Desenvolvimento de fungos em Tifton 85 submetido à diferentes métodos de desidratação

Desenvolvimento de fungos em Tifton 85 submetido à diferentes métodos de desidratação Francieli Batista Silva 1, Alex Sérgio Lazzaretti Vogt 2, Deise Dalazen Castagnara 3, Marcela Abbado Neres 4, Loreno Egidio Taffarel 1, Perecles Brito Batista 5 1 Discentes do curso de Pós graduação em Zootecnia- Universidade Estadual do Oeste do Paraná (UNIOESTE). e-mail: francieli_zoo@yahoo.com.br, loreno.taffarel@gmail.com 2 Zootecnista formado pela UNIOESTE- Marechal Cândido Rondon- PR. e-mail: alexsergio_zoo@yahoo.com.br 3 Discente do curso de Pós Graduação em Agronomia- Universidade Estadual do Oeste do Paraná (UNIOESTE). e-mail: deisecastagnara@yahoo.com.br 4 Docente do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Estadual do Oeste do Paraná (UNIOESTE). e-mail: mabbadoneres@yahoo.com.br 5 Doutorando em Zootecnia UFPB/Areia. perecles.batista@hotmail.com Resumo: O experimento objetivou avaliar as taxas de desidratação, e a ocorrência de fungos no feno de capim-tifton 85 sob diferentes métodos de desidratação. O experimento foi instalado no campo de produção de feno implantado em 2004 com Cynodon sp. cv. Tifton 85 e possui uma área de 1,3 ha, e tem sido manejado exclusivamente para a produção de feno o corte se deu com 42 dias de crescimento quando as plantas apresentavam 35 cm de altura. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 3 com quatro métodos para a desidratação do feno e três períodos de avaliação (antes do corte, no momento do enfardamento e após 30 dias de armazenamento), com seis repetições. Os gêneros de fungos observados no presente estudo foram Aspergillus, Penicillum, Fusarium, Bipolaris, Cladosporium e Rhizopus. Para a população total de fungos houve efeito significativo dos métodos de secagem, dos tempos de armazenamento e da interação. A desidratação do Tifton 85 proporciona produção de feno para armazenamento por período não superior a 30 dias com adequada sanidade para fornecimento aos animais. Para períodos superiores de armazenamento são necessários novos estudos. Palavras chave: Feno, Aspergillus, Fusarium, Penicilium, Bipolaris Development of fungi in Tifton 85 subjected to different methods of dehydration Abstract: The experiment aimed to assess the rates of dehydration, the chemical composition and occurrence of fungi in hay Tifton 85 under different methods of dehydration. The experiment was a field of hay production in 2004 implanted with Cynodon sp. cv. Tifton 85 and has an area of 1.3 ha and has been managed exclusively for the production of hay and the cut was made with 42 days of growth when the plants were 35 cm tall. The experimental design was completely randomized factorial 3 x 4 with four methods for the dehydration of hay and three periods (before the court at the time of baling and after 30 days of storage), with six replicates. The genera of fungi observed in this study were Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Bipolaris, Cladosporium and Rhizopus. For the total population of fungi was no significant effect of drying methods, the storage time and interaction. Dehydration of Tifton 85 hay provides storage for a period not exceeding 30 days with proper sanitation to animal feeding. For longer periods of storage further studies are needed. Keywords: Hay, Aspergillus, Fusarium, Penicillium, Bipolaris Introdução Forragens conservadas como feno e silagem podem ter seu valor alimentício bastante alterado em razão dos procedimentos adotados para a sua produção e conservação e dos fenômenos químicos e microbiológicos que ocorrem no processo (Jobim et al. 2007). Para Reis et al. (2001), além da espécie e idade das plantas forrageiras, os principais fatores para obtenção de um produto de alta qualidade são: o manejo de corte, que visa uma desidratação e o conhecimento técnico para superar os condicionantes apresentados pelos fatores ambientais. Esses fatores interferem diretamente na qualidade bromatológica e sanitária do feno, bem como nas perdas no processo de produção (Domingues, 2009). Muck & Shinners (2001) indicam a necessidade de pesquisas em: compreender os processos que afetam a qualidade dos

