaram que a formulação de misturas eutéticas melhorava a taxa de libertação do fármaco e, consequentemente, a biodisponibilidade de drogas fracamente solúveis em água. Mais tarde, Levy(1963) e Kaning (1964) desenvolvidos sistemas de dispersão sólida, contendo manitol como transportador, através da preparação de dispersões moleculares em vez de utilizar misturas eutéticas. No final dos anos sessenta Simonelli, 1969 e Chiou, 1969 observou-se que as dispersões sólidas, onde o fármaco foi mantida no estado cristalino, não pode ser tão eficaz como a amorfa, pois as primeiras eram mais termodinamicamente estáveis. Portanto, uma segunda geração de dispersões sólidas apareceu, contendo transportadores amorfos em vez de cristalinos. Na terceira geração as dispersões são destinadas a conseguir um maior grau de biodisponibilidade e estabilizar os fármacos pouco solúvel em água, evitando a recristalização da droga (VASCONCELOS et al, 2007). A fraca solubilidade dos fármacos em água e sua baixa taxa de dissolução em fluidos aquosos gastro-intestinais, muitas vezes levam a biodisponibilidade insuficiente (URBANETZ & LIPPOLD, 2005). No campo de produtos farmacêuticos a tecnologia de dispersão sólida (SD S ) é uma das técnicas mais comuns para aumentar temporariamente a solubilidade da droga nos fluidos gastrointestinais, que conduz a uma melhoria na absorção e na biodisponibilidade do fármaco com baixa solubilidade aquosa (YOSHIDA et al, 2012). Dispersões sólidas representam uma útil técnica farmacêutica para aumentar a dissolução, absorção, biodisponibilidade e eficácia terapêutica dos fármacos pouco solúvel em água. Vários mecanismos envolvidos no aumento de solubilidade do fármaco incluem a redução do tamanho de partícula ou 17

tamanho molecular e, e convertem as formas cristalinas do fármaco em forma amorfa (MAESTRELI et al, 2004; VALIZADEH et al, 2007). Vários carreadores hidrófilos, tais como polietilenoglicóis, polivinilpirrolidona, hidróxi-propil-metil celulose, gomas, sacarose, manitol e ureia têm sido investigadas para a melhoria da dissolução e biodisponibilidade de fármacos pouco solúvel (TANTISHAIYAKUL et al, 1999; WEUTS et al, 2005; BARZEGAR-JALALI et al,2012). Também têm sido utilizadas para aumentar a estabilidade química de fármacos em solução ou suspensão (SETHIA & SQUILANTE, 2003). As DS S podem ser definidas como misturas moleculares de fármaco pouco solúvel em água em carreadores hidrofílicos, os quais apresentam um melhor perfil de liberação do fármaco, devido às propriedades dos polímeros utilizados na pré-formulação (VASCONCELOS et al, 2007). Os métodos de fusão e o solvente de evaporação são os dois processos principais para a preparação de dispersões sólidas. Sekiguchi & Obi foram os primeiros a utilizar um processo de fusão consistindo na fusão do fármaco no interior da matriz seguido por arrefecimento e pulverização do produto obtido. No processo de fusão, a mobilidade molecular da transportadora é elevada o suficiente para alterar a incorporação da droga. O método de evaporação do solvente consiste na solubilização da droga e do veículo em um solvente volátil que é mais tarde evaporado. Neste método, a decomposição térmica do fármaco ou do carreador pode ser evitada, uma vez que a evaporação do solvente orgânico ocorre à baixa temperatura. Um processo básico de preparação de dispersões sólidas deste tipo consiste de dissolver o fármaco e o carreador num comum solvente, tal como etanol, clorofórmio ou um mistura de etanol e diclorometano. Diferenças nos processos de evaporação de solvente estão relacionados com o procedimento de evaporação de solvente, o que geralmente incluem secagem à vácuo, aquecimento da mistura numa placa de aquecimento, evaporação do solvente a baixa temperatura, a utilização de um evaporador rotativo, uma corrente de 18

azoto, a secagem por pulverização, liofilização e a utilização de fluido supercrítico (VASCONCELO et al, 2007). 2.2.1 Carreadores Os candidatos ideais para formular uma dispersão sólida de fármacos pouco solúveis são identificados pelas suas propriedades físico-químicas, como o ponto ou entalpia de fusão, parâmetros de solubilidade, coeficiente de partição e diferentes solubilidades durante estudos de pré-formulação e também pelo processo desejado (PAUDEL et al, 2012). A maior parte dos carreadores utilizados para formulações de dispersão sólida são compostos poliméricos hidrófilos que servem principalmente, como inibidor de cristalização através da diminuição da mobilidade molecular da forma amorfa de um fármaco disperso na matriz e, portanto, pode sustentar a solubilidade aumentada, mantendo supersaturação gerada durante a dissolução in vitro e depois a administração por via oral no ambiente gastrointestinal (PAUDEL et al, 2012) Os carreadores, tradicionalmente, utilizados tem sido os solúveis em água como polietilenoglicol (PEG) ou polivinilpirrolidona (PVP) ou materiais com baixo de peso molecular, como os açúcares (CRAIG, 2002). Polietilenoglicol (PEG) São polímeros de óxido de etileno, com a fórmula empírica: HOCH 2 (CH 2 OCH 2 ) m CH 2 OH, onde m representa a média dos números de grupos oxietileno (ROWE, 2009). Figura 3. 19

Figura. 3. Fórmula estrutural dos PEGs (ROWE, 2009). Os PEG s são utilizados como base de pomada; plastificantes; base de supositório; lubrificante para comprimidos e cápsulas e até mesmo, a depender da concentração como co-solvente, dado o baixo ponto de fusão de alguns PEGs (ROWE, 2009). De acordo com Yam e cols.(2011) polietilenoglicóis são polímeros excelentes biocompatibilidade e exibem uma combinação de propriedades hidrofílicas e lipofílicas. Dependendo do seu peso molecular, os polímeros de PEG encontram-se como líquidos viscosos e incolores (peso moleculares inferior a 100 Da) como ceras e sólidos altamente cristalinos (peso molecular inferior de até 10.000.000 Da). Polivilpirolidona (PVP) É um polímero sintético que consiste essencialmente de grupos lineares de 1-vinil-2-pirrolidinona, devidos aos diferentes graus de polimerização resulta em polímeros que de vários pesos moleculares que se diferenciam pela sua viscosidade em solução aquosa (ROWE, 2009). Figura 4. Figura. 4. Fórmula estrutural do PVP (ROME, 2009). 20

Lauril sulfato de sódio (LSS) O LSS é um agente sufactante aniônico utilizado numa ampla gama de formulações farmacêuticas, com propriedade de molhagem excelentes em todo a faixa ph (TAHA,2008). Apresenta-se como um pó branco ou flocos brancos ou creme a marelo pálido, com um toque suave, é um tensoativo, tem sabor amargo e um leve odor de substâncias gordurosas. Figura 5. Figura. 5. Fórmula estrutural do LSS (ROWE, 2009). 2.2.2. Estabilidade das dispersões sólidas O aumento da biodisponibilidade de fármacos pouco solúveis em água, administrado por via oral persiste como um grande desafio no desenvolvimento de medicamentos. A melhoria da solubilidade tem desempenhado um papel de fundamental importância no alcance deste objetivo, tornando esta área de desenvolvimento tecnológica cada vez mais desafiadora (SERAJUDDI, 1999). Além de algumas limitações relacionadas a métodos de preparação, tais como fabricação e aumento na escala do processo de fabricação. A estabilidade física é o mais preocupante problema que afetam as DSs. A forma amorfa do DSs é preferível para aumentar a solubilidade do fármaco. Infelizmente, este estado amorfo é menos estável que o estado cristalino, resultando na recristalização do fármaco no processo de fabricação e nas condições de armazenamento (VASCONCELOS, 2007). No processo de fabricação, ocorre a recristalização subsequente a partir da SD, se o fármaco for dissolvido com solubilidade excessiva num carreador. Em condições de armazenamento propensas à umidade, o fármaco estar sobre um alto risco de 21