fenos durante a produção e armazenamento e também desenvolver meios práticos para reduzir as perdas e aumentar a qualidade. Segundo Rotz (1995), a maioria das perdas ocorre dentro de 30 dias de armazenamento. A população de fungos sofre alteração acentuada havendo diminuição daqueles gêneros típicos de campo como Fusarium e Cladosporium e aumento de Aspergillus e Penicillium de maior ocorrência durante o armazenamento (Hlodversson e Kaspersson, 1986). O uso de segadeiras condicionadoras é amplamente utilizado e a aquisição pelos produtores vem crescendo a cada ano, no intuito de reduzir os riscos de perdas por ocorrência de chuvas através da aceleração do processo de desidratação. Neste sentido, o experimento objetivou avaliar as taxas de desidratação, e ocorrência de fungos no feno de capim-tifton 85 sob diferentes métodos de desidratação. Material e Métodos O experimento foi conduzido em condições de campo, na Fazenda Experimental Antônio Carlos dos Santos Pessoa pertencente à Universidade Estadual do Oeste do Paraná, campus de Marechal Cândido Rondon; possuindo como coordenadas geográficas latitude 24 o 33 40 S, longitude 54 o 04 12 W e altitude de 420 m. O clima local, classificado segundo Koppen é do tipo Cfa, subtropical com chuvas bem distribuídas durante o ano e verões quentes. As temperaturas médias do trimestre mais frio variam entre 17 e 18 C, do trimestre mais quente entre 28 e 29 C e a anual entre 22 e 23 C. Os totais anuais médios normais de precipitação pluvial para a região variam de 1.600 a 1.800 mm, com trimestre mais úmido apresentando totais variando entre 400 a 500 mm (IAPAR, 2008). Durante o crescimento e secagem das plantas as condições climáticas foram favoráveis. O experimento foi instalado no campo de produção de feno implantado em 2004 com Cynodon sp. cv. Tifton 85 e possui uma área de 1,3 ha, e tem sido manejado exclusivamente para a produção de feno e o corte se deu com 42 dias de crescimento quando as plantas apresentavam 35 cm de altura. O corte da área experimental foi realizado às 14:00 hs do dia 29/03/2010 com auxílio de segadeira rotativa. O condicionamento foi realizado duas horas após o corte com auxílio de condicionadora tratorizada com batedores de dedos livres, enquanto as viragens foram realizadas nos tempos 17 e 23 h após o corte com auxílio de ancinho tratorizado. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 3 com quatro métodos para a desidratação do feno e três períodos de avaliação (antes do corte, no momento do enfardamento e após 30 dias de armazenamento), com seis repetições. As amostras foram coletadas segundo os tempos e os tratamentos estipulados, e posteriormente foram submetidas à secagem em estufa com ventilação forçada e mantidas sob temperatura de 50ºC por 72 horas para secagem. Após a secagem as amostras foram moídas em moinho tipo Willey, com peneira de 30 mesh, com posterior avaliação das populações de fungos. Os fungos foram isolados por indução de crescimento do micélio em meio de cultivo BDA (200 g de batata, 20 g de dextrose, 15 g de ágar e 1000 ml de água destilada), por esporulação induzida ou por isolamento direto dos sinais (estruturas reprodutivas) do patógeno a partir das amostras coletadas (Fernandez, 1993; Menezes & Silva-Hanlin, 1997). A partir de observação em microscópio estereoscópico (lupa), foram preparadas lâminas semipermanentes de todas as estruturas fúngicas encontradas, tanto no material sintomático como em meio de cultivo. Estas estruturas foram transferidas, com auxílio de agulha ou estilete para lâmina de microscopia com corante azul algodão de lactofenol, cobertas com lamínula, seladas com esmalte e observadas em microscópio ótico para identificação do fungo, com auxílio de chaves de identificação específicas (Barnett & Hunter, 1987; Guarro et al., 1999; Samson et al., 1995). Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste Tukey ao nível de 5% de probabilidade. Resultados e Discussão Os gêneros de fungos observados no presente estudo foram Aspergillus, Penicillum, Fusarium, Bipolaris, Cladosporium e Rhizopus. Para a população total de fungos houve efeito significativo dos métodos de secagem, dos tempos de armazenamento e da interação (P<0,01). Tanto para os valores médios dos tempos de avaliação, quanto para o desdobramento dos tempos de avaliação para cada método de secagem, observou-se maior