molhabilidade molecular, fato que pode levar o estado amorfo a mover-se para nível de energia mais alto, ou seja, a recristalização. A solubilidade e a miscibilidade da droga no polímero estão diretamente relacionados com a estabilização de um fármaco amorfo contra a cristalização (QUIAN, 2010). Os polietilenosglicol (PEGs) são amplamente utilizados como carreadores para as dispersões sólidas por ter baixo ponto de fusão, rápida taxa de solidificação, a capacidade de formar soluções sólidas, baixa toxicidade e baixo custo (BETAGERI & MAKARLA, 1995; CHIOU & RIEGELMANN, 1969; CRAIG, 1990; DOSHI et al., 1999). A capacidade para estabilizar o estado amorfo de drogas devido inibição de recristalização de drogas, bem como uma solidificação rápida e baixa toxicidade favorece os polímeros polivinilpirolidona-acetato de vinilo (PVPVA) e polivinilpirrolidona (PVP) para a preparação de dispersões sólidas (FRIEDRICH, 2004; SHAMBLIN & ZOGRAFI, 1998; YOSHIOKA et al., 1995). A recristalização de DS em dispersões amorfas sólidas pode levar a uma perda da taxa de dissolução e, consequentemente reduziu a biodisponibilidade. A avaliação do risco de uma formulação de dispersão sólida amorfa no início do programa de desenvolvimento não só pode ajudar na orientação de estratégias de desenvolvimento, mas também apontam elementos críticos na formulação final (Kennedy et al,2008). A estabilidade fisicoquímica de uma dispersão sólida depende do nível de interação molecular entre a droga e o veículo. Do ponto de vista da formulação, os seguintes fatores devem ser considerados para alcançar a estabilidade física ótima (GUO et al, 2013). 1. As fases intrínsecas de estado sólido e a estabilidade do DS; 2. As propriedades físico-químicas do transportador, que incluem peso molecular, cristalinidade, ponto de fusão ou temperatura de transição vítrea, hidrofilicidade, higroscopicidade, formação de ponte de hidrogênio, grupo funcional ácido ou base para interação iónica, e impureza; 3. A carga de droga (ou a proporção em peso do fármaco para carreadores) na dispersão sólida. Geralmente maiores estabilidade física pode ser conseguida com menor carga de fármaco. Isso irá minimizar as interações 22

entre as moléculas do fármaco em si para evitar a cristalização de drogas. Deve notar-se que a instabilidade química induzida pela interação com carreadores geralmente é inversamente proporcional à carga de fármaco, onde a pior degradação química é geralmente associada com a baixa carga de fármaco. A estabilidade física e química deve ser avaliada, especialmente para moléculas lábeis; 4. Métodos de fabricação. As transições de fase sólida (isto é, recristalização da forma amorfa) durante a fabricação processos podem ter um efeito significativo no desempenho das dispersões sólidas e as formas de dosagem subsequentes. O monitoramento em tempo real através do NIR, Raman podem beneficiar o desenvolvimento e controle em processo. Além disso, a maioria dos polímeros utilizados em dispersões sólidas pode absorver a umidade depois de prontas, o que pode resultar em separação de fases, crescimento de cristais ou a conversão do estado amorfo para o estado cristalino durante o armazenamento. Isto pode resultar em diminuição da taxa de solubilidade e dissolução (VAN DEN MOOTER et al,2011 ; WANG et al, 2007.) Yang et al. (2010) em seu estudo produziram quatro diferentes dispersões sólidas amorfas Efavirenz para avaliar o efeito de PVP sobre a estabilidade física. Estas dispersões continham 13 %,14%, 15% e 17% de PVP, que foram confirmadas por DSC sendo inicialmente amorfas. Após a secagem por aspersão sólida foram armazenadas na mesma temperatura (72ºC) e UR (Umidade Relativa) (53%). Os dados experimentais mostram uma diminuição na taxa de recristalização com o aumento do teor de PVP. A estabilidade física das formulações de droga é um dos atributos de qualidade que devem ser avaliados e optimizado durante o desenvolvimento farmacêutico. 23

2.3. ANÁLISE TÉRMICA Análise térmica é definida como um conjunto de técnicas que permite medir as mudanças de uma propriedade física ou química de uma substância ou material em função da temperatura ou tempo, enquanto a substância é submetida a uma programação controlada de temperatura (ARAÚJO, 2003). O estudo de pré-formulação é o primeiro passo para o desenvolvimento de uma forma farmacêutica. Porém, antes de transformar um fármaco em forma farmacêutica é necessário que ele seja química e fisicamente caracterizado. Dessa maneira os métodos termoanalíticos vêm sendo utilizados como ferramentas importantes na etapa de pré-formulação, oferecendo dados que permitem caracterizar a compatibilidade fármaco-fármaco, fármacoexcipiente, determinação de pureza, polimorfismo, bem como avaliar também a estabilidade de possíveis formulados (GIRON, 1997; GLASS, 2004). A análise térmica é usada na indústria farmacêutica como uma técnica rápida e confiável para o controle de qualidade e para o desenvolvimento de novos fármacos. Ela é empregada na caracterização térmica de fármacos, na determinação de pureza, em estudos de compatibilidade de formulações farmacêuticas, na identificação de polimorfos, na avaliação de estabilidade e em estudos de decomposição térmica de fármacos e medicamentos (SOUZA, 2001; MACÊDO, 2002; SILVA, 2007; OLIVEIRA, 2010). Dentre as técnicas termoanalíticas utilizadas na análise térmica podemos citar: a termogravimetria (TG), a calorimetria de varredura diferencial (DSC) e a análise térmica diferencial (DTA). 2.3.1. Termogravimetria (TG) A termogravimetria é uma técnica em que se analisa a mudança de massa de uma substância em função da temperatura ou do tempo, em atmosfera controlada, à medida que a temperatura da amostra varia (em geral, linearmente com o tempo). Dados obtidos de uma curva de TG fornecem informações sobre a estabilidade térmica da amostra, dos seus produtos de 24

decomposição e sobre a cinética de decomposição dos processos físicoquímicos que ocorrerem na amostra (HATAKEYAMA et al, 2002; SKOOG et al, 2002). Os métodos termogravimétricos são classificados da seguinte forma: Dinâmico ou Não-Isotérmico: A perda de massa é registrada, de forma contínua, à medida que a temperatura aumenta. Este método tem sido utilizado para o estudo de decomposição térmica (MEDEIROS, 2001). É um método frequentemente utilizado na caracterização do comportamento térmico de materiais e substâncias, além disso, permite determinar parâmetros da cinética de reações heterogêneas: ordem de reação, energia de ativação e o fator de frequência (DOGAN, et al.) Isotérmico: A variação de massa da amostra é registrada em função do tempo, mantendo-se as temperaturas constantes (YOSHIDA, 1993). Esse método possibilita o cálculo da energia de ativação das reações ocorridas, quando o experimento é repetido em diferentes temperaturas (MEDEIROS, 2001). Quase-isotérmico: No instante em que se inicia à perda de massa da amostra ( m 0), a temperatura é mantida constante até que a massa se estabilize novamente ( m = 0), o aquecimento é então, reiniciado e este procedimento pode ser repetido em cada etapa de decomposição (CONCEIÇÃO, 2000). 2.3.2. Análise térmica diferencial (DTA) A análise térmica diferencial (DTA) é uma técnica de medição contínua das temperaturas da amostra e de um material de referência termicamente inerte, à medida que ambos são sujeitos a um gradiente de temperatura controlada, assim são registradas a diferença entre a temperatura da referência e da amostra, em função da temperatura ou do tempo, de forma linear (IONASHIRO, 2004; SKOOG et al, 1998). Uma pequena quantidade da amostra e uma substância inerte de referência são colocadas dentro de cadinhos de alumína localizados acima dos 25

termopares da amostra e da referência, onde o forno é aquecido eletricamente (SKOOG et al, 1998). O DTA é utilizado na determinação do comportamento térmico e composição de produtos industrializados. Como também, na formação de diagramas de fase e no estudo de transições de fase. Esse método também fornece um caminho simples e preciso para determinação do ponto de fusão, ebulição e decomposição de compostos orgânicos (SKOOG et al, 1998). 2.3.3 Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC) A DSC é uma técnica pela qual se mede a diferença de energia fornecida à amostra e a um material de referência, termicamente inerte, em função da temperatura, enquanto a substância e a referência são submetidas a uma programação controlada de temperatura. Essas duas últimas técnicas possibilitam acompanhar e obter dados quantitativos quanto às alterações físicas ou químicas da amostra, tais como: mudança de estado físico, transições de fase ou reações de desidratação e de decomposição (MATOS et al., 2009; ALVES et al., 2010). Dependendo do método de medida e do tipo de instrumentação para obtenção de dados de DSC podem ser distinguidos dois procedimentos: 1. DSC de energia compensada - Mede-se a energia necessária para manter nula a diferença de temperatura entre a amostra e o material de referência em função do tempo ou temperatura (THOMAS, 2002). Nela são utilizados dois fornos individuais (SKOOG, 1998). 2. DSC de fluxo de calor utiliza um simples forno. As diferenças no fluxo de calor na amostra e referência são medidas em função da temperatura da amostra (SKOOG, 1998). Os dois métodos fornecem a mesma informação, porém os instrumentos são fundamentalmente diferentes (CLÃS et al, 1999). Na indústria farmacêutica a DSC é aplicada na investigação de pureza de produtos, identificação de isômeros ópticos, ocorrência de polimorfismo e formação de eutéticos (THOMAS, 2002). 26