população de fungos no feno após o armazenamento (Tabela 1). Ao serem comparados os métodos de secagem, houve diferença significativa entre os mesmos somente para os valores médios e no feno após o armazenamento, com ocorrência de menor população de fungos no feno submetido à dois condicionamentos. Esse resultado é devido ao maior teor de matéria seca do feno proporcionado por este método de secagem, que ao provocar injúrias aos colmos, favoreceu a aceleração da taxa de desidratação na etapa final de desidratação, quando a remoção da umidade é mais lenta, por se fazer através da cutícula (Moser, 1995). A utilização dessa técnica proporcionou um feno com maior teor de matéria seca no enfardamento, limitando o desenvolvimento dos fungos. Resultados semelhantes foram observados por Nascimento et al. (2000), que ao estudarem o desenvolvimento de fungos no feno de alfafa submetido a diferentes métodos de desidratação, constataram que houve maior ocorrência de fungos do material que sofreu desidratação mais lenta e com menor incidência de radiação solar. Para a população de Fusarium houve efeito significativo dos métodos de secagem (P<0,05) e da interação dos fatores (P<0,01), sem significância para os tempos de armazenamento (P>0,05). Apesar da grande variação observada para a população de Fusarium entre os tratamentos estudados (CV=42,72%), ficou clara a tendência de uma menor ocorrência desse fungo no material com maior teor de umidade, principalmente após o armazenamento. Esse resultado pode estar relacionado com a competição ou com o parasitismo que ocorre entre as próprias espécies de fungos dado um mesmo ambiente. O desenvolvimento excessivo de gêneros favorecidos pela umidade pode ter inibido o desenvolvimento de fungos do gênero Fusarium. Já o fenômeno de parasitismo já havia sido relatado por Nascimento et al. (2000), e segundo os autores, esse fenômeno pode ser responsável pela mudança nas populações de fungos ao longo de períodos de armazenamento. Para a população de Bipolaris houve efeito significativo apenas da interação dos fatores (P<0,05), com menor ocorrência de fungos no momento do enfardamento para os métodos de secagem com uso da condicionadora, e após o armazenamento quando foram utilizadas duas viragens com ancinho. No feno submetido à apenas uma viragem, a população desse gênero de fungos se manteve constante ao longo dos tempos estudados (Tabela 1). A população de Cladosporium encontrada no feno estudado diferiu estatisticamente apenas entre os tempos de armazenamento estudados (P<0,01), com menor população após o armazenamento (Tabela 1). Os resultados são coerentes com fenômeno descrito por Nascimento et al. (2000). Segundo o autor, Cladosporium representa um gênero de fungos saprófitas, que tendem a desaparecer com o decorrer do armazenamento. Os resultados obtidos para a ocorrência total de isolada de fungos no presente trabalho são coerentes com outros resultados, pois segundo Hlodversson e Kaspersson (1986), ocorre acentuada alteração na população de fungos com o processo de fenação, havendo diminuição daqueles gêneros típicos de campo como Fusarium e Cladosporium e aumento dos gêneros típicos de armazenamento. Ainda segundo Gregory et al. (1963), durante a secagem à campo há a ocorrência de uma população bem diversificada de microorganismos, alguns vivendo no ar, na planta e no solo, e essa diversidade de propágulos presentes sugere que diferentes tipos de microflora podem se desenvolver mais tarde, de acordo com as condições que prevalecerão nos fardos ou medas em qualquer período. Também no trabalho de Lacey (1975) com gramíneas nativas, foi observada grande variedade de inóculos. A secagem lenta permite a colonização dos saprófitas, com predominância normal de Cladosporium. Apesar da ocorrência de fungos dos gêneros Aspergillus, Penicillum e Rhizopus, os fenos obtidos podem ser considerados de boa qualidade, pois as populações desses fungos não foram expressivas. Os fungos de armazenamento, como o Aspergillus, normalmente se desenvolvem em fenos com diferentes conteúdos de umidade, podendo servir como indicador biológico das condições de armazenamento (Kaspersson et al., 1984), e sua quantificação em forragens conservadas é fundamental, devido ao mesmo representar um potente produtor de micotoxinas (Moser, 1980).