O DSC permite a avaliação rápida de possíveis interações entre componentes da formulação de acordo com a aparência, mudança, ou o desaparecimento dos picos endotérmico ou exotérmico e através das variações nos valores de entalpia das misturas fármaco-excipiente (FELIX et al, 2009). 2.4. DISSOLUÇÃO Dissolução pode ser definida como um processo pelo qual um fármaco é liberado de sua forma farmacêutica e se torna disponível para ser absorvido pelo organismo. O ensaio de dissolução é um teste físico de natureza destrutiva, no qual o fármaco passa para a forma solúvel a partir da forma farmacêutica intacta ou de seus fragmentos e partículas formados durante o teste, no caso de cápsulas e comprimidos. Portanto, a dissolução é uma importante condição para absorção sistêmica do fármaco, podendo afetar a biodisponibilidade do mesmo. (ABDOU, 1995). As características inerentes ao próprio fármaco como tamanho e porosidade da partícula, dispersibilidade e solubilidade no meio de dissolução, bem como a natureza dos carreadores que compõe a formulação e as técnicas de fabricação empregada na produção da forma farmacêutica afetam a dissolução do fármaco e, conseqüentemente, sua biodisponibilidade e bioequivalência (AUTON, 2005). Desta forma evidencia-se a importância da avaliação do desempenho das formas farmacêuticas sólidas, realizando testes in vitro que permitam visualizar a sua capacidade de liberar o fármaco veiculado em função do tempo (PORTA, 2002; ANSEL, 2007). A dissolução de medicamentos envolve pelo menos dois passos consecutivos: liberação do soluto da matriz e solubilização das partículas do ativo no meio. As propriedades coesivas da formulação representam um importante papel na primeira etapa da dissolução. Para as formas de dosagem sólidas essas propriedades incluem a desintegração, a erosão e a desagregação (BROWN, 2004). Na fase de solubilização das partículas do ativo, as propriedades físicoquímicas do soluto como, forma química (sal, ácido livre, base livre) e forma 27

física (amorfos, polimorfos, tamanho de partícula primário) representam um importante papel para a dissolução. Se essa fase é limitante, a velocidade de dissolução é controlada pela dissolução intrínseca do fármaco, como é o caso da maior parte dos ativos pouco solúveis administrados em formulações de liberação imediata (BROWN, 2004). 2.5. DIFRAÇÃO DE RAIOS X DE PÓ Os raios x são uma forma de radiação eletromagnética com altas energias e pequenos comprimentos de onda, equivalentes ao espaçamento atômico de materiais sólidos (CALLISTER, 2001). A aplicação desse princípio fez com que a difração de raios X seja o método de maior importância na elucidação de estruturas de produtos com estrutura complexa, pois fornece um meio conveniente e prático para identificação qualitativa e quantitativa de substâncias cristalinas, sendo capaz de fornecer informações sobre os compostos presentes em uma amostra sólida, diferenciando seus possíveis polimorfos (SKOOG; HOLLER; NIEMAN, 2002). Destaca-se a grande confiabilidade dos resultados obtidos através dessa técnica já que o perfil de difração obtido é característico para cada fase cristalina (ALBERS et al., 2002). Assim, quando um feixe de raios x incide sobre um átomo isolado, ou íon, elétrons deste átomo serão excitados e vibrarão com a mesma frequência do feixe incidente, emitindo raios x em todas as direções espalhamento de raios x. O fóton do raio-x muda a trajetória, mas conserva a energia e a fase do fóton do elétron incidente (PADILHA, 2000). Se um metal é bombardeado por elétrons acelerados, ocorre emissão de raios x. As radiações mais utilizadas em difração de raios x são as emitidas pelos metais: Cu, Fe, Co, Cr e Mo. Os comprimentos de onda mais utilizados estão na faixa de 0,5 a 3,0 Å, da mesma ordem de grandeza dos espaçamentos interplanares dos cristais, para que possa ocorrer interferência. (PADILHA, 2000). 28

3. OBJETIVOS 3.1. Objetivo geral Avaliar os parâmetros de estabilidade das dispersões sólidas de nifedipino obtidos por secagem por aspersão através de análise térmica e difração de raios-x, e comparar o perfil de dissolução entre as dispersões e o fármaco cristalino. 3.2. Objetivos específicos Obtenção das dispersões sólidas pelo processo de secagem por aspersão utilizando diferentes carreadores. Avaliar a compatibilidade fármaco-carreadores e a estabilidade das dispersões sólidas, utilizando a técnica de DTA e TG. Analisar as dispersões sólidas através da difração de raios X. Quantificar a liberação do fármaco na dispersão sólida, comparado com o fármaco puro pela técnica de dissolução. 29

4. METODOLOGIA 4.1. MATERIAIS Nifedipino (adquirida do fornecedor Galena Importadora) Química e Farmacêutica (Lote 809033, Brasil), Lauril sulfato de sódio (LSS) lote: G21626 (USA), a polivinilpirrolidona (PVP k30) lote: M-080606, os polietilenoglicóis (PEG 400) lote: ALL 27219(Brasil), PEG 6000 lote: NR: Q-1102 (México) e aerosil lote 3157052414 (Alemanha). 4.2. MÉTODOS 4.2.1. Preparação das dispersões sólidas As dispersões sólidas de nifedipino foram preparadas com diferentes carreadores (LSS, PVP, PEG 400 e PEG 6000) obtidas pelos processos de secagem por aspersão (Lab Plant Technology, modelo: SD-05). Pesou-se 8 g de nifedipino, 8 g do surfactante e 4 g de aerosil. O surfactante foi dissolvido em 300 ml de uma solução etanol:água (1:1), depois foi adicionado o nifedipino e por ultimo o aerosil. No processo de secagem utilizou um fluxo de 245 ml/h, temperatura de entrada 140 ± 2 C, temperatura de saída 70 ± 2 C e pressão de 18 bar. As DS s formadas foram: NFD: LSS: AER; NFD: PVP: AER; NFD: PEG6000: AER; NFD: PEG400: AER. 4.2.2. Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC) e DSC- Fotovisual A caracterização do insumo farmacêutico ativo foi inicializada pela obtenção das curvas de DSC, sendo obtida em triplicatas, utilizando um equipamento Shimadzu, modelo DSC-50. Utilizou-se nesses experimentos uma massa de 2 mg do nifedipino que foi acondicionada em um cadinho de alumínio fechado sob atmosfera de nitrogênio com o fluxo de 50 ml.min 1. As curvas foram obtidas utilizando uma faixa de temperatura de 25-250 C e com 30

razões de aquecimento de 2, 5, 10, 20 e 40 C.min -1. O instrumento foi calibrado usando o índio (156,6 do ± 0,3 C) como padrão, sendo o sinal do fluxo de calor calibrado pelo calor de fusão do índio (28,59 ± 0,3 J.g -1 ). Adicionalmente, procedeu-se a realização do DSC-fotovisual do nifedipino através do calorímetro da Shimadzu, modelo DSC-50, acoplado a um sistema fotovisual da Shimadzu com câmara da Sanyo, modelo VCC-D520, conectado a um microscópio Olympus modelo SZ-CTV60. A amostra foi acondicionada em uma panelinha de alumínio e submetida ao aquecimento, com variação de temperatura definido na faixa de 25 a 250ºC, com uma razão de aquecimento de 5ºC.min -1, sob as mesmas condições do fluxo de nitrogênio do DSC convencional. As imagens registradas foram capturas, em tempo real, pelo programa Asymetrix DVP 4.0 para observar as transições de fase na amostra. Nas curvas calorimétricas foram observados os processos endotérmicos e exotérmicos envolvidos na degradação térmica da amostra. Para cada processo foram definidos a temperatura e o calor de reação envolvida. Além de possibilitar a determinação da faixa de fusão da amostra. 4.2.3. Análise Térmica Diferencial (DTA) As curvas DTA foram obtidas em triplicatas utilizando um analisador térmico diferencial de marca Shimadzu, modelo DTA-50, em atmosfera de nitrogênio de 50 ml.min -1, com massa de 8 (± 0,1) mg, acondicionadas em um cadinho de alumina até 900 C. As curvas do nifedipino foram obtidas nas razões de aquecimento de 10, 20,40 C.min -1. Já, as curvas de DTA das dispersões sólidas foram obtidas na razão de aquecimento 10 C.min -1 e dos carreadores puros foram obtidos na razão de aquecimento 10 C.min -1 ate 250 C e 40 C.min -1 ate 900 C. Quando necessário, o equipamento foi calibrado através do ponto de fusão e entalpia do padrão Índio, 156,6 C ± 0,3 e 28,58 J/g ± 0,3, respectivamente, e do ponto de fusão do padrão Zinco (419,6 C ± 0,3), sob as mesmas condições das amostras. 31