Tabela 1. População total de fungos e população dos gêneros observados com maior freqüência no feno de Tifton 85 submetido à diferentes métodos de desidratação, antes do corte, no momento de enfardar e após 30 dias de armazenamento Tratamento Total (10 2 ) Fusarium (10 2 ) Corte Enfar Armaz Média Corte Enfard Armaz Média 1Cond+1Viragem 1,43aB 1,43aB 2,39aA 1,75a 1,09aAB 0,74aB 1,30aA 1,04a 2Cond+1Viragem 1,40aB 1,27aB 1,63bA 1,43b 0,97aA 0,96aA 1,05abA 0,99ab 1viragem 1,31aB 1,53aB 2,54aA 1,80a 0,62aA 1,09aA 0,71bcA 0,81ab 2virages 1,34aB 1,48aB 2,50aA 1,77a 0,87aA 0,94aA 0,28cB 0,69b Médias 1,37B 1,43B 2,27A 0,89A 0,93A 0,83A CV% 11,05 42,72 Bipolaris (10 2 ) Cladosporium (10 2 ) 1Cond+1Viragem 0,89aA 0,48aB 0,55abAB 0,64a 0,72aA 0,43bA 0,56aA 0,57a 2Cond+1Viragem 0,54aAB 0,35aB 0,85aA 0,58a 0,78aA 0,79abA 0,56aA 0,71a 1viragem 0,53aA 0,74aA 0,40bA 0,56a 0,76aAB 0,94aA 0,44aB 0,71a 2virages 0,67aAB 0,76aA 0,28bB 0,57a 0,68aAB 0,95aA 0,25aB 0,63a Médias 0,66A 0,58A 0,52A 0,74A 0,78A 0,46B CV% 48,79 48,21 *Valores seguidos de mesma letra maiúscula na linha e minúscula na coluna, não diferem entre si pelo teste Tukey a 5%. Conclusões A desidratação do Tifton 85 submetido a uma ou duas viragens com ancinho ou a um ou dois condicionamentos com condicionadora de dedos livres proporciona produção de feno para armazenamento por período não superior a 30 dias com adequada sanidade para fornecimento aos animais. Para períodos superiores de armazenamento são necessários novos estudos. Literatura citada BARNETT, H.L., HUNTER B.B. 1987. Illustrated genera of imperfect fungi. 4 ed., Macmillan Publishing Company. 241p. DOMINGUES, J.L. Uso de volumosos conservados na alimentação de eqüinos. Revista Brasileira de Zootecnia, v.38, supl., p.259-269, 2009. FERNANDEZ, M.R. Manual para Laboratório de Fitopatologia. Passo Fundo: EMBRAPA-CNPT, 1993. 128p. GREGORY, P.H., LACEY, M.E., FESTENSTEIN, G.N. et al.1963. Microbial and biochemical changes during the moulding of hay. J. Gen. Microbial., 33(1):147-174. GUARRO, J.; GENÉ, J.; STCHIGEL, A.M. Developments in fungal taxonomy. Clinical Microbiology Reviews, v.12, n.3, p.454-500, 1999. HLODVERSSON, R., KASPERSSON, A. Nutrient losses during deterioration of hay in relation to changes in biochemical composition and microbial growth. Animal Feed Science Technology, v.15, n.2, p.149-165, 1986. INSTITUTO AGRONÔMICO DO PARANÁ -IAPAR. Cartas Climáticas do Paraná. 2006. Disponível em: <http://200.201.27.14/site/sma/cartas_climaticas/classificação_climaticas.htm>. Acesso em: 03 set. 2008. JOBIM, C.C.; NUSSIO, L.G.; REIS, R.A.; SCHMIDT, P. Avanços metodológicos na avaliação da qualidade da forragem conservada. Revista Brasileira de Zootecnia, v. 36, supl. P. 101-119, 2007. KASPERSSON, A., HLODVERSSON, R., PALMGREN, V, et al.1984. Microbial and biochemical changes occuring deterioration of hay and preservative effect of urea. Sweed.J. Agric. Res., 14(1):127-133. LACEY, J.1975. Potencial hazards to animal and man from microorganisms in fodders and grain. Trans. Br. Mycol. Soc., 65(2):171-184.

MENEZES, M.; SILVA-HANLIN, D.M.W. Guia prático para fungos fitopatogênicos. Recife: UFRPE, 1997. 106p. MOSER, L.E. Post-harvest physiological changes in forage plants. In: Post-harvest physiology and preservation of forages. Moore, K.J., Kral, D.M., Viney, M.K. (eds). American Society of Agronomy Inc., Madison, Wisconsin, 1995, p. 1-19. MUCK, R.E.; SHINNERS, K.J. Conserved forages (silage and hay): Progress and Priorities. In: INTERNATIONAL GRASSLAND CONGRESS, 29, 2001, São Pedro. Proceeding Piracicaba: Brazilian Society of animal Husbandry 2001 p. 753-763. NASCIMENTO, J. M.; COSTA, C.; SILVEIRA, A. C. et al. Influência do Método de Fenação e Tempo de Armazenamento sobre a Composição Bromatológica e Ocorrência de Fungos no Feno de Alfafa (Medicago sativa, L. cv. Flórida 77). Revista Brasileira de Zootecnia, v. 29, n. 3, p. 669-677, 2000. REIS, R.A.; SOLLENBERGER, L.E.; URBANO, D. Impacto f overseeding cool-season annual forages on spring regrowth of Tifton 85 bermudagrass. In: INTERNATIONAL GRASSLAND CONGRESS, 19., 2001, São Pedro. Proceedings São Pedro: Brazilian Society of Animal Husbandry, 2001. p.295-297. ROTZ, C.A. Field curing of forage. In: Post-harvest physiology and preservation of forages. Moore, K.J.,Kral, D.M., Viney, M.K. (eds). American Society of Agronomy Inc., Madison, Wisconsin, 1995, p. 39-66. SAMSON, R.A.; HOEKSTRA, E.S.; FRISVAD, J.C.; et al. Introduction to Food-Borne Fungi. Baarn: CBS, 1995. 322p.