Para as curvas de DTA foram observados os processos endotérmicos e exotérmicos envolvidos na degradação térmica da amostra. Para cada processo foi definido a temperatura e o calor de reação envolvidos. O DTA é uma técnica que permite observar diversas situações de interações físicas e químicas entre o fármaco e os carreadores. 4.2.4. Termogravimetria (TG) As curvas de TG/DTG dinâmicas foram obtidas utilizando uma termobalança Shimadzu, modelo TGA 50H, na atmosfera de ar sintético e nitrogênio, com fluxo de 20 e 50 ml.min -1, respectivamente, até 900 C. A massa utilizada foi de 5,0 mg (± 0,003) que foi colocada em cadinho de alumina. As curvas do nifedipino foram realizadas com razões de aquecimento de 10, 20 e 40 C.min -1 e das dispersões sólida só na razão de aquecimento de 10 C.min -1. O equipamento TG foi calibrado usando oxalato de cálcio monoidratado. As curvas foram analisadas pelo programa TASYS da Shimadzu para analisar os estágios de perda de massa. As curvas TG isotérmicas desse ingrediente farmacêutico ativo foram obtidas utilizando uma termobalança Shimadzu, modelo TGA-50H, na atmosfera de ar sintético e nitrogênio, com fluxo de (20 + 50) ml.min -1, nas temperaturas 180,190, 200, 210, 220ºC, com durante um período de 2 horas. Tanto para as curvas dinâmicas como para as isotérmicas foram feitas três repetição do experimento. As curvas termogravimétricas dinâmicas foram analisadas utilizando o método de investigação da cinética pelo modelo de Ozawa, obtendo os parâmetros cinéticos do fármaco, tais como, energia de ativação (Ea), fator de frequência (A) e ordem da reação (n). A análise da cinética foi realizada por meio do programa de análise cinética de TG instalado no próprio sistema de aquisição de dados da Shimadzu. Para as curvas termogravimétricas isotérmicas, utilizou-se outro modelo de cinética, sendo adotado o modelo de Arrhenius, a fim de determinar os 32

parâmetros cinéticos [ordem de reação (n) e constantes de velocidade de decomposição (k)] e avaliar a estabilidade do fármaco. Nesse método utilizamos a equação de Arrhenius para avaliar os dados experimentais pelo modelo de ajuste. 4.2.5. Dissolução do fármaco Nifedipino e dispersões sólidas Estudo de dissolução in vitro foi realizado com o nifedipino e suas dipersões sólidas utilizando o aparelho USP tipo II pelo método de dispersão de pó. O ensaio de dissolução foi realizado nas condições de a 37 ± 0,5ºC e rotação de 100 rpm, utilizando Dissolutor Hanson Research, equipado com 3 cubas e um volume de 900 ml dos meios de dissolução: USP tampão fosfato ph 7,5 e USP fluido gástrico sem enzima ph 1,2 com 0,5% (m/v) de lauril sulfato de sódio. Inicialmente, pesou-se 20 ± 0,02 mg de NFD e 50 ± 0,02 mg de cada dispersão sólida, que é o equivalente a 20 mg de nifedipino, que foram transferidas para as cubas. Em intervalos de 5, 10, 15, 20, 30, 45 e 60 minutos eram retiradas alíquotas de 3 ml e filtradas através de filtro de membrana de 0,45 μm. As amostras foram analisadas utilizando um Espectrofotômetro UV- Visível (Shimadzu, UVmini 1240), com leituras de 235 nm por método de correção em branco. 4.2.6. Difração de Raios X de Pó Os espectros de DRX do nifedipino e das dispersões sólidas foram obtidos utilizando o difratômetro de raios X D5000 modelo (Siemens Bruker AXS-CuKα, geometria θ-20, 40KV 30mA, tamanho do passo de 0,02º2θ - 2θ 2/min, fenda principal = 2mmx12mm e recebimento = 0,2mmx12mm, com monogromador de grafite) utilizando a metodologia de difração de raios X de pó. 33

5. RESULTADOS E DISCUSSÃO 5.1. Caracterização térmica do nifedipino 5.1.1. Dados Calorimétricos (DSC) As curvas de DSC do nifedipino (Figura 6) mostrou dois processos endotérmicos. O primeiro processo endotérmico inicia-se em 95,5ºC, cujo pico ocorre em 98,5ºC, com calor de reação -0,6 J/g, que possivelmente, corresponde à perda de água não ligada. O segundo processo se inicia em, aproximadamente, 174,5ºC, com pico máximo em 175,9 ºC e calor de reação - 101,1 J/g, associado ao processo de fusão do fármaco. Esses resultados evidenciam mudança na temperatura de fusão com deslocamento para temperaturas maiores, à medida que se aumento a razão de aquecimento do processo de acordo com a Tabela 1. Figura 6. Curvas calorimétricas do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 2, 5, 10, 20 e 40 C.min -1 Tabela 1. Variação da temperatura do pico, onset e endset de pico de fusão do nifedipino nas razões estudadas. 34

Razão de aquecimento ( C.min-1) Pico ( C) Onset ( C) Endset ( C) 2 175,9 ± 0,1 174,5 ± 0,1 177 ± 0,01 5 176,5 ± 0,1 174,4 ± 0,01 178,6 ± 0,1 10 177,7 ± 0,5 175 ± 0,4 182,1 ± 0,7 20 178,9 ± 0,4 175,3 ± 0,2 187,6 ± 0,3 40 181,6 ± 0,4 175,5 ± 0,3 206,5 ± 0,5 * Os valores descritos representam à média (X) ± desvio padrão (DP) Os dados de DSC-fotovisual possibilitaram a visualização em tempo real das mudanças físicas e química que sofre o nifedipino. A primeira imagem (Figura 7 foto TA) mostra o fármaco na temperatura ambiente sem alterações visíveis. Em 175,4ºC foi observado o início da mudança da fase sólida para a fase líquida do fármaco e sua total liquefação em 175,8 ºC. A 236,3 ºC observou a vaporização total da amostra. Figura 7. Imagens do DSC-fotovisual do nifedipino. 5.1.3. Estudos Térmicos Diferenciais (DTA) O nifedipino foi submetido a um programa de temperatura nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40 Cmin -1 até a temperatura de 900 C em um analisador térmico diferencial. As curvas térmicas diferenciais podem ser visualizadas na Figura 8. 35

Fig. 8. Curvas de DTA do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40ºC.min -1 Nota-se que o fármaco apresentou comportamento térmico semelhante tanto em DSC como DTA, com o pico de fusão bem definidos. Sendo observado um comportamento térmico variável à medida que aumenta a razão de aquecimento (Tabela 2). Tabela 2. Dados das curvas térmicas diferenciais do pico de fusão do fármaco nifedipino nas razões de aquecimento de 10, 20 e 40 C.min -1 Razão de aquecimento ( C.min -1 ) 10 20 30 Pico ( C) 175,5 ± 0,2 177,6 ± 0,3 180,0 ± 0,1 Onset ( C) 171,6 ± 0,6 172,2 ± 0,5 172,4 ± 0,4 Endset ( C) 180,92 ± 0,3 187,7 ± 1,2 200,9 ± 0,47 Calor de reação (J/g) -98,84 ± 4,18-105,54 ± 1,4-102,48 ± 9,7 * Os valores repesentam a média ± o desvio padrão 36